Composición química de

una bacteria (E. coli) Molécula % del peso seco (2.8x10-13 g)

•Macromoléculas totales 96

Proteínas 55

Polisacáridos 5

Lípidos 9.1

ADN 3.1

ARN 20.5

•Monómeros totales 3

Aminoácidos y precursores 0.5

Azucares y precursores 2

Nucleótidos y precursores 0.5

•Iones inorgánicos 1

Total 100%

Microorganismos

Fuente de energía

Oxido-reducción

Quimiótrofas Luz

Fotótrofas

Compuestos orgánicos

Quimioheterótrofos Fuente de carbono

Compuestos orgánicos

Quimioheterótrofos

CO2

Compuestos orgánicos

Fotoheterótrofos

CO2

Fotoautótrofos

Compuestos inorgánicos

Quimiolitótrofos

Compuestos Orgánicos

Mixótrofos

CO2

Litoautótrofos

Fuente de carbono

Fuente de carbono

Clasificación

Macronutrientes en los

medios de cultivo

Elemento Forma encontrada en el medio ambiente

Forma química en los medios de cultivo

Carbono (C) CO2, compuestos orgánicos Glucosa, malato, acetato,

piruvato, cientos de otros

compuestos o en mezclas

complejas (extracto de levadura, peptona y otros)

Hidrógeno (H) H2O, compuestos orgánicos H2O, compuestos orgánicos

Oxígeno (O) H2O, O2, compuestos orgánicos

H2O, O2, compuestos orgánicos

Nitrógeno (N) NH3, NO3, N2, compuestos

orgánicos nitrogenados

Inorgánicos: NH4Cl, (NH4)2SO4, KNO3, N2

Orgánicos: Aminoácidos,

bases nitrogenadas de

nucleótidos y otros compuestos de nitrógeno

Macronutrientes en los

medios de cultivo

Elemento Forma encontrada en

el medio ambiente

Forma química en los

medios de cultivo

Fósforo (P) PO43- KH2PO4, Na2HPO4

Azufre (S) H2S, compuestos orgánicos

de S, metales (FeS, CuS,

ZnS, NiS y otros)

Na2SO4, Na2S2O3, Na2S,

cisteína u otros compuestos

orgánicos con azufre

Potasio (K) K+ en solución o varias sales

de K

KCl, KH2PO4

Magnesio (Mg) Mg2+ en solución o varias

sales de Mg

MgCl2, MgSO4

Macronutrientes en los

medios de cultivo

Elemento Forma encontrada en

el medio ambiente

Forma química en los

medios de cultivo

Sodio (Na) Na+ en solución o como

NaCl y otras sales de Na

NaCl

Calcio (Ca) Ca2+ en solución o como

CaSO4 y otras sales de Ca

CaCl2

Fierro (Fe) Fe2+ o Fe3

+ en solución como

FeS, Fe(OH), otras muchas

sales de Fe

FeCl3, FeSO4 y otras

soluciones de fierro (o Fe3+,

EDTA, Fe2+ citrato)

Micronutrientes en los

medios de cultivo

Elemento Función celular

Cobalto Vitamina B12, transcarboxilasa

Cobre Proteínas, citocromo c oxidasa, SOD

Manganeso Activador enzimático, SOD.

Molibdeno Enzimas, nitrogenasa de molibdeno, nitrato reductasa.

Níquel Hidrogenasa, monóxido de carbono deshidrogenasa.

Selenio Hidrogenasas, aminoácido selenio-cisteina.

Tungsteno Formato deshidrogenasa.

Vanadio Nitrogenasa de vanadio.

Zinc Anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa.

Factores de crecimiento

Vitamina Función

Ácido p-amino benzoico (PABA) Precursor del ácido fólico

Ácido fólico Metabolismo de un carbono, transferencia

de grupos metilo

Biotina Biosíntesis de ácido grasos, beta

descarboxilaciones, fijación de CO2

Niacina (ácido nicotínico) Precursor del NAD; transferencia de

electrones en reacciones redox

Cobalamina (B12) Reducción y transferencia de fragmentos

de un solo carbono.

Riboflavina Precursor de FAD, FMN, transporte de

electrones.

Ácido pantoténico Precursor de la CoA

Tiamina (B1) Alfa descarboxilaciones, transcetolasas.

Complejo B6 (piridoxal, piridoxamina) Transformaciones de aminoácidos y

cetoácidos.

Grupo Vitamina K, quinonas Transportadores de electrones

(ubiquinonas, menaquinonas, etc.)

Medios de Cultivo

Composición Naturales o Complejos

Sintéticos

Estado Líquido

Fluido 0.1% de agar

Semisólido 0.2 a 0.8% de agar

Sólido 1.5 a 2% de agar

Uso Enriquecidos o nutritivos

De enriquecimiento

Selectivos

Diferenciales

De transporte

De mantenimiento o conservación

Pruebas Bioquímicas

Clasificación por composición de

los medios de cultivo

Naturales o complejos. Son medios

que no tienen una composición

definida. Sangre, suelo, frutas, etc.

o medios que contengan

ingredientes cuya composición no

esté completamente definida

como el extracto de levadura,

peptonas o el agua de la llave.

Los medios sintéticos son aquellos

cuya composición en

completamente conocida, sus

componentes son extrapuros,

como en los medios empleados

para investigación.

Medios de cultivo deshidratados

Clasificación por estado de los

medios de cultivo

Medios líquidos. Generalmente tienen

componentes completamente

solubles. Son útiles en la propagación

de microorganismos pero tienen la

desventaja de que no se pueden

detectar contaminaciones.

Agar

Extraído a partir de un tipo de

algas rojas (de los géneros

Gelidium y Gracilaria), Agar

es un gelificante que se

emplea en Japón desde el

siglo XV. En 1859 se introdujo

en Europa como alimento

característico de la cocina

china y a principios del siglo

XX se empezó a aplicar en la

industria alimentaria. Es una

fuente de fibra y tiene

capacidad de formación de

gel en proporciones muy

bajas. Permite la elaboración

de gelatinas calientes.

Clasificación por estado de los

medios de cultivo

Los medios fluidos contienen agar en una

concentración aproximada a 0.1%, el

medio tiene una consistencia líquida pero

la presencia de agar disminuye la

velocidad de disolución de O2 ambiental.

Se emplea generalmente en el cultivo de

microorganismos anaerobios y

microaerofílicos.

Medio fluido de tioglicolato

con resarzurina (indicador

de oxido/reducción)

Clasificación por estado de los

medios de cultivo

Los medios de cultivo semisólidos

contienen de entre el 0.2 y el 0.8% de

agar, son suaves y permiten observar la

movilidad de los microorganismos. Esta

consistencia es utilizada en los medios

de transporte, las pruebas de movilidad,

pruebas biquímicas y pruebas genéticas.

Clasificación por estado de los

medios de cultivo

Los medios sólidos contienen entre 1.5

a 2.0% de agar, esto los hace tener

una consistencia dura y forman un

soporte para el crecimiento

microbiano. Se emplean para cultivo,

aislamiento, diferenciación,

cuantificación, pruebas de

sensibilidad y en algunos casos para

conservación (inclinados).

Uso. Medios enriquecidos

Contienen componentes ricos nutritivamente y permite el

crecimiento de microorganismos no exigentes. Ejemplos:

•Agar cuenta estándar (cuenta en placa)

•Infusión cerebro y corazón (BHI)

•Agar Soya Tripticaseína (TSA)

•Agar nutritivo (AN)

•Agar sangre (AS)

Buscador de medios de cultivo

http://www.joseacortes.com/microbiologia/buscamedios/index.htm

Uso. Medios de enriquecimiento

Contiene componentes y condiciones que permiten el

desarrollo de un tipo microbiano y disminuyen la velocidad de

crecimiento de la flora acompañante. Ejemplos:

•Caldo selenito

Detección de

Salmonella,

Enterobacter sakazakii y

Yersinia enterocolitica

•Agua peptonada pH 9

Detección de

V. cholerae

•Caldo tetrationato

Pre-enriquecimiento

para Salmonella

Uso. Medios selectivos

Contiene componentes que permiten el desarrollo de un tipo

microbiano e inhiben el crecimiento de los demás

microorganismos. Ejemplos:

•Agar cetrimida

•Caldo bilis verde brillante

•Agar Bacillus cereus

•Agar Sabouraud cicloheximida

Uso. Medios diferenciales

Contiene componentes que permiten diferenciar las actividades

metabólicas de los microorganismos inoculados. La presencia de

indicadores o el uso de reveladores después de la incubación

ponen de manifiesto la actividad. Ejemplos:

•Agar DNAsa

•Agar almidón

•Agar cromogénico para Candida

Uso. Medios diferenciales y

Selectivos

•Agar sal y manitol

•Agar eosina azul de metileno (EMB)

•Agar XLD

•Agar Endo

•Agar Mc Conkey

Uso. Medios de conservación

Algunos medios de cultivo son empleados

para la conservación temporal de

microorganismos, como son:

•Medio sólido en caja a 4ºC (hasta 1 semana).

•Medio de agar inclinado 4ºC (hasta 2

semanas) con sello de glicerol estéril a 4ºC

(varios meses dependiendo del

microorganismo).

•Medio fluido de tioglicolato con carne molida

con sello de aceite mineral estéril a

temperatura ambiente (varios meses

dependiendo del microorganismo).

En la liofilización también se emplea la leche

descremada (años).

Son medios que se emplean para el transporte de muestras sin

alterar la viabilidad y la proporción de microorganismos. Tienen

consistencia semisólida, con amortiguador de pH y reducidos

en nutrientes para preservar la proliferación de microorganismos

por varias horas.

Las muestras se recolectan con asas o con hisopos de alginatos

que no inhiben a los microorganismos.

•Medio Amies

•Medio de Stuart

Uso. Medios de transporte

Uso. Pruebas Bioquímicas

Son medios de cultivo que tienen los nutrientes para

poner en evidencia la actividad metabólica de un

microorganismo puro. Pueden emplear reveladores y/o

indicadores.