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  • MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA

    LA INVESTIGACIN DE BROTES DE

    INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

    PRODUCIDAS POR BACTERIAS

    MEDIANTE MTODOS DE

    BIOLOGA MOLECULAR

    Serie de Normas

    Tcnicas N 35

    Lima - 2002

    CYAN MAGENTA AMARILLO NEGRO

    CYAN MAGENTA AMARILLO NEGRO

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    35

  • MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA

    LA INVESTIGACIN DE BROTES DE

    INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

    PRODUCIDAS POR BACTERIAS

    MEDIANTE MTODOS DE

    BIOLOGA MOLECULAR

    Serie de Normas

    Tcnicas N 35

    Lima - 2002

  • MPR-CNSP-011 Instituto Nacional de Salud

    Portada: Frontis del local central del Instituto Nacional de Salud.

    MINISTERIO DE SALUDMinistro

    Dr. Fernando Carbone Campoverde

    Vice-MinistroDr. Oscar Ugarte Ubillz

    INSTITUTO NACIONAL DE SALUDJefe

    Dr. Luis Fernando Llanos Zavalaga

    Sub-JefeDra. Ada Cecilia Palacios Ramrez

    Centro Nacional de Salud PblicaDra. Susana Zurita Macalup

    Directora General

    Centro Nacional de Alimentaciny Nutricin

    Dr. Napolen Chvez CampoverdeDirector General

    Centro Nacional de Control de CalidadDra. Rosa Guevara Ormeo

    Directora General

    Centro Nacional de Produccin de BiolgicosQ. F. Ricardo Valera Snchez

    Director General

    Sub-Comit EditorInstituto Nacional de Salud

    Presidente

    Dra. Ada Palacios Ramrez

    Secretario Tcnico

    Dr. Csar Cabezas Snchez

    Miembros

    Dr. Jorge Alarcn VillaverdeQ.F. Zulema Arvalo Chong

    Dr. Jorge Barnaby RodrguezDr. Zuo Burstein Alva

    Lic. Ivn Gmez-Snchez PrietoDra. Ivonne Guerrero Alva

    Dr. Alfredo Guilln OneeglioDr. Csar Nquira VelardeDr. Enrique Prez Ramos

    Lic. Margarita Rodrguez GutarraDr. Vctor Surez Moreno

    Editor

    Dr. Leonid Lecca Garca

  • I Instituto Nacional de Salud

    Manual de procedimientos para la investigacin de brotes de infecciones intrahospitalarias producidas por bacterias mediante mtodos de biologa molecular

    MPR-CNSP-011

    MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA LA INVESTIGACIN DEBROTES DE INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

    PRODUCIDAS POR BACTERIAS MEDIANTE MTODOS DEBIOLOGA MOLECULAR

    ELABORACIN:

    Rger Ivn Caldern Espinoza

    Bilogo

    Divisin de Biologa Molecular

    Centro Nacional de Salud Pblica

    Instituto Nacional de Salud

    Martn Javier Alfredo Yagui Moscoso

    Mdico - Patlogo Clnico

    Proyecto VIGIA

    Ministerio de Salud

  • II

    Manual de procedimientos para la investigacin de brotes de infecciones intrahospitalarias producidas por bacterias mediante mtodos de biologa molecular

    Instituto Nacional de SaludMPR-CNSP-011

    Catalogacin hecha por el Centro de Documentacin e Informacin del INS

    Colaboradores:

    Eduardo Ayala SulcaBilogoLaboratorio de ZoonosisDivisin de ParasitologaCentro Nacional de Salud PblicaInstituto Nacional de Salud

    Rosalina Reyes BocanegraTecnlogo MedicoLaboratorio de ZoonosisDivisin de ParasitologaCentro Nacional de Salud PblicaInstituto Nacional de Salud

    Sonia Medina AlvarezTcnico de LaboratorioLaboratorio de ZoonosisDivisin de ParasitologaCentro Nacional de Salud PblicaInstituto Nacional de Salud

    ISBN 9972 - 857 - 26 - 3 (O.C.)ISSN 9972 - 857 - 28 - X (N 35)ISSN 1607 - 4904Hecho el Depsito Legal N 1501012002-3960

    Ministerio de Salud, 2002Av. Salaverry cuadra 8 s/n, Jess Mara, Lima, PerTelf.: 431-0410

    Instituto Nacional de Salud, 2002Cpac Yupanqui 1400, Jess Mara, Lima, PerTelf.: 471-9920 Fax 471-0179e-mail: postmaster@ins.sld.pePgina Web: www.ins.sld.pe

    Publicacin aprobada con R.J. N 323-2002-J-OPD/INS

    Se autoriza su reproduccin total o parcial siempre y cuando se cite la fuente.

    Revisores:

    Jazmina BeraunTecnlogo MdicoHospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen-EsSalud

    Patricia Caballero opoMdico InfectlogoInstituto Nacional de Salud

    Alfredo Guilln OneeglioMdico MicrobilogoClnica San Borja

    Luis Fernando Llanos ZavalagaMdico, MSc (Econ)Instituto Nacional De Salud

    Ysabel Montoya PiedraDoctor en Biologa MolecularCentro Nacional de Salud Pblica

    Cecilia Morn CortijoMdico PatlogoInstituto Nacional de Salud

    Rafael RamrezMdicoHospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen-EsSalud

    Javier Soto PastranaTecnlogo MdicoHospital Nacional Docente Madre Nio San Bartolom

    Vctor Surez MorenoMdico InfectlogoInstituto Nacional de Salud

    Augusto Valencia RamrezMdico Patlogo - ClnicoHospital Nacional Docente Madre Nio San Bartolom

    Rito ZerpaMdico MicrobilogoInstituto de Salud del Nio

    Caldern Espinoza, Roger Ivn ; Yagui Moscoso, Martn Javier AlfredoManual de procedimientos para la investigacin de brotes de infecciones

    intrahospitalarias producidas por bacterias mediante mtodos de biologa molecular /Elaborado por Roger Ivn Caldern Espinoza y Martn Javier Alfredo Yagui Moscoso. -Lima : Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2002.

    29 p. : 30 cm. - (Serie de Normas Tcnicas; 35)

    1. INFECCION HOSPITALARIA /diagnstico 2.INFECCIONES BACTERIANAS3. BIOLOGIA MOLECULAR/mtodosI. Caldern Espinoza, Roger IvnII. Yagui Moscoso, Martn Javier AlfredoIII. Instituto Nacional de Salud (Per)IV. Per. Ministerio de Salud

  • III Instituto Nacional de Salud

    Manual de procedimientos para la investigacin de brotes de infecciones intrahospitalarias producidas por bacterias mediante mtodos de biologa molecular

    MPR-CNSP-011

    CONTENIDO

    INTRODUCCIN V

    SECCIN 1: GENERALIDADES 11.1 Objetivos 11.2 Campo de aplicacin 11.3 Responsabilidades 11.3.1 Responsabilidades del equipo hospitalario 11.3.2 Responsabilidades del Instituto Nacional de Salud 11.4 Documentos de referencia 21.5 Definiciones 21.5.1 Infeccin intrahospitalaria 21.5.2 Brote 2

    SECCIN 2: MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD 42.1 Disposiciones 4

    SECCIN 3: OBTENCIN DE MUESTRAS 4

    SECCIN 4: CONSERVACIN, EMBALAJE, TRANSPORTE Y REMISIN DE CEPAS 54.1 Conservacin de cepas 54.1.1 Conservacin por perodos cortos 54.1.2 Conservacin por perodos prolongados 54.1.3 Recuperacin de cultivos conservados 54.2 Embalaje 64.3 Transporte y remisin de cepas 6

    SECCIN 5: ENSAYO O ANLISIS EN LABORATORIO 75.1 Anlisis plasmdico 75.2 Analisis de diversidad clonal 85.2.1 Ribotipificacin 85.2.2 Reaccin en cadena de la polimerasa 105.2.3 Electroferesis en gel de campo pulsado 115.2.4 Anlisis de los perfiles generados por mtodos de diversidad clonal 115.3 Procedimientos 125.3.1 Anlisis plasmdico 125.3.2 Ribotipificacin 145.3.3 PCR 19

    SECCIN 6: DIAGNSTICO 206.1 Condiciones previas 206.2 Confirmacin de la identificacin bacteriana 216.3 Confirmacin por biologa molecular 216.4 Anlisis de la informacin 22

  • IV

    Manual de procedimientos para la investigacin de brotes de infecciones intrahospitalarias producidas por bacterias mediante mtodos de biologa molecular

    Instituto Nacional de SaludMPR-CNSP-011

    BIBLIOGRAFA 23

    ANEXOS

    ANEXO A: FLUJOGRAMA DE INVESTIGACIN DE BROTES DE IIH 25ANEXO B: DIAGRAMA DE TRABAJO PARA LA CONFIRMACIN DE BROTES DE IIH 26ANEXO C: FORMULARIO PARA EL ENVO DE CEPAS PARA LA CONFIRMACIN DE BROTES DE

    IIH POR BIOLOGA MOLECULAR 27ANEXO D: RESUMEN DE LA INVESTIGACIN EPIDEMIOLGICA DEL BROTE DE IIH 28

  • V Instituto Nacional de Salud

    Manual de procedimientos para la investigacin de brotes de infecciones intrahospitalarias producidas por bacterias mediante mtodos de biologa molecular

    MPR-CNSP-011

    INTRODUCCIN

    Las infecciones intrahospitalarias (IIH) han sido reconocidas en los ltimos aos como un problema de salud pblica,tanto por su impacto en la morbilidad como en la mortalidad hospitalaria. Por otro lado, es reconocida como un buenindicador para medir la calidad de atencin en los hospitales.

    A finales de 1998, el Ministerio de Salud inici los esfuerzos para promover en forma sistemtica la vigilancia,prevencin y control de las IIH con la finalidad de mejorar la calidad de atencin y por consiguiente disminuir lamorbilidad, mortalidad y costos hospitalarios.

    Actualmente ms de 40 hospitales a nivel nacional cuentan con un sistema de vigilancia epidemiolgica de las IIH,esto ha motivado la deteccin cada vez ms frecuente de brotes intrahospitalarios. Sin embargo, el nivel deidentificacin se limita en el nivel hospitalario hasta la determinacin del germen y su patrn de susceptibilidad a losantimicrobianos.

    Estudios de la dinmica de la transmisin intrahospitalaria revelan los factores que contribuyen a la infeccin con elfin de aportar en el desarrollo de medidas preventivas ms eficientes. La deteccin, biodiversidad y grados deadaptacin son ahora las variables que pueden ser analizadas gracias al uso de las tcnicas y criterios de labiologa molecular, que ayudarn al Instituto Nacional de Salud y a los establecimientos de salud a contribuir con lavigilancia, prevencin y control de las distintas infecciones.

    Los mtodos convencionales de caracterizacin bacteriana, no ofrecen suficiente informacin sobre el origen y/olas distintas vas de transmisin de microorganismos patognicos entre los pacientes internados en los hospitales.Sin embargo, con el aporte adicional de las tcnicas moleculares, y la informacin cl