M.C. MSc Sandro Casavilca Zambrano.Patólogo y LaboratoristaPatólogo Oncólogo INEN

Docente UNMSM

Investigación Traslacional: Impact of features of brain lesion in prognosis

• La investigación traslacional: traslada descubrimientos de las ciencias básicas dentro de las aplicaciones clínicas, y/o utiliza observaciones clínicas para generar nuevos tópicos

• Se enfoca en la integración de actividades, las cuales son encabezadas por el área de laboratorio

• La investigación traslacional es un área de atención por parte de las agencias de financiamiento “GRANTS”.

• Permite ampliar su base de investigación • Frecuentemente comprende nuevas colaboraciones con colegas

clínicos• Puede comprometer ensayos clínicos o extenderse al uso de muestras

de pacientes o información

INVESTIGACIÓN TRASLACIONAL – UNA PERSPECTIVA DESDE LA CIENCIA BÁSICA

TRASLACIONCONOCIMIENTO

BASADO EN EVIDENCIA

“La trasferencia del conocimientobasado en la evidencia dentro de

rutina o en la practicarepresentativa

SALUDPUBLICA

Y PRACTICACLINICA

Glasgow, R SBM (2005) 26th Annual SBM Meeting, Symposium #22:Disseminating Behavioral Medicine Research: Making the Translational Leap.

DEFINICION:

La anatomía patológica es el estudio de las formas de presentación, causas, mecanismos y efectos de las enfermedades.

Anatomía patológica

La patología permite estudiar un proceso mórbido desde su inicio, sus estadios intermedios y el final de la enfermedad.

Correlaciona con los signos y síntomasConfirma o niega los exámenes auxiliares

¿Por qué un estudio de patología?

“No existe una categoría de la ciencia a la que se puede dar el

nombre de "ciencia aplicada". Hay ciencia y las aplicaciones de la

ciencia, están unidos como el fruto y el árbol del cual proviene.” Louis

Pasteur

“A los considerados debotos de la ciencia, nada puede hacerlos mas felices

que incrementar sus descubrimientos, pero su

felicidad es completa cuando los resultados de sus estudios encuentran una aplicación práctica.”

~Louis Pasteur

Our goal is to turn knowledge into applications that benefit people.

Impact of features of brain lesion in Impact of features of brain lesion in prognosisprognosis

Número de casos: 73Tipo de tinciones: Ki67 Tipo de análisis: Conteo absoluto y porcentual por

algoritmo nuclear

Evaluación de Ki67 En Metástasis Cerebrales

Diseño de TMA

Selección de zonas tumorales en casos

seleccionados

Diseño de TMA

Tinción HETinción Ki67

Adquisición de imágenes digitales

Software cellSens Dimension:

Permite el manejo remoto de la unidad BX63 permitiendo la visualización entiempo real de las muestras en estudio.

Olympus BX63:Microscopio de control automatizado que permite trabajar con observación en campo claro, campo oscuro, contraste de fase, DIC, luz polarizada y fluorescencia.

Adquisición de imágenes digitales

Interfaz del software cellSens Dimension: Muestra de Ki67 en Metástasis cerebral, digitalizada con un objetivo 40X. Tiempo estimado de digitalización de 4 minutos. Formato de imagen VSI, de alta resolución.

Análisis de imágenes digitales

Software Visiopharm Integrator System:

Permite el análisis de imágenes digitalizadas, a través de la generación de aplicaciones configurables para el reconocimiento del marcador en estudio, en base a las características individuales de los pixeles que conforman la imagen.

Análisis de imágenes digitales

Interfaz del software Visiopharm Integrator System: Las imágenes son importadas en formato VSI, previamente adquiridas usando el software cellSens Dimension. Selección de zonas de interés para el entrenamiento de la aplicación.

Análisis de imágenes digitales

Diseño de la aplicación de análisis: La aplicación se entrena seleccionando de manera manual las células consideradas como KI67 positivas (color verde) y Ki67 negativas (color azul).

Análisis de imágenes digitales

Diseño de la aplicación de análisis: La aplicación permite excluir zonas que no deseamos evaluar, en este caso se excluyeron zonas de necrosis.

Análisis de imágenes digitales

Diseño de la aplicación de análisis: Luego de entrenar la aplicación, se modifica la sensibilidad de reconocimiento para mejorar el analisis.

Análisis de imágenes digitales

Diseño de la aplicación de análisis: La aplicación de análisis, nos permite evaluar zonas predeterminadas por el usuario, y nos proporciona un conteo tanto de células positivas como células negativas, incluso se puede configurar la forma en como se expresan estos resultados.

Algoritmo para tinción nuclear

Ki67: 67.09%

5 zonas de trabajo

6mm de diámetro

Se evaluó Ki67 en un total de 73 casos. La calidad de la tinción ki67 permitió análisis digitales bajo supervisión

de 2 patólogos en 62 casos y evaluó de 2660 a 11960 células (medio 5104).

El índice de proliferación de Ki67 promedio en toda la cohorte BM fue del 44% (rango 5-90%), y el recuento de linfocitos mediano fue 4 (rango 0-21) (Figura 1).

Resultados

La edad mediana al primer diagnóstico de BM fue de 52 años (rango 11-75). El tumor primario más frecuente fue cáncer de mama (31%) y cáncer de pulmón (18,6%).

El 33,6% de los casos tuvieron el BM en el debut y el 39,3% de los casos tenían lesiones activas fuera del cerebro en el momento del diagnóstico

Un índice más alto de GPA (p = 0,155) y ki67≥50% (p = 0,062) tiene una tendencia a una supervivencia más corta. El recuento de linfocitos (p = 0,488) no estuvo asociado con la supervivencia. La adición de ki67 a GPA se asoció a mejores resultados (p = 0,001).Conclusión. La adición del Ki67 de la BM a GPA incrementa el valor pronóstico. Se necesitan más estudios para probar esta hipótesis

ResultadosResultados

• Muchas maneras de hacerlo; diferentes puntos de vista generan diferentes ideas

• Si eres un investigador joven, pon mucho énfasis en como hacer las cosas, considera los resultados y riesgos posibles

• No construyas un castillo de naipes, es decir la totalidad de un proyecto, o la mayor parte de este, se basa en un reactivo que actualmente no existe

• Regresar a consultar los resultados preliminares

Diseño Experimental

La traducción de los resultados de investigaciones basadas en la evidencia a la práctica

Los resultados no se han aplicado en la práctica en escenarios generalizados

Puede tardar 10 -20 años de investigaciones originales para traducir a la práctica médica de rutina

MEDICINA TRASLACIONAL

Investigación básica Métodos de desarrollo

◦ Desarrollo de estudios pilotosEstudios de eficacia

◦ Evaluaciones del estado de salud o el cambio de comportamiento bajo condiciones científicas

Ensayos de efectividad◦ Evaluaciones en condiciones reales o habituales

Ensayos de difusión ◦ Examinar y evaluar las condiciones que promueven o

impiden el uso generalizado

Modelo de 5 Fases

La investigación básica El desarrollo de hipótesis Investigación aplicada, Pilotos Estudios de evaluación del prototipo Los estudios de eficacia Ensayos de efectividad de Tratamiento Ensayos de efectividad de Implementación Evaluaciones de demostración

Modelo de 8 fases

Modelo Traslacional

Modelo de 5 fases Modelo de 8 fases

Instituto Nacional de

Salud, tipo 1 y tipo 2

1.Investigacion básica 1. La investigación básica2. El desarrollo de hipótesis

TIPO 12. Métodos de desarrollo 3. Investigación aplicada4. Estudios de evaluación del prototipo

3. Ensayos de eficacia 5. Los estudios de eficacia

4. Ensayos de efectividad

6. Ensayos de efectividad de Tratamiento.7. Ensayos de efectividad de Implementación TIPO 2

5. Diseminación 8. Evaluaciones de demostración

Modelos Fase asumen progresión lineal desde la investigación básica a la aplicación clínica Cada una de las cinco fases podría trabajar en un circuito

de retroalimentación Ejemplo: Fase 2 podría estar relacionada con la difusión (fase 5),

que podría retroalimentar a otros métodos de desarrollo (Fase 2)

Modelo de 5 fases

◦ La investigación básica no es clínicamente relevante (Generada por su interes particular)

◦ Las guías de práctica clínica en la literatura son insuficientes para la traducción◦ Las comparaciones entre programas son obstaculizados por la competencia y

conflicto de intereses◦ Percepción de que la traducción será larga y costosa◦ Tiempo necesario para la formación de investigadores para comunicar y

compartir a través de campos◦ La resistencia de los profesionales para introducir una innovación◦ Los investigadores no interpretan los resultados para que puedan difundirse

fácilmente

7 Barreras comunes para la Traslación

Otros puntos obtenidos por la

ciencia

• Encuentre un grupo de afinidad, realice reuniones conjuntas en el laboratorio

• Infórmese acerca de los recursos disponibles; instalaciones básicas, otras facultades

• Usted tiene que escribir rápidamente, no deje que las cosas se alarguen, no espere al articulo perfecto

• Asista a reuniones, manténgase en contacto con los demás

La traducción de la investigación a la práctica que promueve la mejora en los resultados de salud, continúa siendo un obstáculo para la mejora de la calidad de la asistencia sanitaria Se necesitan negociaciones y colaboraciones

entre la investigación y la práctica.

Conclusiones

Gracias