monitorización, biodescontaminación y análisis por pcr...

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Monitorización, biodescontaminación y análisis por PCR como parte de la estrategia multimodal del control de infección

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Monitorizacioacuten biodescontaminacioacuten y anaacutelisis por PCR como

parte de la estrategia multimodal del control de infeccioacuten

Parte de la estrategia multimodal

Concepto de bioseguridad ambiental

bull BSA = bioseguridad ambiental

aacutereas criacuteticas

contaminacioacuten microbioloacutegica fuacutengica

otros paraacutemetros fiacutesico-quiacutemicos

disciplina quiruacutergica higiene de manos

medidas preventivas reducir el

riesgo de transmisioacuten

IAAS

Aspectos legales

Aspectos legales

RITE - Real Decreto 10272007

Real Decreto 2382013

Aspectos legales

RITE

UNE 171330 Parte 2 de 2014

Calidad ambiental en interiores

UNE 171340 2012

Validacioacuten y cualificacioacuten de salas de ambiente controlado en hospitales

2014

Aspectos legales

Maacutes normas

UNE 100012

higienizacioacuten de conductos

UNE 100713Acondicionamiento de aire en hospitales

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Parte de la estrategia multimodal

Concepto de bioseguridad ambiental

bull BSA = bioseguridad ambiental

aacutereas criacuteticas

contaminacioacuten microbioloacutegica fuacutengica

otros paraacutemetros fiacutesico-quiacutemicos

disciplina quiruacutergica higiene de manos

medidas preventivas reducir el

riesgo de transmisioacuten

IAAS

Aspectos legales

Aspectos legales

RITE - Real Decreto 10272007

Real Decreto 2382013

Aspectos legales

RITE

UNE 171330 Parte 2 de 2014

Calidad ambiental en interiores

UNE 171340 2012

Validacioacuten y cualificacioacuten de salas de ambiente controlado en hospitales

2014

Aspectos legales

Maacutes normas

UNE 100012

higienizacioacuten de conductos

UNE 100713Acondicionamiento de aire en hospitales

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Concepto de bioseguridad ambiental

bull BSA = bioseguridad ambiental

aacutereas criacuteticas

contaminacioacuten microbioloacutegica fuacutengica

otros paraacutemetros fiacutesico-quiacutemicos

disciplina quiruacutergica higiene de manos

medidas preventivas reducir el

riesgo de transmisioacuten

IAAS

Aspectos legales

Aspectos legales

RITE - Real Decreto 10272007

Real Decreto 2382013

Aspectos legales

RITE

UNE 171330 Parte 2 de 2014

Calidad ambiental en interiores

UNE 171340 2012

Validacioacuten y cualificacioacuten de salas de ambiente controlado en hospitales

2014

Aspectos legales

Maacutes normas

UNE 100012

higienizacioacuten de conductos

UNE 100713Acondicionamiento de aire en hospitales

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Aspectos legales

Aspectos legales

RITE - Real Decreto 10272007

Real Decreto 2382013

Aspectos legales

RITE

UNE 171330 Parte 2 de 2014

Calidad ambiental en interiores

UNE 171340 2012

Validacioacuten y cualificacioacuten de salas de ambiente controlado en hospitales

2014

Aspectos legales

Maacutes normas

UNE 100012

higienizacioacuten de conductos

UNE 100713Acondicionamiento de aire en hospitales

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Aspectos legales

RITE - Real Decreto 10272007

Real Decreto 2382013

Aspectos legales

RITE

UNE 171330 Parte 2 de 2014

Calidad ambiental en interiores

UNE 171340 2012

Validacioacuten y cualificacioacuten de salas de ambiente controlado en hospitales

2014

Aspectos legales

Maacutes normas

UNE 100012

higienizacioacuten de conductos

UNE 100713Acondicionamiento de aire en hospitales

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Aspectos legales

RITE

UNE 171330 Parte 2 de 2014

Calidad ambiental en interiores

UNE 171340 2012

Validacioacuten y cualificacioacuten de salas de ambiente controlado en hospitales

2014

Aspectos legales

Maacutes normas

UNE 100012

higienizacioacuten de conductos

UNE 100713Acondicionamiento de aire en hospitales

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Aspectos legales

Maacutes normas

UNE 100012

higienizacioacuten de conductos

UNE 100713Acondicionamiento de aire en hospitales

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Clasificacioacuten AREAS DEL HOSPITAL Normas aplicables

---- TODO EL HOSPITAL

RITE Real Decreto 10272007

Modificacioacuten del RITE Real Decreto 2382013

---- LOCALES CLIMATIZADOS UTA y CONDUCTOS UNE 100012

Muy alto riesgo

Quiroacutefanos trasplantes cardiovascular proacutetesis traumatoloacutegicas neurocirugiacutea oftalmologiacutea oncohematologia Zona Grandes quemados Zona de preparacioacuten de envasado y preparacioacuten de medicamentos alimentacioacuten parenteral y criobiologiacutea UNE 100713 ndash locales clase I

UNE 171340 Alto

Riesgo

Quiroacutefanos cirugiacutea digestiva pulmonar ginecologiacutea etc Pasillos limpios de quiroacutefanos Almaceacuten de material esteacuteril y zona limpia de esterilizacioacuten Salas de exploraciones funcionales vasculares traumatoloacutegicas RX intervencionista digestivas etc Habitaciones de inmunodeprimidos

Riesgo moderado

Aacutereas Generales Gabinetes de exploracioacuten Salas de lavado Hospitales de diacutea Unidades de Hospitalizacioacuten Farmacia Medicina Nuclear Fisioterapia Laboratorios General Microbiologiacutea Anatomiacutea Patoloacutegica

UNE 100713 ndash locales clase II

UNE 171330

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Aspectos legales

AREAS CRIacuteTICAS HOSPITALARIAS

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Aspectos legales

UNE 171340

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

UNE 171340

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

UNE 171340

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Proacutexima UNE 100012

EN REVISIOacuteN

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

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Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

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Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Situacioacuten actual

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Situacioacuten actual

MONITORIZACIOacuteN BIODESCONTAMINACIOacuteN ANAacuteLISIS PCR

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Los diferentes medidores se

comunican con una unidad

microprocesadora que enviacutea los

datos a un servidor en el que

estaacute instalado el programa de

software VERISAN que es el

que expresa estos datos y los

gestionahellip alarmas

destinatarios graacuteficas

histoacutericos registros etc

Especificaciones teacutecnicas - sensoacuterica

Medidor de diferencias de

presioacuten

Medidor detemperatura

Medidor de

humedad

Contaje de partiacuteculas

Precisioacuten plusmn 03 Pa

Precisioacuten plusmn 05 ordmC

Precisioacuten plusmn 1

Flujo 283 l min

Rango -100 ndash +100 Pa

Rango 0 ndash 65 ordmC

Rango 5 ndash 95

Tamantildeos 05 ndash 5 microm

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Monitorizacioacuten de partiacuteculas

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Monitorizacioacuten de partiacuteculasVENTAJASY BENEFICIOS

1 Medicioacuten EN CONTINUO

2 Facilita la INTERPRETACIOacuteN de los resultados

3 Simplifica la TOMA DE DECISIONES

4 Predeterminacioacuten de DESTINATARIOS AVISOS y ALARMAS

5 Cumplimiento baacutesico de REQUISITOS LEGALES

6 Asegura una herramienta de PREVENCIOacuteN

7 Permite disponer de REGISTROS y EVIDENCIAS de control

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCREjemplos de estudios sobre el sistema de muestreo

Q Desjonqueres M Veyrard laquoLe controcircle de la qualiteacute de lrsquoair en salles propresraquo La vague Ndeg28 p21-24 June 2009

A Brown A Knight N Kumarswami B Lamarre B Lipscombe R Robinson M Williams laquoRapid and Responsive Monitoring Network for Bioaerosol Emissionsraquo NPL REPORT AS 33 October 2009 wwwnplcoukbiotechnologyproductsservicesaspergillusfumigatus-bioaerosol-monitoring-service

Marius Dybwad Gunnar Skogana amp Janet Martha Blatny ldquoComparative Testing and Evaluation of Nine Different Air Samplers End-to-End Sampling

Efficiencies as Specific Performance Measurements for Bioaerosol Applicationsrdquo Norwegian Defence Research Establishment Kjeller Norway AerosolScience and Technology 28 Nov 2013

Ejemplos de estudios sobre ensayos mediante qPCR

Joe Spurgeon PhD CIH Bayshore Environmental Fullerton and Gregory Spahr ME Health and Safety Resources Los Angeles CA - Detecting Low Concentrations ofAirborne AspPen Spores and Aspergillus Spp in HEPA-Filtered Hospital Air Using Filtration Microscopy and qPCR Analysis

J S West S D Atkins J Emberlin BDLFitt laquoPCR to predict risk of airborne disease raquo Trends in Microbiology Vol16No8 Cell Press doi101016jtim200805004 July 2008

Real-Time PCR in Clinical Microbiology Applications for Routine Laboratory Testing M J Espy J R Uhl L M Sloan S P Buckwalter M F Jones E A Vetter J D CYao N L Wengenack J E Rosenblatt F R Cockerill III and T F Smith Division of Clinical Microbiology Department of Laboratory Medicine and Pathology Mayo ClinicRochester Minnesota

Morrison J C Yang K-T Lin R A Haugland A N Neely and S J Vesper (2004) Monitoring Aspergillus species by quantitative PCR during construction of multi-storeyhospital building J Hosp Inf 5785-87

Michael J McConnell Ana Peacuterez-Ordoacutentildeez Pilar Peacuterez-Romero Raquel Valencia Joseacute Antonio Lepe Isabel Vaacutezquez-Barba and Jeroacutenimo Pachoacuten - Quantitative Real-Time PCR for Detection of Acinetobacter baumannii Colonization in the Hospital Environment ndash J Clin Microbiol Apr 2012 50(4) 1412ndash1414

ROGER H WILLIAMS ELAINE WARD AND H ALASTAIR MCCARTNEY - Methods for Integrated Air Sampling and DNA Analysis for Detection of Airborne Fungal Spores -Plant Pathology Department IACR-Rothamsted Harpenden Herts AL5 2JQ United Kingdom APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY - June 2001 p 2453ndash2459 Vol 67 No 6 - American Society for Microbiology

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREOMuestreo volumeacutetrico de aire por aspiracioacuten cicloacutenicaISO14698-12003 Cleanrooms and associated controlled environments Bicontamination control Part 1 General principles and methods

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

MUESTREO

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

ENSAYOMediante teacutecnicas de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) es una variante de la reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultaacuteneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificacioacuten de aacutecido desoxirribonucleico (ADN)

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

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Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

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bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

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moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCRLa solucioacuten a la cuantificacioacuten

de ceacutelulas no viablesLa diferenciacioacuten de ceacutelulas viables y

muertas siempre fue un reto

Para solucionar este problema se ha

disentildeado por la comunidad cientiacutefica un

sistema de deteccioacuten con ethidium

monoazide (EMA) lo que se conoce como

vPCR que permite la diferenciacioacuten de las

ceacutelulas no viables y cuantificar solo las

viables

Meacutetodos y tecnologiacutea

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

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Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

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BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

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bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

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Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

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bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

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El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

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1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

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CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

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Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

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LUZ UV

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BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

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TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

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1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

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2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCRhellip TODOS

bull Flora Aerobia mesoacutefila

bull Acinetobacter baumannii

bull Aspergillus spp

bull Aspergillus fumigatus

bull Aspergillus flavus

bull Aspergillus niger

bull Aspergillus terreus

bull Mucor spp

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomona aeruginosa

bull Clostridium difficile

Patoacutegenos disponibles

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

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COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

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iquestCOacuteMO FUNCIONA

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Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

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bull MRSA

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bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

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Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

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Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Klebsiella productora de carbapenemasas resistencias concretas

bull OXA 48

bull KPC

bull NDM

bull ampC

bull hellip etc

El problema de los marcadores uacutenicos no hay

marcadores comunes a todas esas resistencias

concretas por lo que han de disentildearse primers

individuales para cada una de ellas

La solucioacuten Buscar Klebsiella pneumoniae y ver

casuiacutestica y niveles y luego ir afinando con

resistencias concretas

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

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Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

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Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

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bull VRE

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bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

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bull Preguntas frecuentes

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Necesidadesdel servicio

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bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

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Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

Dificultades

Pseudomona aeruginosa Resistencia XDR

El tema de resistencia XDR de Ps aeruginosa es

maacutes complejo pues el perfil de resistencia XDR estaacute

definido por una enorme cantidad de resistencias

distintas mecanismos muy diferentes que ademaacutes

tiene que ver con la expresioacuten de muchos genes y su

regulacioacuten

La solucioacuten = buscar Pseudomona aeruginosa sin

maacutes y ver casuiacutestica y concentraciones

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

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Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

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Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

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Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

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BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

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Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

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Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

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bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

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EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

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Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

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Biodescontaminacioacuten

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bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

1 Toma de muestras = 5min

2 Ensayo = 5 horas

Logiacutestica

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

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Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

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bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

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BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

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TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

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1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

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2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

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bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

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PEROXIDO vs LUZ UV

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COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

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Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

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COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

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PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

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bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

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COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

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Fungi

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Viruses

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EFICACIA

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EFICACIA

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Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Anaacutelisis ambiental por PCR

Casos de eacutexito

CASO VENTAJA

Quiroacutefanos Obras Fugas de agua etc Ahorro de diacuteas de cierre

Central de esterilizacioacutenMapeo de origen

Correccioacuten de falso neg en placa

Habitacioacuten de aislamiento Ahorro de diacuteas de cierre

Zonas reincidentes Correccioacuten de falso neg en placa

Investigacioacuten de Klebsiella pneumoniae

en UCI neonatosHallada en solucioacuten jabonosa

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

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Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

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Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

moltes gragravecies

Biodescontaminacioacuten

1CORRECTIVA

2PREVENTIVA

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

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BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

iquestCOacuteMO FUNCIONA

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iquestCOacuteMO FUNCIONA

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Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

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Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

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Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

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bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

Nuevas herramientas de bioseguridad

POD

Nuevas herramientas de bioseguridad

BQ 50

Nuevas herramientas de bioseguridad

FS 1

Nuevas herramientas de bioseguridad

CUBE

Nuevas herramientas de bioseguridad

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Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

1 LUZ Ultra Violeta

2 OZONO

3 AGENTES BIOCIDAS ldquoTRADICIONALESrdquo

bull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

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BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

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COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

Biodescontaminacioacuten

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Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Datos praacutecticos

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Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

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bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

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bull Otros quiroacutefanos adyacentes

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bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

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bull iquestHay alguacuten material incompatible

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bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

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BQ 50

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FS 1

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

LUZ UV

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BIOCIDAS QUIacuteMICOS

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BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

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TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

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1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

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2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

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COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

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COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

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ALCANCE

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COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

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COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

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iquestCOacuteMO FUNCIONA

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Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

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bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

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EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

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Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

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BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

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Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

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Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

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bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

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POD

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BQ 50

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FS 1

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CUBE

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moltes gragravecies

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BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

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TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

Biodescontaminacioacuten

1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

bull Tradicionalmente GLUTARALDEHIDO (AEROBRUMER)

bull Actualmente peroacutexido de hidroacutegeno al 5 ndash 8

bull Con iones de plata como coadyuvante ndash en prohibicioacuten

bull Solo o con otros coadyuvantes (Acido peraceacutetico)

Biodescontaminacioacuten

2- VAPORIZACIOacuteN - (Fase GASEOSA)

bull Peroacutexido de hidroacutegeno al 35 (HPV)

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

Via aeacutereahellip sihellip pero no descontaminacioacuten de aireFASE LIQUIDA - AEROSOL FASE GASEOSA - VAPOR

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIES

bull Desinfeccioacuten de SUPERFICIESbull Desinfeccioacuten de AIREbull Desinfeccioacuten de Zonas de difiacutecil accesobull Desinfeccioacuten de INTERIOR DE MATERIAL

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

ALGUNAS COMPARACIONES

Biodescontaminacioacuten

TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO vs LUZ UV

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

Caracteriacutesticas HPV VAPOR PEROXIDO UV

Duracioacuten del ciclo 60 - 120 mins 15 min a gt 60 min

Necesidades teacutecnicas del

proceso

Sellado de puertas y

conductos de ventilacioacutenNinguna

Distribucioacuten del biocida Homogeacuteneo Zonas de sombra

Eficacia biocida Nivel esporicida 6 log Nivel esporicida 1-3 log

Evidencia cientiacutefica

internacionalEvidencia numerosa En fase de emergencia

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COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

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COMPARACIOacuteNCON LUZ UV

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TECNOLOGIAS DISPONIBLES

PEROXIDO VAPOR AL 35 vs

PEROXIDO AEROSOL AL 5-10

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

bull 1- CONCENTRACIONES

bull 2- TECNOLOGIacuteA ndash FASES

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automatedroom disinfection system LE Murdoch L Bailey E Banham F Watson NMT Adams and J Chewins

Wickham Laboratories Gosport Hampshire UK

ALCANCE

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

Evaluating different concentrations of hydrogen peroxide in an automated room disinfection system

Biodescontaminacioacuten

COMPARACIOacuteN CON OTROS PEROXIDOS

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COMPARACIONES DE EFECTIVIDAD

VS

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iquestCOacuteMO FUNCIONA

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iquestCOacuteMO FUNCIONA

Biodescontaminacioacuten

Fungi

bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

bull MRSA

bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

EFICACIA

Biodescontaminacioacuten

EFICACIA

iquestCoacutemo se sabe si fue un eacutexito

Biodescontaminacioacuten

Hay una doble validacioacuten

bull Quiacutemica ndash Indicadores quiacutemicos

bull Microbioloacutegica ndash Indicadores bioloacutegicos

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BiodescontaminacioacutenValidacioacuten quiacutemica

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BiodescontaminacioacutenValidacioacuten bioloacutegica

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Datos praacutecticos

bull Necesidades del servicio

bull Preguntas frecuentes

Biodescontaminacioacuten

Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

bull Otros quiroacutefanos adyacentes

bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

Biodescontaminacioacuten

Preguntas frecuentes

bull iquestCuaacutento se tarda

bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

bull iquestHay que limpiar la zona tras el tratamiento

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POD

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BQ 50

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BIOCIDAS QUIacuteMICOS

Biodescontaminacioacuten

BIOCIDAS QUIacuteMICOSbull PEROXIDO DE HIDROacuteGENO 5 8 35

bull FORMALDEHIDO GLUTARALDEHIDO

bull Combinaciones de varios biocidas

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TECNOLOGIacuteA DE

APLICACIOacuteNEFICACIA

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1- NEBULIZACIOacuteN O AEROSOL (Fase liquida )

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Necesidadesdel servicio

bull Es imprescindible apagar la climatizacioacuten

bull OJO con UTAs comunes a varios quiroacutefanos

bull Es necesario sellar la zona

bull Logiacutestica de actividad asistencial cercana

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bull Boxes de UCI

bull Protocolo de PRL

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bull iquestSe puede dejar material

bull iquestHay alguacuten material incompatible

bull iquestSe puede utilizar la zona inmediatamente

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bull Aspergillus

bull Candida albicans

Bacteria

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bull Cdifficile

bull VRE

bull Acinetobacter baumannii

bull Klebsiella pneumoniae

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Stenotrophomonas maltophilia

bull Serratia marcescens

bull Enterobacter cloacae

Common nosocomial Gram-negative pathogens (ie

responsible for GNB HAI)

Viruses

bull norovirus

bull parainfluenza

bull Ebola

bull SARS (1amp2)

bull MERS-CoV

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