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Instructivo técnico para el análisis de germinación en semillas

Código: IT-LAB-13-v01 Pág. 1 de 7

IINNSSTTRRUUCCTTIIVVOO TTÉÉCCNNIICCOO PPAARRAA EELL AANNÁÁLLIISSIISS DDEE GGEERRMMIINNAACCIIÓÓNN EENN SSEEMMIILLLLAASS

Tabla de Contenidos Contenido Página 1 OBJETIVOS Y ALCANCE .........................................................................................................2 2 REFERENCIAS Y DOCUMENTOS RELACIONADOS......................................................................2 3 DEFINICIONES Y ABREVIATURAS.............................................................................................2 4 REQUISITOS ..........................................................................................................................3

4.1 Requisitos de infraestructura, equipos, materiales y reactivos. ............................3 4.2 Requisitos de personal..............................................................................................4 4.3 Requisitos Específicos. .............................................................................................4 4.4 Medios de verificación de requisitos. .......................................................................4

5 ANÁLISIS/ENSAYO.................................................................................................................5 5.1 Captación y envío de la muestra...............................................................................5 5.2 Recepción y manejo de la muestra/contramuestra .................................................5 5.3 Metodología. ...............................................................................................................5 5.4 Cálculo y Expresión de Resultados..........................................................................6

6 REGISTRO Y ENVÍO DE LOS RESULTADOS...............................................................................6 7 ANEXOS................................................................................................................................7



11 OOBBJJEETTIIVVOOSS YY AALLCCAANNCCEE

El objetivo de este instructivo es entregar los requisitos específicos para la acreditación de laboratorios por parte del SAG para la realización del análisis de germinación en semillas, acreditación que se entrega además por especie.

Del mismo modo, en este documento se entregan las directrices para la realización del análisis mencionado y para la emisión del Informe de Resultados por parte de laboratorios acreditados.

Esta acreditación faculta al laboratorio acreditado a realizar el análisis de germinación en semillas, a semillas corrientes destinadas al comercio interno.

22 RREEFFEERREENNCCIIAASS YY DDOOCCUUMMEENNTTOOSS RREELLAACCIIOONNAADDOOSS

• D.L. N° 1764 de 1977, que “Fija normas para la investigación y comercio de semillas”.

• D.S. N° 188 de 1978, que “Aprueba Reglamento General del Decreto Ley N° 1764 de 1977, para las semillas de cultivo.

• International Rules for Seed Testing, ISTA, versión vigente.

• ISTA Handbook on Seedling Evaluation, versión vigente

33 DDEEFFIINNIICCIIOONNEESS YY AABBRREEVVIIAATTUURRAASS

Germinación Como propósito para los análisis, corresponde a la emergencia y desarrollo de la plántula, período en el cual el aspecto y desarrollo de estructuras esenciales, indican si es o no posible que se desarrolle en el futuro en una planta satisfactoria, bajo condiciones favorables en el suelo.

ISTA Abreviatura de International Seed Testing Association.

Plántulas Normales Son aquellas que al final del período de análisis presentan el potencial para continuar desarrollándose en plantas satisfactorias, cuando crecen en suelos de buena calidad y bajo condiciones favorables de humedad, temperatura y luz.

Plántulas Anormales Son aquellas que no muestran potencial de desarrollo como plantas satisfactorias cuando crecen en suelos de buena calidad y bajo condiciones favorables de humedad, temperatura y luz.

Semillas Latentes o Frescas

Semillas que no germinaron durante el análisis, pero que se mantienen firmes y tienen potencial de desarrollarse en plantas normales.

Semillas Duras Semillas que al final del período del análisis permanecen duras porque no absorbieron agua.



Semillas Muertas Semillas que al final del período de análisis no son ni duras ni frescas y que no han desarrollado ninguna parte de una plántula.

44 RREEQQUUIISSIITTOOSS

4.1 Requisitos de infraestructura, equipos, materiales y reactivos. i) Infraestructura: Deben existir áreas separadas para actividades incompatibles y de un tamaño adecuado al personal que trabaja en los análisis y a la carga de trabajo.

El Laboratorio debe tener un área limpia y seca, lo suficientemente amplia para la necesidad de los análisis que corresponden; sin exposición a corrientes de aire, con buena iluminación (del orden de 1000 lux), debe poseer mesón de trabajo, con cubierta resistente y fácil de limpiar.

Debe haber instalaciones protegidas de condiciones excesivas de temperatura, vapor, vibraciones, interferencias, etc. que puedan afectar adversamente los resultados.

Deben tener fuentes de energía necesaria para los análisis.

Deben existir instalaciones para almacenar las muestras hasta un año después del análisis y en condiciones de temperatura, humedad y limpieza, que permitan la integridad de las muestras .

ii) Equipos: Deben contar con equipamiento, materiales e instrumental acorde al tipo de especies para las cuales se declara competencia, para lo cual considerar los que se indican a continuación (pudiendo agregar o reducir algunos elementos)

• Balanza de precisión

• Lámpara lupa

• Calculadora de sobremesa

• Cabinas o salas de germinación con temperaturas estables y controladas, que permitan obtener a nivel de substrato temperaturas de 15ºC, 20ºC, 25ºC o alterna de 20-30ºC , según la o las especies que acredite

• Cámaras o salas de frío

• Estufa de esterilización o secado

• Sembrador al vacío

• Contador de granos

• Tablas sembradoras

iii) Materiales:

• Pinzas

• Bisturíes

• Agujas de disección



• Contenedores

• Vidrios de reloj

• Bandejas de aluminio

• Respiradores con filtro y/o mascarillas para polvos tóxicos

• Guantes de procedimiento

• Substratos para la siembra: papel filtro liso especial para germinación, papel filtro plisado especial para germinación y arena

• Tipo de agua para regar el substrato: agua destilada para papel filtro liso y plisado y agua corriente para la arena

• Reactivos para ruptura de latencia: Nitrato de Potasio y Ácido Giberélico (AG3)

• Contenedores para sembrar: bandejas de plástico grande con tapa y bandeja de plástico chica con tapa.

4.2 Requisitos de personal i) Según lo dispuesto en el numeral 4.2 del Reglamento Específico para la acreditación de

laboratorios de análisis / ensayo, el Laboratorio debe contar con un responsable técnico, quien será la contraparte del SAG, en temas técnicos asociados a su actividad como laboratorio acreditado.

ii) Contar con analistas que deben cumplir el siguiente perfil:

• Poseer un título técnico relacionado con el área biológica o científica y sus funciones serán realizar los análisis de acuerdo a las reglas de la ISTA y mantener los equipos funcionando bien y calibrados, cuando corresponda.

• Estar capacitados y entrenados en análisis de germinación de semillas.

• Tener formación en Fisiología y Morfología de semillas.

• Tener experiencia demostrable en este análisis de al menos un año.

• Tener capacitación en sistemas de aseguramiento de calidad.

4.3 Requisitos Específicos. No aplica

4.4 Medios de verificación de requisitos. De acuerdo al punto 6.1 del Reglamento específico para la acreditación de laboratorios de análisis/ensayos, los interesados en acreditarse para este análisis deben presentar junto a su solicitud de acreditación lo siguiente:

i) Un dossier con los antecedentes generales del laboratorio que se solicitan en dicho reglamento

ii) Un dossier para verificar el cumplimiento de los requisitos establecidos en los puntos 4.1 a 4.3 de este Instructivo técnico, para lo cual debe adjuntar.



- Listado de identificación de los analistas, indicando nombre completo, número de cédula de identidad y firma.

- Título (copia legalizada) y Currículum vitae de los analistas, indicando la experiencia en el cargo demostrable.

- Certificado de capacitación de los analistas en la técnica de germinación de semillas. - Croquis del área destinada a análisis de germinación de semillas, con la ubicación de

sus equipos

- Lista de equipos e instrumental destinados al análisis de germinación de semillas, incluyendo su plan de mantención y calibración.

- Registro de control de las condiciones de temperatura para las cámaras de germinación y de frío.

55 AANNÁÁLLIISSIISS//EENNSSAAYYOO

5.1 Captación y envío de la muestra. La toma de muestra debe ser representativa del lote al que pertenecen, por lo tanto la metodología de muestreo a seguir, está referenciada en las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA. En estas mismas reglas está establecido el peso mínimo que debe tener la muestra que se recibe en el Laboratorio según el análisis que se solicita y según la especie que se trate y las condiciones para su envío al Laboratorio.

5.2 Recepción y manejo de la muestra/contramuestra La recepción y manipulación de la muestra debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA (versión vigente).

Las muestras deben ser recepcionadas en el Laboratorio hasta dentro de las 72 horas desde su toma, antes en lo posible.

Las muestras deben recibir antes, durante y después de su análisis un manejo tal que permita mantener su integridad y su identificación.

Las muestras deben almacenarse por el período de un año después de su análisis, en condiciones adecuadas para mantenerlas en buenas condiciones.

Con el objeto de mantener la confiabilidad y objetividad en los análisis, las muestras deben ser identificadas con un número o código único dado por el Laboratorio al momento de su recepción e ingreso y sólo después ingresar al laboratorio para su análisis correspondiente, sólo manteniendo esta identificación .

Las muestras para el análisis de germinación deben obtenerse a partir de la fracción de semilla pura del análisis de Pureza o bien de la separación de semilla pura desde la muestra de envío recibida.

5.3 Metodología. El análisis debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 5 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA (versión vigente) y en el Manual de Evaluación de Plantas de la ISTA (versión vigente). Debe incluir los siguientes procesos:



• Obtención de la muestra de trabajo (400 semillas de la fracción de semilla pura).

• Determinación del método y sustrato a usar , según la especie y de acuerdo a la Tabla 5A de las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA.

• Evaluación de la Germinación según Capítulo 5 de las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA y el Manual de Evaluación de Plántulas de ISTA.

• Anotación de los resultados de las 4 réplicas, considerando las Tablas de Tolerancias respectivas del Capítulo 16 de las Reglas ISTA..

5.4 Cálculo y Expresión de Resultados Debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 5 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA (versión vigente).

Procesos a seguir : - Cálculo del porcentaje de : plántulas normales

plántulas anormales

semillas latentes

semillas duras

semillas muertas

- Redondeo de cifras

- Revisión de los resultados frente a las Tablas de Tolerancias respectivas.

66 RREEGGIISSTTRROO YY EENNVVÍÍOO DDEE LLOOSS RREESSUULLTTAADDOOSS

El Laboratorio deberá establecer un formato de Informe de Resultados que debe ser visado o aprobado por el Servicio de manera previa a su puesta en uso.

El formato del Informe de Análisis debe elaborarse de manera tal que incluya todas las observaciones y reglas especificadas para cada análisis en las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA y como mínimo debe contener la siguiente información general:

- Remitente

- Especie y Variedad

- Categoría de la muestra

- Identificación del Lote

- Peso del lote (opcional)

- Número de envases (opcional)

- Tipo de envase (opcional)

- Fecha ingreso de la muestra al Laboratorio

- Fecha de término del análisis

- Identificación de la muestra otorgado en el Laboratorio al momento de su ingreso



- Resultado del o de los análisis

o % Plántulas Normales

o % Plántulas Anormales

o % Semillas Latentes

o % Semillas Duras

o % Semillas Muertas

o % Germinación Total

o % Mínimo Legal aceptado para la especie en análisis.

- Observaciones del análisis, como las condiciones en que se realizó y otras.

- Fecha del Informe

- Firma del Responsable del Laboratorio.

El traspaso de los datos al Certificado o Informe de Análisis correspondiente debe ser supervisado por el Responsable del laboratorio.

El Laboratorio deberá cada tres meses enviar un listado de los Informes de Análisis emitidos al Laboratorio Oficial de Análisis de Semillas de Lo Aguirre, indicando el número del certificado emitido, la fecha de emisión, el remitente y la especie.

EL Laboratorio debe tener registros o fichas de resultados para cada análisis que realice, en el que identifique el tipo de muestra y la especie que se trata, los resultados obtenidos, la metodología y condiciones de análisis usada, fecha del análisis y firma del analista que realizó el análisis y de su supervisor

77 AANNEEXXOOSS

No aplica.

Instructivo técnico para el análisis de determinación de otras especies en semillas


IINNSSTTRRUUCCTTIIVVOO TTÉÉCCNNIICCOO PPAARRAA EELL AANNÁÁLLIISSIISS DDEE DDEETTEERRMMIINNAACCIIÓÓNN DDEE OOTTRRAASS EESSPPEECCIIEESS EENN SSEEMMIILLLLAASS








El objetivo de este instructivo es entregar los requisitos específicos para la acreditación de laboratorios por parte del SAG para la realización del análisis de determinación de otras especies en semillas, acreditación que se entrega además por especie.

Del mismo modo, en este documento se entregan las directrices para la realización del análisis mencionado y para la emisión del Informe de resultados por parte de laboratorios acreditados.

Esta acreditación faculta al laboratorio acreditado a realizar el análisis de determinación de otras especies en semillas, a semillas corrientes destinadas al comercio interno.




• International Rules for Seed Testing, ISTA (versión vigente).

• Manual de Definición de Semilla Pura de ISTA, versión vigente.



Análisis Completo Es aquel en que se analiza toda la muestra de trabajo para determinar si existen semillas de otras especies presentes.

Análisis Limitado Es aquel en el cual la búsqueda de otras especies en la muestra de trabajo completa está restringida a ciertas especies establecidas con anticipación.

Análisis Reducido Es aquel en el cuál sólo se revisa una parte de la muestra de trabajo.

Análisis reducido-limitado

Es aquel en el que se revisa una parte de la muestra de trabajo y sólo se buscan ciertas especies establecidas.

Otras Semillas Corresponde a las semillas de cualquier especie distinta a la semilla pura

Semillas de Malezas Cualquier semilla de género o especie que no sea cultivada con fines agrícola y/o forestal, ornamental o medicinal.

Semillas de otras especies cultivadas

Cualquier semilla de género o especie, que no corresponda a la semilla pura, ni a semilla de maleza y que es cultivada con fines agrícolas, forestales, ornamentales o medicinales.






Deben haber instalaciones protegidas de condiciones excesivas de temperatura, vapor, vibraciones, interferencias, etc. que puedan afectar adversamente los resultados.

Deben tener fuentes de energía necesaria para los análisis. Además, debe poseer mesa de trabajo para análisis de pureza y determinación de otras especies.

Deben existir instalaciones para almacenar las muestras hasta un año después del análisis y en condiciones de temperatura, humedad y limpieza, que permitan la integridad de las muestras.

ii) Equipos: Deben contar con equipamiento, materiales e instrumentales acorde al tipo de especie para las cuales se declara competencia, para lo cual considerar lo que se indica a continuación (pudiendo agregar o reducir elementos)

• Balanza de precisión (cuando el número de decimales a considerar en el pesaje de la muestra sea igual o inferior a 2 decimales)

• Balanza analítica (cuando el número de decimales a considerar en el pesaje de la muestra sea igual o superior a 3 decimales)

• Lupa estereoscópica de a lo menos 45x

• Divisor de semillas

• Lámpara lupa

• Diafanoscopio


iii) Materiales:

• Pinzas

• Bisturíes


• Lupa manual

• Contenedores







• Pinceles


laboratorios de análisis / ensayo, el Laboratorio debe contar con un responsable técnico, quien será la contraparte del SAG, en temas técnicos asociados a su actividad como laboratorio acreditado


• Poseer un título técnico relacionada con el área biológica o científica y sus funciones serán realizar los análisis de acuerdo a las reglas de la ISTA y mantener los equipos funcionando bien y calibrados, cuando corresponda.

• Estar capacitados y entrenados formalmente en morfología y taxonomía de malezas.

• Contar con experiencia previa demostrable de al menos un año.


4.3 Requisitos Específicos. Deben contar para esto con material bibliográfico especializado y una colección de semillas de referencia.




• Listado de identificación de los analistas, indicando nombre completo, número de cédula de identidad y firma.

• Título (copia legalizada) y Currículum vitae de los analistas, indicando la experiencia en el cargo demostrable.

• Certificado de capacitación de los analistas de acuerdo al requisito establecido en el capítulo 4.2 de este instructivo.

• Croquis del laboratorio, identificando área destinada a análisis de pureza, con la ubicación de sus equipos

• Lista de equipos e instrumental destinados al análisis de vigor en frío para maíz, incluyendo su plan de mantención y calibración.




5.1 Captación y envío de la muestra. La muestra, debe ser representativa del lote al que pertenecen, por lo tanto la metodología de muestreo a seguir, está referenciada en las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA. En estas mismas reglas está establecido el peso mínimo que debe tener la muestra de envío al Laboratorio, según la especie que se trate y el análisis que se solicita, y las condiciones de envío al Laboratorio.

5.2 Recepción y manejo de la muestra/contramuestra La recepción y manipulación de la muestra debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA, (versión vigente). El peso de la muestra debe ser el peso de a lo menos 25000 unidades de semillas , o no menos que el peso indicado en la columna 5 de la Tabla 2A de las Reglas de Análisis de la ISTA .

Las muestras deben ser recepcionadas en el Laboratorio hasta dentro de las 72 horas desde su toma, antes si es posible.

Las muestras deben venir claramente identificadas, señalando a lo menos el nombre del solicitante, la especie y la variedad, y cualquier otra información que sea de utilidad para el cliente.

Las muestras para análisis de pureza deben tener un peso mínimo, según la especie que se trate, el cual está indicado en la Tabla 2, columna 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA.



Con el objeto de mantener la confiabilidad y objetividad en los análisis, las muestras deben ser identificadas con un número o código único dado por el Laboratorio al momento de su recepción e ingreso y sólo después ingresar al laboratorio para su análisis correspondiente.

5.3 Metodología. El análisis debe ser realizado de acuerdo a lo indicado Capítulo 4 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (versión vigente), considerando que en Chile la clasificación de otras semillas incluye: semillas cuarentenarias, semillas de malezas no cuarentenarias reglamentadas, semillas de malezas comunes y semillas de otras especies cultivadas.

El análisis comprende:

i) Homogenización de la muestra de envío, pasándola tres veces sin dividir a través de un divisor de semillas.

ii) División de la muestra hasta obtener el peso indicado para realizar este análisis, según la especie (Tabla 2A de las Reglas de Análisis ISTA”).

iii) Pesar la muestra de trabajo y analizarla separando las semillas de todas las otras especies, o ciertas especies solicitadas, desde la semilla pura.



5.4 Cálculo y Expresión de Resultados Debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 4 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (versión vigente), indicando el resultado como: número de otras semillas encontradas, en forma separada para cada especie determinada, y separándolas en las categorías de semillas de malezas cuarentenarias o no cuarentenarias reglamentadas, semillas de malezas comunes y semillas de otras especies cultivadas.


EL Laboratorio debe tener registros o fichas de resultados para cada análisis que realice, en el que identifique el tipo de muestra y la especie que se trata, los resultados obtenidos, la metodología y condiciones de análisis usada, fecha del análisis y firma del analista que realizó el análisis y de su supervisor.


• Remitente

• Especie y Variedad

• Categoría de la muestra

• Identificación del lote

• Peso del lote (opcional )

• Número de envases (opcional)

• Tipo de envase (opcional)

• Fecha ingreso de la muestra al Laboratorio

• Fecha de término del análisis

• Identificación de la muestra otorgado en el Laboratorio al momento de su ingreso

• Resultado del o de los análisis

• Observaciones del análisis, como las condiciones en que se realizó y otras.

• Fecha del Informe

• Firma del Responsable del Laboratorio.


El Laboratorio deberá cada tres meses enviar un listado de los Informes de Análisis emitidos al Laboratorio Oficial SAG de Análisis de Semillas de Lo Aguirre, indicando el número del certificado emitido, la fecha de emisión, el remitente y la especie.

EL Laboratorio debe tener registros o fichas de resultados para cada análisis que realice, en el que identifique el tipo de muestra y la especie que se trata, los resultados obtenidos, la



metodología y condiciones de análisis usada, fecha del análisis y firma del analista que realizó el análisis y de su supervisor

77 AANNEEXXOOSS

No aplica.

Instructivo técnico para el análisis de viabilidad de semillas con el test bioquímico del tetrazolio


IINNSSTTRRUUCCTTIIVVOO TTÉÉCCNNIICCOO PPAARRAA EELL AANNÁÁLLIISSIISS DDEE VVIIAABBIILLIIDDAADD DDEE SSEEMMIILLLLAASS CCOONN EELL TTEESSTT BBIIOOQQUUÍÍMMIICCOO DDEELL TTEETTRRAAZZOOLLIIOO








El objetivo de este instructivo es entregar los requisitos específicos para la acreditación de laboratorios por parte del SAG para la realización del análisis de viabilidad de semillas con el test bioquímico del tetrazolio, acreditación que se entrega además por especie.


Esta acreditación faculta al laboratorio acreditado a realizar el análisis de viabilidad de semillas con el test bioquímico del tetrazolio, a semillas corrientes destinadas al comercio interno.




• International Rules for Seed Testing, versión vigente

• ISTA Handbook on Tetrazolium Testing, versión vigente



Viabilidad Capacidad inherente de una semilla para germinar y producir una plántula normal. Capacidad potencial de un lote de semillas para germinar

Semilla viable Semilla que tiene capacidad de producir una plántula normal

Semilla no viable Semilla que tiene deficiencias y/o otras alteraciones de tal naturaleza como para impedir su desarrollo en una plántula normal









ii) Equipos: Contar con equipamiento, materiales e instrumental acorde al tipo de especies para las cuales se declara competencia, para lo cual considerar lo que se indica a continuación (pudiendo agregar o reducir elementos)

• Lámpara lupa


• Cámara de frío de hasta 10ºC

• Estufa de esterilización o secado con regulación de temperatura entre 20-40ºC

• Lupa estereoscópica de 45 a 60x

iii) Materiales:

• Pinzas

• Bisturíes


• Contenedores


• Bandejas



• Substrato papel filtro liso

• Agua destilada

• Reactivo: 2,3,5-Trifenil Tetrazolio Cloruro o Bromuro1







• Estar capacitados y entrenados en el análisis y tener conocimientos de morfología de semillas.


4.3 Requisitos Específicos. No aplica.






- Certificado de capacitación de los analistas en la técnica - Croquis del área destinada a análisis de vigor con la ubicación de sus equipos

- Lista de equipos e instrumental destinados al análisis de viabilidad, incluyendo su plan de mantención y calibración.

Debido a que la práctica continua de este análisis es muy importante en la obtención de la experiencia y conocimiento, se deberá comprobar este requisito con una evaluación teórica y práctica por especie.


5.1 Captación y envío de la muestra. El muestreo debe ser realizado de acuerdo a lo indicado Capítulo 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (International Rules for Seed Testing, versión vigente).

5.2 Recepción y manejo de la muestra/contramuestra La recepción y manipulación de la muestra debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (versión vigente).

Las muestras deben ser recepcionadas en el Laboratorio hasta dentro de las 72 horas desde su toma y antes en lo posible.





Con el objeto de mantener la confiabilidad y objetividad en los análisis, las muestras deben ser identificadas con un número o código único dado por el Laboratorio al momento de su recepción e ingreso y sólo después ingresar al laboratorio para su análisis correspondiente con esa identificación.

5.3 Metodología. El análisis debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 6 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (International Rules for Seed Testing, ISTA versión vigente) y el Manual de Ensayos al Tetrazolio(ISTA Handbook on Tetrazolium Testing) y debe considerar los siguientes aspectos:

• Preparación de la muestra de trabajo a partir de la fracción de la semilla pura, tomando al azar 4 réplicas de 100 semillas.

• Preparación de la muestra de semillas antes de la tinción, dándoles distintas condiciones según la especie, de acuerdo con la Tabla 6A de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de ISTA.

• Exposición de los tejidos antes de la tinción, según Tabla 6A de las Reglas ISTA.

• Tinción por períodos de tiempo diferente según la especie e indicados en la Tabla 6A de las Reglas ISTA.

• Evaluación de las semillas como viables o no viables.

5.4 Cálculo y Expresión de Resultados Debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 6 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (International Rules for Seed Testing, ISTA versión vigente). Se expresa como porcentaje promedio de las 4 réplicas y aproximado al número entero más cercano.

En la ficha de análisis respectiva de cada muestra se debe anotar la siguiente información:

• Tipo de pretratamiento usado

• Fecha y hora de inicio y término del pretratamiento

• Fecha y hora de inicio y término de tinción

• Número de semillas analizadas

• Temperaturas utilizadas

• Fecha de evaluación

• Iniciales de la analista

• Cálculo de promedio y tolerancia

• Concentración de la solución de tetrazolio usada




El Laboratorio deberá establecer un formato de Informe de Resultados que debe ser visado o aprobado por el Servicio de manera previa a su puesta en uso.


- Remitente



- Identificación del lote








o % de semillas fueron viables.

o En el caso de las Leguminosas se debe agregar % de semillas duras encontradas en el análisis, o, % de semillas duras incluidas en el % reportado de semillas viables


- Fecha del Informe







77 AANNEEXXOOSS

No aplica.

Instructivo técnico para el análisis de Humedad en Semillas


IINNSSTTRRUUCCTTIIVVOO TTÉÉCCNNIICCOO PPAARRAA EELL AANNÁÁLLIISSIISS DDEE HHUUMMEEDDAADD EENN SSEEMMIILLLLAASS








El objetivo de este instructivo es entregar los requisitos específicos para la acreditación de laboratorios por parte del SAG para la realización del análisis de humedad, acreditación que se entrega además por especie.

Del mismo modo, en este documento se entregan las directrices de semillas para la realización del análisis mencionado y para la emisión del Informe de Resultados por parte de laboratorios acreditados.

Esta acreditación faculta al laboratorio acreditado a realizar el análisis de humedad, a semillas corrientes destinadas al comercio interno.




• International Rules for Seed Testing, versión vigente.



Humedad Es el contenido de agua de una muestra, que se traduce en pérdida de peso al desecarla según las instrucciones dadas en las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA. Se expresa como porcentaje del peso de la muestra inicial.









ii) Equipos: Deben contar con el equipamiento, materiales e instrumental acorde al tipo de especies para los cuales se declara competencia, para lo cual considerar lo que se indica a continuación (pudiendo agregar o reducir algunos elementos)

- Balanza analítica, con una precisión de 0.001g.

- Calculadora de sobremesa

- Estufa de esterilización o secado, con temperatura regulable hasta 150ºC

- Molinillo regulable, de bajo nivel de pérdida de humedad

- Desecador

- Harneros o cribas metálicas con luz de malla de 0.50mm., 1.00mm., y 4.00mm.

iii) Materiales: - Contenedores de muestra

- Bandejas

- Cajas térmicas

- Pinzas para manipular placas calientes

- Guantes resistentes a temperaturas altas


laboratorios de análisis / ensayo, el Laboratorio debe contar con un responsable técnico, quien será la contraparte del SAG, en temas técnicos asociados a su actividad como laboratorio acreditado



• Estar capacitados y entrenados en análisis de determinación de humedad.

• Tener experiencia demostrable en este análisis de por lo menos 6 meses.










- Certificado de capacitación de los analistas en la análisis de determinación de humedad - Croquis del área destinada a análisis de determinación de humedad, con la ubicación de

sus equipos

- Lista de equipos e instrumental destinados al análisis de determinación de humedad.

- Registro de control de equipos que lo requiere.


5.1 Captación y envío de la muestra. El muestreo debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (International Rules for Seed Testing, ISTA versión vigente).

Las muestras deben ser enviadas en forma rápida al laboratorio, a más tardar dentro de las primeras 24 hrs., y ser aceptadas sólo si vienen en un envase a prueba de humedad, intacto, del cual debe eliminarse el máximo de aire posible. Deben transportarse en caja con aislación térmica.

5.2 Recepción y manejo de la muestra/contramuestra La recepción y manipulación de la muestra debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (versión vigente).



Con el objeto de mantener la confiabilidad y objetividad en los análisis, las muestras deben ser identificadas con un número o código único dado por el Laboratorio al momento de su recepción e ingreso y sólo después ingresar al laboratorio para su análisis correspondiente, sólo con esta identificación.

5.3 Metodología. Las muestras para análisis de humedad deben analizarse inmediatamente después de recibidas o guardarlas como máximo por no mas de dos horas en un contenedor a prueba de humedad.



El análisis debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 9 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (International Rules for Seed Testing, ISTA versión vigente). El proceso debe incluir:

• Pesado de la muestra de trabajo.

• Molido para aquellas especies indicadas en la Tabla9A de las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA, antes de sacar la muestra de trabajo.

• Presecado, para aquellas especies para las cuales el molido es necesario y que su contenido de humedad es mas de 17%.

• Secado con el método de la estufa a baja temperatura constante para aquellas especies listadas en la Tabla 9B de las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA.

• Secado con el método de la estufa a alta temperatura constante para las especies listadas en la Tabla 9C de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de ISTA.

5.4 Cálculo y Expresión de Resultados Debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 9 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA (International Rules for Seed Testing, ISTA versión vigente).Una vez obtenido el resultado con un decimal, se deben promediar las réplicas y llevar este promedio a las Tablas de Tolerancia (Capítulo 16), si la diferencia entre ambas réplicas no excede el 0,2%. Si es mayor, se debe repetir el análisis.


El Laboratorio deberá establecer un formato de Informe de Resultados que debe ser visado o aprobado por el Servicio de manera previa a puesta en uso.

En el formato del Informe de Resultados debe considerarse un área para expresar el resultado de la humedad de la muestra de semillas, el cual debe expresarse hasta con un decimal


- Remitente














- Fecha del Informe





77 AANNEEXXOOSS

No aplica.

Instructivo técnico para el análisis de pureza física de semillas.


IINNSSTTRRUUCCTTIIVVOO TTÉÉCCNNIICCOO PPAARRAA EELL AANNÁÁLLIISSIISS DDEE PPUURREEZZAA FFÍÍSSIICCAA DDEE SSEEMMIILLLLAASS








El objetivo de este instructivo es entregar los requisitos específicos para la acreditación de laboratorios por parte del SAG para la realización del análisis de pureza física de semillas, acreditación que se entrega además por especie.


Esta acreditación faculta al laboratorio acreditado a realizar el análisis de pureza física de semillas, a semillas corrientes destinadas al comercio interno.




• International Rules for Seed Testing, ISTA, versión vigente

• Manual de Definición de Semilla Pura de ISTA , versión vigente.



Semilla pura Corresponde a la especie indicada por el interesado, o aquellas que se encuentren como predominante en el análisis, incluyendo todas las variedades botánicas y cultivares de dicha especie. También son semilla pura las semillas inmaduras, las de tamaño inferior al normal, arrugadas, enfermas o germinadas, siempre que puedan ser identificadas como perteneciente a dicha especie. Para cada especie, están definidas las semillas puras en las Reglas de Análisis de la ISTA.

Otras semillas Semillas de cualquier otra especie distinta a la de la semilla pura, siempre que se pueda identificar como semilla verdadera.

Materia Inerte Fragmentos de semillas y otras estructuras y materias no definidas como semilla pura en las Reglas de Análisis de ISTA.

Semillas de Malezas Cualquier semilla de género o especie que no sea cultivada con fines agrícolas y/o forestal , ornamental o medicinal

Semillas de otras especies cultivadas

Cualquier semilla de género o especie, que no corresponda a la semilla pura , ni a semilla de maleza y que es cultivada con fines agrícolas, forestales, ornamentales o medicinales









ii) Equipos: Deben contar con equipamiento, materiales e instrumentales acorde al tipo de especies para los cuales se declara competencia, para lo cual considerar lo que se indica a continuación ( pudiendo agregar o reducir elementos)

• Balanza de precisión (cuando el número de decimales a considerar en el pesaje de la muestra sea igual o inferior a 2 decimales)

• Balanza analítica (cuando el número de decimales a considerar en el pesaje de la muestra sea igual o superior a 3 decimales)

• Lupa estereoscópica de a lo menos 45x

• Divisor de semillas

• Lampara lupa

• Diafanoscopio

• Calculadora de sobre mesa

iii) Materiales e Instrumental:

• Pinzas

• Bisturíes


• Lupa manual

• Contenedores







• Pinceles





• Estar capacitados formalmente en análisis de pureza e identificación de semillas de malezas, habiendo aprobado cursos relacionados con morfología y taxonomía de semillas de malezas.

• Contar con experiencia previa demostrable de al menos un año.








- Certificado de capacitación de los analistas de acuerdo al requisito establecido en el capítulo 4.2 de este instructivo.

- Croquis del laboratorio, identificando área destinada a análisis de pureza, con la ubicación de sus equipos

- Lista de equipos e instrumental destinados al análisis de pureza física, incluyendo su plan de mantención y calibración.




5.1 Captación y envío de la muestra. La muestra debe ser representativa del lote al que pertenecen, por lo tanto la metodología de muestreo a seguir, está referenciada en las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA. En estas mismas reglas está establecido el peso mínimo que debe tener la muestra que se recibe en el Laboratorio para su análisis, según la especie que se trate el análisis que se solicita y las condiciones de su envío al Laboratorio.



Las muestras deben venir claramente identificadas, señalando a lo menos el nombre del solicitante, la especie y la variedad, y cualquier otra información que sea de utilidad para el cliente.

Las muestras para análisis de pureza deben tener un peso mínimo, según la especie que se trate, el cual está indicado en la Tabla 2, columna 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA.



Con el objeto de mantener la confiabilidad y objetividad en los análisis, las muestras deben ser identificadas con un número o código único dado por el Laboratorio al momento de su recepción e ingreso y sólo después ingresar al laboratorio para su análisis correspondiente, sólo con esta identificación.

5.3 Metodología. El análisis debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 3 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (versión vigente), considerando que en Chile la fracción de otras semillas se divide en “semillas de malezas” y de “otras semillas cultivadas”. De acuerdo a estas Reglas se deben considerar los siguientes aspectos:

• Homogenización y división de la muestra de envío.

• Pesado de la muestra de trabajo.

• Separación de cada componente de la muestra, dividiendo la fracción “otras semillas” en “semillas de malezas “ y en “ otras semillas cultivadas”.

• Pesado de cada componente por separado.

• Registro del resultado.



5.4 Cálculo y Expresión de Resultados Debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 3 de las Reglas Internacionales de Análisis de Semillas de la ISTA (versión vigente) .En este sentido se deben considerar los siguientes aspectos:

• Cálculo de los porcentajes de cada componente.

• Redondeo de los porcentajes.

• Análisis de la pérdida o ganancia de peso durante el análisis.


Debe seguir las indicaciones de las Reglas de Análisis de la ISTA que en el caso del análisis de pureza debe incluir la siguiente información



- Remitente



- Identificación del lote







- Resultado del o de los análisis:

-% en peso de: semillas puras

otras semillas cultivadas

semillas de malezas

materia inerte

- Total % pureza

- Mínimo legal exigido para la especie




- Fecha del Informe



El Laboratorio deberá cada tres meses enviar un listado de los Informes de Análisis emitidos al Laboratorio Oficial SAG de Análisis de Semillas de Lo Aguirre, indicando el número del certificado emitido, la fecha de emisión, el remitente y la especie.


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No aplica.

Instructivo técnico para el análisis de vigor de semillas de maíz


IINNSSTTRRUUCCTTIIVVOO TTÉÉCCNNIICCOO PPAARRAA EELL AANNÁÁLLIISSIISS DDEE VVIIGGOORR DDEE SSEEMMIILLLLAASS DDEE MMAAÍÍZZ








El objetivo de este instructivo es entregar los requisitos específicos para la acreditación de laboratorios por parte del SAG para la realización del análisis de vigor de semillas de maíz.


Esta acreditación faculta al laboratorio acreditado a realizar el análisis de vigor de semillas de maíz, a semillas corrientes destinadas al comercio interno.




• International Rules for Seed Testing, ISTA, Versión Vigente

• ISTA Handbook on Seedling Evaluation, ISTA ,Versión Vigente

• Handbook of Vigour Test Methods, ISTA . Versión Vigente



Vigor de la Semilla

Es la suma de aquellas propiedades que determinan la actividad y comportamiento de los lotes de semillas con germinación aceptable, en un amplio rango de ambientes. El vigor incluye la tasa y uniformidad de la germinación y crecimiento de las plántulas; capacidad de emergencia de las semillas, bajo condiciones ambientales desfavorables; y comportamiento después del almacenaje, especialmente la mantención de la capacidad de germinar.









ii) Equipos:

• Balanza de precisión

• Lámpara lupa


• Cabina o sala de germinación con temperatura constante de 25ºC +/- 2ºc, a nivel del substrato

• Cámara o sala de frío, con temperatura constante de 10ºC +/- 2ºc

• Sembrador al vacío

• Contador de granos

• Tablas sembradoras

iii) Materiales:

• Pinzas

• Bisturíes

• Contenedores




• Substratos para la siembra: papel filtro liso especial para semillas, papel filtro plisado especial para semillas y arena

• Tipo de agua para regar el substrato: agua destilada para papel filtro liso y plisado y agua corriente para la arena.

• Contenedores para sembrar: bandejas de plástico grande con tapa y bandeja de plástico chica con tapa.







• Estar capacitados y entrenados en análisis de vigor de maíz en frío.

• Tener conocimiento y formación en Fisiología y Morfología de semillas

• Tener experiencia demostrable en este análisis.


4.3 Requisitos Específicos. Este análisis así como todos los otros de vigor de semillas que existen son específicos para cada especie y requieren equipo adecuado, el uso de muestras de control y de una buena experiencia del analista. Existen sólo algunos análisis de vigor validados por ISTA, entre los cuales no se encuentra este, por lo tanto, sus resultados sirven sólo como complemento al análisis de germinación.






- Certificado de capacitación de los analistas en la técnica de vigor en frío para maíz - Croquis del área destinada a análisis de vigor con la ubicación de sus equipos

- Lista de equipos e instrumental destinados al análisis de vigor en frío para maíz, incluyendo su plan de mantención y calibración.

- Registro de control de las condiciones de temperatura para las cámaras de germinación y de frío.


5.1 Captación y envío de la muestra. La muestra debe ser representativa del lote al que pertenecen, por lo tanto la metodología de muestreo a seguir, está referenciada en las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA. En estas mismas reglas está establecido el peso mínimo que debe tener la muestra que se recibe



en el Laboratorio, según la especie que se trate el análisis que se solicita y las condiciones de envío al Laboratorio.





Con el objeto de mantener la confiabilidad y objetividad en los análisis, las muestras deben ser identificadas con un número o código único dado por el Laboratorio al momento de su recepción e ingreso y sólo después ingresar al laboratorio para su análisis correspondiente.

5.3 Metodología. La descripción y detalles para cada análisis de semillas, está referenciado en las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA.

i) Muestra de trabajo Tomar al azar, desde la fracción de semilla pura de la muestra, 400 semillas o bien separar 400 semillas que cumplan con la definición de semilla pura (Manual de definición de semilla pura de la ISTA), para sembrar en cuatro replicas de 100 semillas cada una o bien en 8 subreplicas de 50 semillas.

ii) Condiciones de análisis Identificar todas las muestras con su número de ingreso, fecha de inicio y termino del pretratamiento, fecha de inicio y termino del análisis y sigla de la especie, esta información puede ser escrita directamente sobre el substrato, cuando se utilice papel liso, o bien en una tarjeta cuando se use arena

- Siembra en papel enrollado para maíz(BP): sembrar 8 subreplicas de 50 semillas cada una (para así completar 400 semillas),para cada subréplicas tomar 2 franjas de papel filtro liso de 45x22,5cm aproximadamente, previamente identificada, y colocarlas sobre una superficie limpia (desinfectada con alcohol), humedecer con agua (30cc), sembrar alternadamente cinco hileras horizontales de 10 semillas cada una, homogéneamente distribuidas y con el punto de inserción de la semilla hacia abajo, cubrir con una franja de papel de igual tamaño y regar con una jeringa (15cc) de agua destilada, enrollar el papel cuidando que no quede ni muy apretado ni muy suelto e introducir en una bolsa de plástico 4 rollos, cuidando que su identificación quede a la vista, totalizando un total de 8 rollos por muestra, distribuido en 2 bolsas de plástico.

- Siembra en arena (S): para el caso de las bandejas grandes depositar arena humedecida hasta completar un tercio de la capacidad de la bandeja, emparejar la superficie sin comprimir, sembrar 50 o 100 semillas por bandeja (completando un total de 8 o 4 bandejas por muestra, respectivamente), luego cubrir con arena hasta completar dos tercios de la



capacidad total, colocar la tarjeta de identificación en el borde de la bandeja, orientar hacia fuera, y poner la tapa, trasladar a la sala o cámara que corresponda, según la temperatura requerida.

iii) Tratamientos Una vez sembrada la semilla, ya sea en substrato de papel o de arena, trasladar las muestras a la germinadora regulada a 10°C, por un período de 7 días.

iv) Duración del análisis y temperaturas Una vez cumplido el período de tratamiento a 10°C, trasladar las muestras a la sala regulada a 25°C, por un período de 6 días. Las temperaturas de análisis tienen una tolerancia de +/- 2°C.

v) Evaluación Evaluar todas las plantulas de acuerdo a los principios generales señalados en el Manual de Evaluación de Plantas de la ISTA (versión vigente). Para efectuar la evaluación, las estructuras esenciales deben estar lo suficientemente desarrolladas como para permitir la detección de alguna anormalidad

En el proceso de evaluación las categorías a determinar son las siguientes:

- Plantas normales

- Plantas anormales

- Semillas latentes

- Semillas muertas

Al final del período de análisis de germinación, clasificar las plantas como normales y anormales, y las semillas no germinadas como semillas latentes o frescas y semillas muertas.

vi) Repetición del análisis Los resultados de un análisis pueden ser considerados insatisfactorio y podrían no ser informados, un segundo análisis debería ser hecho por el mismo u otro método alternativo, bajo las siguientes circunstancias

- Cuando se sospecha de dormancia (semillas frescas no germinadas).

- Cuando las plantas no puedan ser evaluadas por fitotoxicidad o micelio de hongo o bacteria

- Cuando exista dificultad en decidir la correcta evaluación de las plantas

- Cuando hay evidencia de errores en condiciones de análisis, evaluación de plantulas o conteo

- Cuando el rango de las replicas de 100 semillas excede el máximo rango tolerado, según Tabla de tolerancia.

5.4 Cálculo y Expresión de Resultados Los resultados son expresados como porcentaje por número. Cuando las cuatro replicas de 100 semillas de un análisis están dentro del rango tolerado, el promedio de plántulas normales representa el porcentaje de vigor a ser reportado en el certificado o informe de análisis de



semillas. Calcular el porcentaje promedio al número entero más cercano, según regla internacional de redondeo, comenzando de arriba hacia abajo.




- Remitente









- Cambiar por Identificación de la muestra otorgado en el Laboratorio al momento de su ingreso



- Fecha del Informe



El Laboratorio deberá cada tres meses enviar un listado de los Informes de Análisis emitidos al Laboratorio Oficial de Análisis de Semillas de Lo Aguirre, indicando el número del certificado emitido, la fecha de emisión y el remitente


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No aplica.

nstructivo Écnico ara el anÁlisis e …faolex.fao.org/docs/pdf/chi60728anx.pdf · para las...

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