metodos de extraccion e identificacion de lipidos

7/23/2019 Metodos de Extraccion e Identificacion de Lipidos

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METODOS DE EXTRACCION EIDENTIFICACION DE LIPIDOS

TANIA DE LA FLOR BELLIDO G

DEYSI MALA

JUANITO HERRERA



LIPIDOS

• Definición.- Los lípios os!s"#$%i#s &'#s#s (i)$)$ # s)'*!í+i%#+)$") +),%l#s%o$s"i"!i#s po' )s")')s ) l#&li%)'i$# ) o"'os #l%ool)s %o$los /%ios &'#sos. P!))$ %o$")$)'#)+/s /%ios &'#sos li0')s1&li%)'i$# li0')1 ')si$#s1 )s)$%i#s1#l0!+i$#s1 pi&+)$"os1 )"%. Es #()%)s # )s"#s s!s"#$%i#s *!) s))0)$ s!s #%%io$)s



Clasificación.-

Lípidos saponificables: Los lípidos

saponificables son los lípidos que contienen

ácidos grasos en su molécula y producen

reacciones químicas de saponificación. A su

vez los lípidos saponificables se dividen en:Lípidos simples

Lípidos compleos

Lípidos insaponificables: !on los lípidos que no poseen ácidos grasos en

producen reacciones de saponificación. "ntre los lípidos insaponificables encon

"steroides y %rostaglandinas.



Funciones

• Función de reserva• Función estructural

• Función Aislante

• Función

biocatalizadora• Función

transportadora

• Función Reguladora:

• Función de

Localización.- Las grasas provien

vegetales como de los animales. "n

se localizan preferentemente en las s

las células del albumen &ricino' o en

cotiledones &almendras$ maní' o en

adormidera$ etc.' y además en el per

frutos como el olivo.



EXTRACCION DE LIPIDOS

• Los +4"oos ) )5"'#%%i3$ ) l#s&'#s#s #%)$ !so ) op)'#%io$)s2ísi%#s # ()%)s *!í+i%#s1 o$)s!)l) "'#0#6#'s) )$ 2'io o 0i)$#p'o()%#$o )l %#lo'.

• T#+0i4$ p!)) !s#'s) isol()$")s#p'opi#os 74")'1 %lo'o2o'+o1s!l2!'o ) %#'0o$o. B)$%i$#1 #%)i")s) p)"'3l)o8 #!+)$"#' l# p')si3$#"+os24'i%#.

• E$ &)$)'#l s) %o$si)'#$ los



METODOS DE EXTRACCION DE LIPIDOS A PARTIRDE LAS DROGAS

• Ex!esión en F!io.- S)p')sio$#$ los 3'&#$os 'i%os )$#%)i")s )$ p')$s#s1 lo *!)p'o(o%# )l )s%!''i+i)$"o )

los #%)i")s )$ )5%)l)$"))s"#o ) p!'),#. El p'o!%"oo0")$io )s ) p'i+)'#%#li#. S) )+pl)# p#'##l&!$#s s)+ill#s ol)#&i$os#s p#'# )l #%)i") ) í&#o )



• Ex!esión en Calien"e.- Al p'opio "i)+po *!) s)3'&#$os1 s) #%) #%"!#' l# #%%i3$ )l %#lo'1')$i+i)$"o )s +#o'1 l# %#li# )l p'o!%"o )

')si!o1 o "o'"#1 p'o()$i)$") ) l# %o+p')si3$ s) )2o''#6) #0o$o1 p!)s pos)) #!$ los p'i$%ipios p'os)+ill#s.



METODOS DE EXTRACCION DE LIPIDOS APARTIR DE LAS DROGAS

• Po! el #ao! $e a%ua.-El (#po' ) #&!# so0'o0'# #0l#$#$o l#s %4l!l#s *!) %o$"i)$)$ )s"'!)$o l!)&o s!s +)+0'#$#s1 )l %#lo' #%":# #l 2!$i' l# &'#s# s3li# p')s%!''i+i)$"o.

• Po! acción $e $isol#en"es.- S) )+pl)#$ loisol()$")s ) &'#s#s1 solos o #so%i#os los *

s) )s"il#$ *!)#$o %o+o ')si!o l#s &'#s#s.



METODOS DE EXTRACCION e IDENTIFICACIONDE LOS LIPIDOS

• METODOS DE SOXHLET

• El +4"oo %o$sis") )$ !$# )5"'#%%i3$ ) lípios s)+i-%o$"i$!# %o$ )l sol

2!$%io$#+i)$"o %o$"i$!o o +),%l# ) sol()$")s o'&/$i%os #)%!#o s)&:$ )5"'#)'.

• E$ )s") +4"oo )l isol()$") s) %#li)$"#1 s) (ol#"ili,# %o$)$s# &o")#$o s%!#l *!)# s!+)'&i# )$ )l isol()$"). Pos")'io'+)$") 4s") )s si2o$)#%#l)$"#+i)$"o p#'# )+p),#' ) $!)(o )l p'o%)so. El %o$")$io ) &'#s#i2)')$%i# ) p)so.

• P!ea!ación $e la &ues"!a ' ex"!acción $e los l(i$os9 E$ !$ %#'"!%o %olo%#' l# +!)s"'# s)%# p)s## 7%o$(i)$) !"ili,#' lo p'o()$i)$") ) l#!+)# po' )l +4"oo i$i')%"o81 po$)'l# )$ )l "!0o )5"'#%"o'. T#'#' )l 0%o$)%"#'lo #l +is+o. Po' l# p#'") s!p)'io' )l "!0o )5"'#%"o' #&')&#' )l 74")' )"íli%o1 4")' ) p)"'3l)o1 +),%l# ) #+0os1 )"%.8 #s"# *!) )s%#'&!) )#)+/s #l'))o' ) l# +i"# )l %o$")$io )l "!0o )5"'#%"o'. C#l)$"#' p#'

#l +)$os ; %i%los ) ll)$#o si2o$#o )l "!0o )5"'#%"o' 7!'#$") < o'#s #p



• Recue!ación ' eli&inación $el sol#en"e9=!i"#' )l %#'"!%o )l "!0o )5"'#%"o' %o$ )l')s"o ) l# +!)s"'#. Vol()' # #'+#' )l )*!ipo ')%!p)'#' )l sol()$") li+pio *!) s) (##%!+!l#$o )$ )l "!0o )5"'#%"o'. U$# (),*!) *!)# !$ p)*!)>o (ol!+)$ )$ )l 0#l3$s)p#'#' )l sol()$") ) los lípios po')(#po'#%i3$ # 0#>o M#'í# o )$ 0#>o ) #')$#%#li)$"). Colo%#' )l 0#l3$ %o$ los lípios!$os ?@ +i$!"os )$ )s"!2# p)s#'.

• C)lculos* !$# (), %o$o%i# l# +#s# )lípios li0') ) sol()$") o'&/$i%o1 %#l%!l#' )lpo'%)$"#6) ) &'#s# )$ l# +!)s"'# ")$i)$o

)$ %!#$"# l# +#s# i$i%i#l ) +!)s"'#



"l método de (lig)*+yer proporciona un método rápido para la e,tracción de

productos alimenticios que contienen una cantidad significativa de agua.

"l método se basa en la )omogenización de la muestra con cloroformo$ m

proporciones tales que se forme una sola fase miscible con el agua de la muestra

de cloroformo y agua se logra la separación de fases. "l material lipídico se encu

acuosa$ mientras que el material no lipídico se encuentra en la fase acuosa. Lo

e,traer de dos gramos de muestra seca )asta veinte gramos de muestra )me

agua de la muestra se austa a dieciséis mililitros para conservar la proporc

metanol y agua la cual es esencial si se pretende una separación de fase

cuantitativa de lípidos. La ventaa de este procedimiento es que las etapas de f

eliminadas. !in embargo no es un método muy cuantitativo y tiene un elevado mmuestras secas de cereales.

METODO DE +LIG, DER



• +e acuerdo a este método$ la separación de la

grasa es lograda por amoniaco y etanol con un

posterior efecto de des)idratación sobre los

fosfolípidos. La grasa es disuelta en éter reciéndestilado y se a-ade algo de petróleo de tal

suerte que se separen algunos compuestos no

lipídicos que se puedan encontrar en la fase

etérea. "sta mezcla es completamente

inmiscible en agua de manera que mediante una

e,tracción adecuada es simple dear la grasa enla fase etérea y el residuo graso es pesado.

• "ste método es particular para lec)e fresca que

no contiene ácidos grasos libres$ los cuales en

disolución alcalina forman sales de amonio y

esto es insoluble en éter. "sta es la razón por la

cual esto no se aplica a quesos$ los cuales si

MET! !E R"E - #TTL$E%

• Aplicaciones: Determinación:



• Aplicaciones:

• L)%)1 l)%) s)+i)s%')+##1l)%) )$ pol(o

• L)%) %o$)$s## #,!%#'## si$ #,!%#'#'

• N#"# $#"# 0#"i#• L#%"os!)'o

• Reactivos:

• Sol!%i3$ ) N#Cl @1 p(

• NHDOH 7)$si# @.?8

• E"#$ol

• E")' i)"íli%o9 i$")'(#lo ))0!lli%i3$ @-@C

• E")' ) p)"'3l)o9 i$")'(#lo ))0!lli%i3$ @-@C

Determinación:

!e seca un matraz "rlenmeyer con bo

/00 ml con algunas perlas de vidrio du

/56$ se coloca en desecador y se pesa

de 34* 1mg.La muestra se pesa también

a los valores recomendado en la tab

e,tracción de 7oonnier$ diluyéndose c

si fuera necesario )asta un volumen de

de la nata debe utilizare la solución de)asta que el producto se )aya disp

&para la lec)e en polvo es conveniente

e,tracción y su contenido durante 19 m

de agua a 0*;056 agitando ocasionalm



A continuación se a-aden / ml de amoníaco$ se mezcla y tras enfriar se a

etanol. +espués de a-adir /9 ml de éter dietílico$ se tapa el tubo de e,trac

durante 1 minuto invirtiéndolo suetando el tapón. <inalmente se a-aden /9

petróleo y se vuelve a agitar durante 20 segundos. =na vez que las

separado completamente$ lo que sucede después de dear reposar el tubo

o centrifugándolo durante 9 minutos a 900*00 r.p.m.$ se pasa tanta

&superior' como sea posible al erlenmeyer previamente pesado. !e repite

vez la e,tracción del residuo acuoso con otros 19 ml de éter dietílico y é

como se detalló más arriba. A continuación se renen las fase orgánicas$

solventes &también el etanol' y se seca el residuo que queda en el mat

durante 1) a 102 34* /56. !e enfría en desecador y se pesa con una p

1mg. "l secado se repite )asta obtener peso constante.



P'o!%"o l/%")o P)so )$ &'#+os

L)%) )$")'# )$ pol(o ?-?1?

L)%) )s%')+## )$ pol(o ?1-?1

N#"#1 $#"# 0#"i# <-

L)%) %o$)$s## #,!%#'## -1

L)%) %o$)$s## si$ #,!%#'#' -

L)%) )$")'#1 l)%) )s$#"## ?@-??

%esos recomendados de muestra

&'lculo

"l porcentae de grasa > se calcula de acuerdo con la siguiente igualdad:

> ?@B ?&m/*m

1' . 10047

m1: masa en gramos del matraz "rlenmeyer con las perlas.m

/: masa en gramos del matraz "rlenmeyer con las perlas con grasa tras el secad

7: peso de la muestra en gramos

8ota: "s conveniente realizar un ensayo en blanco sustituyendo la muestra por

destilada.

Materia grasa en dulce de lec(e. M)todo de Rose #ottlieb



Materia grasa en dulce de lec(e. M)todo de Rose #ottlieb

Reactivos

8CDEC conc.

"tanol

"ter etílico

"ter de petróleo

%esar un gramo de muestra en papel satinado previamente tarado. "ncerrar parcialmente el d

entrar en contacto con los reactivos' e introducir )asta el fondo en una probeta de 90 ml con ta

agua destilada y agitar )asta que se disuelva el dulce de lec)e &si es necesario calentar a (.7

agregar 1 ml de 8CDEC conc. Agitar y agregar 9 ml de etanol. Agitar y agregar con pipeta a

etílico. Agitar 20 seg. y agregar con pipeta aforada 10 ml de éter de petróleo.

Folver a agitar y leer bien el volumen total de la mezcla. +ear reposar entre D y /D )s. en lu

evitar la evaporación de solventesG si esto ocurriera se notará una disminución en el volume

aforada tomar 10 ml de la fase superior etérea y evaporarlos en un peque-o cristalizador tara

desecador$ pesar y e,presar en @ de grasas.



METODO GER+ER

• s") +4"oo (ol!+4"'i%o p')s)$"# !$ %#'/%")'!$ "#$"o %!#$"o )+pí'i%o # *!) (#'ios 2#%"o')s#2)%"#$ l# &'#()# )sp)%í2i%# ) l# &'#s#s)p#'##1 (#'i#%io$)s p'opi#s ) l# &'#s#1/%ios &'#sos p')s)$")s1 sol!0ili# ) l# &'#s#

)$ los isol()$")s1 )"%. Co$ )s") +4"oo(ol!+4"'i%o l# +!)s"'# s) si":# )$ !$0!"i'3+)"'o s) )s%o+po$) !"ili,#$o /%ioso /l%#lis ) +#$)'# *!) l# &'#s# )s li0)'##1)s"# s) s)p#'# po' +4"oos +)%/$i%os7%)$"'i2!&#8 s) %ol)%"# )$ )l %!)llo %#li0'#o.



REACCIONES CROMATICAS E IDENTIFICACIONDE LIPIDOS

• Los #%)i")s #$ %olo'#%io$)s)sp)%i#l)s1 7reacciones cromáticas)%o$ (#'ios ')#%"i(os1 %o+o /%ios1/l%#lis1 s#l)s i()'s#s #l&!$#s ))s"#s ')#%%io$)s si'()$ p#'#

is"i$&!i' %i)'"os &'!pos ) #%)i")s1o"'#s si'()$ p#'# %#'#%")'i,#')")'+i$#o #%)i") %!#$o so$)5%l!si(#+)$") )sp)%í2i%#s )l #%)i"))$ %!)s"i3$.

• E$"') l#s ')#%%io$)s ) %#'/%")'



REACCION DE ,EDENRIC,.-• E$ !$# %#ps!l# ) po'%)l#$# ) 2o$o pl#$o s)

%olo%#$ %% ) /%io s!l2:'i%o %o$%)$"'#o so0'))l s) (i)'")$ #l&!$#s &o"#s ) #%)i") # )5#+i$#'. E$l# ,o$# ) %o$"#%"o s) o0s)'(# l# %olo'#%i3$9

• Los acei"es no secan"es* oli(o1 +#$í #l+)$'#s1$o #$ ")$io %#+0io s)$si0l) ) %olo'. A ()%)s )l#%)i") ) oli(o "o+# !$ %olo' #+#'illo ()'oso.C!#$o los #%)i")s so$ +! (i)6os o )s"/$ '#$%ios#$ %olo'#%io$)s #$#'#$6##s o p#'#s.

• Con los acei"es se&isecan"es* #l&o3$1 s4s#+o1%ol,#1 +#í,1 )"%.1 s) o0"i)$)$ %olo'#%io$)s )l#$#'#$6#o #s"# )l p#'o.

• Con los acei"es secan"es* li$#,#1 %/>#+o1#o'+i)'#1 "!$&1 %olo'#%io$)s p#'#s o $)&'#s 2o'+#%i3$ ) !$# p)lí%!l# )sp)s# )$ l# s!p)'2i%i).



REACCION DE ,A/C,ECORNE• S) +),%l# )$ !$ "!0o ) )$s#o %% ) #%)i") %o$

<%% ) ')#%"i(o 2o'+#o po' "')s (ol:+)$)s ) /%io$í"'i%o p!'o !$ (ol!+)$ ) #&!# )s"il##.

• S) o0s)'(# l# %olo'#%i3$ *!) "o+# )l #%)i") #&i"#o%o$ )l /%io po' !$os os +i$!"os l!)&o l#%olo'#%i3$ )sp!4s ) #0)'lo ")$io !'#$") <@+i$!"os #l 0#>o +#'í#.

• Los #%)i")s $o s)%#$")s oli(o1 #l+)$'#s1#()ll#+#s1 +#$í1 %o$s)'(#$ s! %olo' )l ) oli(o"o+# # ()%)s %olo' #+#'illo ()'oso. Es"os +is+os#%)i")s %!#$o )s"/$ '#$%ios p!))$ #*!i'i' %olo'#$#'#$6#o.

• Los #%)i")s s)+is)%#$")s s)%#$")s "o+#$%olo'#%i3$ )s) )l #$#'#$6#o #s"# )l 'o6o %#s"#>o.



REACCION DE +ELLIER • E$ !$ "!0o ) )$s#o s) %olo%#$ %% ) #%)i") o

) l# &'#s# s3li#1 2!$i# 2il"'##1 %%. )/%io $í"'i%o %o$%)$"'#o o i$%olo'o %%. D)sol!%i3$ s#"!'## )$ 2'io ) ')so'%i$# )$ 0)$,ol s) #&i"#$ 2!)'")+)$") !'#$") ?@ s)&!$os.

• Los #%)i")s ()&)"#l)s #$ %olo'#%io$)s 'o6#s1()')s o (iol)"#s1 !'#$") )l "i)+po *!) s)#&i"#$ @ s)&!$os )sp!4s. L#s %olo'#%io$)s*!) #p#')%)$ +/s "#') $o )0)$ "o+#'s) )$%!)$"#. Los #%)i")s #$i+#l)s %o$s)'(#$ s! %olo' op#s#$ #l p#'o.

• Es"# ')#%%i3$ si'() p#'# )s%!0'i' los #%)i")s()&)"#l)s ) s)+ill#s )$ l#s &'#s#s #$i+#l)s7&'#s# ) %)'o po' )6)+plo8. El #%)i") ) oli(o# %olo'#%i3$ s)$si0l) )$ )s") i$")'(#lo )"i)+po. El #%)i") ) s4s#+o # %olo'#%i3$ ()').



ENSAO DE ELAIDINA

• Es"# 0#s#o )$ l# "'#$s2o'+#%i3$ ) l# ol)í$# li*!i# )$ s! is3+)'o )

s3li#1 po' #%%i3$ )l /%io $i"'oso1 lo *!) $o s!%)) %o$ los /%ili$ol)$i%o %#'#%")'ís"i%os ) los #%)i")s s)%#$")s.

• E$ !$ "!0o ) )$s#o s) %olo%#$ ?@%% ) #%)i") %% ) /%io $í"'i%o1+i$!"os s) #&')&# ?+& ) +)'%!'io *!) s) #%) isol()' #&i"#$o ))sp!4s s) )6# )$ ')poso 7 p'o!%%i3$ ) /%io $i"'oso81 )$!')%i+i)$"o. S) p!)) $o"#'9

• Co$ )l #%)i") ) oli(o p!'o s) o0"i)$) !$# +#s# soli# 0l#$%#i&!#l+)$") s) %o+po'"#$ los #%)i")s ) #l+)$'#s +#$i.

• Co$ los #%)i")s s)+is)%#$")s ) p)s%#o s) o0"i)$) !$# +#s# s)+is3l

• Co$ los #%)i")s s)%#$")s #$ !$ p'o!%"o li*!io #+#'illo1 #$#'#$6#ono contener oleína).

• OLEINA.-S!0s"#$%i# lí*!i#1 #l&o #+#'ill)$"#1 =!) s) ENCUENTRA EN LAS G'#s#s +#$")%#s

metodos de extraccion e identificacion de lipidos

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