mikrobiota sirovog mleka – nepatogeni ...namirnice.vet.bg.ac.rs/001 studentski folder/002...
TRANSCRIPT
MIKROBIOTA SIROVOG MLEKA – NEPATOGENI MIKROORGANIZMI
prof. dr Snežana BulajićKatedra za higijenu i tehnologiju namirnica animalnog porekla
Potencijalni izvori kontaminacije sirovog mleka/uloga-značaj MO prisutnih u sirovom mleku
Izvor: Quigley et al. 2013. The complex microbiota of raw milk. FEMS Microbiol Rev 37: 664–698
Izvori kontaminacije mleka mikroorganizmima
Izvor kontaminacije CFU/ml
Ductus papillaris
Vazduh u štali
Zaprljano vime
Pribor za mužu i posude za mleko
100-300
150-1 000
1 500
50 000
Šematski prikaz kontaminacije mleka mikroorganizmima pri ručnoj muži
Mlečna žlezda
Koža vimena
Koža i dlaka krava
Vazduh
Pribor za mužuposude za mleko
Uzročnici mastitisa
Mikrokoke, korinebakterije
Streptokoke, leukonostok vrste
Bakterije mlečne kiseline
Propionske bakterije
Bacili, klostridije
Kvasci, plesni
Enterokoke
Pseudomonas, AchromobacterFlavobacterium
Šematski prikaz kontaminacije mleka mikroorganizmima pri mašinskoj muži
Mlečna žlezda
Papila
Aparat za mužu
Posude za mleko
Uzročnici mastitisa
Mikrokoke, korinebakterije
Streptokoke
Bakterije mlečne kiseline
Bakterije koje stvaraju gas
Enterobakterije
Pseudomonas
AchromobacterChryseobacterium (Flavobacterium)
Izvor: Quigley et al. 2013. The complex microbiota of raw milk. FEMS Microbiol Rev 37: 664–698
Izvor: Quigley et al. 2013. The complex microbiotaof raw milk. FEMS Microbiol Rev 37: 664–698
Bakterije mlečne kiseline
Genus Lactococcus (7 vrsta, 2 subvrste i 1 biovar)
L. lactis L. lactis subsp. lactis L. lactis subsp. cremoris L. lactis subsp. lactis biovar diacetylactis L. garvieae – patogen kod riba; izolati iz mleka LTG stekli sposobnost
iskorištavanja La; nedostaje proteolitička aktivnost
Genus Streptococcus (97 vrsta i 17 podvrsta)
Streptococcus thermophilus “Generally Recognized As Safe”- GRAS status) S. uberis. S. agalactiae, S. dysgalactiae, S. macedonicus (tradicionalni sirevi od
sirovog mleka)
Bakterije mlečne kiseline Genus Lactobacillus
▪ Taksonomske promene kontinuirano traju:
▪ 44 vrste i 11 subvrsta u 1986.
▪ 88 vrsta i 15 subvrsta u 2003.
▪ 125 vrsta i 27 subvrsta u decembru 2005.
▪ 174 vrsta i 27 subvrsta 2013.
▪ Habitat- niše bogate na sadržaju UH; biljke, životinje, silaža, sirovo mleko
L. delbrueckii subsp. delbrueckii L. delbrueckii subsp.(ssp.) bulgaricus L. delbrueckii ssp. lactis L. helveticus L. casei, L. paracasei L. plantarum/paraplantarum L. rhamnosus, L. curvatus, L. brevis, L. sake, L. pentosus, L. acidophilus, L. reuterii, L. buchneri, L.
gasseri, L. fermentum, L. crispatus – “non-starter lactic acid bacteria – NSLAB”
Bakterije mlečne kiseline
Genus Leuconostoc (23 vrste i 4 subvrste)
Leuconostoc mesenteroides Leuconostoc pseudomesenteroides Leuconostoc lactis
Genus Enterococcus
Enterococcus faecalis Enterococcus faecium E. durans Enterococcus mundtii Enterococcus italicus
Propionibacterium- dve različite grupe/odvojeni habitati: “acnes” grupa i “dairy or classical”
Gram pozitivni štapići aerobni do aerotolerantni
Optimalna temperatura rasta 30-32°C
Propionibacterium freundenrichii, Propionibacterium acidipropionici, Propionibacterium jensenii, Propionibacterium thoenii
Švajcarski sirevi (Ementaler); fermentacija laktoze do propionata, acetata i CO2- formiranjeokaca i karakterističnog ukusa
Brevibacterium
Gram pozitivni štapići
Optimalna temperatura razmnožavanja 20-30°C
Brevibacterium linens stvara žuti do narandžasto crveni pigment
Nalazi se na površini sireva sa površinskim zrenjem
Proteolitičke bakterije
▪ Nesporogene proteolitičke bakterije iz rodova:▪ Proteus▪ Pseudomonas– P. fluorescens– P. fragi– P. nigrificans– P. viscosa
▪ Serratia – Serratia marcescens
▪ Alcaligenes– Alcaligenes viscolactis
▪ Micrococcus– Micrococcus caseoliticus
Proteolitičke bakterije
▪ Sporogene proteolitičke bakterije– Sporogene aerobne iz roda Bacillus
– B. cereus
– B. megaterium
– B. subtilis
– B. coagulans
– Geobacillus stearothermophilus
(B. stearothermophilus)
Proteolitičke bakterije
▪ Sporogene proteolitičke bakterije– Sporogene anaerobne iz roda Clostridium:
– Cl. butyricum
– Cl. tyrobutyricum
– Cl. sporogenes
– Cl. perfringens
Lipolitički mikroorganizmi
Pseudomonas Chryseobacterium (Flavobacterium) Alcaligenes Aeromonas Achromobacter Micrococcus Corynebacterium Escherichia coli Klebsiella Bacillus
Psihrotrofni mikroorganizmi
Psyhros hladno
Philos voli
▪ DEFINICIJA : FIZIOLOŠKA GRUPA BAKTERIJA, koja, BEZ OBZIRA NA OPTIMALNU TEMPERATURU RASTA, MOŽE DA SE RAZMNOŽAVA, mada usporeno, PRI T ˂ 7oC
Psihrotrofni mikroorganizmi
Gram negativni nesporogeni iz rodova:
Pseudomonas (Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putrefaciens, Pseudomonas fragi i Pseudomonas viscosa
Alcaligenes (A. viscolactis, A. ordorans, A. tolerans)
Achromobacter (A. butyri)
Klebsiella
Enterobacter (E. aerogenes i E. cloacae)
Psihrotrofni mikroorganizmi
Gram pozitivne bakterije iz rodova: Microccocus Bacillus Arthrobacter
Plesni iz rodova: Mucor Cladosporium Geotrichum Penicillium Fusarium
Kvasci iz rodova:
Candida Cryptococcus Torulopsis
Porast broja psihrotrofnih mikroorganizama u mleku pri +4°C
Ukupan broj bakterija (UB) 100 000/ml
Broj psihrotrofa (10% UB) (75%) 10 000/ml
Generacijsko vreme psihrotrofa pri 4oC 10 h
Za 72 časa pri 4°C 8 generacija
Broj psihrotrofa posle tri dana 1 280 000/ml
Termorezistentne bakterije
Preživljavaju 30 min. pri 63-65°C
Nesporogeni:
Mikrokoke Enterokoke Korinebakterije Mikrobakterije
Sporogeni aerobni mezofilni:
Bacillus cereus Bacilus subtilis, Bacillus sporothermodurans
Sporogeni aerobni termofilni: Geobacillus stearothermophilus (B. stearothermophilus)
Sporogeni anaerobni mezofilni: Clostridium vrste; C. sporogenes, C. butyricum, C. tyrobutyricum
Razmnožavanje bakterija u mleku u funkciji vremena i T
24 48 72 96 časovi
log
N
3
4
5
6
7
8
4,4°C
10°C
15,5°C
Broj mikroorganizama u mleku
▪ Pravilnik o kvalitetu sirovog mleka (Sl. glasnik RS br.106/2017)
▪ Pravilnik o veterinarsko-sanitarnim uslovima, odnosno opštim i posebnimuslovima za higijenu hrane životinjskog porekla, kao i o uslovima higijene hrane životinjskog porekla (Sl. glasnik RS, br. 25/11 i izmena 27/14).
Uslovi za sirovo kravlje mleko
– Prva kategorija- Ukupan broj bakterija na temperaturi 30°C (po ml) ≤ 100 000 (*)- Broj somatskih ćelija (po ml) ≤ 400.000 (**)
– Druga kategorija- Ukupan broj bakterija na temperaturi 30°C (po ml) 100 001-400 000- Broj somatskih ćelija (po ml) ≤ 400.000 (**)
– Treća kategorija- Ukupan broj bakterija na temperaturi 30°C (po ml) 400 001-1 000 000- Broj somatskih ćelija (po ml) ≤ 400.000 (**)
(*) promenljiva geometrijska sredina u toku dvomesečnog perioda, sa najmanje dva uzorka mesečno; (**) promenljiva geometrijska sredina u toku tromesečnog perioda sa najmanje jednim uzorkom mesečno.
Direktiva EC 853/2004
▪ Sirovo mleko namenjeno za proizvodnju termički obrađenog mleka, slatko zgrušanog mleka, obogaćenog ili aromatizovanog mleka i pavlake mora da ispunjava sledeće uslove:
– Broj kolonija mikroorganizama određen pri 30oC ≤ 100 000/ml