microbiologie subiecte examen rezolvate

Download Microbiologie Subiecte Examen Rezolvate

Post on 09-Jul-2015

522 views

Category:

Documents

12 download

Embed Size (px)

TRANSCRIPT

MICROBIOLOGIE SUBIECTE EXAMEN PARIAL 1. Celule eucariote i procariote, caracteristici comparative Celula eucariota: nucleu: cu membrana, mai multi cromozomi, aparat mitotic citoplasma: RE, mitocondrii, lizozomi, ribozomi 80S, mb cu steroli - Peretele celular: absent sau compus din celuloza sau chitina Capsula: absenta Celula procariota: Nucleu: fara membrana, un singur cromozom circular, absentza mitozei Citoplasma: nu are RE, nu are mitocondrii, nu are lizozomi, are ribozomi 70S, mb nu contine steroli Peretele celular: are structura complexa prezentand glicopeptid, proteine, lipide etc Capsula: adesea prezenta 2. Clasificai bacteriile dup form i dispunere exemple Dupa forma bacteriile se pot grupa in: a) de forma cocoidala diametre egale sau inegale dispuse izolat sau grupat. Majoritatea streptococilor si stafilococilor sunt sferici, enterococii sunt ovalari, pneumococii sunt lancelati iar meningococii si gonococii sunt reniformi. In functie de planurile de diviziune: i. stafilococii in ciorchine ii. pneumococii -2cate 2 iii. streptococii in lanturi b) cu forma de bastonas (bacili), drepti cu capetele usor rotunjite (enterobacterii), drepti cu capetele taiate drept (B anthracis), fuziformi (fusobacterium) c) cocobacili (H. Influenzae, B. Perlussis, B. Abortus) d) forma spiralata (bacili curbi V cholerae, spirali si spirochete) Unele bacterii, inclusiv daca rezulta prin multiplicarea unei singure celule prezinta un polimorfism accentuat (Proteus) 3. Enumerai componentele constante i facultative ale celulei bacteriene Structuri constante: peretele bacterian inconjoara mb citoplasmatica, 15-30nm - mezozomi structuri membranoase care se formeaza prin invaginarea membranei citoplasmatice de care raman legati citoplasma intens bazofila o ribozomi forma sferica si marime variabila in f de Mg si K, esentiali in procesul de biosinteza proteica nucleu in contact direct cu citoplasma, contine ADN si nu are nucleoli Structuri inconstante: incluziile formatiuni structurale inerte care apar in citoplasma la sfarsitul perioadei de crestere activa, pot contine polimeri anorganici, substante anorganice simple, polimeri organici, lipide etc. Vacuole formatiuni sferice care contin diferite substante in solutie apoasa, au o membrana lipoproteica numita tonoplast Capsula glicocalix, strans legat de celula bacteriana, structura polizaharidica (S pneumonae) sau polipeptidica (Anthracis), vizibila la mo Flageli confera mobilitate bacteriilor Fimbrii formatiuni scurte cu rol in adeziune Spori forma de rezistenta si conservare a speciei 4. Structura peretelui la bacteriile Gram pozitive i Gram negative Gram pozitive: Peretele contine 80-90% mureina (peptidoglican, glicopeptid parietal). Mureina este un heteropolimer al carui schelet este format prin legarea alternanta in lanturi polizaharidice a 2 zaharuri aminate, acidul N acetil muramic (NAM) si N acetil gluczoamina. Fiecare molecula de NAM are substituit un tetrapeptid alcatuit din D si L aminoacizi. Intre tetrapeptidele substituite, la lanturile polizaharidice alaturate se stabilesc legaturi peptidice prin gruparea terminala COOH a unui tetrapeptid si grupari terminale libere ale tetrapeptidului vecin. Astfel se formeaza structuri bidimensionale sub forma unor straturi care inconjoara intreaga celula bacteriana. Bacteriile gram pozitive retin violetul de gentiana (au culoarea violet la coloratia Gram). La unele bacterii, reteaua de baza este acoperita de retele suplimentare cu specificitate antigenica, alcatuite de exemplu din acid teichoic. Dintre bacteriile gram pozitive fac parte: stafilococul, streptococul, enterococul, bacilul difteric, bacilul antraxului...

Gram negative: Li se descrie un perete celular in general mai subtire alcatuit dintr-un strat fin de proteoglican (10-20% din structura peretelui) care este acoperit de o membrana externa. Spatiul dintre membrana citoplasmatica si membrana interna reprezinta spatiul periplasmic. Din punct de vedere chimic membrana externa este alcatuita din fosfolipide, proteine si cantitati variabile de lipopolizaharide. Lipopolizaharidul (endotoxina) are in componenta doua structuri esentiale: Lipidul A si polizaharidul O. Bacteriile gram negative se decoloreaza cu alcool-acetona si se recoloreaza cu fuscina diluata (au culoare rosie in coloratia gram). Dintre bacteriile gram negative fac parte: meningococul, gonococul, enterobacteriile, vibrionul holeric, cocobacilii gram negativi. 5. Rolul peretelui bacterian prin rigiditate asigura forma caracteristica bacteriei (coci, bacili etc) asigura rezistenta bacteriei (ex: variatii ale presiunii) flexibilitatea peretelui celular la unele bacterii poate fi explicata atat prin flexibilitatea membranei cat si prin grosimea redusa a peptidoglicanului are rol antigenic (carbohidratul C la streptococ, antigenul O lipopolizaharidic etc) are rol in diviziunea bacteriana formand septul transversal la nivelul lui pot actiona unele antibiotice (ex: betalactaminele, vancomicina, D-cicloserina)

-

6. Coloraia Gram, timpi interpretare exemple -

-

diluam intr-un recipient fuscina (9 apa, 1 fuscina) acoperim frotiul cu violet de metil sau cristal violet (violet de gentiana dpdv istoric) asteptam 1-3 minute inlaturam colorantul acoperim frotiul cu lugol (mordant) pentru 1-3 min indepartam lugolul acoperim frotiul cu un amestec alcool-acoetona (1 actenoa, 3 alcool) pentru 7-8 secunde spalam insistent cu apa acperim frotiul cu fuscina diluata pentru 1 min spalam cu apa asezam frotiul in stativ pentru uscare examinam la microscop, notam observatiile, interpretam

7. Protoplati Sferoplati Forme L Protoplastul este o sfera marginita de membrana citoplasmatica, reprezinta bacteria gram-pozitiva dupa indepartarea completa a peretelui, de exemplu sub actiunea lizozimului care lizeaza mureina. In medii hipotone protoplastul se lizeaza. Este o structura care nu se poate multiplica. Sferoplastul reprezinta bacteria gram negativa dupa degradarea partiala a peretelui contine o cantitate mai mica de mureina. Lizozimul poate actiona asupra peptidoglicanului numai dupa alterarea membranei externe. In medii hipotone sferoplastul se lizeaza. Spre deosebire de protoplast acesta se poate multiplica. Formele L germeni modificati structural, observati pentru prima oara in 1935. Denumiti L dupa numele institutului Dr Lister unde s-au descoperit. Nu sunt microorganisme distincte ci forme ale unor microorganisme cu peretele bacterian modificat. Utilizandu-se lizozim sau penicilina ca agenti inductori s-au putut obtine forme L de la majoritatea bacteriilor. Este posibil ca aceste forme L sa explice prezenta in organism a anumitor forme cronice. 8. Coloraia Ziehl-Neelsen, timpi interpretare exemple Coloratie utila in identificarea prezentei de bacili acid-alcool rezistenti (BAAR), solubilizand peretele prin cresterea temperaturii, facilitand patrunderea colorantului.

-

punem frotiul uscat si fixat pe un suport situat deasupra tavitei de colorare acoperim complet lama cu fuscina bazica nediluata trecem becul de gaz aprins pe sub lama acoperita de fuscina pana incepe emiterea de vapori se repeta procedura de 3 ori in 10 minute spalam insistent cu apa distilata sau de la robinet adaugam amestecul decolorant acid-alcool pentru 3 min recoloram cu albastru de metilen, 1 minut

-

-

spalam cu apa distilata sau de la robinet asezam frotiul in stativ pentru uscare examinam la microscop, notam observatiile, interpretam

9. Structura i rolul membranei citoplasmatice Intre perete si citoplasma exista membrana citoplasmatica avand grosimea de 7-10nm. La ME apare formata din 2 straturi intunecoase separate de un strat mai clar. Este considerata un mozaic fluid, compusa dintr-un film fosfolipidic in care floteaza proteine globulare c extremitatile polare hidrofile expuse spre spatiul intracelular, extracelular sau ambele. Fosfolipidele, dispuse in dublu strat, cu extremitatile polare, hidrofile, expuse contactului cu apa pe ambele fete ale membranei si extremitatile nepolare, hidrofobe, proemyaye spre stratul mijlociu al membranei. Nu contine steroli. Roluri: - filtru selectiv datorita pemeazelor (rol in permeabilitate si transport) - contine enzime ale metabolismului respirator (citocromi) - este sediul majoritatii activitatilor enzimatice ale celulei bacteriene - excreta enzime hidrolitice - intervine activ in procese de biosinteza - are rol in diviziunea celulara septul transversal - este implicata in chemotoxie prin receptorii de pe suprafata sa - asupra membranei pot actiona anumite antibiotice (polimixinele) 10.Ribozomii, structur i rol au forma sferica si o marime care depinde de concentratia ionilor de MG si K unii apar liberi in citoplasma altii legati de fata interna a membranei citoplasmatice contin circa 65% ARNr ct = 70S = 1x30S+1x50S intre cele doua subunitatio se formeaza un canal prin care trec moleculele de ARNm in cursul sintezei proteice rol esential in procesul de biosinteza proteica ARNm transporta informatia genetica de la genom la nivelul ribozomilor Traducerea se face la nivelul ribozomilor de catre ARNt care are dubla specificitate (pentru fiecare din cei 20AA exista unul sau mai multi ARNt)

-

11.Mezozomi Incluzii Vacuole (n structura celulei bacteriene) Mezozomii sunt structuri membranoase care se formeaza prin invaginarea membranei citoplasmatice de care raman legati. Sunt prezenti in special la bacteriile gram-pozitive. Au structura chimica a membranei citoplasmatice si aceleasi functii in permeabilitate si respiratie. Sunt mai dezvoltati la bacteriile gram-pozitive. Cu un capat se pot fixa de materialul nuclear, favorizand distribuirea in mod egal a genomului intre cele doua celule fice. Au rol si in formarea septului transversal. Incluzii sunt formatiuni structurale inerte ce apar in citoplasma la sfarsitul perioadei de crestere activa. Pot contine polimeri anorganici (de exemplu cor