liquid-based cytology in non-gyn...
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奇美醫院 細胞病理科
王秀珠
Liquid-Based Cytology in Non-GYN application
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液基細胞學原理
• 液基抹片指的是將採取的檢體,置入細胞保存液内,再經過處理去除影響診斷的背景(黏液、血液及發炎性滲出物等),將細胞集中,製作成薄層抹片,經固定、染色、閱片後,最後由病理醫師做出細胞學診斷;這樣的製作方法不但可以改善細胞學的判讀品質,而且剩餘檢體也可以進一步做免疫染色或分子病理檢驗。
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3
檢體類別
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Advantages in LBC
• Entire sample transfer • Reproducibility • Small screening area • Cell preservation • Cell concentration • Devoid obscuring factor • Ancillary tests
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Disadvantage of LBC
• Higher cost • Facility demanding • Alteration in architecture • Alteration in cell morphology • Cannot perform air-dried smears for Romanowsky stains (Liu、Diff-Quik、
Wright-Giemsa stain )
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• 1996,Cytec Thinprep 2004,LGM Liqui- Prep
• 1999,TRIPATH,AutoCyte 2011,Biodyne, CellPrep
(SurePath) US FDA approval: None
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Technical Differences 過濾膜
(ThinPrep, CellPrep)
離心+自然沉降
(SurePath)
Cibas ES, Cytology Diagnostic Principles and Clinical Correlates, 4th ed, p5
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Comparison of Different LBC Methods 名稱 Cytospin
(傳統細胞離心)
ThinPrep
(新柏式)
SurePath
(BD必帝)
Liqui-Prep
(麗柏)
CellPrep
(弘晉)
原理 離心 過濾膜技術 離心+自然沉降 離心 過濾膜技術 所需設備 一般離心機
細胞離心機 特殊製片機 自動化或手工:
標本轉移機 離心機 製片染色機
一般離心機 震盪機
特殊製片機
檢驗試劑 無 四種固定液 兩種固定液 採檢試劑套組 四種固定液
製片過程 利用離心旋轉原理將細胞打製玻片上
利用濾膜壓片製作抹片
重力自然沉降使細胞黏附在玻片上
手工塗抹 利用濾膜壓片製作抹片,增加吹附步驟使細胞分佈均勻
檢體直徑
5mm
20mm 13 mm 不一定 20mm
抹片 Somewhere between
薄層monolayer
立體 3D
薄層monolayer
薄層monolayer
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科內執行
出發總要有個方向 …
• 各研討會與文獻
• 提升抹片品質
• 增加科部營收
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Fine-needle aspiration (FNA)
• Thyroid FNA Adequacy(2009 TBS of Thyroid): 6 groups of follicular cells Nondiagnostic rate: 2 ~20% CMH : 約23%
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健保點值
細胞學檢查Cytology Examination (15001-15022)
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執行面克服
• 臨床科:至各科說明
• 組內:
作業流程調整
新增電腦開單批價畫面
人員訓練:學習操作流程
組內研討會---Cytomorphology
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Thyroid • 保吉生(ThinPrep) • BD(SurePath)
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Thyroid • 保吉生(ThinPrep)
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Collection – Thyroid FNA
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ThinPrep® 新柏氏電腦薄層抹片
1. 對病灶進行抽吸後,打入Thin Prep專屬的保存液瓶內,混和 均勻。 2. 保存液為20ml,內含有54%甲 醇,檢體瓶較大。 3. 如有血液較多的檢體需先以醋 酸做前處理。 4. 注意病人姓名標示之正確性, 並依照一般流程送檢至細胞病 理科。
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ThinPrep®: Filtration method
ThinPrep 5000
•TP5000多量處理:每個托盤 20 個檢體
•每 20 個檢體處理時間約為 45分鐘。
•可用於婦科及非婦科檢體,程式不同。
•僅製片。
ThinPrep 2000 •單容器處理 •去掉瓶蓋,將檢體瓶和ThinPrep玻片放在機器裡。按下按鈕,等待 3-5 分鐘(具體時間視細胞結構而定)
•採集處理後的玻片放在95%酒精中固定 •僅製片 •可用於婦科和非婦科檢體,但是需要不同的篩檢程式。
•每小時處理 25 張片子
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ThinPrep 2'30''
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Thyroid • BD(SurePath)
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Red
5-10% methanol Haemolytic agent Excellent for bloody specimens
BD Cytorich solution
Clear
24% ethanol solution Good general use preservative Non-bloody specimens
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Collection – Thyroid FNA
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Conventional / CytoRich LBC - FNA
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1. 取10 mL的cytorich red固定液至空離心管中。固定液可常溫保存,成本昂貴請小心取用。1mL固定液至多可溶解50ul的血液,若檢體含血量多,請適量多加固定液。
2. 對病灶進行抽吸後,打入裝有固定液的離心管中(針頭請置於液面下),並抽取固定液來回清洗針筒約三到五次,盡量將抽取的細胞沖出至固定液中。完成後蓋回蓋子,並上下搖晃使其混和均勻。
3. 若是抽出囊腫內液體,請打入5mL檢體至保存液中,剩餘檢體直接丟棄。
4. 至少靜置半小時以上。
5. 注意病人姓名標示之正確性,並依照一般流程送檢至細胞病理科。
FNA---採檢步驟
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Processing (1) Collection Vortex 10min
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Processing (2) Centrifuge for 5 minutes @ 600 g
Pour off supernatant
Add 3 -10 cc Cytorich red and vortex 20”
Over night
Centrifuge for 5 minutes @ 600 g
Pour off supernatant and vortex 20”
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Processing (3) PreCoat slide put into Slide rack Settling chamber
Settling chambers insert into cutouts and lock
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Processing (4) PrepStain system全自動電腦製片染片
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獨特檢體架設計 –具方向性,避免檢體放置錯誤
每片玻片單獨製片染片 –專屬chamber & precoat slide
PrepStain system全自動電腦製片染片
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PreCoat slide put into Slide rack
Settling chamber Settling chambers insert into cutouts and lock
Processing (4) Add 1 cc Tris-buffer & vortex to homogenise sample
Put the sample into settling chamber Stand 10 min