mikrobiota sirovog mleka – nepatogeni ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 studentski folder/002...

29
MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI MIKROORGANIZMI prof. dr Snežana Bulajić Katedra za higijenu i tehnologiju namirnica animalnog porekla

Upload: others

Post on 10-Jan-2020

12 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI MIKROORGANIZMI

prof. dr Snežana BulajićKatedra za higijenu i tehnologiju namirnica animalnog porekla

Page 2: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Potencijalni izvori kontaminacije sirovog mleka/uloga-značaj MO prisutnih u sirovom mleku

Izvor: Quigley et al. 2013. The complex microbiota of raw milk. FEMS Microbiol Rev 37: 664–698

Page 3: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Izvori kontaminacije mleka mikroorganizmima

Izvor kontaminacije CFU/ml

Ductus papillaris

Vazduh u štali

Zaprljano vime

Pribor za mužu i posude za mleko

100-300

150-1 000

1 500

50 000

Page 4: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Šematski prikaz kontaminacije mleka mikroorganizmima pri ručnoj muži

Mlečna žlezda

Koža vimena

Koža i dlaka krava

Vazduh

Pribor za mužuposude za mleko

Uzročnici mastitisa

Mikrokoke, korinebakterije

Streptokoke, leukonostok vrste

Bakterije mlečne kiseline

Propionske bakterije

Bacili, klostridije

Kvasci, plesni

Enterokoke

Pseudomonas, AchromobacterFlavobacterium

Page 5: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Šematski prikaz kontaminacije mleka mikroorganizmima pri mašinskoj muži

Mlečna žlezda

Papila

Aparat za mužu

Posude za mleko

Uzročnici mastitisa

Mikrokoke, korinebakterije

Streptokoke

Bakterije mlečne kiseline

Bakterije koje stvaraju gas

Enterobakterije

Pseudomonas

AchromobacterChryseobacterium (Flavobacterium)

Page 6: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa
Page 7: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Izvor: Quigley et al. 2013. The complex microbiota of raw milk. FEMS Microbiol Rev 37: 664–698

Page 8: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Izvor: Quigley et al. 2013. The complex microbiotaof raw milk. FEMS Microbiol Rev 37: 664–698

Page 9: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Bakterije mlečne kiseline

Genus Lactococcus (7 vrsta, 2 subvrste i 1 biovar)

L. lactis L. lactis subsp. lactis L. lactis subsp. cremoris L. lactis subsp. lactis biovar diacetylactis L. garvieae – patogen kod riba; izolati iz mleka LTG stekli sposobnost

iskorištavanja La; nedostaje proteolitička aktivnost

Genus Streptococcus (97 vrsta i 17 podvrsta)

Streptococcus thermophilus “Generally Recognized As Safe”- GRAS status) S. uberis. S. agalactiae, S. dysgalactiae, S. macedonicus (tradicionalni sirevi od

sirovog mleka)

Page 10: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Bakterije mlečne kiseline Genus Lactobacillus

▪ Taksonomske promene kontinuirano traju:

▪ 44 vrste i 11 subvrsta u 1986.

▪ 88 vrsta i 15 subvrsta u 2003.

▪ 125 vrsta i 27 subvrsta u decembru 2005.

▪ 174 vrsta i 27 subvrsta 2013.

▪ Habitat- niše bogate na sadržaju UH; biljke, životinje, silaža, sirovo mleko

L. delbrueckii subsp. delbrueckii L. delbrueckii subsp.(ssp.) bulgaricus L. delbrueckii ssp. lactis L. helveticus L. casei, L. paracasei L. plantarum/paraplantarum L. rhamnosus, L. curvatus, L. brevis, L. sake, L. pentosus, L. acidophilus, L. reuterii, L. buchneri, L.

gasseri, L. fermentum, L. crispatus – “non-starter lactic acid bacteria – NSLAB”

Page 11: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Bakterije mlečne kiseline

Genus Leuconostoc (23 vrste i 4 subvrste)

Leuconostoc mesenteroides Leuconostoc pseudomesenteroides Leuconostoc lactis

Genus Enterococcus

Enterococcus faecalis Enterococcus faecium E. durans Enterococcus mundtii Enterococcus italicus

Page 12: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Propionibacterium- dve različite grupe/odvojeni habitati: “acnes” grupa i “dairy or classical”

Gram pozitivni štapići aerobni do aerotolerantni

Optimalna temperatura rasta 30-32°C

Propionibacterium freundenrichii, Propionibacterium acidipropionici, Propionibacterium jensenii, Propionibacterium thoenii

Švajcarski sirevi (Ementaler); fermentacija laktoze do propionata, acetata i CO2- formiranjeokaca i karakterističnog ukusa

Page 13: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Brevibacterium

Gram pozitivni štapići

Optimalna temperatura razmnožavanja 20-30°C

Brevibacterium linens stvara žuti do narandžasto crveni pigment

Nalazi se na površini sireva sa površinskim zrenjem

Page 14: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Proteolitičke bakterije

▪ Nesporogene proteolitičke bakterije iz rodova:▪ Proteus▪ Pseudomonas– P. fluorescens– P. fragi– P. nigrificans– P. viscosa

▪ Serratia – Serratia marcescens

▪ Alcaligenes– Alcaligenes viscolactis

▪ Micrococcus– Micrococcus caseoliticus

Page 15: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Proteolitičke bakterije

▪ Sporogene proteolitičke bakterije– Sporogene aerobne iz roda Bacillus

– B. cereus

– B. megaterium

– B. subtilis

– B. coagulans

– Geobacillus stearothermophilus

(B. stearothermophilus)

Page 16: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Proteolitičke bakterije

▪ Sporogene proteolitičke bakterije– Sporogene anaerobne iz roda Clostridium:

– Cl. butyricum

– Cl. tyrobutyricum

– Cl. sporogenes

– Cl. perfringens

Page 17: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Lipolitički mikroorganizmi

Pseudomonas Chryseobacterium (Flavobacterium) Alcaligenes Aeromonas Achromobacter Micrococcus Corynebacterium Escherichia coli Klebsiella Bacillus

Page 18: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Psihrotrofni mikroorganizmi

Psyhros hladno

Philos voli

▪ DEFINICIJA : FIZIOLOŠKA GRUPA BAKTERIJA, koja, BEZ OBZIRA NA OPTIMALNU TEMPERATURU RASTA, MOŽE DA SE RAZMNOŽAVA, mada usporeno, PRI T ˂ 7oC

Page 19: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Psihrotrofni mikroorganizmi

Gram negativni nesporogeni iz rodova:

Pseudomonas (Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putrefaciens, Pseudomonas fragi i Pseudomonas viscosa

Alcaligenes (A. viscolactis, A. ordorans, A. tolerans)

Achromobacter (A. butyri)

Klebsiella

Enterobacter (E. aerogenes i E. cloacae)

Page 20: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Psihrotrofni mikroorganizmi

Gram pozitivne bakterije iz rodova: Microccocus Bacillus Arthrobacter

Plesni iz rodova: Mucor Cladosporium Geotrichum Penicillium Fusarium

Kvasci iz rodova:

Candida Cryptococcus Torulopsis

Page 21: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa
Page 22: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Porast broja psihrotrofnih mikroorganizama u mleku pri +4°C

Ukupan broj bakterija (UB) 100 000/ml

Broj psihrotrofa (10% UB) (75%) 10 000/ml

Generacijsko vreme psihrotrofa pri 4oC 10 h

Za 72 časa pri 4°C 8 generacija

Broj psihrotrofa posle tri dana 1 280 000/ml

Page 23: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa
Page 24: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Termorezistentne bakterije

Preživljavaju 30 min. pri 63-65°C

Nesporogeni:

Mikrokoke Enterokoke Korinebakterije Mikrobakterije

Sporogeni aerobni mezofilni:

Bacillus cereus Bacilus subtilis, Bacillus sporothermodurans

Sporogeni aerobni termofilni: Geobacillus stearothermophilus (B. stearothermophilus)

Sporogeni anaerobni mezofilni: Clostridium vrste; C. sporogenes, C. butyricum, C. tyrobutyricum

Page 25: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Razmnožavanje bakterija u mleku u funkciji vremena i T

24 48 72 96 časovi

log

N

3

4

5

6

7

8

4,4°C

10°C

15,5°C

Page 26: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Broj mikroorganizama u mleku

▪ Pravilnik o kvalitetu sirovog mleka (Sl. glasnik RS br.106/2017)

▪ Pravilnik o veterinarsko-sanitarnim uslovima, odnosno opštim i posebnimuslovima za higijenu hrane životinjskog porekla, kao i o uslovima higijene hrane životinjskog porekla (Sl. glasnik RS, br. 25/11 i izmena 27/14).

Page 27: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Uslovi za sirovo kravlje mleko

– Prva kategorija- Ukupan broj bakterija na temperaturi 30°C (po ml) ≤ 100 000 (*)- Broj somatskih ćelija (po ml) ≤ 400.000 (**)

– Druga kategorija- Ukupan broj bakterija na temperaturi 30°C (po ml) 100 001-400 000- Broj somatskih ćelija (po ml) ≤ 400.000 (**)

– Treća kategorija- Ukupan broj bakterija na temperaturi 30°C (po ml) 400 001-1 000 000- Broj somatskih ćelija (po ml) ≤ 400.000 (**)

(*) promenljiva geometrijska sredina u toku dvomesečnog perioda, sa najmanje dva uzorka mesečno; (**) promenljiva geometrijska sredina u toku tromesečnog perioda sa najmanje jednim uzorkom mesečno.

Page 28: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa

Direktiva EC 853/2004

▪ Sirovo mleko namenjeno za proizvodnju termički obrađenog mleka, slatko zgrušanog mleka, obogaćenog ili aromatizovanog mleka i pavlake mora da ispunjava sledeće uslove:

– Broj kolonija mikroorganizama određen pri 30oC ≤ 100 000/ml

Page 29: MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 Studentski folder/002 Higijena...Koža i dlaka krava Vazduh Pribor za mužu posude za mleko Uzročnici mastitisa