FACTORII DE REGLARE AI GAMETOGENEZEI

• Hormoni hipofizari – gonadotropine – FSH, LH;• Celule Sertoli – bariera hemotesticulara; celule

Leydig;• Celulele tecii foliculare interne, celulele

stratului granulos;• Inhibina, activina.

CELULE SERTOLI, CELULE LEYDIG• Celulele SERTOLI (sustentaculare, sustinere)

localizate in interiorul tubilor seminiferi.

• Celulele LEYDIG (interstitiale) localizate in afara tubilor seminiferi si secreta testosteron (nivele crescute in L3-L6 intrauterin, primul an de viata si postpubertate)

• Celulele liniei seminale (spermatogonie, spermatocit primar si secundar, spermatida si permatozoid)

Celulele Seroli impart tubii seminiferi in 2 compartimente

BAZAL – intre membrana bazala si jonctiunile celulelor Sertoli (contine spermatogonii) – celule diploide, 46 cromozomi

LUMINAL – superior de jonctiunile celulelor Sertoli (bariera hemotesticulara) – contine spermatocite...

În principal, aceasta bariera protejeaza celulele cu 23 de cromozomi (care ar putea fi receptate ca non - self) de un eventual atac cu anticorpi al organismului.

BARIERA HEMOTESTICULARA

• 1. membrana bazala;• 2. spermatogonia;• 3. spermatocit primar;• 4. spermatocit secundar;• 5. spermatida;• 6. spermie;• 7. celula Sertoli;• 8. bariera

hemotesticulara.

ETAPA I- ESTE REPREZENTATĂ DESPERMOGRAMA ŞI SPERMOCULTURĂ

ETAPA II ESTE REPREZENTATA DE EFECTUAREA ANTICORPILOR ANTISPERMATICI.

INFERTLITATE

TESTE DE INFERTILITATE MASCULINA

• 1.SPERMOGRAMA - reprezinta test de fertilitate masculina care verifica cantitatea si calitatea spermei

• Rezultatele• NORMOSPERMIE = valori normale;

• Volum sperma: 1.5 mlNumar total de spermatozoizi: 39 de milioane / ejaculatConcentratia spermatozoizilor: 15 milioane / mlVitalitate: 58% spermatozoizi viiMobilitate progresiva: 32%Mobilitate totala (progresiva + neprogresiva): 40%Morfologie: 4% forme normalepH: 7.2

• Rezultate anormale• polizoospermie = concentratia spermatozoizilor peste

limitele normal; • hipospermie = volumul spermei < 1,5 mL ;• hiperspermie = volumul spermei > 5 mL; • aspermie = absenta spermei; • piospermie = prezenta leucocitelor in sperma (dau

culoare galbuie); • hematospermie = prezenta hematiilor in sperma (dau

culoare rosiatica); • astenozoospermie = motilitate < 40%; • teratozoospermie = > 96% din spermatozoizi au forme

anormale; -• necrozoospermie = spermatozoizi neviabili; • oligoozoospermie = spermatozoizi mobili < 15 mil./mL

si motilitate < 40%; • azoospermie = absenta spermatozoizilor.

SPERMOGRAMA

• In cadrul spermogramei se analizeaza si morfologia (structura amanuntita a componentelor fiecarui spermatozoid: cap, gat si coada) spermatozoizilor.

• Se analizeaza 100 spermatozoizi. • Pe baza caracteristicilor ei sunt catalogati ca • normali (valoare normala mai mare de 4%) si• anormali (malformati: cap dublu, cap amorf, cap

alungit, piesa intermediara grosa, coada dubla, coada franta,coada incolacita etc)

TIPURI DE SPERMII

ANTICORPI ANTISPERMATICI - 8% din barbaţii infertili. - Anticorpii - de clasa IgG si IgA au relevanţă clinică. - Anticorpii antispermatici de clasa IgG au efecte citotoxice si sunt detectati în ser sau la nivelul spermatozoizilor cu ajutorul testului SpermMar pentru IgG. - Anticorpii antispermatici de clasa IgA au în principal proprietati de aglutinare, rar apar în absenta anticorpilor de clasa IgG, dar semnificaţia lor pentru infertilitatea masculină este mai mare. - Pacienţii care prezintă combinat anticorpii antispermatici de clasa IgA şi anticorpii antispermatici de clasa IgG, sau care prezintă doar anticorpii antispermatici de clasa IgA, au şanse foarte mici de obţinere a sarcinii pe cale naturală. - Pentru o mai bună studiere a existentei anticorpilor antispermatici, se folosesc două teste: MAR test si immunobead(IBT).

Test MAR (Mixed Antiglobulin Reaction)

- se efectueaza pentru detectarea anticorpilor prezenti pe spermatozoizi (IgA si IgG). - Cand sunt prezenti anticorpii antispermatici, spermatozoizii mobili vor lega particulele de latex formand aglutinari. - > 40% spermatozoizi legati de particule - pozitiv (probabilitate foarte mare de infertilitate de cauza imunologica).

Testul Mar direct se efectuează pentru detectarea anticorpilor prezenţi pe spermatozoizi. - Se efectuează pe spermatozoizi din probe proaspete sau pe spermatozoizii obţinuţi în urma prelucrării probelor. - Suspensia cu spermatozoizi este amestecată cu o suspensie cu particule de latex acoperite cu anticorpi monoclonali anti – IgA uman sau cu anticorpi monoclonali anti – IgG uman.Testul Mar indirect se efectuează pentru detectarea anticorpilor de clasa IgG prezenţi pe spermatozoizi. - Se efectuează pe spermatozoizii obţinuţi în urma prelucrării probelor. - Suspensia cu spermatozoizii obţinuţi prin prelucrarea este incubată cu serurile de control şi - apoi amestecată cu o suspensie cu particule de latex acoperite cu anticorpi monoclonali anti – IgG uman.

Halosperm

este un test diagnostic bazat pe tehnica dispersiei cromatinei nucleului spermatozoizilor.

Principiul consta in denaturarea blanda a ADN-ului cu formarea unui halo in jurul capului spermatozoidului cand ADN-ul este intact, - lipsa acestui halo cand ADN-ul este fragmentat. -

SDF>30% fragmentare mare a ADN-ului.

- Utilitate clinica - Alegerea metodei de reproducere asistata (ART) corespunzatoare

Proba se tratează cu Halosperm Kit şi are la bază un proces de dispersie, de condensare a cromatinei spermatice cu dispariţia ei în cazul unui spermatozoid afectat.

Prezenţa haloului traduce viabilitatea spermatozoidului. În concluzie, testul este o evaluare cantitativă exprimată

procentual a calităţii probei, care ne indică conduita în tehnica de reproducere asistată.

- Dacă SDF este sub 30%, se poate practica inseminare artificială, - când însă nivelul este peste 30% atunci şansele de reusită vor fi

prin fertilizare in vitro sau ICSI, evitându-se o inseminare inutilă.- Superioritatea acestei metode se manifestă intocmai prin corecta

selectare a tehnicii de reproducere asistată, fără încercari eşuate care întârzie scopul final.

- Cele mai bune rezultate au fost obţinute prin ICSI datorită procesului de selecţie a celor mai viabili spermatozoizi şi de excludere a materialului de proastă calitate.

Celulele tecii foliculare interneCelulele stratului granulos folicular

INHIBINA• FSH stimuleaza producerea de catre celulele

granuloase a inhibinei, care va subpresa FSH-ul. • Inhibina este produsa atat in gonade, cat si in

glanda hipofiza, placenta, corp galben ;• Exista doua tipuri de inhibina : alfa si beta. : • Inhibina B prezinta un varf de secretie in prima

parte a fazei foliculare si un al doilea pick secretor la ovulatie.

• Inhibina A prezinta un varf secretor la jumatatea fazei luteale;

• Secretia de inhibina este diminuata de GnRH

CICLUL OVARIAN• Cuprinde

– Ciclul folicular (F. Foliculara); Ovulatia;Formarea si evolutia corpului galben (F.Luteala)

• Dureaza in medie 28 zile - Incepe la pubertate - Se termina la menopauza (50-52 ani) = epuizarea rezervei ovariene

• ATENTIE ----- C. Ovarian nu este acelasi lucru cu C. Menstrual

OVULATIE

Semne clinice de ovulatie• Cresterea temperaturii bazale• Modificarea mucusului cervical (devine elastic si alunecos

pentru a asigura un "vehicul" sigur pentru "transportul" spermei) asemanator albusului de ou

Daca C.O este mai lung/scurt se calculeaza considerand constanta faza luteala (14 zile) = Metoda calendarului Ex- C.O 35 zile – ovulatia are loc in 35-14 = ziua 21

Aspectul de feriga a mucusului cervical în perioada ovulaţiei

Teste de ovulatie

– masoara nivelul de LH in urina (colorimetric) – acelasi principiu ca si testul de sarcina

– Masurarea progesteronului in sange in ziua 21 (secretat de corpul galben- in principal) – este un martor al ovulatiei care a avut loc in ziua 14

• Considerand un C.O de 28 zile, ovulatia are loc teoretic in ziua 14 (la 24-36 h dupa peack-ul de LH = trigger al ovulatiei)

OVULATIE - Implicatii clinice

– Planificarea sarcinei – perioada fertila = 1 sau 2 zile inainte si dupa ovulatie

– Contraceptie (Metoda calendarului)– Tehnici de reproducere umana asistata

(inseminare intrauterina – IUI- pe ciclu natural, fara stimulare ovariana in prealabil)

CICLUL FOLICULARFoliculul –reprezinta complexul format dintr-un ovocit (primar sau secundar) inconjurat de unul sau mai multe straturi de celule foliculare. Ciclul folicular incepe la pubertate ATENTIE – ciclul ovogenetic debuteaza in viata intrauterina) si se termina la menopauza (epuizarea foliculilor din ovar = golirea ovarelor).

Determinarea rezervei ovariene (important in fertilitate)

• INHIBINA B (produsa de celulele granuloase) – masurata in faza foliculara

• AMH (anti-Mullerian hormone)O dată cu începerea pubertăţii, AMH este produs de celulele stratului granulos ale foliculilor de creştere din ovar

AMHLa sexul masculin valorile AMH pot diferenţia -criptorhidismul (celule Sertoli) de anorhie iar -la copiii mici ce prezintă ambiguitate genitală determinarea markerului este utilă pentru evaluarea prezenţei şi funcţiei testiculare.

Implicatii clinice: Sunt 2 situatii in care AMH-ul poate oferi informatii extrem de pretioase in atitudinea terapeutica: - Determinarea rezervei ovariene (la femeile care urmaresc obtinerea unei sarcini prin fertilizare in vitro) sau determinarea prezentei testiculelor pe traiectul de coborare atunci cand ele nu se gasesc in scrot.

Tipuri foliculi ovarieni vizibili pe lame

• Folicul primar• Folicul secundar• Folicul matur – tertiar – de Graaff• Folicul secundar/matur fara ovocit/nucleu in

sectiune• Folicul in evolutie

CICLUL UTERIN

• Poate fi impartit in 4 faze: • 1. Menstruala • 2. Proliferativa • 3. Secretorie • 4. +/-Premenstruala • Fiecare faza se afla sub un control hormonal strict. • Hormonii care controleaza ciclul uterin sunt secretati

de ovare sub influenta hipofizara (LH-ul si FSH-ul nu controleaza dimensiunile mucoasei uterine).

Implicatii clinice: • Mucoasa uterina poate fi urmarita ecografic

inregistrandu-se dimensiunile endometrului (format din 3 straturi bazal +spongios+ compact) utilizandu-se adesea termenul ecografic de endometru trilaminar – pentru a desemna faza secretorie (postovulatie).

• Progesteronul pregateste uterul pentru implantare.

• Implantatia blastocistului (nu embrion, nu zigot, nu morula) se face doar in faza secretorie cand mucoasa uterina este suficient de groasa si “suculenta” (tradusa in termeni hormonali printr-un progesteron crescut).

Explorarea infertilitatii feminine• Principalele dozari hormonale:• ESTRADIOL• PROGESTERON• FSH• LH• PROLACTINA• TESTOSTERONUL (FREE)

Explorarea infertilitatii feminine

• TEMPERATURA BAZALA• EVOLUTIA MUCUSULUI CERVICAL• ECOGRAFIA

• BIOPSIA DE ENDOMETRU• LAPAROSCOPIA

Teste de permeabilitate tubara:

• Histerosalpingografia• Histeroscopia• laparoscopia

HISTEROSALPINGOGRAFIA

METODE CONTRACEPTIVE

• HORMONALE– Anticonceptionale (Estrogen+Progesteron sau numai Progesteron)

–INHIBA OVULATIA, mucusul cervical devine impermeabil, inhiba proliferarea mucoasei uterine si astfel implantarea oului

– Plasture hormonal (5/5cm) –se aplica 3 saptamani/luna cu pauza 1saptamana ( contin estrogen (E2) si progesteron(P)

– Inel vaginal – se aplica 3s/luna (de catre femeie) (E2+P)– Injectia trimestriala (P in doza mare) –intramuscular; are actiune

pe mucus cervical si ovulatie– Implant (Progesteron in doza mare) – se fixeaza de catre medic,

subcutanat in brat – dureaza 3 ani– Sterilet hormonal (Mirena) – se fixeaza intrauterin, de catre medic,

dureaza 5 ani

METODE CONTRACEPTIVE

• NEHORMONALE– Sterilet, Spermicide, Prezervativ, Diafragma

• NATURALE– Temperatura bazala – creste cu 0,3-0,5 grade dupa ovulatie si se

mentine constanta pana la menstruatie– Metoda simptomatica- modificarea glerei cervicale

• DEFINITIVE– Ligatura trompelor/ductelor deferente

• URGENTA– Pilula cu Progesteron in doza mare (Postinor)– Pilula cu Estrogen si Progesteron in doze mari – Steriletul introdus in Max 5 zile

Care sunt metodele de contracepție?

METODE CONTRACEPTIVE ÎN

PREZENT

1. Pilula combinată („anticoncepţionalele”)2. Pilula cu progestageN3. Sistemul intrauterin („sterilet cu

hormoni”)4. Implantul5. Injecţiile6. Plasturele contraceptiv7. Inelul vaginal8. Contracepţia de urgenţă sau pilula de a

doua zi9. Prezervativul10. Spermicidele (ovulele anticoncepţionale,

creme, foiţe)11. Diafragma cu spermicid12. Metode naturale13. Legarea trompelor uterine

1. Prezervativul2. Retragere (coitus interruptus)3. Vasectomie

• Plasturele este pătrat și se poate fixa pe abdomen, coapse, fese sau braţ.

• Conţine estrogen și progesteron, hormonii fiind eliberaţi continuu, pătrunzand în sange prin piele.

Se considera ca spermatozoizii stiu sa-si mentina directia datorita factorilor pe care ii intalnesc in tractul genital feminin:•Temperatura mediului intern din tractul genital feminin•Consistenta si densitatea secretiilor tractului genital feminin•Peristaltismul de la nivelul cavitatii uterine – Contractiile miometrului conduc spermatozoizii catre trompele uterine

Poti sa alegi sexul copilului?

S-a constatat ca:Spermatozoizii cu cromozom Y:•Sunt mai mici si mai rapizi decat cei cu cromozom X•Au durata de viata mai scurta decat cei cu cromozom XSpermatozoizii cu cromozom X:•Sunt mai lenti decat cei cu cromozom Y•Sunt mai capabili sa faca fata mediului acid al tractului genital feminin

Stiati caInotatori pe distante lungi

- Distanta pe care un spermatozoid trebuie sa o parcurga pentru a fecunda este de aproximativ 15

cm.- aceasta distanta este de 3,750 ori mai mare

decat dimensiunea spermiei. - Comparabil ar fi un om inotand 64 km pentru a

ajunge la destinatie

Cand te-ai nascut?!

In Korea si alte tari est asiatice varsta oficiala se stabileste din momentul conceptiei si nu din

momentul nasterii. Asadar in aceste tari in momentul nasterii ai implinit deja 9 luni!