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Prof. Dr. Emanuel Carrilho Instituto de Química de São Carlos - USP

Métodos Analíticos em Bioequivalência e Fármacos

Bioequivalência

MEDICAMENTOS GENÉRICOS ⇒Lei 9787 - 10 / 02 / 1999 ⇒Resolução 391 - ANVS/MS - 09 / 08 / 1999

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• Fármacos descritos ou não em compêndios oficiais: informar as empresas fabricantes e a rota de síntese. • Os métodos analíticos: identificar e quantificar os principais contaminantes dos fármacos. • Os excipientes descritos em compêndios oficiais: cita-se a literatura • Os excipientes não descritos em compêndios oficiais: apresentar especificações e métodos de análise adotados

Fármacos e Excipientes

Fármacos e Excipientes

ENSAIOS FARMACOPÉICOS •  Identificação •  Contaminantes ⇒ orgânicos ⇒ inorgânicos •  Atividade óptica

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•  ASPECTOS FARMACOCINÉTICOS

⇒ Efeito versus tempo ⇒ Parâmetros medidos

Bioequivalência

EFEITO x TEMPO David Bourne. - Pharmaceutics III - Pharmacokinetics and

Biopharmaceutics, 1999

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PARÂMETROS MEDIDOS David Bourne. - Pharmaceutics III - Pharmacokinetics and

Biopharmaceutics, 1999

•  ETAPA CLÍNICA •  ETAPA ANALÍTICA •  ETAPA ESTATÍSTICA

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ETAPA CLÍNICA •  voluntários •  saúde •  idade •  peso •  estado enzimático •  boas práticas clínicas •  conselho nacional de bioética •  pesquisador médico

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ETAPA ESTATÍSTICA •  STATISTICA 6.0 for Windows •  GraphPad Prism TM

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Bioequivalência

ETAPA ANALÍTICA •  Pessoal qualificado •  Métodos analíticos •  Equipamentos •  Validação de métodos •  Boas Práticas de Laboratórios de Ensaios

Métodos Analíticos •  Métodos Eletroanalíticos •  Métodos Térmicos •  Métodos Cromatográficos

– Cromatografia em fase gasosa (HRGC ou GC) – Cromatografia em fase líquida (HPLC ou LC) –  Eletroforese Capilar (HPCE ou CE)

•  Métodos Espectroscópicos –  Espectrometria de massas (MS) –  Infravermelho (IR) e ressonância magnética

nuclear (NMR)

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Introdução

Cromatografia Líquida acoplada a Espectrometria de Massas (LC-MS)

Introdução

•  LC provém a separação, em fase líquida, de misturas complexas, porém dificilmente fornece a identificação positiva de componentes individuais.

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Cromatografia Líquida

•  MS é uma técnica que auxilia na elucidação estrutural de compostos (identificação), porém dificilmente é apropriado para a análise de misturas.

Introdução

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Espectrometria de Massas

Misturas em MS

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•  LC opera em fase líquida enquanto que MS opera em fase gasosa, sob alto vácuo.

•  O uso de uma interface é necessário para ter compostos seqüencialmente separados em LC e introduzidos para análise no MS.

Introdução

Combinando LC com MS

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Aquisição dos Dados Elevado número de espectros por pico

Melhorando os Resultados Obter a maior eficiência possível

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Melhorando os Resultados Apresentação de cromatograma de íon selecionado

Melhorando os Resultados Monitoramento de íon selecionado (SIM)

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Aplicações de LC-MS na Análise de Compostos

Farmacêuticos •  LC-MS

– Separação e determinação massa molecular

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Estudo de Metabólicos

Aplicações de LC-MS na Análise de Compostos

Farmacêuticos •  LC-MS

– Separação e determinação massa molecular

•  LC-MS-MS – Separação, MM e informação estrutural

(identidade) – Excelente sensibilidade e quantificação

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Aplicações de LC-MS

•  LC-MS – Separação e determinação massa

molecular •  LC-MS-MS

– Separação, MM e informação estrutural (identidade)

– Excelente sensibilidade e quantificação •  MS de alta resolução

– Identificação positiva de metabólicos

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Sumário

•  O interfaceamento de LC com MS resulta em um poderoso instrumento de LC/MS que pode ser usado para análises de misturas complexas, originada das mais variadas fontes.

•  Aplicações de interesse nas áreas de farmacologia, meio ambiente, arqueologia, médica, e forense, além de química e bioquímica.