molekuláris genetika
DESCRIPTION
Molekuláris genetika. Falus András. MIÉRT VAGYUNK KÜLÖNBÖZŐEK?. MIÉRT VAGYUNK BETEGEK?. TŰT A SZÉNAKAZALBAN!!. DE MEKKORA A SZÉNAKAZAL?. 27. Genom méretek /bp/. pyknonok, fracto, miRNS?. GENETIKA Mutáns fenotípus Mutáns allél DNS szekvencia Protein szekvencia. REVERZ GENETIKA - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
Molekuláris genetikaMolekuláris genetika
Falus András
MIÉ
RT V
AG
YU
NK
KÜ
LÖ
NB
ÖZ
ŐEK
?
MIÉRT VAGYUNK BETEGEK?
TŰT A SZÉNAKAZALBAN!!
DE MEKKORA A SZÉNAKAZAL?
27
Genom méretek /bp/
pyknonok, fracto, miRNS?
GENETIKA
Mutáns fenotípus
Mutáns allél
DNS szekvencia
Protein szekvencia
REVERZ GENETIKA
Protein szekvencia
DNS szekvencia
Mutáns allél
Mutáns fenotípus
LEHETŐSÉGEK BETEGSÉGGÉNEK AZONOSÍTÁSÁRA
MÉG NEM AZONOSÍTOTT BETEGSÉGGÉN
A pathogenezis biokémiai mechanizmusa ismert
Ismert kromoszómán belüli pozíció
FUNKCIONÁLIS KLÓNOZÁS POZÍCIONÁLIS KLÓNOZÁS
Elképzelés a pathogenezis molekuláris mechanizmusáról vagy
rokon mechanizmusú állati vagy emberi betegség
KANDIDÁNS(JELÖLT) KLÓNOZÁS
Deléciós térképezés gének kromoszómális poziciójának meghatározására
Pozício-nális
Pozícionális jelölt
Jelölt
Funkcionális
A teljes genom %-ában 100
1985
1990
1995
1980
2000
2005
2003
Human GenomeProject kezdete
Az emberi gének 80%-a feltérképezve
A genom szek-vencia ismert
Szekvenciák: DNS RNS fehérje
• DNS szekvenálás „könnyű”• RNS és fehérje szekvenciák a DNS alapján komputerrel meghatározhatók• Fehérje 3D szerkezete?• Biológiai funkciója?• Hogyan működik az egész a többi fehérjével kölcsönhatásban?
Hatalmas szakadék volt az elméleti tudás (modellek)és a gyakorlati genetikai vizsgálatok között
Nem állt megfelelő módszer rendelkezésre
Áttörés—technológiai—
endonukleázok vektorok
Az elvi lehetőség létrejött:
ettől kezdve bármely gén, génszakaszklónozható volt
A REKOMBINÁNS DNS FELHASZNÁLÁSA
• szekvencia bankok• DNs próbák• expressziós vektorok• gén terápiás vektorok
DNS komplementaritás(bázis párosodás)
DNS DENATURÁLÁS ÉS HIBRIDIZÁLÁS
A PRÓBÁK:
• Egyszálú jelölt oligonukleotidok (genomiális vagy cDNS szekvenciák vagy RNS), amelyek a komplementaritás alapján hibridizálnak a DNS szállal• Segítségükkel egy keresett szekvencia vagy in situ (sejtben, kromoszómán) vagy gélben mutatható ki
Southern blot (DNS) I.
Southern blot (DNS) II.
RFLP ANALÍZIS
RFLP=restrikciós fragmenthossz-polimorfizmus
Restr
i kci ó
s t
érk
ép
készí
tése
DNA „ujjlenyomat”
VNTR alkalmazása (egyedi azonosítás)
Polimerázláncreakció
Automatizált DNS szekvenálás
AZ AUTOMATIZÁLT SZEKVENÁLÁS EREDMÉNYE
Elektroforézis iránya
Genom programok
•HGP•kórokozók•haszonállatok és növények•laboratóriumi modell állatok
….YOLHONTARKAHIMURETTORTARNYATNYUJTAMINARETBUSDONNABARNABALKONONMERENGABIBORALKONYONOLASZHONGONDORFELLEGEKSOTETEGLANYHULFULLETEGSZOKOKUTVIZEFOLBUZOGTORTMARVANYFARADTMIRTUSZOKGOROGHONSZIRTEKREGIROMKODOTPIPALOBUSOROMALEGSURUAFOLDKOPARNYAJPASZTOROKFENYOGYOPARSVAJCZERGEBERCEKSZEDULETSIKLOMAJORFELHOKFELETTSOTETZOLDVOLGYEKJÉGMEZOHARAPNIFRISSALEVEGONEMETHONVAROSREGIHAZEMELETESTETOFAVAZCEGEREKKANCSOKOKUTAKHIZOTTPOLGAROKSZUKUT…
A SZEKVENCIA MÉG NEM ELÉG!!
Babits Mihály: Messze..messze
A KIRÁLYNŐT MEGÖLNÖTÖK NEM KELL FÉLNETEK JÓ LESZ HA MÁS VELETEK ÉN NEM ELLENZEM
A KIRÁLYNŐT MEGÖLNÖTÖK NEM KELL FÉLNETEK, JÓ LESZ, HA MÁS VELETEK, ÉN NEM ELLENZEM.
A KIRÁLYNŐT MEGÖLNÖTÖK NEM KELL, FÉLNETEK JÓ LESZ, HA MÁS VELETEK, ÉN NEM, ELLENZEM.
FONTOS A KÖZPONTOZÁS ÉS A HANGSÚLY!!
METTŐL MEDDIG TERJED EGY GÉN, HOL VANNAK A SZABÁLYOZÓ RÉGIÓK,
ÉS HOGYAN MŰKÖDNEK??
Szekvenciák: DNS RNS fehérje
• DNS szekvenálás „könnyű”• RNS és fehérje szekvenciák a DNS-é alapján komputerrel meghatározhatók• Fehérje 3D szerkezete?• Biológiai funkciója?• Hogyan működik az egész a többi fehérjével kölcsönhatásban?
A P
UZ
ZLE N
ÉH
ÁN
Y D
AR
AB
KÁ
JA
MÉG
HIÁ
NY
ZIK
!