ESTABILIDADE DE ENZIMAS

Estabilidade Enzimtica X Atividade EnzimticaAtividade Enzimtica: dada pela medio da velocidade inicial da reao sob uma faixa de condies determinadas. Estabilidade Enzimtica: Capacidade das enzimas de reter sua capacidade cataltica sob diferentes condies de reao ao longo do tempo funo biolgica das enzimas esta intimamente associada sua estrutura tridimensional.

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Atividade Enzimtica

Velocidade inicial da reao determinada pela faixa linear da formao de produto.

Estabilidade das Enzimas

Desnaturado

Nativo

Estado termodinamicamente mais estvel em condies fisiolgicas Os estados de equilbrio da desnaturao das protenas consistem na alterao das propriedades fsico qumicas da soluo de modo a deslocar o equilbrio valor da constante de equilbrio.

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Fatores que Influenciam a Estabilidade Temperatura pH Fora inica Presena de agentes desnaturantes Atividade da gua Presso

Efeito da TemperaturaDesnaturao por desdobramento da Molcula- liberdade conformacional aumenta a elevadas temperaturas reversvel na zona de transio

Desnaturado

Nativo

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Efeito do pH Normalmente valores extremos de pH induzem a desnaturao (muito ou muito ). Alterao da carga dos aminocidos da molcula (anula interaes eletrostticas- promove repulses)- 7 dos 20 aas das protenas alteram sua carga com variao do pH Afeta a estrutura da molcula.

Efeito do pHDesnaturao cida (pH )desaparecimento das cargas negativas (grupos COOH das Asp e Glu). desaparecimento das carga positivas- acmulo negativas grupos COOH e nas tirosinas e cistenas.

Desnaturao alcalina (pH ):

Estrutura interna de uma protenairreversvel aumenta reatividade

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Efeito do pH

Agentes DesnaturantesSubstncias que causam a desnaturao das enzimas- aumentam solubilidade cadeias laterais da protena (hidrfobas e polipeptdica) Na maioria das vezes reversvel (100%). Utilizados p/ caracterizao termodinmica da desnaturao. Ex: cloreto de guanidina e uria

Atividade da guaO nvel e distribuio de gua residual afeta a eficincia cataltica. Falta de gua torna a molcula mais rgida e excesso de gua diminu estabilidade enzimtica (aw