“los mejores hombres son producto de sus propios errores” de sus propios errores”
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““Los mejores hombres Los mejores hombres son productoson producto
de sus propios de sus propios errores”errores”
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Laboratorio # 3Laboratorio # 3
BacterioloBacteriologíagía
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Objetivos del laboratorio
Entender la clasificación de las bacterias de Entender la clasificación de las bacterias de acuerdo a sus característicasacuerdo a sus características
Describir las estructuras y morfología de las Describir las estructuras y morfología de las bacteriasbacterias
Prácticar técnicas de cultivos de bacteriasPrácticar técnicas de cultivos de bacterias
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LA CLA CÉÉLULALULA
Unidad básica de los organismos
Unicelular
Características de los seres vivos:
•Movimiento
•Respiración
•Metabolismo
•Reproducción
•Responden a estímulos Pluricelular
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LA CLA CÉÉLULALULA Dos tipos de células: Eucariótica Procariótica
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CCÉÉLULA EUCARILULA EUCARIÓÓTICATICA
Eu = verdadero Karios = núcleo
Organelos definidos
Grande y
compleja
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CCÉÉLULA PROCARILULA PROCARIÓÓTICATICA Pro = Antes
Karios = núcleo Pequeña y simple
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Reinos Categoría
taxonómica formada por fila o divisiones relacionados
Considerada la categoría más alta hasta finales del s. XX
ClasificaciónClasificación
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Se reconocen cinco reinos en la actualidad Prokaryotae: organismos unicelulares, bacterias
y algas llamadas cianobacterias. Célula procariótica
Protista: organismos que solo tienen una célula eucariótica
Fungi: (hongos) descomponedores, parásitos (patógenos)
Plantae: organismos que usan clorofila para captar la energía lumínica y convertirla en alimento (fotosíntesis). Son autótrofos
Animalia: organismos heterótrofos
ClasificaciónClasificación
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Nivel taxonómico más altoDominiDominioo
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Dominio ArchaeaDominio ArchaeaArqueas:
•Halogeometricum borinquensis
•Haloterrigena thermotolerans
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Dominio BacteriaDominio Bacteria
•Células procariotas (estructura simple)
•Carecen de núcleo u organelos
limitados por una membrana
•Tienen importancia positiva y negativa
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CianobacteriasCianobacterias•Eran conocidas como algas azul-verdosas
•Organismos fijadores de nitrógeno
•Abundantes en charcas y lagos
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Dominio EukaryaDominio Eukarya
•Se encuentran los diferentes reinos
•Organismos con núcleo verdadero
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BacteriasBacterias
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BacteriasBacterias•Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674)•Células microscópicas que se miden en micras (u)•Mayoría presentan pared celular compuesta de peptidoglucano (polimero de proteínas y carbohidratos)•Reproducción por fisión binaria (asexual)•Material genético encontrado en plásmidos•Algunas poseen cápsula•Pueden formar colonias
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BacteriasBacterias•Crecimiento de las colonias
•Su morfología y tamaño se utilizan para identificar las especies de bacterias
Formas comunes
Márgenes comunes
Características de la superficie
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Tinción BacterianaTinción Bacteriana•Utilización de tintes para identificar bacterias
•Tinción Gram•Células responden al tinte de acuerdo a la complejidad y composición de su pared celular (pared delgada o gruesa)•Bacterias Gram +•Gram –•Gram variable (menos común)
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Tinción GramTinción GramBacteria Gram + Bacteria Gram -
Pared celular simple Pared celular compleja
Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina
No capa externa de lipopolisacáridos
Capa externa de lipopolisacáridos
Retienen cristal violeta/iodo-color azul/violeta
Retienen safranina-color rojo/rosado
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Parte experimentalParte experimental
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Técnicas de asepsia Técnicas de asepsia Contaminación de cultivos Trabajamos con posibles patógenos Limpiar mesas con Lysol Lavarse las manos Utilizar zafacón Utilizar guantes Utilizar bata
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Ejercicio # 1: Ejercicio # 1: Preparación de laminilla Preparación de laminilla Preparar laminilla con muestra de sarro
Procedimiento: Gota de agua en laminilla Raspar sarro con palillo Pasar palillo en gota de agua Secar la laminilla utilizando lámpara de alcohol Derramar cristal violeta a la laminilla (2-3 gotas) Lavar exceso de tinte Secar con papel especial Observar preparación a través del microscopio Dibujar lo observado.
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Ejercicio # 2: Ejercicio # 2: Observación de Observación de
laminillaslaminillas Observar laminillas Bacterias - tinción gram Bacilos Cocos Otras morfologías
Dibujar lo observado
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Ejercicio # 3: Ejercicio # 3: MorfologMorfología ía bacterianabacteriana
Observar bajo estereoscopio las placas Petri para identificar la morfología de las colonias
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Ejercicio # 4:Ejercicio # 4: Exposición de platosExposición de platos Tomar muestra de aire, agua, suelo, entre otros, utilizando la técnica a explicarse en el laboratorio
Colocarla en las placas Petri conteniendo un medio de cultivo (TSA) utilizando las técnicas asépticas correspondientes
Cerrar con parafina y rotular las placas: nombre, sección, clave, instructor.
Incubar a 25°C por 48 hrs Anotar y dibujar los resultados
Tomar en consideración a las bacterias, no a los hongos
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Ejercicio # 5:Ejercicio # 5: Control de Control de crecimiento Bacterianocrecimiento Bacteriano
Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o antisépticos para determinar su eficacia inhibiendo el crecimiento de bacterias Inocular de forma estriada la muestra de bacterias en el
medio de cultivo Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes
sustancias químicas, sobre el agar y un disco con agua (control)
Rotular las placas Incubar a 37°C, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los
resultados (medir la zona de inhibición-cm)
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Informe Escrito (40 Informe Escrito (40 pts)pts)
Será solo del ejercicio de control de crecimiento bacteriano Página presentación Introducción (incluir objetivos) Materiales y métodos Análisis de resultados (incluir gráficas, dibujos y/o
tablas) Conclusión Bibliografía (mínimo cinco)