manual de practicas de biologia celular-libre

UNIVERSIDAD AUTNOMA DE NUEVO LEN FACULTAD DE MEDICINA VETERIANRIA Y ZOOTECNIA

2012

DRA. SIBILINA CEDILLO ROSALES

Escobedo, N.L., junio de 2012

MANUAL DE PRCTICAS DE BIOLOGA CELULAR


UANL, FMVZ

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MANUAL DE PRCTICAS DE UA BIOLOGA

CELULAR

Escobedo, Nuevo Len. Junio del 2012.

No. de hojas tiles incluyendo portada y anexos 104.

Revis

Dr. Ramiro valos Ramrez Lder del CA Epidemiologa Veterinaria

Mc. Alicia Nevares Coordinadora del Academia del ACFB

Aprobacin

Dr. Juan Jos Zarate Ramos Presidente. Consejo Tcnico FMVZ

Elaboracin

Dra. Sibilina Cedillo Rosales Responsable de la UA

Dra. Alicia Marroqun Cardona

Dr. Ramiro valos Ramrez

Fecha de Elaboracin y Versin

Primera versin-agosto de 2004 Segunda versin-agosto del 2009 Tercera versin-junio del 2012


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DIRECTORIO

Dr. Jess Ancer Rodrguez Rector

Ing. Rogelio G. Garza Rivera Secretaria General

Dr. Ubaldo Ortiz Mndez Secretario Acadmico

Dr. Juan Jos Zarate Ramos Director de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Dr. Ramiro valos Ramrez Lder del CA Epidemiologa Veterinaria

Dra. Sibilina Cedillo Rosales RESPONSABLE DE LA UNIDAD DE APRENDIZAJE


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Contenido DIRECTORIO ............................................................................................................................ iv MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Y EN CAMPO ................................ iv COMPETENCIA GENERAL DEL SISTEMA DE PRCTICAS ...........................................vii CONTENIDO DEL SISTEMA DE PRCTICAS ....................................................................vii PRACTICA NO. 1 INTEGRACIN DE UN LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR

(LBC) ................................................................................................................. 10 INTRODUCCIN ............................................................................................................. 10 COMPETENCIAS DE LA PRCTICA ........................................................................... 10 PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD .......................................................................... 11 DESARROLLO DE LA PRCTICA ............................................................................... 13 SISTEMA DE EVALUACIN......................................................................................... 14 HOJAS DE TRABAJO ..................................................................................................... 16 FUENTES DE INFORMACIN ...................................................................................... 20

PRACTICA NO. 2 EL MICROSCOPIO, HERRAMIENTA EN BIOLOGA CELULAR . 22 INTRODUCCIN ............................................................................................................. 22 COMPETENCIAS DE LA PRCTICA ........................................................................... 22 PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD .......................................................................... 23 DESARROLLO DE LA PRCTICA ............................................................................... 25 SISTEMA DE EVALUACIN......................................................................................... 28 HOJAS DE TRABAJO ..................................................................................................... 30 FUENTES DE INFORMACIN ...................................................................................... 32

PRCTICA NO. 3 VIRUS, PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS ......................................... 34 INTRODUCCIN ............................................................................................................. 34 COMPETENCIAS DE LA PRCTICA ........................................................................... 34 PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD .......................................................................... 35 DESARROLLO DE LA PRCTICA ............................................................................... 37 SISTEMA DE EVALUACIN......................................................................................... 39 HOJAS DE TRABAJO ..................................................................................................... 41 FUENTES DE INFORMACIN ...................................................................................... 45

PRCTICA NO. 4 TRANSPORTE DE MEMBRANA (SMOSIS) ................................... 47 INTRODUCCIN ............................................................................................................. 47 COMPETENCIAS DE LA PRCTICA ........................................................................... 47 PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD .......................................................................... 48


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DESARROLLO DE LA PRCTICA ............................................................................... 50 SISTEMA DE EVALUACIN......................................................................................... 53 HOJAS DE TRABAJO ..................................................................................................... 54 FUENTES DE INFORMACIN ...................................................................................... 56

PRACTICA NO. 5 ORGANELOS DE LA CLULA VEGETAL (PLSTIDOS) ............... 58 INTRODUCCIN ............................................................................................................. 58 COMPETENCIAS DE LA PRCTICA ........................................................................... 58 PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD .......................................................................... 59 DESARROLLO DE LA PRCTICA ............................................................................... 61 SISTEMA DE EVALUACIN......................................................................................... 63 HOJAS DE TRABAJO ..................................................................................................... 65 FUENTES DE INFORMACIN ...................................................................................... 69

PRCTICA NO. 6 NCLEO (ENVOLTURA NUCLEAR, CROMATINA) EN MITOSIS .. ................................................................................................................ 71 INTRODUCCIN ............................................................................................................. 71 COMPETENCIAS ............................................................................................................ 71 PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD .......................................................................... 72 DESARROLLO DE LA PRCTICA ............................................................................... 74 SISTEMA DE EVALUACIN......................................................................................... 75 HOJAS DE TRABAJO ..................................................................................................... 76 FUENTES DE INFORMACIN ...................................................................................... 78

PRCTICA NO. 7 DISGREGACIN CELULAR POR MTODOS QUMICOS .............. 80 INTRODUCCIN ............................................................................................................. 80 COMPETENCIAS ............................................................................................................ 80 PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD .......................................................................... 81 DESARROLLO DE LA PRCTICA ............................................................................... 83 SISTEMA DE EVALUACIN......................................................................................... 85 HOJAS DE TRABAJO ..................................................................................................... 86 FUENTES DE INFORMACIN ...................................................................................... 88

Anexos ................................................................................................................................ 89 ANEXO A.1 TINCIN RPIDA DE HEMATOCRITO (CLULAS EUCARIOTAS

(SANGRE)) ...................................................................................................................... 90 Anexo A.2 TINCIN DE GRAM PARA PROCARITOAS (BACTERIAS) PRESENTES EN

MUCOSAS DE ANIMALES ............................................................................................. 92


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ANEXO A.3 FORMATO DEL REPORTE DE PRCTICAS. ............................................ 93 GLOSARIO ................................................................................................................................ 95 BIBLIOGRAFA ...................................................................................................................... 105


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MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Y EN CAMPO 1. Antes de realizar cada prctica lee cuidadosamente el protocolo para familiarizarte

con el trabajo a desarrollar. Al conocer el protocolo disminuyes la posibilidad de que ocurran accidentes y adems puedes aprovechar el tiempo de manera ms eficaz.

2. En el laboratorio est prohibido comer, beber y fumar.

3. En el laboratorio y en campo debes llevar en todo momento el equipo de proteccin personal necesario. Esto garantiza que cualquier accidente que pueda ocurrir, sea de menor gravedad. De no acatar la regla no se permitir acceso a la prctica.

4. Al lugar de trabajo slo debes llevar aquellos materiales estrictamente necesarios para la actividad que vas a desarrollar.

5. En el laboratorio comienza cada jornada limpiando tu rea de trabajo. Repite este procedimiento despus de que hayas terminado, asegurndote que el material de desecho sea depositado en el lugar que corresponde y lo reutilizable sea lavado y desinfectado.

6. El material necesario para el desarrollo de la prctica ser entregado solo mediante un vale.

7. La indisciplina dentro del laboratorio o en campo ser sancionada con la anulacin de la prctica o expulsin parcial o total del alumno, segn el caso lo requiera.

8. S muy cuidadoso con todo el material, y equipo que utilices para evitar accidentes y deterioro del mismo en laboratorio y en campo.

9. Si trabajas con sustancias, nunca las inhales o uses la pipeta con la boca. 10. Si utilizas jeringas no las vuelvas a tapar, deschalas tal cual en el recipiente

adecuado.

11. En caso de romper material de laboratorio o descomponer algn equipo por el mal uso de ste, el responsable cubrir el costo que se genere en un lapso no mayor a 30 das hbiles.

12. Para las salidas a campo el alumno deber firmar un oficio donde se responsabiliza de su persona, en caso de no obedecer las normas establecidas durante la prctica cualquier accidente ser su responsabilidad.

13. Tras la sesin de trabajo, lvate las manos antes de hacer cualquier otra actividad para mantener unas buenas condiciones higinicas.


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14. En caso de accidente o lesin, avisa inmediatamente al profesor o responsable de la prctica en laboratorio o en campo para que pueda realizarse una accin rpida y apropiada.

15. Despus de cada prctica, el alumno deber entregar un reporte de la misma, con las caractersticas descritas en el anexo No. 1.


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COMPETENCIA GENERAL DEL SISTEMA DE PRCTICAS

Adquirir y construir los conocimientos prcticos de Biologa Celular, desarrollando trabajo en equipo, relacionado con representacin grfica de las observaciones y anlisis de resultados. Lo anterior bajo el cumplimiento del reglamento interno y de las normas de seguridad y bioseguridad necesarias en el laboratorio y en campo, para garantizar el funcionamiento y uso adecuado del material e instalaciones. Mismas que ir conociendo y aplicando ante su prctica y entorno inmediato.


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CONTENIDO DEL SISTEMA DE PRCTICAS

Comp. veterinaria

Comp. profesional

Comp. laboral

Unidad de comp. Destreza Actitudes Contenidos

Salud animal

Biologa Celular

Auxiliar en laboratorio de Biologa Celular NIVEL II

Identificar y reconocer la funcionalidad de un laboratorio de Biologa Celular (LBC), los equipos empleados, sus usos y aplicaciones.

Definir la funcin y emplear los equipos usados en el LBC, centrfuga, microscopio, balanzas, instrumental etc. Aprender sobre el manejo adecuado y disposicin de los residuos generados en el LBC.

Atencin y disponibilidad para escuchar la explicacin de los equipos y funcionamiento de estos en el LBC. Inters en conocer las aplicaciones en Medicina Veterinaria del LBC.

Funcionamiento del LBC. Equipos con los que debe contar un LBC: nombres y aplicaciones de stos. Materiales de cristalera empleados en el LBC: nombres y usos de estos. Manejo y disposicin de materiales biolgico infecciosos y txicos.

Biologa celular

Tcnico auxiliar en preparacin de frotis para observacin en microscopio NIVEL II

Emplear las tcnicas para preparacin de frotis sanguneos, bacterianos y de otras muestras para observacin microscpica

Nombrar y definir los componentes de un microscopio ptico. Dominar el manejo de un microscopio ptico. Conocer y emplear los tipos de tinciones empleados para diferentes frotis. Reconocer y disponer adecuadamente los desechos biolgicos infecciosos.

Analtico para interpretar parcialmente lo observado en frotis. Honesto al reportar las variaciones o dificultades al realizar los procesos. Concentracin para elegir el tipo de tincin de acuerdo al tipo de muestra. Sistemtico para realizar los procesos adecuadamente.

Estructura celular. Caractersticas y funciones de la clula. Organismos presentes en diferentes muestras. Estructura viral y bacteriana. Manejo de muestras biolgico infecciosas. (sangre/ bacterias etc.)

Identificar y reconocer diferentes morfologas celulares.

Reconocer estructuras bacterianas. Reconocer y diferenciar entre clulas procariotas y eucariotas. Analizar y nombrar diferencias entre clulas vegetales y animales. Manejar el microscopio ptico.

Honesto al reportar los sucesos que se presentan durante el desarrollo de actividades. Concentracin y anlisis para identificar el tipo celular que se est observando. Sistemtico para realizar el trabajo ordenadamente y sujetndose a protocolos.

Estructura celular. Estructura y diferencias entre clulas procariotas y eucariotas. Estructura y funcin de clulas vegetales y animales. Manejo de microscopio ptico. Manejo y disposicin de biolgico infecciosos.


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Biologa celular


Preparacin de soluciones con diferente concentracin o molaridad Emplear las tcnicas para preparacin de frotis sanguneos y de otras muestras para observacin microscpica.

Dominar la preparacin de soluciones en diferentes concentraciones y molaridades Observar procesos biolgicos como la osmosis y su efecto en clulas sanguneas y en clulas vegetales. Relacional la teora adquirida en clase y los fenmenos observados en la prctica. Reconocer y disponer adecuadamente los desechos biolgicos infecciosos.

Analtico para interpretar parcialmente lo observado en la preparacin biolgica. Honesto al reportar las variaciones o dificultades al realizar los procesos. Concentracin para observar los fenmenos dinmicos ocurridos en las muestras. Sistemtico para realizar los procesos adecuadamente.

Estructura celular. Caractersticas y funciones de la clula. Membrana celular y propiedades de esta. Manejo de muestras biolgico infecciosas. (sangre)

Biologa celular


Emplear las tcnicas para preparacin de frotis a partir de clulas vegetales y el empleo te tinciones en este tipo de clula.

Reconocer clulas vegetales, Reconocer diferentes partes de una planta Reconocer en las clulas del meristemo de la raz con una tincin especial las diferentes fases de la divisin celular Analizar y nombrar diferentes fases de la divisin celular en clulas vegetales Manejar el microscopio ptico.

Analtico para interpretar parcialmente lo observado en el preparado. Honesto al reportar las variaciones o dificultades al realizar los procesos. Concentracin para elegir el tipo de tincin de acuerdo al tipo de muestra. Sistemtico para realizar los procesos adecuadamente.

Estructura celular. Estructura de una planta. Caractersticas y funciones de la clula vegetal. Divisin celular en clulas vegetales. Manejo adecuado de muestras y reactivos de laboratorio

Biologa celular


Emplear las tcnicas para preparacin de frotis a partir de diferentes planta s, frutos, tubrculos y semillas, as como el empleo de tinciones de estos.

Nombrar y definir algunos organelos de las clulas vegetales. Dominar el manejo de un microscopio ptico. Conocer y emplear los tipos de tinciones empleados para diferentes frotis. Reconocer y disponer adecuadamente los desechos biolgicos.

Analtico para interpretar parcialmente lo observado en frotis. Honesto al reportar las variaciones o dificultades al realizar los procesos. Concentracin para elegir el tipo de tincin de acuerdo al tipo de muestra. Sistemtico para realizar los procesos adecuadamente.

Estructura celular. Caractersticas y funciones de la clula vegetal. Organelos celulares y sus funciones. Manejo de muestras biolgico .

Biologa celular

Tcnico auxiliar en preparacin y manejo de cultivos celulares NIVEL II

Emplear las tcnicas de mantenimiento de cultivo celular.

Manejar las tcnicas de mantenimiento de cultivos celulares.

Metdico para desarrollar el protocolo de prctica adecuadamente. Habilidad manual para el manejo de los equipos y materiales y correcto mantenimiento del cultivo.

Definicin de cultivos celulares y mantenimiento de stos. Materiales y equipos empleados para el mantenimiento de cultivos celulares Medios de cultivo. Tipos de clulas disponibles para cultivos celulares. Aplicacin del empleo de cultivos celulares.


Prctica No. 1. Elementos y Funcin de un LCB

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PRCTICA NO. 1

ELEMENTOS Y FUNCIN DE UN

LABORATORIO DE BIOLOGA

CELULAR

MANUAL DE PRCTICAS DE BIOLOGA CELULAR Prctica No. 1. Elementos y Funcin de un LCB

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PRACTICA NO. 1 INTEGRACIN DE UN LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR (LBC)

No. Alumnos: Equipo de trabajo de 15-20 alumnos Duracin: 1 hora

INTRODUCCIN Dentro de la amplia gama de reas de estudio que se involucran directamente en la carrera de Mdico Veterinario, se encuentra la Biologa. Particularmente, es de gran importancia la Biologa Celular, que es una ciencia encargada del estudio de los procesos y funciones que desarrolla una clula, los componentes de sta, sus productos y las interacciones que esta realiza con en su contexto social con otras clulas y con el medio ambiente. A s mismo, dentro de su campo de aplicacin, se incluyen el estudio de macromolculas biolgicas adems de la estructura y mantenimiento celular.

Gran parte del conocimiento generado durante la ltima dcada acerca de fenmenos celulares, tales como apoptosis y cncer, entre otros; se ha originado bajo condiciones controladas en los laboratorios donde se aplican los estudios de biologa celular, por lo cual es de importancia conocer la organizacin de esta rea y sus funciones.

COMPETENCIAS DE LA PRCTICA Describir las acciones que se desarrollan en un laboratorio de Biologa Celular conociendo los equipos y materiales que se utilizan aqu para entender los tipos de investigaciones que se pueden desarrollar en estos, mediante la visita de laboratorios que cuentan con el equipo y la investigacin en diferentes fuentes bibliogrficas.

Sers competente cuando:

Identifiques y definas cada uno de los materiales y equipo empleados en el LBC. Menciones al menos 5 funciones que desempea un LBC. Portes la vestimenta acorde a lo especificado para trabajar en un LBC. Te comportes adecuadamente ante las situaciones de tu entorno de prctica apegndote al protocolo de sta y no provoques ningn incidente negativo.


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PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD

a) Responsabilidades Antes de la prctica: hacer la investigacin bibliogrfica respecto a lo sealado dentro del desarrollo de la misma.

Durante la prctica: atender a las instrucciones y explicacin por parte del profesor y/o personal del departamento sobre las reas del laboratorio, sus funciones y las condiciones para trabajar dentro del laboratorio. Tomar notas importantes durante el desarrollo de la prctica.

Despus de la prctica: establecer los resultados, conclusiones y discusin de la misma y elaborar el reporte correspondiente.

b) Equipo de proteccin personal Equipo Cantidad Descripcin

Bata blanca 1 Hasta la rodilla, manga larga, con botones y bolsas.

Zapatos 1 par Cerrados (estrictamente prohibido huaraches y sandalias)

Riesgo Causa

Golpes. Con objetos, ocasionados por falta de precaucin o por indisciplina.

d) Acciones preventivas Usar el equipo de proteccin personal. Trabajar apegado al protocolo de la prctica. No usar equipo en el que no se haya tenido entrenamiento previo o del cual se tengan dudas. Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio. Avisar al responsable de la prctica de cualquier accidente por insignificante que parezca.

c) Cuadro de deteccin de riesgos


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e) Acciones de contencin Toda persona que sufra algn accidente cuando se encuentre realizando alguna prctica dentro de laboratorio, ser remitida al Centro Mdico de Ciudad Universitario en San Nicols o a Servicios mdicos del H. Universitario. Es importante considerar que se solicitar informacin acerca de las vacunas recibidas por el afectado, ya que en los casos de cortaduras es indispensable haber recibido la vacuna antitetnica. Por otra parte, se emiten las siguientes recomendaciones para las situaciones que no requieran atencin mdica y las cuales en caso de urgencias pueden ser consultadas en el Manual de Primeros Auxilios:

Accidente por cortaduras: Detener el sangrado y hacer una curacin. Irritacin de mucosas: Lavar con agua corriente la zona afectada. Alergias: Trasladar inmediatamente a un centro mdico. Descargas elctricas: Cortar la energa elctrica y trasladar a un hospital. Golpes: Valorar la gravedad y evaluar si es necesario trasladar o no al Centro Mdico.

En caso de dudas, consultar el Manual de Primeros Auxilios

f) Cuadro de disposicin de desechos Desechos o residuos Disposicin

Material producto de registro de notas Deposito para basura comn

g) Normas especficas NOM-017-STPS-2008, EQUIPO DE PROTECCIN PERSONAL-SELECCIN, USO Y

MANEJO EN LOS CENTROS DE TRABAJO. NOM-113-STPS-2009, SEGURIDAD-EQUIPO DE PROTECCIN PERSONAL-CALZADO DE

PROTECCIN-CLASIFICACIN, ESPECIFICACIONES Y MTODOS DE PRUEBA. NOM-029-ZOO-1995, CARACTERSTICAS Y ESPECIFICACIONES PARA LAS

INSTALACIONES Y EQUIPO DE LABORATORIOS DE PRUEBAS Y/O ANLISIS EN MATERIA ZOOSANITARIA.


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DESARROLLO DE LA PRCTICA Instalaciones, Equipo y Materiales

Cantidad Material 1 c/p * Indumentaria apropiada (Ver seccin sobre equipo de proteccin personal en los

procedimientos de seguridad) 1 c/p Equipo de computo con acceso internet (personal o de la FMVZ) 1 c/p Cuaderno de trabajo y lpiz o pluma para anotaciones 1 Departamento de Virologa Veterinaria y Gentica

Metodologa La prctica se compone de 2 actividades, la primera consta de una

investigacin bibliogrfica del estudiante sobre el equipo y material usados en un laboratorio de biologa celular (LBC), as como el funcionamiento del mismo. La segunda parte se compone de un recorrido por los distintos departamentos de la FMVZ que poseen el equipo existente en un LBC, donde los estudiantes reconocern el equipo y explicaran su funciones guiados por el profesor. As mismo se explicar de manera grfica el nombre y uso de algunos materiales de cristalera usados comnmente en el laboratorio.

ACTIVIDAD 1

En esta documentacin buscaremos las imgenes y funciones de la siguiente lista de materiales y equipo:

EQUIPO Autoclave Balanza analtica Cmara de electroforesis Campana de extraccin de cidos nucleicos Campana de flujo laminar Estufa de cultivo celular Estufa de cultivo bacteriolgico Fotodocumentador Lector de ELISA Microscopio compuesto Microscopio invertido

Microscopio de inmunofluorescencia PCR-Tiempo Real Pipeta multicanal Potencimetro Purificador de agua (nanopure) Secuenciador Termoagitador Termociclador Transiluminador Ultracongelador -20C Ultracongelador -80C Ultracongelador -150C

MATERIAL Caja de petri Esptula Frascos para cultivo celular Agitadores magnticos Matraz de aforacin Matraz Erlenmeyer Mortero Pipeta serolgica Pipeta Pasteur Pizeta Probeta Vaso de precipitado Vidrio de reloj


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ACTIVIDAD 2

Materiales:

Cantidad Material

1 c/p * Indumentaria apropiada (Ver seccin sobre equipo de proteccin personal en los procedimientos de seguridad)

c/p Materiales que se requieren de forma individual.

Metodologa

Se realizar un recorrido por los departamentos de Virologa Veterinaria, y Gentica para identificar el equipo y material que en estos departamentos se utiliza.

Identificars y explicars en base al trabajo previo de la actividad 1, los equipos y materiales del laboratorio y su funcin.

SISTEMA DE EVALUACIN a) Resultados esperados en relacin con los criterios de

desempeo Se evaluara tu comportamiento durante la prctica. La forma en empleas el equipo de proteccin personal. Tu participacin en las actividades de la prctica. La ausencia de accidentes o causas de stos provocados por ti.

b) Lineamientos generales para la evaluacin La observancia directa de tu desempeo para obtener los resultados de la

prctica. Cuestionario escrito respecto a los contenidos de la prctica incluido en el examen parcial correspondiente. Cuestionario verbal durante la prctica referido a los contenidos previos. Revisin de las hojas de trabajo al final de la prctica y sello de las mismas, sin el cual, la prctica no tendr valor. Reporte escrito de la prctica entregado en el tiempo previsto y de acuerdo al formato de descrito en el anexo A.3.


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c) Mtodo de asignacin de calificaciones El cumplimiento de los siguientes puntos ser evaluado para cada prctica y al momento de esta:

Observacin de desempeo _____ Cuestionario verbal _____ Hojas de trabajo _____ Reporte de prctica _____ Todo lo anterior deber sumar un 2% del promedio final.


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HOJAS DE TRABAJO

Competencia: que el estudiante explique la funcin de un LBC mediante la investigacin bibliogrfica y observacin fsica de los equipos y material que se utilizan dentro del laboratorio de biologa celular.

Instrucciones: realiza una bsqueda de material y equipo que se utiliza dentro de un LBC (actividad 1) y coloca una imagen y la descripcin de su funcin dentro de la siguiente tabla. Utiliza esta tabla para la actividad 2.

Imagen del Equipo Descripcin y Funcin

Imagen del Equipo Descripcin y Funcin


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Imagen del Equipo Descripcin y

Funcin

Imagen del Equipo Descripcin y

Funcin


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Imagen del

Material

Descripcin y

Funcin

Imagen del

Material

Descripcin y

Funcin


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En base a la actividad 1 y 2,

a) Describe con tus palabras lo que aprendiste de la funcin de un LBC en la Medicina Veterinaria, _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

b) Describe las tcnicas que se utilizan actualmente y su funcin en los laboratorios que visitaste. _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

c) Describe adems las normas de seguridad que se toman en cada uno de ellos. _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________


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FUENTES DE INFORMACIN Bibliografa bsica.

Karp G (2011). Biologa Celular y Molecular, Conceptos y Experimentos. 6. Edicin. Editorial McGraw-Hill Interamericana Editores, S.A de C.V., Mxico D. F., Mxico. Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P (2006). Introduccin a la Biologa Celular. 2da. Edicin. Editorial Mdica Panamericana, S.A. Madrid, Espaa. Lodish, H., Darnell, J., Baltimore, D., Lawrence, Z.S., Berk, A., Matsudaria, P. (2006). Biologa Celular y Molecular. Editorial Mdica Panamericana. Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P (2010). Molecular Biology of the Cell. 4. Ed. Garland Science, Nueva York, EE.UU. Con CD-ROM. Pollard TD, Earnshaw WC (2008) Cell Biology. 2. Edition. Elsevier Inc. Philadelphia, USA. Nelson, D.L., Cox, M.M. (2000). Lehninger Principles of Biochemistry. 3 Ed. The Mona Group, LLC

Sitios Web: http://www.youtube.com/watch?feature=endscreen&NR=1&v=cSUvHZCyQVg http://www.youtube.com/watch?v=4mKhULnxqcw&feature=related http://www.dailymotion.com/video/xkvq7y_biologia-molecular-almudena-r-ramiro_school http://www.youtube.com/watch?v=eaXmOClyjeQ&feature=related http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?rid=mboc4 http://www.aidelos-shop.com/index.php?route=product/category&path=54_55&sort=p.model&order=ASC http://www.millipore.com/company/cp1/learning_centers http://www.bellcoglass.com http://www.vwrsp.com http://www.discover.bio-rad.com

MANUAL DE PRCTICAS DE BIOLOGA CELULAR Prctica No. 2. El microscopio, herramienta en Biologa Celular

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Prctica No. 2

EL MICROSCOPIO,

HERRAMIENTA EN BIOLOGA

CELULAR


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PRACTICA NO. 2 EL MICROSCOPIO, HERRAMIENTA EN BIOLOGA CELULAR

No. Alumnos: Equipos de trabajo de 6 a 7 alumnos Duracin: 2 horas

INTRODUCCIN Debido a las dimensiones pequeas de las clulas, se gener la necesidad de inventar el microscopio como una herramienta fundamental en la Biologa. Los primeros reportes acerca del uso de un microscopio fueron hechos por Robert Hooke en 1665, cuando observ cortes de corcho y encontr lo que ms tarde sus contemporneos Schleiden y Schwann describiran como clulas. Estos hallazgos dieron origen a la Teora Celular. An en la actualidad, el microscopio ptico desempea un papel importante en la investigacin biolgica, sin embargo, con el creciente desarrollo tecnolgico han surgido variaciones en el diseo de microscopios, los cuales son ms avanzados y ofrecen mayores posibilidades en la observacin detallada de estructuras celulares, tal es el caso del microscopio electrnico que permite la visualizacin de partculas subcelulares. Gracias a las innovaciones en la fabricacin de microscopios y el reciente desarrollo de modelos con mayor aumento y poder de resolucin, es que se ha logrado una mejor comprensin de la organizacin celular.

COMPETENCIAS DE LA PRCTICA Utilizar el microscopio ptico compuesto y describir las aplicaciones de ste como una herramienta bsica para el estudio celular. Tambin, diferenciaremos las morfologas de organismos y estructuras observadas en muestras de distinto origen y conoceremos el funcionamiento del microscopio electrnico y sus aplicaciones.


Identifiques y definas la funcin de las partes de un microscopio ptico compuesto. Nombres al menos 5 tipos diferentes de microscopios y sus aplicaciones. Manejes correctamente el microscopio ptico compuesto, practicando el encendido- apagado y enfocando imgenes al menos 3 veces en los aumentos 10x, 40x y 100x. Manejes y dispongas adecuadamente los desechos que se originen producto de la prctica. Portes correctamente el equipo de proteccin personal durante la prctica y entiendas la funcin de ste.


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Te comportes adecuadamente ante las situaciones de tu entorno de prctica apegndote al protocolo de sta y no provoques ningn incidente negativo.


a) Responsabilidades Antes de la prctica: Colectar por equipo 3 muestras de agua de charcos o a tu eleccin (bebederos de animales, tinacos o cualquier cosa que este en solucin) con anticipacin y depositarlas en frascos de vidrio previamente etiquetados (Cada etiqueta llevar el nmero del equipo, fecha y lugar de colecta). Conseguir los materiales que requieres para la prctica y llevarlos oportunamente el da de la prctica.

Durante la prctica: Observar, entender y manejar correctamente el microscopio ptico compuesto.

Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener organismos vivos peligrosos.



Bata blanca

1 Hasta la rodilla, manga larga, con botones y bolsas.

Cubre boca 1 De algodn Guantes 1 De ltex Lentes 1 De plstico y con proteccin lateral lisa




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Riesgo Causa Cortaduras.

Porta y cubre objetos, frascos de vidrio Irritacin de mucosas.

Alcohol 96

Alergias. Muestras colectadas

Descargas elctricas. Microscopios

Golpes. Con objetos, ocasionados por falta de precaucin o por indisciplina.

d) Acciones preventivas Usar el equipo de proteccin personal. Trabajar apegado al protocolo de la prctica. No usar equipo en el que no se haya tenido entrenamiento previo o del cual se

tengan dudas. Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio. Avisar al responsable de la prctica de cualquier accidente por insignificante que parezca.





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f) Cuadro de disposicin de desechos Desechos o residuos Disposicin

Vidrios Depsitos para desecho de vidrio Material producto de registro de notas Deposito para basura comn Papeles contaminados con muestras no biolgico-infecciosas o producto de limpieza de mesas.

Deposito para basura comn

Lquido de muestras no biolgico-infeccioso Drenaje comn Muestra catalogada como biolgico-infeccioso Deposito para biolgico-infeccioso


MANEJO EN LOS CENTROS DE TRABAJO. NOM-113-STPS-2009, SEGURIDAD-EQUIPO DE PROTECCIN PERSONAL-CALZADO DE

PROTECCIN-CLASIFICACIN, ESPECIFICACIONES Y MTODOS DE PRUEBA. NOM-029-ZOO-1995, CARACTERSTICAS Y ESPECIFICACIONES PARA LAS

INSTALACIONES Y EQUIPO DE LABORATORIOS DE PRUEBAS Y/O ANLISIS EN MATERIA ZOOSANITARIA. NOM-052-SEMARNAT-2005, QUE ESTABLECE LAS CARACTERSTICAS, EL PROCEDIMIENTO DE IDENTIFICACIN, CLASIFICACIN Y LOS LISTADOS DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS NOM-087-ECOL-SSA1-2002, PROTECCIN AMBIENTAL - SALUD AMBIENTAL - RESIDUOS PELIGROSOS BIOLGICO-INFECCIOSOS - CLASIFICACIN Y ESPECIFICACIONES DE MANEJO

DESARROLLO DE LA PRCTICA Materiales

Cantidad Material 1 c/p * Indumentaria apropiada (Ver seccin sobre equipo de proteccin personal en los

procedimientos de seguridad) 2 c/e Microscopio compuesto de luz 3 c/p *Portaobjetos y cubreobjetos 1 c/e Aceite de inmersin 3 c/e *Frascos para muestras (pueden conseguirlos o solicitarlos en el laboratorio con

anticipacin)


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3 c/e *Muestras biolgicas de diferente ndole (se te permite decidir cualquier muestra que sea de t inters, p. ej. Agua estancada, lquido ruminal, muestras de esperma, etc).

1 c/e Etanol al 96% en frasco gotero 1 c/e *Bolgrafo o marcador indeleble punto fino o mediano 3 c/e Goteros de plstico c/e Materiales requeridos por equipo. c/p Materiales que se requieren de forma individual. * Materiales que debes de conseguir y que no se proporcionaran en el laboratorio.

Metodologa La prctica se compone de 2 actividades, la primera es una demostracin del funcionamiento del microscopio compuesto de luz, visualizando algunas muestras de diferente procedencia para su comparacin, sta se realizar El Departamento de Parasitologa Veterinaria. En la segunda parte utilizars las muestras de agua que se te pidieron para observar los microorganismos presentes en ella.

ACTIVIDAD 1

En la primera actividad, identificaremos las estructuras que forman parte de un microscopio compuesto

Antes de la Prctica:

Realizars una investigacin sobre las partes de un microscopio ptico, su funcin, manejo, medidas de seguridad para manejarlo, y variantes del mismo, apyate en la bibliografa sugerida y las pginas web al final de esta prctica.

Identificando las siguientes partes del microscopio:

Sistema ptico Sistema manual o de soporte Ocular Soporte (el pie o base y el brazo) Objetivos Platina Condensador Tubo Diafragma Revlver Filtros Tornillos de enfoque: macromtrico y micromtrico Lmpara Sistema de alimentacin de electricidad


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Durante la prctica:

Describirs junto con tus compaeros y el docente en el laboratorio, el manejo y funcionamiento del microscopio y de las medidas de seguridad para su uso. As mismo podrs identificar las variantes del mismo que se encuentran en el laboratorio. Contesta las Hojas de trabajo de la prctica.

Practicaremos 2 veces la forma de sujetar el microscopio y el encendido y apagado.

Para realizar el enfoque trabajaremos primero con preparados teidos (cortes histolgicos y frotis sanguneos teidos). Observaremos las preparaciones a 4X, 10X, 40X y 100X.

ACTIVIDAD 2

A continuacin vamos a preparar un frotis en portaobjetos con cada una de las muestras que colectaste para observar.

El procedimiento es el siguiente:

Tomaremos 1 muestra por frasco y depositaremos 1 gota en un portaobjeto con ayuda del gotero, colocaremos el cubre objeto y observaremos en el microscopio.

Manipularemos los tornillos macromtrico y micromtrico, cambiaremos de posicin la platina y realizaremos todas las actividades que se requieran para enfocar la muestra.

Realizaras dibujos de lo observado por lo menos con dos de los cuatro objetivos con que cuenta el microscopio (esto depender del tipo de muestra con que trabajes y las indicaciones del instructor) para no olvidar detalles.

Por equipo debes realizar las observaciones de tus muestras visualizando a 10x, 40x y 100x para registrar las diferentes morfologas de lo observado, debers comparar lo observado con material de libros, o archivos digitales, as mismo debers hacer una consulta bibliogrfica sobre los temas que el instructor te indique y as completar tu reporte de prctica.

Al finalizar la prctica debes lavar todo el material y el equipo que empleaste para devolverlo a su lugar y entregarlo como lo recibiste.


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Recuerda que los dibujos y registros de tu prctica sern revisados antes de salir del laboratorio con la firma del profesor y el sello del laboratorio, en caso de no incluir el sello y firma del instructor, la prctica no ser vlida.

Podrs anexar fotografas y dibujos tomados en el laboratorio de lo observado, as como del material bibliogrfico consultado, estos debes anexarlos al reporte de la prctica que debes entregar en la siguiente sesin prctica y de acuerdo al formato correspondiente (ver apndice A).

Apyate con bibliografa para tratar de identificar lo observado y logres entregar un reporte ms competo.

NOTA: si los organismos son demasiado mviles, agrega una gota de alcohol 96.


desempeo Se evaluara tu comportamiento durante la prctica. La forma en empleas el equipo de proteccin personal. Tu participacin en las actividades de la prctica. El adecuado uso del microscopio para enfocar La adecuada manipulacin de las muestras y preparacin de ellas para

observarlas al microscopio La identificacin de los microorganismos presentes en las muestras. La ausencia de accidentes o causas de stos provocados por ti.


prctica. Cuestionario escrito respecto a los contenidos de la prctica incluido en el examen parcial correspondiente. Cuestionario verbal durante la prctica referido a los contenidos previos. Revisin de las hojas de trabajo al final de la prctica. Reporte escrito de la prctica entregado en el tiempo previsto y de acuerdo al formato de descrito en el anexo A.3.


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c) Mtodo de asignacin de calificaciones El cumplimiento de los siguientes puntos ser evaluado para cada prctica y al momento de esta:

Observacin de desempeo _____ Cuestionario verbal _____ Hojas de trabajo _____ Reporte de prctica _____

Todo lo anterior deber sumar un 2% del promedio final.


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HOJAS DE TRABAJO

Competencia: que el estudiante observe mediante el microscopio los microorganismos presentes en una gota de agua y los identifique mediante la ayuda de la literatura e imgenes consultadas en la web.

Instrucciones: dibuja por lo menos en dos aumentos lo observado en la actividad 1 y 2 utilizando colores para ello y posteriormente compara lo observado con la literatura para identificar los microorganismos presentes en tu muestra.

Actividad 2 Tipo de muestra: Aumento del objetivo: Aumento total con que se observa la muestra:

Actividad 2 Tipo de Muestra: Aumento del objetivo: Aumento total con que se observa la muestra:

Actividad 2 Tipo de muestra: Aumento del objetivo: Aumento total con que se observa la muestra:

Actividad 2 Tipo de Muestra: Aumento del objetivo: Aumento total con que se observa la muestra:


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En base a la actividad 1 y 2,

a) Identifica los microorganismos presentes en la(s) muestras de agua que observaste en el laboratorio, describe su clasificacin.

b) Explica como estos microorganismos influyen en su medio ambiente y cules son los efectos que pueden causar en los animales.

Microorganismo y taxonoma Efectos en media ambiente y animales


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Sitios Web: http://www.youtube.com/watch?v=0Tunrrm3OlM http://www.youtube.com/watch?v=LXbWgRwXFPk&feature=related http://www.youtube.com/watch?v=084qcBbXp58 http://www.youtube.com/watch?v=4n0NPkzIsnI http://www.maxipedia.org/Multimedia/Multimedia.htm http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26880/ http://www.usc.es/gl/investigacion/riaidt/microscopia/index.html http://bama.ua.edu/~hsmithso/class/bsc_656/websites/history.html http://www.cellsalive.com/toc_microsc.htm http://www.revista.unam.mx/vol.4/num1/sabias/tipos.htm http://www.amedeo.com

MANUAL DE PRCTICAS DE BIOLOGA CELULAR Prctica No. 3. Virus, Procariotas y Eucariotas

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100nm

Prctica No. 3

VIRUS,

PROCARIOTAS Y

EUCARIOTAS


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PRCTICA NO. 3 VIRUS, PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

No. Alumnos: Equipos de 6-7 alumnos Duracin: 2 horas

INTRODUCCIN

Entre los sistemas de organizacin de la vida que habitan en la Tierra, se conocen bsicamente 2 niveles de complejidad: sistema acelular (virus, viroides y priones), y sistema celular (el procariota y eucariota). Tanto los procariotas como eucariotas aunque existen diferencias entre ellos, todas comparten el mismo sistema gentico y transmiten su herencia gentica mediante un sistema codificado de ADN. En el caso de los sistemas acelulares poseen algunas caractersticas de los sistemas celulares (procariotas y eucariotas) pero no renen todos los principios para agruparlos dentro de estos, por ejemplo: los virus pueden poseer como genoma ADN o ARN, pero no poseen la maquinaria para replicar este material, ni para la produccin de protenas; por otro lado los viroides solo poseen una RNA circular de cerca de 400 pb y no poseen genes; y por ltimo los priones son protenas infectivas que pueden transformar protenas celulares en protenas prinicas infectivas.

Los procariotas y eucariotas pueden diferenciarse morfolgicamente mediante el uso del microscopio simple y en el caso de los virus solo pueden evidenciarse mediante microscopia electrnica.

COMPETENCIAS DE LA PRCTICA Diferencies la morfologa y tamao relativo de eucariotas (vegetales y animales) y procariotas (bacilos y cocos gramm negativos y positivos) desarrollando la habilidad de para preparar y teir diferentes muestras y su observacin al microscopio ptico as como la diferenciacin de estos y los virus a travs de micrografas electrnicas.


Realices al menos 2 diferentes tipos preparados con sus respectivas tinciones (sanguneo y bacteriano) de muestras biolgicas para observacin en microscopio ptico.


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Manejes y dispongas adecuadamente los desechos que se originen producto de la prctica. Emplees correctamente el equipo de proteccin personal durante la prctica y entiendas la funcin de este. Diferencies al microscopio un procariota de un eucariota. Diferencies al microscopio clulas eucariotas (una clula animal y una vegetal). Distingas en micrografas electrnicas virus, eucariotas y procariotas. Te comportes adecuadamente ante las situaciones de tu entorno de prctica apegndote al protocolo de sta y no hayas provocado ningn incidente negativo.


a) Responsabilidades Antes de la prctica: Colectar por equipo las muestras de sangre. Manejar las muestras sangunea y de bacterias como muestras biolgicas-infecciosas.

Durante la prctica: portar la bata y equipo de proteccin (guantes y lentes) y traer el manual de prcticas. Realizar las preparaciones y las tinciones de las muestras (sangre, bacterias y clulas vegetales). Manipular correctamente el microscopio. Realizar las actividades incluidas en la prctica respetando los tiempos determinados para esto.






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Riesgo Causa Cortaduras Porta y cubre objetos frascos de vidrio Irritacin de mucosas Alcohol 96

Reactivos para la tincin de Gram Alergias Muestras colectadas, alcohol 96, tincin de Gram Descargas elctricas Microscopios Golpes Con objetos, ocasionados por falta de precaucin o por

indisciplina

d) Acciones preventivas: Usar el equipo de proteccin personal. Trabajar apegado al protocolo de la prctica. No usar equipo en el que no se haya tenido entrenamiento previo o del cual se


e) Acciones de contencin: Toda persona que sufra algn accidente cuando se encuentre realizando alguna prctica dentro de laboratorio, ser remitida al Centro Mdico de Ciudad Universitario en San Nicols o a Servicios mdicos del H. Universitario. Es importante considerar que se solicitar informacin acerca de las vacunas recibidas por el afectado, ya que en los casos de cortaduras es indispensable haber recibido la vacuna antitetnica. Por otra parte, se emiten las siguientes recomendaciones para las situaciones que no requieran atencin mdica y las cuales en caso de urgencias pueden ser consultadas en el Manual de Primeros Auxilios:

Accidente por cortaduras: Detener el sangrado y hacer una curacin. Irritacin de mucosas: Lavar con agua corriente la zona afectada. Alergias: Trasladar inmediatamente a un centro mdico. Descargas elctricas: Cortar la energa elctrica y trasladar a un hospital.



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Golpes: Valorar la gravedad y evaluar si es necesario trasladar o no al Centro Mdico.


f) Cuadro de disposicin de desechos Desechos o residuos: Disposicin

Vidrios Depsitos para desecho de vidrio Productos de registro de notas Deposito para basura comn Materiales no biolgico-infecciosos Deposito para basura comn Lquidos no biolgico-infeccioso Drenaje comn Muestras biolgico-infeccioso Deposito para biolgico-peligroso


MANEJO EN LOS CENTROS DE TRABAJO.

NOM-029-ZOO-1995, CARACTERSTICAS Y ESPECIFICACIONES PARA LAS INSTALACIONES Y EQUIPO DE LABORATORIOS DE PRUEBAS Y/O ANLISIS EN MATERIA ZOOSANITARIA. NOM-018-STPS-2000, SISTEMA PARA LA IDENTIFICACIN Y COMUNICACIN DE PELIGROS Y RIESGOS POR SUSTANCIAS QUMICAS PELIGROSAS EN LOS CENTROS DE TRABAJO. NOM-087-ECOL-SSA1-2002, PROTECCIN AMBIENTAL - SALUD AMBIENTAL - RESIDUOS PELIGROSOS BIOLGICO-INFECCIOSOS - CLASIFICACIN Y ESPECIFICACIONES DE MANEJO

NOM-052-SEMARNAT-2005, QUE ESTABLECE LAS CARACTERSTICAS, EL PROCEDIMIENTO DE IDENTIFICACIN, CLASIFICACIN Y LOS LISTADOS DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS.

DESARROLLO DE LA PRCTICA Materiales:

Cantidad Material 1c/p *Indumentaria apropiada (ver seccin sobre equipo de proteccin

personal en los procedimientos de seguridad) 1 c/e Microscopio 1 c/e *Muestra de hoja de cebolla


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1 c/e *Muestras de sangre con anticoagulante (tomada de un mamfero y de una ave/reptil) (aprox. 1ml).

1c/e Hisopos estriles 3 c/p Portaobjetos 3 c/p Cubreobjetos 1c/e Aceite de inmersin 1c/e Mechero de alcohol o de bunsen 1c/e *Marcador de cera 1c/g Estuche para tincin con GRAM 1 c/g Estuche para tincin de hematocrito c/e Materiales requeridos por equipo. c/g Material requerido por grupo. c/p Materiales que se requieren en forma individual. * Materiales que debes conseguir y que no se proporcionaran en el laboratorio.

Metodologa: La prctica consta de una sola actividad en donde se prepararn las muestras biolgicas (sangre y clulas vegetales) con soluciones hipertnicas, isotnicas e hipotnicas numeradas al azar, de tal forma que tendrn que identificar qu tipo de solucin es cada numero segn el efecto causado en la clulas.

ACTIVIDAD 1

1. Realizaremos y observaremos con el microscopio a aumento de 20X, 40X y 100X:

Un frotis de un hisopado bucal de algn animal o alumno. Extensiones de sangre de mamfero, ave/reptil. Un frotis de hoja de cebolla. 2. Para ver los procedimientos para realizar la preparacin de las muestras

empleadas ver el apndice A.2.

3. Identifica la diferencia entre las clulas eucariota (animal, vegetal) y procariota (cocos y bacilos).

4. Realiza un dibujo de lo observado en tus hojas de trabajo, con el objetivo de 100X de la clula procariota, de una clula nucleada de la sangre y de la vegetal, procurando mantener el tamao proporcional de las estructuras.


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ACTIVIDAD 2

1. Observaremos micrografas electrnicas de virus calculando el tamao de cada partcula, corroborando posteriormente el tamao de estos en una revisin bibliogrfica.

2. Observaremos la figura A correspondiente al Parapoxvirus con tincin negativa y microscopia electrnica de transmisin, calcula su tamao comparando el tamao de la escala mtrica de la micrografa y el tamao del virus. La micrografa B corresponde a Parvovirus canino obtenido de un canino (perro)con diarrea y aglutinado con anticuerpos antiparvovirus, realiza el mismo ejercicio. En las micrografas C y D observamos Pestivirus (C: Virus de Fiebre Porcina Clsica y D: Virus de la Diarrea Viral Bovina). En la figura C calcula el tamao de la partcula con la escala correspondiente y en la figura D calcula el tamao tomando en cuenta que la partcula est cubierta con anticuerpos, los cuales estn marcados con partculas de oro (esferas oscuras observadas en la micrografa) y cada esfera mide 10 nm).

3. Realizaremos una revisin bibliogrfica para corroborar lo calculado en el ejercicio anterior, estos datos sern anexados al reporte.


desempeo Se evaluar tu comportamiento durante la prctica. La forma en que empleas el equipo de proteccin personal. Tu participacin en las actividades de la prctica. Que realices el procedimiento en forma correcta para la preparacin de las

muestras. Que identifiques las clulas procariotas y eucariotas en tus preparacines con ayuda de microscopio ptico Que identifiques clulas procariotas y eucariotas as como virus en micrografas electrnicas La ausencia de accidentes o causas de stos provocados por ti.


prctica. Cuestionario escrito respecto a los contenidos de la prctica incluido en el examen parcial correspondiente.


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Cuestionario verbal durante la prctica referido a los contenidos previos. Revisin de las hojas de trabajo al final de la prctica. Reporte escrito de la prctica entregado en el tiempo previsto y de acuerdo al formato descrito en el anexo A.3.

c) Mtodo de asignacin de calificaciones El cumplimiento de los siguientes puntos sern evaluados para cada prctica y al momento de esta:




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HOJAS DE TRABAJO

Instrucciones: sigue las instrucciones de la actividad 1 de la prctica y dibuja lo observado en las preparaciones que realizaste y agrega la informacin solicitada.

MUESTRA 1 Tipo de muestra: Tipo de clula observada: Aumento total de muestra:


:




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Instrucciones: sigue las instrucciones de la actividad 2 de la prctica, calcula el tamao de estos virus midiendo su dimetro o en su defecto el largo por ancho tomando como base la barra de referencia encontrada en la micrografa. Consulta en lnea las medidas reales.

Tamao del virus en nm.: _______ segn el clculo




100nm

C D


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En base a las actividades anteriores contesta lo siguiente:

1.- Escribe la diferencia en tamao y forma de las clulas eucariotas y procariotas y las caractersticas que puedes distinguir al microscopio ptico en cada una de ellas

DESCRIPCIN PROCARIOTAS EUCARITAS DIFERENCIAS Forma

Tamao

CARACTERSTICAS

2.- Escribe las diferencias entre clulas eucariotas (clula animal y vegetal) y que puedes distinguir al microscopio ptico y electrnico

DESCRIPCIN PROCARIOTAS EUCARITAS DIFERENCIAS Forma

Tamao

Organelos

3.- Explica para que sirve el conteo diferencial de leucocitos en sangre y que nos indican los cambios en el porcentaje de cada una de estas clulas. Escribe en una tabla la cantidad normal de cada uno de ellos en las diferentes especies. ____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________


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Especie Tamao/ forma de eritorcitos

Leucocitos totales

% neutrfilos

% monocitos

% eosinfilos

% linfocitos

% basfilos

Total de plaquetas

Perros Gatos Equinos Cerdos Bovinos Ovinos Caprinos Aves* *Explica las diferencias en aves en cuanto a estructura y tamao de estos.


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Sitios Web: http://www.youtube.com/watch?v=crwGuhQRM4s&feature=related http://cellsalive.com/cells/3dcell.htm http://cellsalive.com/howbig.htm http://www.maxipedia.org/Multimedia/Multimedia.htm http://www.virology.net/Big_Virology/BVFamilyIndex.html

MANUAL DE PRCTICAS DE BIOLOGA CELULAR Prctica 4. Transporte de membrana (smosis)

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PRCTICA No. 4 TRANSPORTE DE MEMBRANA

(SMOSIS)


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PRCTICA NO. 4 TRANSPORTE DE MEMBRANA (SMOSIS)

No. Alumnos: Equipos de 6-7 alumnos Duracin: 2 horas

INTRODUCCIN Transporte a travs de la membrana celular es el movimiento constante de sustancias en ambas direcciones a travs de esta, el cual puede ser activo o pasivo. El tipo de transporte pasivo no requiere energa para llevarse a cabo. Uno de los tipos de transporte pasivo es la smosis, que se define como el paso del agua a travs de una membrana relativamente permeable de una regin donde hay menor concertacin de solutos a una de mayor concentracin de solutos. En los organismos vivientes, el agua entra a la clula y sale de ella por smosis.

En los animales, por ejemplo, el agua contenida en el plasma sanguneo, iones y otras macromolculas (urea) pasa a travs de un tapiz de clulas epiteliales que se encuentran en los tbulos renales. Posteriormente son reabsorbidos gran cantidad de iones mediante diferentes tipos de transporte a travs del los tbulos renales, esto permite a su vez la osmosis del agua hacia los capilares. Por lo anterior y por muchos otros procesos donde la presin osmtica se ve involucrada, la smosis juega un papel de vital importancia en los organismos vivos.

COMPETENCIAS DE LA PRCTICA Analizaremos la influencia que poseen los solutos sobre la estructura de clulas vegetales y animales mediante la comprensin del proceso de smosis utilizando para ello soluciones hipertnicas, isotnicas e hipotnicas y el microscopio ptico y la interpretacin de estos fenmenos.


Realices al menos 1 una preparacin (frotis) de gota gruesa a partir de sangre y 1 preparacin de clulas vegetales (cebolla). Expliques la diferencias entre soluciones hipotnicas, isotnicas e hipertnicas y su efecto en las clulas. Distingas al microscopio los efectos de hemlisis y crenacin en eritrocitos y plasmlisis en clulas vegetales (cebolla). Emplees correctamente el equipo de proteccin personal durante la prctica y entiendas la funcin de este.


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Manejes y dispongas adecuadamente los desechos que se originen producto de la prctica. Te comportes adecuadamente ante las situaciones de tu entorno de prctica apegndote al protocolo de sta y no hayas provocado ningn incidente negativo.


a) Responsabilidades Antes de la prctica: Colectar por equipo las muestras de sangre con anticoagulante y la cebolla morada. Manejar las muestras sanguneas como muestras biolgicas-infecciosas.

Durante la prctica: portar la bata y equipo de proteccin (guantes y lentes) y traer el manual de prcticas. Realizar las preparaciones de las muestras (sangre, clulas vegetales). Manipular correctamente el microscopio. Realizar las actividades incluidas en la prctica respetando los tiempos determinados para esto.






Riesgo Causa Cortaduras Porta y cubre objetos frascos de vidrio Alergias Muestras colectadas Descargas Microscopios



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elctricas Golpes Con objetos, ocasionados por falta de precaucin o por

indisciplina

d) Acciones preventivas: Usar el equipo de proteccin personal. Trabajar apegado al protocolo de la prctica. No usar equipo en el que no se haya tenido entrenamiento previo o del cual se





f) Cuadro de disposicin de desechos Desechos o residuos Disposicin Vidrios Depsitos para desecho de vidrio Productos de registro de notas Deposito para basura comn Materiales no biolgico-infecciosos Deposito para basura comn Lquidos no biolgico-infeccioso Drenaje comn Material biolgico-infeccioso Deposito para biolgico-peligroso


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g) Normas especficas

NOM-017-STPS-2008, EQUIPO DE PROTECCIN PERSONAL-SELECCIN, USO Y MANEJO EN LOS CENTROS DE TRABAJO.

NOM-029-ZOO-1995, CARACTERSTICAS Y ESPECIFICACIONES PARA LAS INSTALACIONES Y EQUIPO DE LABORATORIOS DE PRUEBAS Y/O ANLISIS EN MATERIA ZOOSANITARIA.

NOM-113-STPS-2009, SEGURIDAD-EQUIPO DE PROTECCIN PERSONAL-CALZADO DE PROTECCIN-CLASIFICACIN, ESPECIFICACIONES Y MTODOS DE PRUEBA.

NOM-029-ZOO-1995, CARACTERSTICAS Y ESPECIFICACIONES PARA LAS INSTALACIONES Y EQUIPO DE LABORATORIOS DE PRUEBAS Y/O ANLISIS EN MATERIA ZOOSANITARIA. NOM-087-ECOL-SSA1-2002, PROTECCIN AMBIENTAL - SALUD AMBIENTAL - RESIDUOS PELIGROSOS BIOLGICO-INFECCIOSOS - CLASIFICACIN Y ESPECIFICACIONES DE MANEJO

DESARROLLO DE LA PRCTICA Materiales

Cantidad Material 2 c/e Microscopio 1 c/e *Muestra de hoja de cebolla morada, germinado de alfalfa o elodia 1 c/e *Muestra de sangre de mamfero con anticoagulante (EDTA) (2ml). 5 c/p Portaobjetos 3 c/p Cubreobjetos 1 c/e Aceite de inmersin 1 c/e *Marcador indeleble 1 c/e Solucin hipertnica (15% NaCl) 1 c/e Solucin hipotnica (agua destilada) 1 c/e Solucin isotnica (suero salino fisiolgico) 1 c/p *Navaja y mango de bistur 1 c/p *Pinzas de diseccin c/e Materiales requeridos por equipo. c/p Materiales que se requieren de forma individual. * Materiales que debes de conseguir y que no se proporcionaran en el laboratorio.


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Metodologa La prctica consta de 2 actividades, la primera en la cal realizars preparaciones de clulas vegetales (cebolla, Elodea o germinado de alfalfa) con solucione hipertnicas, isotnicas e hipotnicas y la segunda actividad donde hars lo mismo con muestra de clulas animales (sangre), en ambos casos observaras los efectos de estas soluciones sobre las clulas identificando los efectos de plasmlisis, hemlisis y crenacin.

ACTIVIDAD 1

Preparacin de clulas vegetales

1. Si utilizas cebolla para tu preparacin, tomars una de las capas de la misma. Con el bistur realizars un corte de aproximadamente 1cm y tomars con unas pinzas de diseccin la epidermis interna de la capa de cebolla (capa delgada interna de la hoja de cebolla).

2. Colocar un segmento de cerca de 0.5 cm de esta epidermis con la cara interna hacia arriba en un portaobjetos. Realizar una de estas muestras para cada solucin (si son 4 soluciones hacer un preparado para cada una de ellas.

3. Si trabajas con hojas de Elodia o germinado de alfalfa, tomaras una de las hojas y parte del tallo de las mismas, observaras al microscopio en el tallo y hojas el mejor sitio para realizar el preparado (donde tengas clulas con pocos cloroplastos, realizars un corte de cerca de 0.5 cm de la muestras, colcala sobre el portaobjetos. Realizars una preparacin para cada tipo de solucin a probar.

4. Se te proporcionan 3 soluciones donde una de las tres es isotnica, otra hipertnica y la ltima hipotnica (marcadas al azar con los nmeros 1,2 y 3), y una solucin control (solucin isotnicas, marcada como SS)

5. Cubrirla cada preparado con una solucin diferente (cerca de 60l), numerando en una esquina por la parte inferior el portaobjetos para identificar las soluciones y coloca un cubre objetos sobre la muestra.

6. Dejar incubar las soluciones 5 minutos al medio ambiente. 7. Observar con los objetivos 5, 20 y 40X los efectos de las soluciones en estas

clulas.

8. Establece cual de todas estas soluciones es la solucin hipertnica.

9. Dibuja en las hojas de trabajo tus observaciones y escribe tus conclusiones.


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ACTIVIDAD 2

Preparacin de clulas animales (sanguneas) 1. Toma 2 portaobjetos con guantes y si ensuciar su superficie divide el

portaobjetos en dos con tu marcador indeleble por la superficie inferior, identifica con el nmero 1, 2, 3 y SS cada uno de los espacios por la parte inferior en la esquina inferior derecha.

2. Coloca en cada uno de estos espacios en el centro 40 l de las soluciones numeradas correspondientes a lo marcado en el portaobjetos, utilizando para ello puntillas diferentes para cada solucin.

3. Mezcla suavemente la muestra sangunea y toma 5l, colcalos en el centro de la solucin que colocaste en los portaobjetos, repite la operacin con el resto de las soluciones, es importante que utilices una puntilla para cada muestra (as no mezclaras las muestras)

4. Coloca el cubreobjetos evitando que tengan contacto entre si en el mismo portaobjetos (evitar la mezcla de las soluciones)

5. Observa tu control isotnico (SS) para distinguir el estado normal de las clulas. 6. Tomando como referencia este control observa el resto de los preparados e

identifica en cul de ellos hay Hemlisis (solucin hipotnica), en cul de ellos hay crenacin (solucin hipertnica y en cul de ellos no se observa cambios (solucin isotnica).

7. Es importante que tomes en cuenta los siguientes puntos: colocar primero las soluciones en los portaobjetos, de hacer lo contario podrs tener un efecto de evaporacin de plasma sanguneo y tus resultados se observarn como crenacin en todas las clulas; evitar observar la muestra despus de un largo tiempo colocada la muestra en la platina con luz intensa, ya que esto deshidrata la preparacin u se observa crenacin de los eritrocitos; no leer el preparado en el centro donde pusiste la muestra ya que el plasma amortigua el efecto de las soluciones, lee el preparado entre la orilla y el centro donde puedas observar mejor las clulas.

8. Dibuja tus observaciones en la hojas de trabajo y junto con tu equipo define que tipo de soluciones son la nmero 1, 2 y 3.

9. Investiga los temas que se te piden, saca tus conclusiones y escribe lo que se te pide.


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desempeo Se evaluar tu comportamiento durante la prctica. La forma en que empleas el equipo de proteccin personal. Tu participacin en las actividades de la prctica. Que realices el procedimiento en forma correcta para la preparacin de las

muestras. Que identifiques los efectos de plasmlisis en clulas vegetales Que identifiques los efectos de hemlisis y crenacin en clulas sanguneas Que identifiques segn estos efectos que tipo de solucin (hipertnica, isotnica e hipotnica) son las soluciones 1, 2 y 3. Que comprendas la importancia de estas soluciones y su efecto a nivel organismo y la utilizacin de las mismas como terapia de fluidos. La ausencia de accidentes o causas de stos provocados por ti.


prctica. Cuestionario escrito respecto a los contenidos de la prctica incluido en el examen parcial correspondiente. Cuestionario verbal durante la prctica referido a los contenidos previos. Revisin de las hojas de trabajo al final de la prctica. Reporte escrito de la prctica entregado en el tiempo previsto y de acuerdo al formato descrito en el anexo A.3.

c) Mtodo de asignacin de calificaciones El cumplimiento de los siguientes puntos sern evaluados para cada prctica y al momento de esta:




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HOJAS DE TRABAJO


Clulas vegetales

No. De la solucin: Tipo de solucin:




Clulas sanguneas





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Despus de realizar las actividades 1 y 2 explica lo siguiente:

1. Porque en clulas vegetales no se observa el efecto de lisis celular como se observa en clulas animales?.

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

2. Cul sera el efecto si se colocara directamente una solucin hipotnica va intravenosa?

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

3. Explica en base a lo observado porque cuando existe una desnutricin severa por falta de alimento o por una parasitosis extrema el lquido que forma el plasma sale de torrente sanguneo y se distribuye en el tejido conectivo (edema).

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

4. Investiga y en la siguiente tabla escribe las soluciones usadas en terapia de fluidos, escribiendo sobre estas los datos que se te solicitan en la misma

Nombre de solucin

Contenido de la solucin

Tipo de solucin segn lo anterior

Observaciones de uso clnico


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Nombre de solucin

Contenido de la solucin

Tipo de solucin segn lo anterior

Observaciones de uso clnico



Sitios Web: http://www.youtube.com/watch?v=z6d2jFk0uS4&feature=related http://www.youtube.com/watch?v=17windHxk6Y http://physioweb.med.uvm.edu/bodyfluids/osmosis.htm http://books.google.es/books?hl=es&lr=lang_de|lang_es|lang_en&id=Kr7IFsN2DboC&oi=fnd&pg=PA399&dq=soluciones+hipertonicas,isotonicas+hipotonicas&ots=nXvSesvL6L&sig=ruDF2bjivjGjMhNuobFrDq5Bb5U#v=onepage&q=soluciones%20hipertonicas%2Cisotonicas%20hipotonicas&f=false http://www.ivis.org/proceedings/laveccs/2011/Tello2.pdf http://www.pisa.com.mx/

MANUAL DE PRCTICAS DE BIOLOGA CELULAR Prctica 5. Organelos de la Clula Vegetal (Plstidos)

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PRCTICA No. 5 Organelos de la Clula Vegetal (Plstidos)


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PRACTICA NO. 5 ORGANELOS DE LA CLULA VEGETAL (PLSTIDOS)

No. Alumnos: Grupos de 6 alumnos en equipos de trabajo Duracin: 2 horas

INTRODUCCIN Dentro de las clulas eucariotas se encuentran las clulas vegetales, las cuales tiene la capacidad de realizar la fotosntesis. En este proceso se convierte el CO2 en molculas orgnicas (carbohidratos), estas son transportadas a travs de la planta, almacenadas y utilizadas como fuente de energa y como material para el crecimiento de la planta. Estas clulas adems producen una gran cantidad de oxgeno.

La clula vegetal, adems de poseer una pared celular formada por glucosa, posee plastos, organelos citoplasmticos caractersticos de estas clulas. Los cloroplastos son los organelos encargados de la fotosntesis, de color verde (pigmento fotosinttico clorofila). En los cromoplastos se almacenan otros pigmentos fotosintticos (carotenos o xantofilas, etc.) que le dan una tonalidad que vara de amarillo hasta color rojo (tomate y zanahoria). Los leucoplastos son organelos que se encuentran en la clula vegetal, sin pigmento y que almacenan diferentes compuestos, entre ellos protenas (proteinoplastos), grasas (oleoplastos) y almidn (amiloplastos).

COMPETENCIAS DE LA PRCTICA Diferenciar al microscopio electrnico los tipos de plstidos y su contenido presentes en clulas vegetales mediante al observacin al microscopio de distintas preparaciones que nos permita entender su funcin dentro de la clula vegetal y el tejido de plantas. Sers competente cuando:

Realices al menos 1 preparacin a partir de clulas vegetales de los diferentes muestras por el mtodo de aplastamiento. Cuando expliques los tipos de plastos presentes en las clulas vegetales y el contenido de cada una de las muestras. Cuando en las muestras logres identificar los cloroplatos Cuando en las muestras logres identificar los cromoplatos. Cuando logres identificar en las muestras los leucoplastos. Manejes y dispongas adecuadamente los desechos que se originen de la prctica. Emplees correctamente el equipo de proteccin personal durante la prctica y entiendas la funcin de este.


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Te comportes adecuadamente ante las situaciones de tu entorno de prctica apegndote al protocolo de sta y no hayas provocado ningn incidente negativo.


a) Responsabilidades Antes de la prctica: Colectar por equipo las solicitadas en material y mtodos.

Durante la prctica: portar la bata y equipo de proteccin (guantes y lentes) y traer el manual de prcticas. Realizar las preparaciones de las muestras segn lo indicado en las instrucciones de trabajo. Manipular correctamente el microscopio. Realizar las actividades incluidas en la prctica respetando los tiempos determinados para esto.



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