LAPORAN RESMI PRAKTIKUM

ANALISIS OBAT, MAKANAN, DAN KOSMETIK

PENETAPAN KADAR PEMANIS BUATAN (SIKLAMAT)

DALAM MINUMAN DENGAN METODE NITRIMETRI

Disusun Oleh:

Luky Oktaviasari (FA/09138)

Anggi Rista Wulandari (FA/09141)

Ria Fasyah Fatmawati (FA/09144)

I’in Innayatul Ula (FA/09147)

Golongan/ Kelompok : I A / C

Tanggal Praktikum : 30 Maret 2014

Asisten Jaga : Vero

Dosen Pembimbing : Prof. Dr. Edy Meiyanto, M.Si., Apt.

LABORATORIUM KIMIA ANALISIS

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS GADJAH MADA

YOGYAKARTA

2014

PENETAPAN KADAR PEMANIS BUATAN (\SIKLAMAT) DALAM MINUMAN DENGAN METODE NITRIMETRI

I. Tujuan

Menetapkan kadar siklamat dalam minuman dengan menggunakan metode

nitrimetri.

II. Dasar Teori

Pemanis buatan adalah bahan tambahan makanan berupa senyawa kimia yang

dapat menyebabkan rasa manis pada yang tidak atau hampir tidak mempunyai nilai

gizi dan biasanya digunakan untuk keperluan olahan pangan, industri serta minuman

dan kesehatan. Pemanis buatan ada yang di golongkan nutritive (selain rasanya manis

juga mengandung kalori yang bisa di gunakan tubuh) contohnya sorbitol dan laktosa;

dan non-nutritive (yang tidak mengandung kalori yang bisa di gunakan tubuh) contoh

nya siklamat dan sakarin.(Cahyadi, 2008).

Masing-masing pemanis buatan juga mempunyai karakter yang berbeda dan

bereaksi berbeda pula. Namun keamanan dari produk pemanis buatan (juga bahan

pangan lain) diatur oleh codex general standard for food addivitves, yang menentukan

pengguna bahan tambahan pangan tertentu termasuk pemanis buatan. Berdasarkan

peraturan tersebut, maka BPOM RI (Badan Obat dan makanan Republik Indonesia)

mengizinkan pengunaan pemanis buatan yaitu asesulfam-K, aspartame, Neotam,

Sakarin, Siklamat, Alitam dan Sukralosa dengan jumlah tertentu.

Contohnya yaitu siklamat. Siklamat (N-cyclohexyl-sulphamic acid)

mempunyai tingkat kemanisan 30 x dari sukrosa. Pemanis ini tidak mengandung

kalori dan sangat stabil terhadap suhu tinggi. Siklamat dapat dicampur dengan

pemanis lain yang dapat meningkatkan rasa manisnya. Di Amerika, penggunaan

siklamat dilarang mulai tahun 1970 salah satunya karena menyebabkan penurunan

stabilitas kemanisannya sebagai pemanis di dalam minuman. Siklamat menimbulkan

rasa manis tanpa rasa ikutan (tidak ada after taste-nya). Sifat siklamat sangat mudah

larut dalam air. Dalam perdagangan dikenal sebagai Assugrin, Sucaryl, dan Sucrosa.

(Hartono et al, 2002)

Siklamat merupakan salah satu zat pemanis non nutritif hasil sintesis dari

reaksi kimia. Siklamat terdapat dalam dua macam yaitu asam dan garamnya. Natrium

siklamat adalah bentuk garam yang sering digunakan sebagai pemanis sintetik.

Siklamat memiliki tingkat kemanisan yang tinggi sebesar 30 kali lebih manis dari

sukrosa sehingga umumnya terdapat dalam makanan atau minuman dengan kadar

relative kecil. Selain itu, rasanya enak dan tanpa rasa pahit setelah dikonsumsi, tidak

berbahaya dan digunakan secara luas dalam makanan dan minuman.

Pemerian natrium siklamat adalah sebagai berikut :

Natrium Siklamat

Rumus molekul  : C6H12NNaO3S

Berat molekul : 201,22

Kelarutan : Larut dalam 5 bagian air, dalam 250 bagian etanol (95%)

P dan dalam 25 bagian propilen glikol P, Praktis tidak larut

dalam klorofom P dan dalam eter P

Pemerian : Hablur atau serbuk hablur, putih, tidak berbau atau hampir

tidak berbau, rasa agak manis walaupun dalam larutan encer.

Di Indonesia menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI No.

722/Menkes/Per/IX/88 kadar maksimum asam siklamat yang diperbolehkan dalam

makanan berkalori rendah dan untuk penderita diabeter mellitus adalah 3 g/kg bahan

makanan/minuman. Menurut WHO batas konsumsi harian siklamat yang aman (ADI)

adalah 11 mhg/kg berat badan.

Metode titrasi Nitrimetri merupakan metode penetapan kadar secara kuantitatif

dengan menggunakan larutan baku natrium nitrit (NaNO2). Titrasi nitrimetri merupakan

titrasi yang dipergunakan dalam analisa senyawa-senyawa organik, khususnya untuk

persenyawaan amina primer. Metode ini didasarkan pada reaksi diazotasi yakni reaksi

antara amina aromatik primer (fenil amina primer) dengan natrium nitrit dalam suasana

asam membentuk garam diazonium dengan persamaan yang berlangsung dalam dua

tahap seperti dibawah ini : 

NaNO2 + HCl → NaCl + HNO2

Ar- NH2 + HNO2 + HCl → Ar-N2Cl + H2O

Reaksi tersebut tidak stabil dalam suhu kamar, karena garam diazonium yang

terbentuk mudah tergedradasi membentuk senyawa fenol dan gas nitrogen. Sehingga

reaksi dilakukan pada suhu di bawah 15oC. Pembentukan garam diazonium berjalan

lambat, oleh karena itu reaksi diazotasi dapat dipercepat dengan panambahan garam

kalium bromide (KBr) sebagai katalis.

Untuk menunjukkan titik ekivalensi atau titik akhir titrasi dapat digunakan

indikator. Dalam titrasi diazotasi, digunakan dua macam indikator, yaitu indikator

dalam dan indikator luar. Sebagai indikator dalam digunakan campuran indikator

tropeolin oo dan metilen blue yang ditunjukkan oleh perubahan warna dari ungu

menjadi biru kehijauan. Sedangkan indikator luar nya digunakan kertas kanji iodida

atau pasta kanji iodida. Bila menggunakan indikator luar, hati-hati pada reaksi titik

akhir palsu. Titik akhir dicapai bila saat digoreskan pada pasta kanji-KI langsung

terbentuk warna biru.

Titik akhir titrasi juga dapat ditentukan dengan teknik potensiometri

menggunakan platina sebagai indikator elektroda dan saturated calomel elektroda

sebagai elektroda.

III. Alat dan Bahan

1. Alat : 2. Bahan :

- Labu takar 100 ml, 1000 ml - Aquades

- Corong pisah - HCl pekat

- Labu Erlenmeyer - NaOH 0.1 N

- Buret - Asam sulfanilat

- Pipet tetes - Metilen blue

- Gelas ukur - Tropeolin OO

- Neraca analitik - NaNO2

- Cawan porselen - NaHCO3

- Gelas beaker - Es batu

- Termometer

- Ember

IV. Cara Kerja1. Pembuatan larutan NaNO 2 0,1 N

Sebanyak 6,900 g Natrium nitrit padat ditimbang seksama

Dilarutkan dalam aquades ad hingga 1000 mL dalam labu takar

2. Pembakuan NaNO 2

0.4 g asam sulfanilat dan 0.2 g natrium bikarbonat dikeringkan pada suhu 120ºC

Dimasukkan ke Erlenmeyer lalu ditambah sedikit H2O dan diaduk hingga larut

Diencerkan dengan H2O hingga 100 mL

Ditambah 5 mL HCl 37% lalu ditetesi indikator Metilen blue (2 tetes) dan Tropaeolin

OO (3 tetes)

Didinginkan hingga suhu 15ºC dengan es batu

Dititrasi pelan-pelan dengan NaNO2 sampai terjadi perubahan warna menjadi biru

kehijauan

3. Penetapan kadar siklamat

Diambil 50 ml sampel dilarutkan dalam campuran 45 mL H2O dan 5 mL HCl pekat

37% b/v lalu didiamkan selama 2-3 menit

Ditambahkan indikator Metilen Blue (2 tetes) dan Tropaeolin OO (3 tetes) pada suhu

15ºC

Dititrasi dengan NaNO2 pada suhu 15 ºC

Dihentikan titrasi ketika larutan berubah warna menjadi biru kehijauan

4. Dicatat volume NaNO 2 yang dibutuhkan

V. Data Percobaan dan Perhitungan1. Organoleptis

Sampel : Okky Koko Drink® Rasa Leci

Bentuk sediaan : Minuman gelas

Bau : Manis, aroma leci

Rasa : Manis, (rasa leci)

Volume : 170mL/cup

Komposisi : Air, Nata De Coco 5,5% , Gula Pasir, Fruktosa,

Pengatur Keasaman Asam Sitrat, Perisa Artifisial Leci, Pemanis Buatan

(Natrium siklamat 632,14 mg/kg, ADI 11 mg/kg BB, Aspartam 91,58 mg/kg,

ADI 50 mg/kg BB) Pengental Kalsium Laktat, Pengawet Natrium Benzoat,

Pengental Gom Gellan, Ekstrak Leci 0,005 %.

Tanggal kadaluarsa : 22 Febuari 2015

No.registrasi : BPOM RI MD 226310058494

Produksi : PT Triteguh Manunggal Sejati, Tangerang 15132 -

Indonesia

2. Pembakuan Larutan Natrium nitrit 0,1N :

Reaksi pembakuan :

NaNO2 + HCl HNO2 + HCl

+ HNO HCl + H2O

o Berat asam sulfanilat I : 205,4 mg

Volume NaNO2 : 10,3 mL

N NaNO2 = 205,4 x 0,117,32 x 10,3

=0,1151 N

o Berat asam sulfanilat II : 203,1 mg

Volume NaNO2 : 11,8 mL

N NaNO2 = 203,1 x 0,117,32 x 11,8

=0,0994 N

Normalitas : mg sulfanilat x0,1

17,32 x volume titrasi

o Berat asam sulfanilat III : 204,7 mg

Volume NaNO2 : 13,1 mL

N NaNO2 = 204,7 x 0,117,32 x 13,1

=0,0902 N

N=0,1151+0,0994+0,0902

3=0,1016 N

3. Perhitungan kadar natrium siklamat :

Reaksi yang terjadi :

HCl, H2O + 2 H20

Valensi Na-siklamat : 1

BE = BM/1 = 201

.

Volume sampel = 50 ml

Volume titran I = 0,6 ml

Volume titran II = 0,2 ml

Volume titran III = 0,4 ml

Volume titran VI = 0,2 ml

a. Kadar Na-siklamat

S1 = 0,6 ×0,1016 × 201

50 ×1000 = 2,45 x 10-4 % b/v

S2 = 0,2× 0,1016 ×201

50 ×1000 = 0,82 x 10-4 % b/v

S3 = 0,4 × 0,1016× 201

50 ×1000 = 1,63 x 10-4 % b/v

S4 = 0,2× 0,1016 ×201

50 ×1000 = 0,82 x 10-4 % b/v

Kadar rata-rata = 1,43 x 10-4 % b/v

b. Kadar Na-siklamat tiap cup

Kadar (%b/v) = Vtitran× Ntitran× BE sampel

mL sampel× 1000

S1 = 0,6 ×0,1016 × 201

50x170 mL = 41,660 mg/cup

S2 =0,2× 0,1016 ×201

50x 170mL = 13,887 mg/cup

S3 = 0,4 × 0,1016× 201

50x170 mL= 27,773 mg/cup

S4 = 0,2× 0,1016 ×201

50x 170mL= 13,887 mg/cup

Kadar rata-rata tiap cup = 24,302mg/cup

VI. Pembahasan

Praktikum kali ini bertujuan untuk menentukan kadar pemanis buatan dalam

sampel minuman ringan secara kuantitatif. Sampel minuman ringan adalah Okky Koko

Drink® Rasa Leci kemasan 170 ml. Pemanis buatan yang terdapat dalam minuman

sampel adalah natrium siklamat.

Pemanis buatan termasuk dalam bahan tambahan makanan (BTM). Definisi

bahan tambahan makanan adalah bahan yg tidak digunakan sebagai makanan dan

bukan merupakan komposisi makanan, mempunyai atau tidak mempunyai nilai gizi,

sengaja ditambahkan ke dalam makanan untuk maksud teknologi ( termasuk

organoleptis ) pada pembuatan pengolahan, penyediaan , perlakuan, pewadahan,

pembungkusan, penyimpanan dan pengangkutan makanan untuk menghasilkan suatu

komponen makanan atau mempengaruhi sifat khas makanan. Persyaratan BTM antara

lain :

1. Aman ( telah diuji dan di evaluasi )

2. Pada kadar yang diperlukan tidak membahayakan.

3. Selalu diadakan pengamatan dan evaluasi ulang

4. Memenuhi persyaratan mutu dan kemurnian

5. Penggunaannya dibatasi untuk tujuan tertentu

6. Penggunaannya dibatasi untuk makanan tertentu,maksud tertentu dan kadar

serendah

mungkin

Bahan tambahan makanan hanya dapat ditambahkan ke dalam makanan dalam

kadar tertentu dan serendah mungkin, karena dalam kadar yang tinggi dapat berefek

negatif atau bahkan toksik bagi manusia. Regulasi bahan tambahan makanan diatur

dalam Peraturan Kementrian Kesehatan no.722/ MEN KES/ PER / IX /88.  

Pemanis buatan (sintesis) merupakan bahan tambahan yang dapat

memberikan rasa manis dalam makanan, tetapi tidak memiliki nilai gizi . Sekalipun

penggunaanya diizinkan, pemanis buatan dan juga bahan kimia lain sesuai peraturan

penggunaannya harus dibatasi. Alasannya, meskipun pemanis buatan tersebut aman

dikonsumsi dalam kadar kecil, tetap saja dalam batas-batas tertentu akan menimbulkan

bahaya bagi kesehatan manusia yang mengkonsumsinya. Pembatasan tersebut dikenal

dengan ADI (Acceptable Daily Intake) atau asupan harian yang dapat diterima. ADI

merupakan jumlah maksimal pemanis buatan dalam mg/kg berat badan yang dapat

dikonsumsi tiap hari selama hidup tanpa menimbulkan efek yang merugikan kesehatan.

Siklamat pada manusia mempunyai nilai ADI maksimal 45% atau setara dengan 11

mg/kg berat badan (BB). Angka ini setara dengan 550 mg per hari untuk manusia yang

berat badannya 50 kg. Regulasi pemanis sebagai bahan tambahan makanan telah diatur

tersendiri dalam SNI 01-6993-2004.

Penetapan kadar siklamat dalam berbagai produk makanan dan minuman sangat

penting untuk menjamin bahwa kadar yang terkandung dalam produk tidak merugikan

konsumen jika melebihi batas yang ditentukan (quality assurance). Selain itu juga

dapat mencegah tindakan penipuan oleh produsen yang tidak mencantumkan

kandungan sebenarnya dalam komposisi produk tersebut.

Nama kimia : sodium cyclohexylsulfamate, sodium

cyclohexanesulfamate

Rumus kimia : C6H12NNaO3S

Berat molekul : 201.22

Pemerian : Kristal atau serbuk putih tidak berwarna

Kadar : tidak kurang dari 98.0% dan tidak lebih dari 101.0% dihitung dari

basis yang telah dikeringkan

Kelarutan : larut dalam air, praktis tidak larut dalam etanol

Penetapan kadar : larutkan kurang lebih 0,4 gram sampel yang telah ditimbak

seksama dalam campuran 50 ml air dan 5 ml asam klorida encer. Titasi dengan 0,1 M

natrium nitrit. sebagai indikator luar adalah kertas kanji iodida.titik akhir ditentukan

jika larutan memberikan warna biru segera setelah dioleskan dengan batang pengaduk

pada kertas kanji iodida.titik akhir juga dapat ditentukan dengan potensiometri.titrasi

dikatakan telah selesai jika titik akhir reprodusibel setelah campuran didiamkan selama

1 menit.

Tiap ml 0,1 natrium nitrit setara dengan 20,12 mg C6H12NNaO3S dihitung terhadap

basis yang telah dikeringkan

Siklamat merupakan pemanis non-nutritif lainnya yang tidak kalah

populer.Tingkat kemanisan siklamat adalah 30 kali lebih manis daripada gula dan

siklamattidak memberikan after-taste seperti halnya sakarin. Meskipun demikian, rasa

manis yang dihasilkan oleh siklamat tidak terlalu baik (smooth) jika dibandingkan

dengansakarin.Siklamat diperjual belikan dalam bentuk garam Na atau Ca-nya.Dari

studi literatur, diketahui bahwa Na-Siklamat mempunyai kemungkinan dapat

menyebabkan kanker hati pada hewan percobaan tikus (Boop et al.,1986), walaupun

dalam penelitian selanjutnya, tidak terdapat efek induksi kanker hati pada tikus, mencit,

anjing, hamster sampai monyet, bila digunakan pada dosis yang tepat (Richards et al.,

1951; Taylor et al., 1968; Branton et al, 1973; Coulston et al., 1975). Oleh karena itu,

uji kuantitatif pemanis buatan Na-Siklamat ini penting dilakukan untuk mengetahui

jumlah yang terkandung dalam minuman yang beredar di masyarakat.

Beberapa metode analisis dapat digunakan untuk memperoleh kandungan

siklamat dalam sampel, contohnya sebagai berikut ini :

1. HPLC (High-Performance Liquid Chromatography)

Merupakan salah satu metode yang diakui oleh AOAC (Association of Official

Analytical Chemist) untuk memperoleh kadar siklamat yang akurat dan tepat (Sheridan

et al., 2008). Pada jurnal disebutkan bahwa sampel dipreparasi dengan cara

homogenisasi, ekstraksi kloroform dan dilusi ke air, detektor yang digunakan adalah

tandem MS, dan fase diam yang digunakan ethyl-hybrid C18 dengan fase diam asam

asetat dan metanol (0,15 : 1 v/v). Di jurnal lain menyebutkan validasi dari uji HPLC

(menggunakan detektor UV dengan teknik spiking) ini baik dan teruji presisi dan

selektif untuk mendapatkan kadar kandungan siklamat di minuman dan makanan yang

beredar di masyarakat (Novelina et al., 2009)

2. Capillary zone electrophoresis

Metode ini menggunakan elektroforesis dengan detektor UV pada 254

nm.Dengan fase diam uncoated fused-silica dan elektrolit campuran dari

heksadesiltrimetilammonium hidroksida 1 mM dan Narium benzoate 10 mM.Metode

ini menggunakan standar internal, yaitu menggunakan asam alpha-hikdroksisobutirat

Telah dibuktikan juga bahwa metode ini tidak berbeda signifikan dengan metode

gravimetri yang presisi.Pada metode ini tidak diperlukan preparasi sampel, sehingga

dapat menjadi kelebihan metode ini, dan dapat juga mendeteksi zat lain, seperti

aspartame, acesulphame-K (Thompson et al., 1995).

3. Spektrofotometri/Colorimetri

Metode ini juga dituliskan dalam kumpulan jurnal AOAC (Anonim, 2000) .

Prinsipnya adalah hidrolisis siklamat menjadi cyclohexanamine/cyclohexylamine

dikatalisis oleh asam kuat, lalu direaksikan dengan p-quinon atau benzoquinon,

sehingga menjadi 2-(cyclohexylamino)-1,4-benzoquinone yang dapat dibaca

serapannya pada λmax sebesar 493 nm, dibandingkan blanko. Sebelumnya perlu

dilakukan pembuatan kurvabaku dengan menggunakan Na-siklamat baku.

Sikloheksanamin p-quinon 2-(cyclohexylamino)-1,4-benzoquinone

4. Gravimetri

Metode ini juga tertulis di AOAC (Anonim, 2000). Prinsipnya adalah

pengambilan SO42- yang terbentuk dari hidrolisis siklamate menggunakan asam kuat,

yang direaksikan dengan BaCl2 dan NaNO2 sehingga terbentuk BaSO4 yang kemudian

ditimbang sampai berat konstan, artinya dalam 2 kali penimbangan tidak terdapat

perubahan berat sebesar 0,1%. Selama proses ini, harus bebas dari SO2 yang akan

mengganggu uji yang dilakukan.

5. Titrimetri/Nitrimetri

Metode ini dapat digunakan karena HONO dari hasil reaksi NaNO2 dan asam,

dapat bereaksi dengan sikloheksilamin, hasil hidrolisis siklamat dengan asam kuat,

menjadi senyawa nitrosamine. Kelebihan dari HONO dapat bereaksi dengan indikator

luar, kertas kanji-KI, menyebabkan warna biru, dan indikator dalam Tropeolin OO-

metilen blue (3:2). Metode termasuk sederhana dan murah, sehingga masih sering

digunakan dalam sampel skala kecil (Anonim, 2011).

Dalam praktikum ini dipilih metode nitrimetri atau titrasi diazotasi karena

sederhana, tidak memakan banyak waktu, alat dan bahan tersedia walaupun tidak cukup

sensitif untuk mendeteksi analit dalam jumlah yang sangat kecil. Namun keterbatasan

ini dapat dimodifikasi dengan metode standar adisi, yaitu dengan penambahan larutan

standar berisi analit yang jumlahnya telah diketahui kedalam sampel, sehingga

diharapkan metode nitrimetri ini akan cukup sensitif dalam mendeteksi analit.

Metode titrasi diazotasi disebut juga dengan nitrimetri yakni metode penetapan

kadar secara kuantitatif dengan mengunakan larutan baku natrium nitrit. Metode ini

didasarkan pada reaksi diazotasi yakni reaksi antara amin aromatik primer dengan asam

nitrit dalam suasana asam membentuk garam diazonium. Beberapa reaksi diazotasi

yang mungkin terjadi adalah :

1. Pembentukan garam diazonium dari gugus amin aromatik primer (amin

aromatiksekunder dapat dihidrolisis terlebih dahulu, sedangkan gugus nitro

aromatik dapat direduksi terlebih dahulu agar menjadi amin aromatik primer)

2. Pembentukan senyawa nitrosamine dari amin alifatik sekunder

3. Pembentukan senyawa azidari gugus hidrazida dan

4. Pemasukan gugus nitro yang jarang terjadi karena sulitnya nitrasi dengan

menggunakan asam nitrit dalam suasana asam

Siklamat dapat dianalisis dengan metode nitrimetri karena pada struktur siklamat

terdapat gugus amin alifatik sekunder yang dapat dihidrolisis menjadi senyawa

nitrosamin.

Selanjutnya senyawa nitrosamin ini akan bereaksi dengan natrium nitrit

membentuk garam diazonium dalam suasana asam. Reaksinya adalah sebagai berikut :

NaNO2 + HCl HNO2 + NaCl

Beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam nitrimetri adalah :

1. Suhu

Pada saat melakukan titasi, suhu harus dijaga antara 5-15oC walaupun sebenarnya

pembentukan garam diazonium berlangsung pada suhu yang lebih rendah. Untuk

mempercepat reaksi diazotasi dapat ditambahkan 1 gram KBr sehingga titrasi dapat

dilakukan pada suhu kamar. KBr dalam nitrimetri berperan sebagai :

Katalisator, yaitu untuk mempercepat reaksi karena KBr dapat mengikat NO2

membentuk nitrosobromid, yang akan meniadakan reaksi tautomerisme dari bentuk

keto dan langsung membentuk fenol

Stabilisator, yaitu untuk mengikat NO2 agar asam nitrit tidak terurai atau

menguap

Titrasi tidak dapat dilakukan dalam suhu tinggi karena :

HNO2 yang tebentuk akan menguap pada suhu tinggi

Garam diazonium yang terbentuk akan terurai menjadi fenol

2. Keasaman

Titrasi ini berlangsung pada pH + 2 untuk mengubah NaNO2 menjadi HNO2 dan

pembentukan garam diazonium. Indikator universal dapat digunakan untuk mengecek

pH titrat sebelum dimulai titrasi.

3. Kecepatan titrasi

Reaksi diazotasi berlangsung sangat lambat, sehingga agar reaksi sempurna maka

titrasi harus dilakukan perlahan-lahan dan dengan penggojogan yang kuat. Frekuensi

tetesan pada awal titrasi kira-kira 1ml/menit, lalu menjelang akhir titrasi menjadi 2

tetes/menit.

Larutan natrium nitrit sebagai titran bukanlah baku primer karena zat ini bersifat

higroskopis, sehingga perlu dibakukan dengan baku primer, dalam praktikum ini

digunakan asam sulfanilat pro analisis sebagai baku primer. Sebagai baku primer,

senyawa ini harus memiliki syarat-syarat baku primer pada umumnya, antara lain :

1. Mudah diperoleh, dimurnikan, dikeringkan

2. Mempunyai ekuivalen yang tinggi sehingga sesatan penimbangan dapat diabaikan

3. Mudah larut pada kondisi dimana ia digunakan

4. Harus dapat diuji terhadap zat-zat pengotor dengan uji-uji kuantitatif atau uji-uji lain

yang kepekaannya diketahui (jumlah zat pengotor umunya tidak boleh melebihi 0,01-

0,02%)

5. Reaksi dengan larutan standar harus stoikiometri dan praktis lengkap

6. Tidak berubah dalam udara selama penimbangan, tidak higroskopis, tidak dioksidasi oleh

udara atau dipengaruhi karbondioksida, tidak berubah selama penyimpanan

Nama kimia : 4-amino asam benzena sulfonat, asam para anilin sulfonat

Berat molekul : 173.19

Kelarutan : sedikit larut dalam air, alkohol dan eter ; larut dalam air panas

dan asam klorida panas

Kelarutan dalam air : 1g/100ml

Pemerian : kristal serbuk keabu-abuan

Stabilitas : stabil dalam keadaan normal

Pembakuan natrium nitrit dilakukan dengan memasukkan 400 mg asam

sulfanilat yang telah ditimbang seksama ke dalam gelas beker, ditambahkan 0,2 gram

natrium bikarbonat dan sedikit air kemudian diaduk hingga larut. Penambahan natrium

bikarbonat yang bersifat basa ini akan membentuk garam dari asam sulfanilat yang

mudah larut dalam air, karena kelarutan asam sulfanilat dalam air sendiri sangat kecil.

Larutan diencerkan dengan 100 ml air, ditambahkan asam klorida 5 ml untuk

membentuk suasana asam. pH titrat dapat dicek menggunakan kertas indikator

universal sampai ± 2. Sebagai indikator dalam praktikum ini digunakan indikator dalam

yaitu tropeolin OO dan methylen blue dengan perbandingan 3 :2. Dijaga temperatur

pada saat titrasi agar tetap 15oC dengan cara merendam labu Erlenmayer dalam baskom

yang berisi air es. Hal ini dilakukan karena reaksi diazotasi stabil pada suhu tersebut.

Titrat dititrasi dengan natrium nitrit sampai warna larutan berubah dari semula ungu

menjadi hijau kebiruan yang menandakan bahwa telah tercapai titik akhir titrasi. Warna

akhir ini harus stabil selama 1 menit.

Pada titrasi diazotasi, penentuan titik akhir titrasi dapat menggunakan

indikator luar, indikator dalam dan potensiometri. Dalam praktikum ini hanya

dilakukan titrasi nitrimetri dengan menggunakan indikator dalam yaitu campuran

Tropaeolin OO dan Metilen Blue.

Indikator dalam terdiri dari campuran tropeolin OO dan methylen blue. Tropeolin

OO merupakan indikator asam-basa yang berwarna merah dalam suasana asam dan

berwarna kuning bila dioksidasi oleh adanya kelebihan asam nitrit, sedangkan methylen

blue sebagai pengkontras warna sehingga pada titik akhir titrasi akan terjadi perubahan

warna dari ungu menjadi biru sampai hijau tergantung senyawa yang dititrasi.

(tropaeolin OO/ orange IV/ diphenylamine orange)

Rentang pH : 1,4 (merah) – 2,6(orange)

Pada pemakaian indikator dalam meskipun pelaksanannya mudah tetapi

seringkali untuk sampel yang berbeda akan menimbulkan warna yang berbeda. Terlebih

untuk sampel yang berwarna, penggunaan indikator ini akan menimbulkan kerancuan

meskipun telah digunakan blangko sekalipun. Namun karena tidak ada pilihan lain

dalam praktikum ini tetap digunakan indikator dalam untuk nitrimetri, selain dengan

mempertimbangkan ketersediaannya di laboratorium.

Reaksi pembakuan natrium nitrit dan asam sulfanilat berlangsung menurut reaksi

berikut :

NaNO2 + HCl HNO2 + NaCl

Kesetaraan : Tiap ml larutan NaNO2 setara dengan 13,319 g NH2-C6H4-SO3H

NormalitasNaNO 2= mg sulfanilat x 0,117,32 x volume titrasi

Dari hasil perhitungan pembakuan didapatkan molaritas natrium nitrit sebesar

0,1016N dengan CV sebesar 12,40%. Hasil ini mendekati teoritis yaitu sebesar 0,1 N.

Penetapan kadar siklamat dilakukan dengan titrasi langsung sampel dengan

natrium nitrit yang telah dibakukan. Pertama- tama diambil 50 ml sampel. Kemudian

sampel dilarutkan dalam campuran 45 ml akuadest dan 5 ml HCl 37% b/v. Selanjutnya

tambahkan indikator tropeolin OO dan methylen blue dengan perbandingan 3 : 2 pada

suhu 15oC. Campuran larutan siap dititrasi dengan Natrium Nitrit hingga warna larutan

yang awalnya ungu berubah menjadi biru kehijauan. Titrasi ini dilakukan dengan 3 kali

replikasi.

Dari titrasi yang dilakukan dan melalui perhitungan, didapat kadar rata-rata

Natrium Siklamat sebesar 1,43 x 10-4 % b/v dengan CV sebesar 54,54%. Kemudian

dicari kadar sikalamat dalam setiap kemasan Koko Jelly Drink, dan didapat rata-rata

kadar sebesar 24,302 mg/cup. Didapatkan harga CV sebesar 54,70%. Koefisien variasi

yang didapatkan sangat besar yaitu ≥ 5% sehingga presisi yang didapatkan kurang

bagus.Kesalahan-kesalahan yang terjadi ini, kemungkinan disebabkan oleh praktikan

yang kurang cermat dan kurang hati-hati dalam penimbangan, penuangan, pembacaan,

dan lain sebagainya.

VII. Kesimpulan1. Penetapan kadar siklamat dalam minuman ringan dapat dengan menggunakan

metode nitrimetri

2. Natrium nitrit dibakukan dengan asam sulfanilat.

3. Indikator yang digunakan adalah indikator dalam yaitu campuran tropeolin OO dan

metilen blue, titik akhir titrasi ditandai dengan berubahnya warna ungu menjadi biru

kehijauan.

4. Sampel minuman yang digunakan yaitu Okky Koko Drink® , mengandung siklamat

dalam bentuk garamnya yaitu natrium siklamat.

5. Kadar siklamat dalam sampel adalah 1,43 x 10-4 % b/v, sementara kadar siklamat

yang terkandung dalam 1 cup Okky Koko Drink® adalah 24,302 mg/cup

VIII. Daftar Pustaka

Anonim, 2000, Cyclohexylsulphamate (Cyclamate) salt in non alchoholic beverages, AOAC Official Method:957.09

Anonim, 2011, Kimia Farmasi Analisis II, Nitrimetri dapat diunduh pada http://malapharmacheticalword.blogspot.com/2011/03/kimia-farmasi-analisis-2nitrimetri.html diakses pada tanggal 04 Mei 2014

Badan Standardisasi Nasional-BSN, SNI 01-6993-2004 Tentang Bahan Tambahan

Pangan Pemanis Buatan – Persyaratan Penggunaan Dalam Produk Pangan,

Jakarta.

Boop BA, Sonders RC, dan Kesterson JW, 1986, Toxicological aspect of cyclamate and cyclohexylamine. Crit. Rev. Toxicol., 16: 213-306.

Branton PG, Gaunt IF, dan Grasso P, 1973, Long-term toxicity of sodium cyclamate in mice, Food Cosmet.Toxicol., 11:735.

Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman, 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar,

Yogyakarta.

Novelina YM, Sutanto, Fatimah A. 2009. Validasi Metode Analisis Penetapan Kadar Senyawa Siklamat dalam Minuman Ringan.Jakarta :Prosiding PPI Standardisasi

Richard RK, Taylor JD, O’Brien JL, dan Duescher HO. 1951.Studies cyclamate sodium (sucaryl sodium), a new non-caloric sweetening agent.J. Am. Pharm. Assoc., 40: 1.

Sudjadi,dkk. 2004, AnalisaObat dan Makanan,FakultasFarmasi UniversitasGadjahMada,

Yogyakarta.

Taylor JD, Richards RK, Wiegand RG, dan Weinberg MS. 1968. Toxicological studies with sodium cyclamate and saccharin. Food Cosmet.Toxicol., 6: 313.

Thompson CO, Trenerry VC, Kemmery B. 1995. Determination of cyclamate in low joule foods by capillary zone electrophoresis with indirect ultraviolet detection.J. Chromato. A. 704: 203-210

Yogyakarta, 10 April 2014

Praktikan,

Luky Oktaviasari (FA/09138)

Anggi Rista Wulandari (FA/09141)

Ria Fasyah Fatmawati (FA/09144)

I’in Innayatul Ula (FA/09147)