)عمليالجزء ال( محاضرات تغذیة حیوان الفصل الربیعي-المرحلة الثالثة

جامعة بابل-كلیة الزراعة -قسم األنتاج الحیواني علي أمین سعید. اعداد د

2011-2012

Lectures of Animal Feeding

Practical Part

3rd Class - Spring Semester

Animal Production Department

College of Agriculture-Babylon University

Written by: Dr. Ali A. Saeed

2011 -2012

2

)عملي(محاضرات تغذیة حیوان التحلیالت الكیمیائیة لألغذیة واألعالف) 1(محاضرة رقم

Chemical analysis of feed and roughages

والمـــادة ) moistureالرطوبـــة (لمـــاء تحتـــوي جمیـــع األغذیـــة واألعـــالف علـــى مكـــونین اساســـیین همـــا ا dry matter (DM)الجافة

Water الماء -اوالوتتبـاین نـسبة الرطوبـة فـي األغذیـة واألعـالف تبعـا لمكوناتهـا مـن المـواد ، ویشار الیه ایـضا بالرطوبـة

maturityومرحلـة النـضج ، مجموعـة مـن تلـك المـوادلـطخ فـي حـال تـصنیعها مـن ingredientsالعلفیـة

stage ـــــة ـــــي تجـــــرى احیانـــــا ألغـــــراض الحفـــــظ وتحـــــسین القیمـــــة الغذائی ـــصنیعیة الت ـــــة والتــ والعملیـــــات الحقلیفــاألعالف الخــضراء كالجــت والبرســیم والحــشائش المختلفــة یكــون محتواهــا الرطــوبي مرتفــع فیمــا . لألعــالف

، محاصـیل األخـرىینخفض هذا المحتوى في األعالف الخشنة التي تشمل عـادة مخلفـات زراعـة الحبـوب والوتقــل نــسبة . وتـنخفض نــسبة الرطوبــة كــذلك فــي األعـالف المركــزة التــي تــشكل الحبــوب الجـزء الرئیــسي منهــا

. النبات الى النضجادة كلما اقتربالرطوبة عفانهـــا bales والبـــاالتhay وعمـــل الـــدریسwiltingالعملیـــات الحقلیـــة التـــي تـــشمل التـــذبیل بالنـــسبة الـــى

امـــا. الرطوبـــة لـــضمان امكانیـــة حفـــظ المـــادة العلفیـــة وخزنهـــا لحـــین الحاجـــة ألســـتخدامهاتـــؤدي الـــى تقلیـــل ــــسیلجة ــــى رفــــع المحتــــوى الرطــــوبي للمــــواد فانهــــا تــــؤدي العملیــــات التــــصنیعیة كالمعــــامالت الكیمیائیــــة وال ال

.التالخاضعة للتصنیع قبل اضافة المحالیل الكیمیائیة واألضافات المختلفة المستخدمة في تلك المعاملــتخلص لتقــدیمها الــى الحیوانــات جــدیر بالــذكر ان األعــالف المعاملــة كیمیائیــا یجــري تعریــضها للهــواء قبــل

سـواء عنـد (من بعض المواد الضارة كاألمونیا التي تتحرر عند اضافة الیوریـا أو األمونیـا وامـالح األمونیـوم .جیع الحیوان على تناول كمیات مناسبة منهاوتش لرفع استساغتها) السیلجة او المعاملة الكیمیائیةاجراء Dry matter المادة الجافة -ثانیا

وتقـسم المـادة الجافـة الـى مـادة . ونـزع الرطوبـة منهـا وتمثل الجزء المتبقي من المادة العلفیة بعد تجفیفهاخالن مـع ان المكـونین العـضوي وغیـر العـضوي یتـدا). معدنیـة(ومادة غیر عـضویة ) غیر معدنیة(عضویة

اذ تحتــوي المركبــات العــضویة علــى امــالح معدنیــة بــصورة ، بعــضهما وال یتمیــزان فــي الواقــع بــشكل منفــصلالحدیــد كمــا هــو الحــال فــي الهیموغلــوبین مكونــات تركیبیــة فالبروتینــات علــى ســبیل المثــال یتــضمن تركیبهــا

hemoglobin والمـایوغلوبین myoglobinزین و الفــسفور كمـا هــو الحــال مـع الكــا casein او الكبریــتكمــا یتــضمن تركیــب الــدهون ، وغیرهــاmethionine والمیثیــونین cysteineكمـا هــو الحــال مــع السیــستین

.والكربوهیدرات وجود عناصر معدنیة فیها

3

Inorganic matterالمادة غیر العضویة -1رفــت عملیــة حــرق لــذلك فقــد ع ashاو الرمــاد minerals saltsوتعــرف ایــضا بــاألمالح المعدنیــة

ر ویحتــوي الرمــاد علــى جمیــع العناصــashingالمــادة الجافــة لتقــدیر نــسبة المــادة العــضویة فیهــا بالترمیــد عدا الكربون والهیدروجین واألوكسجین والنتـروجین التـي تتـشكل منهـا المـادة الموجودة في الطبیعة تقریبا ما

سیین فـــي الرمـــاد الحیـــواني بینمـــا یعتبـــر البوتاســـیوم ویعتبـــر الكالـــسیوم والفـــسفور العنـــصرین الرئیـــ. العـــضویةوتـــصنف العناصـــر المعدنیـــة الـــى عناصـــر اساســـیة . والـــسلیكون العنـــصرین الرئیـــسیین فـــي الرمـــاد النبـــاتي

تـــضم العناصـــر الرئیـــسیة الكالـــسیوم والفـــسفور والبوتاســـیوم والـــصودیوم والمغنیـــسیوم ، واخـــرى غیـــر اساســـیةامـا العناصــر غیــر ، الحدیــد والنحـاس والمنغنیــز والخارصـین والیــود وغیرهــاتــضم ووغیرهـا والعناصــر النـادرة

.األساسیة فانها تضم السلیكون والنیكل واأللمنیوم والرصاص وغیرها Organic matter المادة العضویة -2

وتـــشمل البـــروتین الخـــام ومـــستخلص وتمثـــل العناصـــر البنائیـــة ومـــصادر الطاقـــة فـــي جـــسم الحیـــوان وهـــي التـــسمیة crude fiber (CF) األلیـــاف الخـــام - والكربوهیـــدرات بنوعیهــا المعقـــد)الـــدهون(ثــر األی

ــــة فــــي التحلــــیالت الكیمیائیــــة كمــــا یطلــــق علــــى هــــذا الجــــزء ایــــضا تــــسمیة الكربوهیــــدرات التركیبیــــة المتداولstructural carbohydrates ،والنـوع الـذائب soluble لتحلـل الـسریعالـذي یتكـون مـن الـسكریات القابلـة ل

روجین )التخمــر(فــي الكــرش ن النت الي م ستخلص الخ الطرح بالم سب ب ذي یح زء ال ذا الج ى ھ ق عل ویطل

nitrogen free extract (NFE) .ون وتــشترك مكونـــات المــادة العـــضویة ى الكرب ا عل ي احتوائھ ف

كوال. والهیدروجین واألوكسجین فـضال عـن النتـروجین الموجـود فـي البروتینـات د تل ات بصورة توج المركب

ي فقط مستقلة او حرة ا ف تكثـر فـي األنـسجة التـي glycolipidsالكالیكولیبیـدات انما قد تكون مرتبطة كم . التي تمثل الصورة التي تنتقل بها اللیبیدات خالل سوائل الجسمlipoproteins والالیبوبرتینات العصبیة

فـــي النباتـــات یوجـــد معظـــم . النتــروجین فـــي تركیبهـــا فیمثـــل المركبـــات التـــي یـــدخل بالنـــسبة للبـــروتین الخـــامویكثــر . ات البقولیــة تقــوم بخــزن البــروتین فــي اجزائهــا وخاصــة البــذورالبــروتین بــصورة انزیمــات اال ان النباتــ

امــا فــي الحیــوان فــان معظــم البــروتین . البــروتین فــي النباتــات النامیــة ویقــل كلمــا تقــدم النبــات باتجــاه النــضجالعــضلیة والجلــد والــشعر والــصوف واألضــالف فــضال عــن وجــوده كمكــون اساســي فــي یوجــد فــي األنــسجة

. األنظمة األنزیمیة والهرمونیةوتعتبــر األحمــاض األمینیــة الوحــدات البنائیــة للبروتینــات وتــصنف عــادة الــى احمــاض امینیــة اساســیة وغیــر

وتین فــضال عــن دورهــا الحاســم وتلعــب األحمــاض النوویــة دورا هامــا جــدا فــي التخلیــق الحیــوي للبــر. اساســیة .في نقل المعلومات الوراثیة المسؤولة عن الصفات والمظاهر األنتاجیة التي تمیز الحیوانات المختلفة

بـــصورة رئیــسیة كــل مـــن مكونـــات جــدران الخالیــا النباتیـــة والتــي تــشمل فانــه یمثــل بالنــسبة لأللیــاف الخـــاممــع تقــدم درجـــة ligninاللــذان یرتبطــان بـــاللجنین hemicelluloseوالهیمیـــسلیلوز cellulose الــسلیلوز

جنین الى الـصیغة العامـة للكربوهیـدرات اال انـه لوبالرغم من عدم خضوع التركیب الكیمیائي لل، نضج النبات

4

غالبـا مــا یــصنف علیهـا بــسبب ارتباطــه الوثیــق مـع الكربوهیــدرات المتعــددة غیــر الذائبـة فــي األنــسجة النباتیــة وتلعــب األلیــاف الخــام دورا مهمــا فــي تغذیــة المجتــرات نظــرا لكونهــا تــصنف علــى . خالیــاوخاصــة جــدران ال

آكالت األعشاب التي غالبا ما تتمیز بوجود مستوى مرتفع من االلیـاف الخـام التـي تـؤثر علـى هـضم الغـذاء لنمـــو ئمـــةوتتمیـــز المجتـــرات بامتالكهـــا معـــدة مركبـــة تعمـــل علـــى تـــأمین الظـــروف المال. والتنـــاول الحـــر منـــه

األحیــاء المجهریــة القــادرة علــى تحلیــل مكونــات األلیــاف الخــام فــضال عــن تحلیــل عماصــر الغــذاء األخــرى بمــــا یعــــرف بغیــــاب األوكــــسجین) الجــــزء األكبــــر مــــن المعــــدة(بواســــطة العملیــــات التــــي تجــــري فــــي الكــــرش

.fermentationبالتخمرات ة الموجــودة فــي الغــذاء وتــشمل الزیــوت والــدهون بالنــسبة الــى مــستخلص األیثــر فانــه یمثــل المركبــات الدهنیــ

% 4-2ویكــون المحتــوى الــدهني فــي النباتــات منخفــضا نــسبیا یتــراوح بــین . والمركبــات العطریــة والــصبغاتفـي الكـسب الزیتیـة مثـل كـسبة وقد یقل عن ذلك المدى في بعض انواع التبن وقد یزیـد عـن المـدى المـذكور

والكلیـسرول fatty acids میائیـا تتـألف الـدهون مـن األحمـاض الدهنیـة كی. بذور الكتان وكـسبة بـذور القطـنglycerol ، ــــى احمــــاض مــــشبعة ــــة ال تتــــضمن صــــیغتها الكیمیائیــــة saturatedتــــصنف األحمــــاض الدهنی

وتـرتبط ثالثـة جزیئـات مـن ، تتـضمن عـدد مـن االواصـر مزدوجـة unsaturatedأواصر مفردة وغیر مشبعة .triglycerideلیسرول واحدة لتكوین جزیئة كلیسریدات ثالثیة االحماض الدهنیة مع جزیئة ك

بالنــسبة للمــستخلص الخــالي مــن النتــروجین فهــو یمثــل الجــزء العــضوي المتبقــي فــي العینــة بعــد اســتخالص ولـــذلك فقـــد اعتبـــر مؤشـــرا عـــن الجـــزء ) غیـــر الـــذائب(الـــدهن والبـــروتین الخـــام والجـــزء الكربوهیـــدراتي المعقـــد

كمـــا یمكـــن اعتبــاره معیـــارا لمـــا ، بـــسیط او الــسكریات الذائبـــة ســـواء كانــت بـــسیطة او متعــددةالكربوهیــدراتي التقـوم النباتـات بخـزن الطاقـة اذ ، readily available energy تحتویـه المـادة العلفیـة مـن الطاقـة الجـاهزة

یوانـات تـستفاد منهـا الح starchy and soluble simple sugarsبـصورة مـواد نـشویة وسـكریات بـسیطة رة . energy sources للطاقـة كمصادر باسـتثناء في حالة المجترات وھي تضم جمیع حیوانات الحقل الكبیالمحللـة للمـواد ) بكتیریـا(فان تلـك المـصادر تتخمـر بـسرعة فـي الكـرش نتیجـة لفعالیـة احیـاء الكـرش الخنازیر

هـــا مـــن الطاقـــة مباشـــرة عنـــد والتـــي ستحـــصل علـــى احتیاجاتamylolytic microbesالنـــشویة والـــسكریة تحلیــل المــواد الــسكریة والنــشویة فــضال عــن تــوفیر الطاقــة لألحیــاء األخــرى الموجــودة فــي الكــرش والتــي ال

للـــسلیلوز لبكتیریـــا المتخصـــصة بتحلیـــل مثـــل اamylolytic activityتمتلـــك لفعالیـــة تحلیـــل تلـــك المـــواد cellulytic bacteria والبكتیریا المحللة للبروتین proteilytic bacteriaوغیرها من احیاء الكرش .

ویقــل محتــوى النباتــات والمحاصــیل مــن المــستخلص الخــالي مــن النتــروجین بتقــدم عمرهــا علــى العكــس ممــا یجـري بالنــسبة لأللیـاف الخــام التــي یرتفـع محتواهــا بتقـدم عمــر المحاصــیل والنباتـات ولــذلك فـان العالقــة بــین

.الي من النتروجین هي عالقة عكسیة او تبادلیةاأللیاف الخام والمستخلص الخ والــستریك fumaricویـضم المــستخلص الخــالي مـن النتــروجین بعــض األحمــاض العـضویة مثــل الفیوماریــك

citric والمالیك malic والتي وعلى الرغم من وجودهـا الطبیعـي بكمیـات قلیلـة اال انهـا تلعـب دورا هامـا فـي

5

تـــدخل الـــى دورة كریبـــز ألنتـــاج metabolitesبـــات ایـــضیة وســـطیة الغـــذائي كمركmetabolismاألیـــض فــي نمــاذج الـــسایلج المعــدة بــصورة جیـــدة دهنیــة الطیـــارة األحمــاض الومــن المتوقــع وجـــود ، ATPالطاقــة

وتــشمل احمــاض األســیتیك fermentationللتحلیــل وفــي نمــاذج ســائل الكــرش ألنهــا تنــتج خــالل التخمــرات acetic والبروبیونیــــك propionic والبیوتیریــــك butyric واحمــــاض اخــــرى تكــــون نــــسبتها قلیلــــة جــــدا مثــــل

وتمثـــل تلـــك األحمـــاض مـــصادر للطاقـــة فـــي المجتـــرات اذ ، isovaleric واألیزوفالیریـــك valericالفالیریـــك وفـي الـسایلج تتكـون تلـك األحمـاض نتیجـة للنـشاط ، من الطاقـة المتـوفرة لتلـك الحیوانـات% 90-80تشكل

فـــي المحـــصول المعـــد للـــسیلجة وان تـــراكم microflora لألحیـــاء المجهریـــة الموجـــودة طبیعیـــا األنزیمـــي ســیؤدي الــى خفــض األس الهیــدروجیني الــى lacticاألحمــاض المــذكورة باألضــافة الــى حــامض الالكتیــك

اذا لـم الحدود التي ستحول دون استمرار حیاة تلـك األحیـاء وبالتـالي حفـظ الـسایلج الـى فتـرة زمنیـة قـد تطـول .یحدث عبث في التغطیة البالستیكیة الضروریة لصناعة السایلج

الفیتامینات التي توجـد بكمیـات قلیلـة جـدا وتشمل المادة العضویة باالضافة الى العناصر االساسیة المذكورة نظمـة األفي النماذج النباتیة والحیوانیة اال انها رغم ذلك تلعب دورا هاما جدا ألنها تـدخل فـي تركیـب بعـض

ویتمكن النبات من تخلیق الفیتامینات خالل عملیات األیض بینمـا ال یـتمكن الحیـوان مـن تخلیقهـا .األنزیمیةلكـــن المجتـــرات تمتلــــك القـــدرة علــــى تخلیـــق جمیــــع ، ویعتمـــد علـــى التجهیــــز الخـــارجي لــــسد احتیاجاتـــه منهــــا

لجــدول التــالي مكونــات العناصــر ویبـین ا. نتیجــة للنـشاط المیكروبــي فــي الكــرشBالفیتامینـات مــن مجموعــة .الغذائیة التي یتم تقدیرها كمیا من خالل التحلیل الكیمیائي لألعالف واألغذیة

المكونات الرمز العنصر الغذائي )بعض المركبات الطیارة(الماء الرطوبة

المعــــــــــــادن major Ca, K, Mg, Na, S, P, Cl:الرئیسیة Ash الرماد trace:Fe, Mn, Cu, Co, I, Zn, Mo, Se, Crلنادرة ا األساسیة

Si, Ni, Ti, Al, V, B, Pb, Sn : المعادن غیر االساسیة

CP البروتین الخام ، كالیكوسیدات نتروجینیة، نترات، امینات، احماض امینیة، بروتینات

. و احماض نوویةBفیتامینات ، الیبوبروتینات

EE مستخلص األیثر، ســـــــــیروالت، صـــــــــبغات، احمـــــــــاض عـــــــــضویة، شـــــــــموع، ونـــــــــو زیـــــــــوتده

K, E, D, Aفیتامینات ، كالیكولیبیدات بكتینات ولجنین، هیمیسلیلوز، سلیلوز CF األلیاف الخام المستخلصالخالي من النتروجین

NFE

واخرى ، Bفیتامینات ، صبغات، احماض عضویة، نشا، سكریات

6

Chemical analysis techniquesتقنیات التحلیل الكیمیائي فـي تجري التحلیالت الكیمیائیة لألغذیة واألعـالف المختلفـة لتقـدیر نـسب العناصـر الغذائیـة الموجـودة

عینــات او نمــاذج مــسحوبة مــن المــواد المــراد تحلیلهــا باســتخدام اجهــزة ومعــدات متخصــصة ومــواد ومحالیــل تحلیالت وحــسب العنـصر المطلــوب تقـدیر نــسبته خاصــة بـالproceduresكیمیائیـة مختلفـة وبموجــب طـرق

.وباألعتماد على الخصائص الكیمیائیة والفیزیائیة التي تتمیز بها تلك العناصروتعتمـــد معظـــم المعلومـــات المتعلقـــة بـــالتحلیالت الكیمیائیـــة لألغذیـــة والتـــي اصـــبحت بمتنـــاول البـــاحثین فـــي

لألغذیــة التــي ابتكــرت قبــل اكثــر approximate analysisالوقــت الحاضــر علــى طــرق التحلیــل التقریبــي وقــد اعتمــدت تلــك الطــرق علــى وســائل ، Stohmann و Henneberg عــام مــن قبــل األلمــانیین 150مــن

تطـویر التحلـیالت فـي التكنولوجیـا الحدیثـةوقـد سـاهمت . تغیـرا بـاهرا وحتـى وقـت قریـبتبسیطة لكنها احدث mixersوخالطـــاتheaters لكیمیائیـــة مـــن هیتـــراتمعـــدات تحـــضیر المحالیـــل افتطـــورت ، الكیمیائیـــة، stirring techniques وتقنیـات التحریـك مـع الحـرارة او بـدونها shakers وهـزازات pumpsومـصخات

تـمكمـاtitration والتـسحیح distillation والتقطیـر pipettesفـضال عـن تطـویر اجهـزة سـحب المحالیـل gas ي جهـاز فـchromatography جهزة المختبریة مثـل جهـاز الكیمیائي في األالفصلاستخدام تقنیات

chromatography (GC)جهـاز و )gas liquid chromatography (GLC تـم تطــویر و مــؤخرا فـضال high performance liquid chromatography (HPLC)جهـاز تلـك التقنیـات المختبریـة فـي

كمـــا عرفـــت اجهـــزة حققـــت منـــافع ، spectrophotometric techniquesعـــن تقنیـــات التحلیـــل الطیفـــي وجهـاز ،amino acid analyzer بحـاث العلمیـة مثـل جهـاز تحلیـل األحمـاض األمینیـة التوصـف فـي األ

near infra red (NIR) للحـصول علـى نتـائج اجهـزة التحلیـل الكیمیـائي معظـم الحاسـوب فـي قـد ادخـل و .دقیقة

7

یرها للتحلیلأخذ العینات وتحض) 2(محاضرة Sampling and preparing to analysis

ة فیــه ینطــوي العینــات والنمــاذج مــن المــادة األســاس او ســحبها مــن المكــان او العــضو الموجــوداخــذ

لتحلیـل الكیمیـائي ألن اي اخـتالف بـین العینـة واألسـاس اي ویمثـل العملیـة الممهـدة ل، على اهمیة كبیـرة جـداق للمــادة األســاس فــي العینــة المؤخــوذة منهــا ســیعطي نتــائج غیــر دقیقــة وال یعــول علیهــا عــدم التمثیــل الــدقی

:وتتضمن عملیة اخذ النماذج وتحضیرها الخطوات التالیة، كثیرا washing الغسل -اوال

tap water والنباتات والمحاصیل العلفیة حال جلبها الى المختبر بالماء العادي تغسل األعالف ا یمكـــن اســـتخدام محالیـــل مخففـــة مـــن المنظفـــات غیـــر األیونیـــة علـــى ان تجـــرى عملیـــة الغـــسل بالـــسرعة كمـــ

ویفضل ان یعقب الغسل بالمـاء العـادي الغـسل بالمـاء المقطـر وبعـد ، الممكنة لتقلیل الفقد في األجزاء الذائبةلمـاء ال یعـد ضـروریا اذا ان الغـسل با. ذلك تجفف باستخدام قطعة مـن القمـاش النظیـف او األنـسجة الورقیـة

ئــذ یكفـي ازالــة األتربــة عنهــا بالفرشــاة دكانـت المحاصــیل او األعــالف المــراد تحلیلهـا نظیفــة او متربــة فقــط عنالعادیــة او باســتخدام منفــاخ الهــواء الیــدوي او الكهربــائي وهــو مفــضل فــي الواقــع عــن الغــسل ألنــه قــد یتعــذر

، تخدام القمــاش وازالــة الرطوبــة التــي لحقــت بــه نتیجــة للغــسلغــسول بالمــاء باســمالتجفیــف التــام للمحــصول الكمــا ال یوصــى بالغــسل لكــل األعــالف والمحاصــیل فالــسایلج یــؤدي غــسله الــى فقــد فــي جــزء مــن األحمــاض

ویـشمل ، العضویة الناتجة خالل التخمرات فضال عـن احتمـال حـصول فقـد فـي الـسكریات الذائبـة ان وجـدتبـوب المتخلفــة مــن الــصناعات الغذائیـة والبنجــر الــسكري والمكمــالت الــسائلة األمتنـاع عــن الغــسل نمــاذج الح

.والمنتجات الثانویة لمصانع التعلیب وغیرها والتي من الشائع ارسالها الى المختبر لغرض التحلیل Size of sample العینة حجم-ثانیا

ا یجـري اخـذ عینـة صـغیرة منهـا ألجـراء المـادة العلفیـة او المحاصـیل المـراد تحلیلهـمن نظافة بعد التأكد واذا كانــت الكمیــة المرســلة الــى المختبــر قلیلــة فلــن یكــون هــذا ، الخطــوات التالیــة الممهــدة للتحلیــل الكیمیــائي

ویتم اخذ العینات والنماذج اعتمادا على نوع المادة ومستوى الدقـة المطلـوب توخیهـا وذلـك . األجراء ضروریابمعنـى اخـر كـم ، تـستخدم فـي تقـدیر كـل عنـصر مـن عناصـر الغـذاء المختلفـةعـدد العینـات التـي من خالل

فـي العـادة ویمكـن ان یعـاد فـي duplicateمرة سیعاد التحلیل لتقدیر عنصر معین؟ اذ یعاد التحلیـل مـرتین دم وقد یلجأ القائم بالتحلیل الى اعادة احـد التقـدیرات او اكثـر امـا لعـ، triplicateحاالت محددة ثالثة مرات

او صـــالحیة المحالیـــل الكیمیائیـــة المـــستخدمة او قناعتـــه بالنتـــائج او ألســـباب فنیـــة تـــرتبط بظـــروف المختبـــر بــصورة عامــة تراعــى تلــك الظــروف عنــد تحدیــد الكمیــة المــسحوبة مــن المــادة . األجهــزة او اي اســباب اخــرى

. المراد تحلیلها

8

Sampling اخذ العینات -ثالثائــة المــادة العلفیــة المــراد تحلیلهــا ألخــذ العینــة منهــا بطریقــة تــضمن العــشوائیة وعــدم یجــري تحــضیر وتهی

: وكما یليالتحیز من جهة والتمثیل الدقیق لتلك المادة من جهة اخرىالكمیــة المرســلة الــى المختبــر علــى ســطح خلــطت: cereals and powdersالحبــوب والمــساحیق - 1

ویـــتم فــي البدایـــة تقــسیم الكمیـــة الـــى . قیلة الــصلبة غیـــر مــاص ویفـــضل اســتخدام األســـطح الـــصصــقیل ویجري خلط كل كومة على حدة ویحـتفظ بنـصفها ویهمـل النـصف stackمجموعات على شكل كومة

ثـم ، األخر ثم تخلـط األنـصاف المتبقیـة لتـصبح كومـة واحـدة تمثـل نـصف الكمیـة المرسـلة الـى المختبـر بنــصفها ویهمــل النــصف األخــر ویتكــرر ذلــك لحــین ویحــتفظیــتم التعامــل معهــا بــنفس األســلوب الــسابق

.األبقاء على كمیة مناسبة للخطوات التالیة من التحضیر للتحلیل ســطحتقطــع الكمیــة المرســلة مــن المــادة الخــضراء علــى: green roughagesاألعــالف الخــضراء - 2

ســـحق ویـــستخدم للتقطیـــع شـــفرة حـــادة لـــضمان التقطیـــع بـــدون ان یحـــدثاو بالســـتیكي ســـمیك معـــدني ، تقــسم األجــزاء المقطعــة ویــتم التعامــل معهــا بــنفس الطریقــة الــسابقة، وخــروج العــصارة مــن تلــك المــادة

ویتوقــف تكـــرار الخلـــط والتقـــسیم الـــى كومـــات واألحتفـــاظ بالنـــصف واهمـــال النـــصف األخـــر علـــى نـــسبة یتطلـب اد تحلیلهـا حیث ان زیـادة الرطوبـة فـي المـادة المـر، الرطوبة التقریبي وهو امر یعتمد على الخبرة

لضمان توفر كمیة مناسبة مـن العینـة بعـد تجفیفهـا )والعكس صحیح(األحتفاظ باكبر كمیة منها كعینة .بحیث تكون كافیة ألجراء كل التحلیالت المطلوبة وبأي تكرار قد یلجأ الیه

المختبـر یجـري التعامـل مـع المـواد العلفیـة الجافـة المرسـلة الـىDry roughages:األعشاب الجافة - 3 :على النحو التالي

الى اطوال متماثلة ویـستخدم مقـص حـاد لهـذا ) سیقان واوراق وجذور( تقطیع الكمیة المرسلة بالكامل - طولیـا ایـضا ثـم یقطـع كـل جـزء طولیـا الـى جـزئین ویقطـع كـل جـزء، الغرض لضمان عدم تفتـت الكمیـة

مــع بعــضها خلطــا جیــدا وتقــسم الــى ثــم تقطــع األجــزاء الطولیــة الــى اجــزاء عرضــیة تخلــطالــى جــزئین . قسمین یحتفظ باحدهما ویهمل الثاني ویتكرر ذلك بنفس األسلوب السابق

فـي حالـة األعــالف الخـضراء كمـا هـو الحـال مـع األعـالف الجافــة التقطیـع الطـولي یالحـظ عـدم اجـراء العــصارة النباتیــة التــي وذلــك لتجنــب ســحق المــادة العلفیــة الخــضراء المــراد تحلیلهــا وفقــد جــزء منهــا مــع

یمكن خروجها فیما ال یحدث ذلك في حالة األعالف الجافة انما قـد یتفتـت جـزءا منهـا وهـو امـر ان لـم .یجري تجنبه فانه لن یضر كثیرا ألنه ال یؤدي الى فقد اي جزء منها

صل األوراق المرســل الــى المختبــر بكثافــة ورقیــة ذات مــساحة ســطحیة كبیــرة یفــضل فــ تمیــز العلــفاذا وتخلــط ، تقطــع الــسیقان علــى حــدة وبــنفس االســلوب المــذكور انفــا وتقطــع األوراق بــالثرم، عــن الــسیقان

بـــصورة منفـــصلة ثـــم تخلـــط مـــع بعـــضها خلطـــا جیـــدا ویجـــري تقـــسیمها عـــدة مـــرات و اجـــزاء كـــل منهمـــا

9

ــــة كافیــــة مــــن العلــــف ألجــــربنــــصف وتتكــــرر العملیــــة حتــــى بقــــاءحتفــــاظ ألواســــتبعاد النــــصف وا اء كمی . التحلیالت المطلوبة

Drying التجفیف -رابعا، األختیـــار العـــشوائي للعینـــة یـــتم تجفیفهـــا الـــى الـــوزن الثابـــت فـــي الفـــرن الخـــاص بـــالتجفیف بعـــد

. ویفضل استخدام اطباق من األلمنیوم الرقیـق لتجفیـف كمیـة مناسـبة مـن المـادة العلفیـة المـراد تحلیلهـا الحقـاكمـــا ان التجفیـــف قـــد یجـــرى wet material اد یوصـــى بـــاجراء تحلیلهـــا وهـــي رطبـــةعلمـــا ان بعـــض المـــو

كمـــا هـــو الحـــال مـــع الـــسایلج وبعـــض او بطریقـــة التقطیـــر بـــالتولوین freeze drying بطریقـــة التجمیـــد كمـا تهـدف بعـض الدراسـات الـى التحـري عـن تـأثیر طریقـة التجفیـف ، األعالف المتخمرة او بعض مكوناتهـا

.اسات الخاصة باألداء كالتناول من الغذاء والهضمعلى بعض القی Milling الطحن -خامسا

حیــث نــة المختبریــة او اي مطحنــة مناســبة اخــرى بح بعــد تجفیــف العینــات یــتم طحنهــا باســتخدام المطحالیـل المتتحول العینة الى مسحوق ناعم لزیادة المساحة الـسطحیة للعینـة العلفیـة التـي سـتتعرض الـى تـأثیر

وبنــاءا علــى ذلــك فــان تجفیــف ، او األســتخالص وزیــادة التجــانس فــي مكوناتهــا الكیمیائیــة الخاصــة بالهــضم . روتینیـــا فـــي المختبـــرات العلمیـــةعمـــاللتحلـــیالت المختلفـــة علیهـــا یعتبـــر ألجـــراء االعینـــات وطحنهـــا تمهیـــدا

Temporary storage of dried samplesالخزن المؤقت للعینات المجففة -سادسایمكــن فــي ظــروف مــسیطر علیهــا مــع تــوفر الخبــرة (بــالنظر الــى التتــابع الــذي تجــرى بــه التحلــیالت

، فــان ذلــك یتطلــب األحتفــاظ بالعینــات لفتــرة معینــة مــن الــزمن) الكافیــة اجــراء اكثــر مــن تحلیــل فــي آن واحــدضــعها فـي حاویــات بالســتیكیة او مــن التلــف بعـد وجففــة فــان ذلـك ســیؤمن سـالمتهاوطالمـا كانــت العینـات م

زجاجیة وخزنها في ظروف المختبر دون الحاجـة الـى الخـزن بالتبریـد او التجمیـد الـذي یعـد ضـروریا للحفـاظ كمــا یتوجــب الكتابــة . فــي هــذه الحالــةعلــى العینــات الرطبــة فــضال عــن الحاجــة الــى تــوفر الطاقــة الكهربائیــة

انــا برمــوز تـدل علــى نــوع العینــة المحفوظــة وتــدرج مــدلوالت او األكیــاس احیlabeling علـى تلــك الحاویــات تلـك الرمـوز فـي سـجل خـاص یحـتفظ بـه فـي المختبـر ویـدون فیـه كـل المعلومـات الفنیـة الخاصـة بـالتحلیالت

.الكیمیائیة

Essential rules in chemical analysisقواعد اساسیة في التحلیالت الكیمیائیة یة التي یجب مراعاتها والتقید بها عند اجراء التحلیل الكیمیائي تشمل القواعد األساس : النظافة التامة للمعدات واألدوات المستخدمة-1

ویـــتم التنظیــف عـــادة . تعــرف المعــدات واألدوات النظیفـــة بلمعانهــا وانـــسیاب المــاء علـــى ســطوحهاآلزالــة ثــم اعــادة الغــسل بالمــاء العــادي ســفنجات والفرشــاة او األمنظــف المحلول البالغــسل بالمــاء العــادي وبــ

10

آثار المادة المنظفة واخیرا الغـسل بالمـاء المقطـر لعـدة مـرات ویفـضل تجفیـف األدوات الزجاجیـة بـالفرن لفتـرة .زمنیة قصیرة قبل وضعها في اماكنها المحددة

dipotassium غــم مــن مــادة 10ویمكــن اســتخدام محلــول تنظیــف خــاص یحــضر فــي المختبــر باذابــة

cromate مل من حامض الكبریتیك المركز لتنظیف األدوات والمعـدات الزجاجیـة التـي تجمعـت 100في والتي ال یمكـن ازالتهـا بـالتنظیف األعتیـادي ویمكـن تفـادي األضـطرار للتنظیـف بهـذا فیها الرواسب المتكلسة

. امهاالمحلول عن طریق التنظیف المستمر للزجاجیات حال األنتهاء من استخد balances الموازین -2

:یراعى اتباع القواعد التالیة عند استخدام الموازین المختبریة في التحلیالت الكیمیائیة یجـــب وضـــع المـــوازین علـــى منـــضدة او اي ســـطوح تتمیـــز بالـــصالبة والثبـــات لتالفـــي األهتـــزاز، وال -

ان یـؤدي الــى حـصول اخطــاء فــي ینـصح بنقــل المـوازین الحــساسة ألن تغیـر وضــعها األفقـي یمكــن هـــا الــى تغییــر ضـــبطها ممــا یـــستدعي الــوزن وفــي بعـــض انــواع المــوازین یمكـــن یــؤدي مجــرد تحریك

.التوازن عادة تصفیرها عن طریق ضبط موقع فقاعةایـــدة لتالفـــي ســـقوط الـــشعر اســـتخدام الفرشـــاة الجافـــة فـــي تنظیـــف المـــوازین ویراعـــى اختیـــار انـــواع ج -

اســتخدام المناشــف او األســفنجات المبللــة اال عنــد الــضرورة مــع األبتعــاد وال یوصــى ب، الخــاص بهــا .مواقع القابس الكهربائي ومفاتیح التشغیل والضبطعن األماكن الحساسة في الموازین مثل

یجب وزن العینات عندما تكون باردة وتجنب التسرع ووزن الجفنات والـدوارق المـستخدمة فـي الـوزن - .بعد اخراجها من الفرن حتى تبرد desiccator توضع في الدیسیكیتر ولتأمین ذلك، وهي ساخنة

.یجب ان تتم عملیة الوزن بسرعة لتالفي تجمع الرطوبة على العینات المراد وزنها - الـذي توضـع فیـه العینـة غیـر مهـم یمكـن تـصفیر المیـزان مـع containerعندما یكـون وزن الوعـاء -

.عد وضعها فیه مباشرةالوعاء لیتسنى تسجیل وزن العینة فقط بیجـــب مراعـــاة ان یقـــوم بـــالوزن فـــي كـــل مـــا یتعلـــق بتقـــدیر معـــین نفـــس الـــشخص وباســـتخدام نفـــس -

.المیزان

Volumetric measurement equipmentsمعدات القیاسات الحجمیة ـــدوارق الحجمیـــة cylinder تـــشمل تلـــك المعـــدات األســـطوانة المدرجـــة volumetric flasks وال

وتــستخدم glass consواألقمـاع الزجاجیــة beakersوالبیكـرات conical flasksدوارق المخروطیـة والـوتـــستخدم . فـــي نقـــل وتحـــضیر المحالیـــل الكیمیائیـــة المـــستخدمة فـــي التحلیـــل الكیمیـــائيجمیـــع تلـــك األدوات

وهـي buretteكمـا تـستخدم الـسحاحات ، لسحب واضافة كمیـات محـددة مـن المحالیـلpipettesالماصات انبوبة زجاجیة طویلة مدرجـة تمـأل بمحلـول الحـامض او القاعـدة تـستخدم لمعادلـة القاعـدة او الحـامض علـى

.التوالي حیث یستدل على نقطة التعادل من خالل تغیر لون المحلول

11

مفاهیم عامة في تحضیر المحالیل الكیمیائیة) 3(محاضرة

ذرة هیــــدروجین فقــــدت ( الهیـــدروجین القابــــل للتـــأین هــــي المركبـــات التــــي تحتـــوي علــــى: Acids ضحمـــااال ومتعـــددة البروتـــون CH3COOH و HClاحادیـــة البروتـــون مثـــل وتقـــسم الـــى احمـــاض ) الكترونهـــا الوحیـــد

.فلزیة مع الماءال وتحضر بشكل عام من تفاعل األكاسید الH3PO4 و H2SO4مثل

ینــتج مــن التحلــل المــائي و (¯OH)كــسیل هــي المركبــات التــي تحتــوي علــى ایــون الهیدرو :Basesالقواعــد وCa(OH)2 ومتعـــــددة الهیدروكــــــسید مثــــــل NaOHللقواعـــــد وتــــــصنف الــــــى احادیـــــة الهیدروكــــــسید مثــــــل

Al (OH)3 ،وتحضر من تفاعل األكاسید الفلزیة مع الماء.

حمــاض بعــض المركبــات تحتــوي جزیئاتهــا علــى ذرات هیــدروجین غیــر قابلــة للتــأین فــي المــاء فهــي لیــست اوالمركبات التي تحتوي جزیئاتهـا علـى مجموعـة هیدروكـسیلیة غیـر قابلـة للتـأین فـي المـاء CH4مثل المیثان

.C2H5OHفهي لیست قواعد مثل الكحول األثیلي

هــي المــواد الناتجــة مــن احــالل األیــون الموجــب للقاعــدة محــل بعــض او كــل الهیــدروجین : Saltsاألمــالح .ن تفاعل األحماض مع القواعدوتنتج األمالح م، الحامضي

(+H)المفهـــوم القــــدیم للحـــامض هــــو المـــادة التــــي تطلـــق فــــي محلولهـــا المــــائي ایـــون الهیــــدروجین الموجــــب

امــا المفهـوم الحــدیث فــان . (¯OH)والقاعـدة هــي المـادة التــي تطلــق فـي محلولهــا المــائي ایـون الهیدروكــسید زوج مـن األلكترونـات والقواعـد هـي المـواد التـي لهـا القابلیـة األحماض هي المواد التي لها القابلیة على تقبل

.على منح زوج من األلكتروناتبصورة عامة تمیل ذرات العناصر الفلزیة الـى فقـدان األلكترونـات والتحـول الـى ایونـات موجبـة لـذلك تحـضر

كتــــساب األلكترونــــات بینمــــا تمیــــل ذرات العناصــــر الالفلزیــــة أل، القواعــــد باذابــــة األكاســــید الفلزیــــة فــــي المــــاء .والتحول الى ایونات سالبة لذلك تحضر األحماض باذابة األكاسید الالفلزیة في الماء

:تحضیر المحالیل

یـستفاد منـه (1N) عیـاري 1 لألحمـاض والقواعـد بتركیـز stock solutions تحضر المحالیل األساسـیة :لتحضیر اي محلول آخر وفقا للقانون العام المعروف

2 تركیز× 2حجم = 1 تركیز× 1حجم

12

غـم مـن 40.5 باذابـةNaOH محلـول هیدروكـسید الـصودیوم مـن(1N) عیـاري 1 ذلـك تحـضیر علـىمثـال غـم مـن القاعـدة 42واذا كانـت القاعـدة متمیعـة یـتم اذابـة ، حبیبات القاعـدة النقـي فـي لتـر مـن المـاء المقطـر

.في لتر من الماء المقطر : من محلول القاعدة وبموجب المعادلة المذكورة0.312Nمحلول لتر من ولتحضیر

1 × 2ح = 0.312 × 1000 تخفف الى لتر ماء مقطر1N مل من محلول القاعدة 312=

فـــي حالـــة األحمـــاض المركـــزة تـــستخدم المعلومـــات التـــي تثبـــت عـــادة علـــى قنینـــة الحـــامض المركـــز لحـــساب ضیر محالیل اخرى من الحامض وباي تركیز وتحstock solutionsعیاریة األحماض المركزة واعتبارها

ة specific weight (SP)فـاذا كـان الـوزن النـوعي ى القنین ة عل ات المثبت ز 1.84حسب المعلوم والتركی : فان0.96

1.84 ×0.96 ×1000

عیاري 36= = العیاریة

98 ÷ 2

علـى سـبیل المثـال N 0.128محلـول حـامض الكبریتیـك عیاریـة لتـر مـن وعنـدما تظهـر الحاجـة لتحـضیر :فیمكن الرجوع الى القانون العام

V2 ×N2 = V1×N1 او 2 ت× 2ح = 1 ت× 1 او ح2 تركیز× 2حجم = 1 تركیز× 1حجم 36 × 2ح = 0.128 ×1000

حامض المركز یكمل الحجم الى لتر من الماء المقطر مل من ال3.356=

1000 × التركیز× الوزن النوعي

= العیاریة

الوزن المكافىء

13

ویوفر الجدول التالي المعلومات الخاصة باألحماض الشائعةالوزن الصیغة الحامض

الجزیئيالوزن النوعي

العیاریة %النقاوة التقریبیة

الحجم الالزم 1Nلتحضیر

ملCH3COOH 60 1.05 99.5 17 5.7 األسیتیك

ملHCl 36.5 1.19 38 12 89 الهیدروكلوریك

ملHNO3 63 1.42 70 16 62 النتریك

ملHClO4 100.5 1.54 60 9 68 البیركلوریك

ملH3PO4 98 1.69 85 45 23 الفوسفوریك

ملH2SO4 98.1 1.84 96 36 28 الكبریتیك

ملHCOOH 46 1.20 88 24 42 الفورمیك

ملHF 20 1.15 26.3 38 الهیدروفلوریك

غم من المذیب100 هي عدد غرامات المذاب في :لمئویة الوزنیةالنسبة ا

100 × ]) وزن المذیب+ وزن المذاب (÷ وزن المذاب [ غـم مـن الـسكر فـان النـسبة الوزنیـة للـسكر فـي هـذا 10 غـم مـن المـاء و 40فاذا احتوى محلول معین علـى

:المحلول] 10 ÷) 10 + 40 ([ × 100 = 20%

المـــولي ألحـــد مكونـــات المحلـــول هـــو نـــسبة عـــدد مـــوالت المـــذاب او المـــذیب الـــى الكـــسر:الكـــسر المـــولي المجموع الكلي لموالت مكونات المحلول

مجموع عدد موالت مكونات المحلول÷عدد موالت المذاب = الكسر المولي للمذاب مجموع عدد موالت مكونات المحلول÷عدد موالت المذیب = الكسر المولي للمذیب

100 ×حاصل ضرب الكسر المولي = مولیة النسبة ال غـم 34.2مـول وقـد احتـوى المحلـول علـى / غـم342وزنـه الجزیئـي C12H22O11 محلـول الـسكروز :مثال

. غم من الماء180من السكر و الوزن الجزیئي ÷الوزن = عدد موالت السكر

مول0.1 = مول/ غم342 ÷ غم 34.2 = مول10= 18 ÷180= ء عدد موالت الما

0.09) = 10 +0.1 (÷0.1 = الكسر المولي للسكر

14

0.99) = 10 +0.1 (÷10= الكسر المولي للماء

غــم مــن المــاء، الــوزن الجزیئــي 72 غــم مــن هیدروكــسید الــصودیوم فــي 4 محلــول مكــون مــن اذابــة :مثــال .18 وللماء 40للقاعدة

0.1= 40÷4= عدد موالت القاعدة في المحلول 4= 18÷72= عدد موالت الماء في المحلول

4.1 = 4 +0.1= المجموع الكلي للموالت في المحلول 0.024 = 4.1 ÷ 0.1= الكسر المولي للقاعدة 0.975 = 4.1 ÷ 4) = الماء(الكسر المولي للمذیب

Molalityالمواللیة

غم من المذیب1000 كغم او 1 هي عدد موالت المادة في كغم/مول= كتلة المذیب بالكیلوغرام ÷عدد موالت المذاب = )المحلول( المذاب مواللیة

تساوي غم ماء فان مواللیة السكر 360 غم من الكلوكوز مذابا في 36محلول محضر من الوزن الجزیئي /الوزن = عدد موالت السكر في المحلول

مول0.2 = 180 ÷ 36 = كغم0.36= كغم / غم1000 ÷ غم 360= بالكیلوغرامات ) الماء(لمذیب كتلة ا

كغم ماء/ مول سكر0.55 = 0.36 ÷ 0.2= مواللیة السكر في المحلول

Molarityالموالریة

هي عدد موالت المذاب في لتر من المحلول لتر/ مول=حجم المحلول باللتر ÷ عدد موالت المذاب = المحلول ) المذاب(موالریة

فــي قنینــة حجمیــة ســعة ا لتــر ) مــول0.2( غــم مــن الكلوكــوز بقلیــل مــن المــاء المقطــر 36اذا اذیبــت : مثــال فان الموالریة 1000واكمل الحجم بالماء المقطر الى

لتر/ مول0.2= لتر1 ÷ 0.2 السكر فان مل بعد وضع 100 ما وحضر بها المحلول وذلك بمألها الى 100اما اذا كانت القنینة سعة

لتر/ مول2 = 0.1÷ 0.2= موالریة المحلول

15

تقدیر نسبة الرطوبة والمادة الجافة) 4(محاضرة Determination of moisture and dry matter

یعتبــــر تجفیــــف العینــــات احــــد اهــــم الخطــــوات الخاصــــة بالتحلیــــل الكیمیــــائي واول التقــــدیرات الواجــــب

وألن بـــاقي التقــدیرات یفـــضل اجرائهـــا فـــي جافــة ألنهـــا تـــشمل جمیـــع عناصــر الغـــذاء اجرائهــا لتقـــدیر المـــادة الاذ لــیس مــن المجــدي تقــدیر عنـــصر كــالبروتین علــى ســبیل المثــال فــي نمــوذج ال تـــشكل ، النمــاذج المجففــة

وان عناصــر الغــذاء ســواء ، المــادة الجافــة فیــه ســوى الربــع او الثلــث كمــا هــو الحــال فــي األعــالف الخــضراء . قة بالطاقة او النتروجین هي موجودة في الواقع في الجزء الجاف ولیس في الجزء الرطبالمتعل

Materials and equipments المواد واألجهزة المستخدمة

: تضم األجهزة والمعدات المستخدمة في تقدیر نسبة الرطوبة والمادة الجافة ما یلي drying ovenفرن تجفیف - 1 sensible balanceمیزان حساس یقیس الوزن الى رقمین عشریین - 2 desiccatorوعاء زجاجي منضدي لتبرید الجفنات الخزفیة الساخنة - 3 porcelain cruciblesجفنات خزفیة او زجاجیة تتحمل الحرارة العالیة - 4 spatulaملعقة صغیرة ألخذ العینات - 5 clippers ملقط او ماسك معدني لمسك الجفنات الساخنة - 6

Procedureطریقة العمل

:تتضمن طریقة العمل الخطوات التالیة ˚م100 دقیقـــة علـــى درجـــة حـــرارة 15توضـــع الجفنـــة الخزفیـــة النظیفـــة فـــي الفـــرن الكهربـــائي لمـــدة - 1

لتبریـــد desiccator ان وجـــدت ثـــم تنقـــل الجفنـــة الـــى الدیـــسیكیتر لـــتخلص مـــن الرطوبـــةلـــضمان ا . دقیقة30-15الجفنات الساخنة لمدة

.وزن الجفنة الفارغبدقة ویمثل توزن الجفنة الفارغة والنظیفة والمجففة - 2فـي الجفنـة الخزفیـة الموجـودة علـى المیـزان ) غیـر مجففـة( غم من العینة الرطبة 4-2توضع كمیة - 3

.وزن الجفنة مع العینة قبل التجفیفوتوزن بدقة لیمثل باستخدام الملعقة لتبقــى فیـــه بعــد غلقـــه لمـــدة ˚م100الــى الفـــرن وتثبــت درجـــة الحــرارة علـــى تنقــل الجفنـــة مــع العینـــة -4

over nightومن األجـراءات الروتینیـة تـرك الجفنـات فـي الفـرن الـى الیـوم التـالي . ساعة18-24الذي یمكـن األسـتدالل علیـه عـن طریـق لضمان التجفیف التام للعینات والوصول الى الوزن الثابت

وعنــدما ال ، شــریطة ان یــتم ذلــك والجفنــة بــاردة الخزفیــة بفــارق زمنــي بــسیط الــوزن المتكــرر للجفنــة

16

یتغیـــر الـــوزن بــــین وزنـــین متتـــالیین فــــان ذلـــك ســـیدل علــــى الوصـــول الـــى الــــوزن الثابـــت وحــــصول .التجفیف التام

عنــد الوصـــول الــوزن الثابـــت او مــرور الوقـــت الكــافي لـــذلك یــتم قطـــع التیــار الكهربـــائي عــن الفـــرن -5دة desiccator قــصیرة یفــتح بعــد ذلــك وتنقــل الجفنــة الــساخنة الــى لفتــرة وتركــه رد لم 30-15 لتب

.دقیقةالباردة ویمثل ذلك وزن الجفنة مـع العینـة بعـد التجفیـف ویكـون ذلـك الـوزن اقـل مـن یتم وزن الجفنة -6

.وزن الجفنة والعینة قبل التجفیف نتیجة لفقد الرطوبة منها عند وضعها في الفرن

لخاصة بتقدیر نسبة الرطوبة والمادة الجافةالحسابات ا Calculations of moisture and dry matter ratio

وزن الجفنة فارغة–وزن الجفنة والعینة قبل التجفیف = وزن العینة وزن الجفنة والعینة بعد التجفیف-وزن الجفنة والعینة قبل التجفیف= وزن الرطوبة

وزن الرطوبة-ینةوزن الع= وزن المادة الجافة

وزن الجفنة والعینة بعد التجفیف -الجفنة والعینة قبل التجفیف وزن

100 × = نسبة الرطوبة

وزن العینة

نسبة الرطوبة– 100= نسبة المادة الجافة

17

تقدیر الرماد والمادة العضویة) 4(محاضرة Determination of ash and organic matter

ترتـب وی، یعتبر تقدیر الرماد والمادة العضویة فـي العینـات المرحلـة الثانیـة فـي التحلـیالت الكیمیائیـة

ادة العـــضویة یمثــــل جـــزء المــــادة الجافـــة الــــذي یتـــضمن العناصــــر التقـــدیر اهمیــــة كبیـــرة ألن المــــ ذلــــك علـــىالعضویة التي تجهز الحیـوان بالطاقـة والنتـروجین وتـستخدم نـسبة المـادة العـضویة فـي العینـة لحـساب الجـزء

بطــرح مجمــوع نــسب البــروتین الخــام والــدهن nitrogen free extract (NFE)الكربوهیــدراتي الــذائب .ة المادة العضویةواأللیاف الخام من نسب

Materials and equipmentsالمواد واألجهزة المستخدمة

: ما یليعضویة والمادة الماد تضم األجهزة والمعدات المستخدمة في تقدیر نسبة الر burning oven (furnace)فرن الحرق - 1

sensible balanceمیزان حساس یقیس الوزن الى رقمین عشریین - 2 desiccatorضدي لتبرید الجفنات الخزفیة الساخنة وعاء زجاجي من - 3 porcelain cruciblesجفنات خزفیة او زجاجیة تتحمل الحرارة العالیة - 4 spatulaملعقة صغیرة ألخذ العینات - 5 clippersملقط او ماسك معدني لمسك الجفنات الساخنة - 6 .رةكفوف قماشیة سمیكة مغطاة بطبقة رقیقة من نسیج لماع لعكس الحرا - 7

Procedureطریقة العمل

: تتضمن طریقة العمل الخطوات التالیة ˚م100 دقیقـــة علـــى درجـــة حـــرارة 15توضـــع الجفنـــة الخزفیـــة النظیفـــة فـــي الفـــرن الكهربـــائي لمـــدة - 1

لتبریـــد desiccator ان وجـــدت ثـــم تنقـــل الجفنـــة الـــى الدیـــسیكیتر لـــتخلص مـــن الرطوبـــةلـــضمان ا .قیقة د30-15الجفنات الساخنة لمدة

.وزن الجفنة الفارغتوزن الجفنة الفارغة والنظیفة والمجففة بدقة ویمثل ذلك - 2 غــم مــن العینــة المجففــة فــي الجفنــة الخزفیــة الموجــودة علــى المیــزان باســـتخدام 2-1توضــع كمیــة - 3

.وزن الجفنة مع العینة قبل التجفیفالملعقة وتوزن بدقة لیمثل ویــتم تــشغیل الفــرن ، ˚م 500-400 ت درجــة الحــرارة علــىفــرن وتثبــتنقــل الجفنــة مــع العینــة الــى ال - 4

. ساعات5-4ومراقبة وصول الحرارة الى الحدود المثبتة وابقاء العینة فیه بعد ذلك لمدة

18

بعد مرور الوقت المحدد لذلك یتم قطع التیار الكهربـائي عـن الفـرن وتركـه لفتـرة زمنیـة مناسـبة لیبـرد -5 باســـتخدام ملقـــط طویـــل مـــع ارتـــداء الكفـــوف الخاصـــة عنـــد یفـــتح بعـــد ذلـــك وتنقـــل الجفنـــة الـــساخنة

. دقیقة30-15تبرد لمدة الضرورة وتوضع في الدیسیكیترة -6 تم وزن الجفن ویكـون ذلـك الــوزن وزن الجفنـة مــع العینـة بعـد الحــرقویمثــل ذلـك بعـد ذلـك البـاردة ی

.د وضعها في الفرن منها عنن وزن الجفنة والعینة قبل الحرق نتیجة لفقد المادة العضویةاقل م

قدیر نسبة الرماد والمادة العضویةالحسابات الخاصة بت Calculations of ash and organic matter ratio

وزن الجفنة فارغة– وزن الجفنة والعینة قبل الحرق= وزن العینة وزن الجفنة والعینة بعد الحرق-وزن الجفنة والعینة قبل الحرق= وزن الرطوبة

وزن الرطوبة-وزن العینة= المادة الجافة وزن

وزن الجفنة والعینة بعد الحرق-الجفنة والعینة قبل الحرق وزن

100 × = نسبة الرطوبة

وزن العینة

نسبة الرطوبة– 100= نسبة المادة الجافة

19

)مستخلص األیثر(تقدیر الدهن الخام ) 5(محاضرة Determination of fat (ether extract)

یثر او المذیبات العضویة یقصد بالدهن الخام او مستخلص األیثر كافة المواد الذائبة باأل

والزیوت والصبغات والشموع والفیتامینات الذائبة في الدهون وبعض األحماض وتشمل الدهون، رىاألخ .بر عن القیمة الظاهریةٕالعضویة والكحوالت ولذلك ال یعبر هذا التقدیر عن القیمة الحقیقیة للدهن وانما یع

والهكسان و petroleum ether مثل األیثر البتروليویمكن استخدام العدید من المذیبات العضویة درجة غلیانه النخفاض تلك المذیبات أفضل ان األیثر یعتبر إال diethyl etherاألیثر ثنائي األثیل

.في العینةالموجودة لمؤكسدة وغیر المؤكسدة كافة الدهون اإذابةولقدرته على الموجودة الدهونذابةال لمذیب العضويعلى فكرة التعویض المستمر با التقدیرألساس العلمي فياویعتمد

التي تعتمد Soxhlet method طریقة تقدیر الدهن في العینات طریقة سوكسلیت وتسمى، في العینةستخالص الدهن الموجود في العینة عن طریق تعریضها الى المذیب العضوي بشكل مستمر حتى اعلى

اسة تركیبه أو بوزن ما یفقد من یتم إذابة كل الدهون الموجودة فیها وجمعه لغرض وزنه والعمل على در . المفقود منها نتیجة لالستخالصالعینة الذي یمثل الدهن

دورق خاص مصنوع من زجاج : المستخدمة في االستخالص من ثالثة أجزاء هينظومة وتتألف الم مع، على الدورقبإحكام تربط أو التكثیفومنظومة خاصة بالتقطیر، المذیبتجمع فیه رة یمقاوم للحرا

الذي یمثل الملحق جزء األول الذي یمثل دورق المذیب والجزء الثاني جزء ثالث یتخذ موقعا وسطیا بین الیستبدل ، دمج األجزاء الثالثة في جهاز واحد یعمل وفقا للفكرة العامة المذكورةمؤخرا تم . الخاص بالتقطیر

ذات القواعد المسامیة التي ) الثمبالت( الصغیرةالزجاجیةالمعدنیة او حاویات من الفیه الدورق بمجموعةكما یؤمن الجهاز تقطیر ، أي محلول غیرهأوجراء الغسل بالماء تجعل من الممكن سحب المذیب وأل

.االستخالص بعملیة لالستمرارالمذیب وتكثیفه

Materials and equipmentsالمواد واألجهزة المستخدمة : ما یليعضویة والمادة المادي تقدیر نسبة الر تضم األجهزة والمعدات المستخدمة ف

جهاز سوكسلیت ألستخالص الدهن - 1

ھكسان او ایثر بترولي او اي مذیب آخر - 2 drying ovenفرن التجفیف - 3

sensible balanceمیزان حساس یقیس الوزن الى رقمین عشریین - 4 desiccatorوعاء زجاجي منضدي لتبرید الجفنات الخزفیة الساخنة - 5 filter paperرشیح ورق ت - 6

20

spatulaملعقة صغیرة ألخذ العینات - 7 .كفوف قماشیة سمیكة - 8

Procedure :طریقة العمل

:تتضمن طریقة العمل الخطوات التالیة والمطحونة ولفها بورقة ترشیح ووضعها في الجزء مجففة جیدا من العینة ال غم2- 1یتم وزن -1

.هابعد تسجیل رمز العینة علیالمنظومة أوالوسطي من الجهاز ة الترشیح الوسطي بحیث تغمر ورق الجزء فيلمذیب العضوي المستخدم مل من ا150- 100 سكب ی- 2

. المثبت باحكام اسفل هذا الجزء الى الدورق قد تنزل كمیة منهالملفوفة و كل تثبت، )ریمكن تشغیل كمنظومة واحدة او اكث ( منظومات6از استخالص الدهن من یتألف جه- 3

الزجاجیة التي تتكون في قاعدة الجهاز یحتضن منضومة األستخالص موجود هیتر مقعر علىمنظومة تثبیت تلك ویستخدم ل الهیترات المسالذي ی) یوزن بدقة قبل ربطه بالمنظومة(الدورق تبدأ بمن ثالثة اجزاء

وحامل ثقیلة تؤمن استقرارها اعدة قلف من اعدة الجهاز الصندوقیة مجموعة تتأومة عمودیا على قالمنظ .وماسك

على الجزء ثم تثبت منظومة التقطیربإحكام لمذیب الوسطي على الدورق الخاص با یثبت الجزء- 3الماسك كد من اتصاله با وضغطه الى األسفل بهدوء مع التأهذا الجزء یمینا ویسار تحریكالوسطي ب

وخروج الماء الساخن منها قبل إلیها هالتأكد من سالمة تدفق یفتح الماء لمأل المنظومة و.ثبت بالحاملمال . بتشغیل المسخناتالبدء

لینتقل بالغلیان والتبخر لمذیبم تشغیل المسخنات حیث یبدأ ا عند التأكد من الربط وانسیابیة الماء یت- 4فوفة بورقة العینة الملوتجمعه هناك مالمسا جزء الوسطي الى الاجعارالى منظومة التقطیر فیتكثف

متد زمن تدریجیا لذلك قد ی الدهن الموجود في العینةاستخالصیبدأ بعد تشبعها بالمذیب التيوالترشیح الدهن الموجود في كلاستخالصتم یحیث ، ة حسب نسبة الدهن في العینة ساع15االستخالص الى

ه الى المكثف لیرجع سائال الى لیتجمع فیه مع استمرار تبخر المذیب وعبور انتقاله الى الدورقالعینة و . الجزء الوسطي وتواصل عملیة األستخالص

منظم الحرارة ذلك اعتمادا على سرعة تكثف المذیب یتم التحكم بدرجة حرارة المسخنات من خالل - 5 الجزء الوسطي حیث یفضل ان یكون ذلك بطیئا نسبیا للسماح ببقاء المذیب مالمسا للعینة في ونزوله الى

. الوسطي اطول فترة ممكنةالجزء من األجزاء یقطع التیار الكهربائي عن المسخنات وتترك المجموعة المتكونةبعد انتهاء األستخالص - 6

ثم یجري رفع منضومة التكثیف بالتدویر والدفع الى األعلى ومن ثم فصل الجزء ، الثالثة لتبرد قلیالجزء في قنینة المذیب وسحب العینات واعادة ربط الوسطي من الدورق وسكب المذیب الموجود في هذا ال

21

األجزاء وایصال التیار الكهربائي والسماح بغلیان المذیب الموجود في الدورق المالمس للمسخن وتبخیره وتكثیفة في الجزء الوسطي ومراقبة مستوى المذیب بحیث یتم قطع التیار الكهربائي وفصل الجزء الوسطي

ب التصریف الى الدورق وذلك ألستعادة المذیب وجمعه ألستخدامه مرة اخرى قبل وصول المذیب الى انبو .في استخالص آخر

غلق التیار الكهربائي عن المسخنات واطفاء النقطة الكهربائیة یتم نتهاء من استعادة المذیب بعد األ- 7 مذیب بالتبخر الفي حمام مائي ساخن لطردوضع الدورق ی .بعنایة المنظومة تفكیكورفع القابس ثم یجري

المجفف الكهربائي على درجة ثم یتم تجفیف الدورق ب، ى الدهن المستخلص في قعر الدورقحیث سیتبق desiccator ینقل بعد تجفیفه من بقایا الماء الى المجفف الزجاجي وساعة0.5-1لمدة ° م100 حرارة

لفرق بین الوزن الثاني والوزن األول ویمثل ا، أخرى ویسجل وزنه بدقة دقیقة لیبرد ثم یوزن مرة30لمدة .لص من العینة والمتبقي في الدورقوزن الدهن المستخ

:كنسبة مئویة بالمعادلة التالیة یتم حساب نسبة الدهن - 6 وذلك بوزن العینات ، من عینة واحدة في آن واحدأكثرتقدیر الدهن في ل أخر أسلوب یمكن استخدام -

ها عن العینات األخرى كل عینة على انفراد ووضع عالمة خاصة على كل عینة لتمییزولفها بورقة ترشیحویتم األستخالص باألسلوب السابق ، الحاملة الوسطیةأحیانا یسمى الذيتوضع كلها في الجزء الوسطي

المتجمع في الدورق سیمثل مجموع ما تم الدهن ألنفي هذه الحالة مع عدم الحاجة الى وزن الدورق في حالة واحدة إال العملیةالناحیة ستخالصه من جمیع العینات وبالتالي سوف لن تكون له اهمیة من ا

تماما الملفوفة والموضوعة في الحامل الوسطي تمثل مكررات ذات وزن متماثلالعیناتوهي ان تكون كل ستفقده اال ان ما . لتحدید نسبة الدهن في تلك العینةتوسطا حینئذ یمكن االستفادة من المللعینة نفسه

األسلوب قد هذا مع ضرورة التذكیر بان سیكون معیارا لنسبة الدهن فیها عینة من وزنها كال على حدة بالمقارنة مع أطولیستوجب استخدام حجم اكبر من المذیب وامتداد فترة األستخالص الى وقت ربما یكون

المعاد تقطیره المذیب من ستعادة اكبر كمیة ممكنةه سیتیح الفرصة أل انإال، استخدام اسلوب وزن الدورق

وزنه قبل األستخالص–وزن الدورق بعد األستخالص

100 × = نسبة الدهن

وزن العینة

22

لى ما ستفقده تلك مرة اخرى على اعتبار ان نسبة الدهن في العینات سیتم تقدیره اعتمادا عالستخدامه .العینات من وزن

في فرن التجفیف الكهربائي على مقطر الساخن ثالث مرات ثم تجفیفالعینات بالماء اللفافات غسل ت - 8 دقیقة في المجفف الزجاجي 30 بعد تركها لمدة بدقةوزنتثم دقیقة 30-15لمدة ° م100رة درجة حرا

الفرق بین وزنها قبل األستخالص ووزنها بعده وزن الدهن في العینة ثم تحسب نسبة حیث سیمثل ،لتبرد :الدهن في العینة بالمعادلة التالیة

األستخالصبعد ما وزنه– األستخالص ورقة الترشیح والعینة قبلوزن

100 ×= نسبة الدهن

وزن العینة

23

تقدیر األلیاف الخام ) 5(ضرة محاDetermination of crude fiber (CF)

تخمر الذائبة وتمثل الجزء الذي ال ی غیر) المعقدة( الكربوهیدرات المتعددة أجزاء تشمل األلیاف الخام ، سریعة التخمر الكربوهیدرات أو كما هو الحال مع الكربوهیدرات الذائبة في الكرش والشبكیة رعةبس

سلیلوز والبكتینات واللجنین وان كان األخیر والهیمی یصوره رئیسیة من السلیلوز وتتكون األلیاف الخام . یدرات المعقدة لصلته الوثیقة بها الكربوه الىمركب غیر كربوهیدراتي إال انه یضاف

الخام في المواد ویعتبر تقدیر األلیاف الخام في العینة العلفیة غایة في األهمیة حیث ان نسبة األلیافغیر غذائیة وبخاصة للحیوانات بر دلیال على هضمها من قبل الحیوان وبالتالي تحدید قیمتها التالعلفیة تع

على ا لمجترات فأنها تتمكن من هضم مكونات األلیاف الخام جزئیا حیث یعتمد ذلك كثیر اإما، المجترةكرش نشاط أحیاء العدد و زیادةدرات الذائبة ل الكربوهی نسبة مناسبة منة وتوفر المصادر النتروجینی

. األلیاف الخامفیزها للحصول على باقي احتیاجاتها من الطاقة من مكونات تحلیل تحوالمجهریة موجودة في العینة العلفیة عن أخرىوتعتمد الفكرة األساسیة للتقدیر على التخلص من مركبات عضویة

ثم تلك المركبات و تحلیل ثم مع قاعدة مخففة ثانیا لهضمأوالطریق غلي العینة تباعا مع حامض مخفف الجزء المفقود من العینة العلفیة بالحرق بعد األلیاف الخام مثل تحرق المتبقي من العینة حیث س

. المركبات العضویة الموجودة فیهااستخالصلدهن منها وذلك ص ا ویفضل استخدام عینات خالیة من الدهن أي استخدام العینات التي سبق استخال

ألسلوب المتبع في من الصعب هضمه والتخلص منه بایتعرض للتأكسد ویصبح بالتالي ألن الدهن قد ألن الغلي بالقاعدة یمكن ان یؤدي الى حدوث قبل القاعدةكما یفضل الغلي بالحامض، التقدیر الحالي

، ن قد یؤدي الى فقد جزء من العینةراالتصوبن مما قد یجعل عملیة الغلي مع القاعدة مصحوبا بأزیز وفو األجراء غالبا ما یتخذ على الرغم من ان التصوبن یحدث عند غلي الدهون مع القواعد القویة إال ان ذلك

.لالحتیاط

Materials and equipmentsالمواد واألجهزة المستخدمة : ما یليعضویةة ال والمادماد تضم األجهزة والمعدات المستخدمة في تقدیر نسبة الر

fibertec systemلیاف جهاز أستخالص األ - 1

drying ovenفرن التجفیف - 2 burning oven (furnace)فرن حرق - 3 sensible balanceمیزان حساس یقیس الوزن الى رقمین عشریین - 3 desiccatorوعاء زجاجي منضدي لتبرید الجفنات الخزفیة الساخنة - 4

24

glass centrifugeنة بعد األستخالص جفنات زجاجیة لترشیح العی - 5 vacuum pumpمضخة شفط - 6 حامض الكبریتیك المركز - 7 هیدروكسید الصودیوم او هیدروكسید البوتاسیوم - 8 اوكتانول او دیكالین - 9

اسیتون -10 قطع خزفیة -11 spatulaملعقة صغیرة ألخذ العینات -12 .كفوف قماشیة سمیكة - 7

Procedureطریقة العمل

:طریقة العمل الخطوات التالیة تتضمن حیث ،قطعة من الورق العادي او الترشیح باستخدامالعینة المجففة والمطحونة غم من 2-1وزن ی-1 ویمكن ، وتوضع العینة على الورقة وهي في المیزان باستخدام الملعقةصفریعلى المیزان والورقة وضع ت

العینة بعد وتفرغ ، ومن ثم احتساب وزن العینة بالطرحة تسجیل وزن الورقة الفارغ ووزن الورقة مع العین . لتر 1 سعة األستخالص الخاص باأللیاف الخام ذلك في دورق أو بیكر

مل من حامض 7یحضر بتخفیف ( N 0.255 مل من حامض الكبریتیك المخفف 200اضافة - 2لمنع decline او الدیكالین octanol قطرات من األوكتانولمع ) الكبریتیك المركز في لتر ماء مقطر

مع وضع عدد من القطع ، تكون الرغوة التي قد تجعل من الصعب تعریض كل العینة الى تأثیر الحامض .یس التفاعل ومنع الفوران واألزیزخزفیة في الدورق لتجنالفض على اعلى درجة حرارة وعندما یبدأ الغلیان یتم خه المسخن الذي یتم تشغیلعلىالدورق یوضع - 3

لمدة نصف یستمر غلي العینة بالحامض ، منظالحرارة الى النصف حسب نوع التدریج الموجود في المیرفع من ثم ، قلیالیترك الدورق بعد قطع التیار الكهربائي عن المسخن حتى یبرد ، ساعة من بدء الغلیان

بالماء المقطر وتغسل العینة المتبقیةمحلول الحامضيترشیح المحتویات للتخلص من ال موضعه و . وتعاد الى البیكر بعد غسله بالماء المقطرالث مرات للتخلص من بقایا الحامضالساخن ث

الذي یركب على فوهة السحب glass centrifuge یستخدم لغرض الترشیح ما یعرف - 4section hole في مضخة الشفط ویتم سحب محلول الحامض وماء غسل البیكر المستخدم والماء

.لمقطر الساخن الذي تغسل به العینة المتبقیة ثالثة مراتا

25

یحضر (N 0.312 فالمخف NaOH هیدروكسید الصودیوممن محلول مل 200یتم اضافة - 5او الدیكالین مع اضافة قطرات من األوكتانول ) غم من حبیبات القاعدة في لتر ماء مقطر12.5باذابة

.ب السابقةطع الخزفیة لنفس األسباوعدد من الق یتم بعد، دة نصف ساعة أیضا من بدء الغلیانیعاد الدورق الى المسخن لغلي العینة مع القاعدة لم - 6

بالماء المقطر ما تبقى منها و تغسل أو ترشح العینة ذلك تبرید الدورق بتركه فترة زمنیة مناسبة ثم أي إذابةباألسیتون مرتین للتأكد من ثم تغسل اعدة المستخدمة خن ثالث مرات للتخلص من بقایا القالسا

ساخن وترشیحها للتخلص من مواد دهنیة قد تكون متبقیة في العینة ویعاد غسل العینة بالماء المقطر ال .السوائل

عند استخدام التقنیة األلیة الحدیثة في تقدیر األلیاف الخام یبقى األساس العلمي نفسه اال ان - 7بكمیة یتم الغلي tecator fibertec systemختلف فعند استخدام الكمیات والمحالیل یمكن ان ت

. هیروكسید البوتاسیوم من M 0.223 حامض الكبریتیك و من M 0.128محدودة من ساعة ثم تبرد العینة المجففة 5- 4لمدة ° م100یتم تجفیف العینة في المجفف الكهربائي على درجة - 8

ذلك الوزن األول الذي سیمثل العینة الجافة التي نزع منها الدهن في المجفف الزجاجي وتوزن بدقة فیكونوان هذا ، مرحلتي الغلي مع الحامض والقاعدةوالبروتین والسكریات الذائبة التي تم استخالصها خالل

العناصر تتأثر بالمحالیل الحامضیة والقاعدیة المخففة مع مجاف سیتضمن األلیاف الخام التي لالوزن ال . العینةة الموجودة فيالمعدنی

ثم تبرد العینة في المجفف ساعة 5- 4 لمدة° م500-400تحرق العینة في فرن الحرق على - 9بعد احتراق الزجاجي وتوزن بدقة فیكون ذلك الوزن الثاني الذي سیمثل محتوى العینة من الرماد فقط

ویتم حساب ، زن األول والوزن الثانيالفرق بین الوب الجزء الكربوهیدراتي المعقد من العینة الذي یحسب :د ذلك باستخدام المعادلة التالیةنسبة األلیاف الخام بع

حرق البعد العینة وزن– العینة بعد التجفیفوزن

100 × = نسبة األلیاف الخام

وزن العینة

26

تقدیر البروتین الخام ) 5(محاضرة Determination of crude protein (CP)

غیر والمركبات النتروجینیة true protein یشمل البروتین الخام كل من البروتین الحقیقي

أهمویعتبر هذا التقدیر من ، ت والیوریا واألمیدات والببتیدات األمونیوم والنتراأمالح مثل NPNالبروتینیة .یائیة للمواد العلفیةالتحلیالت الكیم

على یمكن ان یتضمن تركیبهاجین و البروتینات من الكربون والهیدروجین واألوكسجین والنترونتتكو .الكبریت والفسفور

حامض 25-22 قد تم الكشف عنوالوحدات األمینیة للبروتینات هي amino acidsاألمینیة األحماض ألمینیة مع بعضها بأواصر وترتبط هذه األحماض اأساسي غیر أو أساسیا معروف سواء كان أمیني .ببتیدیة

Basic of determination قدیراألساس الذي یعتمد علیة الت

سواء الموجود في تركیب البروتین الحقیقي امالح األمونیوم البروتین الى یعتمد التقدیر على تحویل وعند تقدیر النتروجین الكلي یتم حساب البروتین ، مواد النتروجینیة غیر البروتینیة الموجود في تركیب الأو

المواد العلفیة الذي یعتمد على افتراض یشمل كل 6.25باستخدام معادلة خاصة تتضمن المعامل :كوناتها تقریباومنتروجین كمعدل عام على الرغم من وجود بعض المواد % 16ان البروتین یحتوي في تركیبه على - 1

: اقل من تلك النسبة لذلك فانأو أكثریحتوي بروتینها على مثل النسبة المئویة للبروتین وت، N ×6.25كمیة = )16 ÷100(× كمیة النتروجین = كمیة البروتین

100 × ) وزن العینة÷كمیة البروتین في العینة (: یقة العلفي صحیح نسبیا عدا االفتراض بروتیني وقد یكون هذا أصلان كل النتروجین في المادة العلفیة هو من - 1

ونظرا .یلج والنباتات غیر مكتملة النضج فیها نسبة كبیرة مثل الساNPNبعض المواد التي یشكل المجتراتبینما ال تتمكن غیر غذائيلا من كل النتروجین االستفادة لكون الحیوانات المجترة تتمكن من

اكبر في أهمیةفان لتقدیر البروتین الخام ، خالیة من تلك المركبات تقریباأعالفهامن ذلك حیث تكون . القیمة الغذائیة للمادة العلفیةتقدیر

Stages of determination مراحل التقدیر

Kjeldahlستخدمة في تقدیر البروتین الخام في العینات العلفیة عل طریقة كلدال الماآللیةتعتمد methodالتي ترتكز على الخطوات التالیة :

27

Stages of digestion الهضم مرحلة -1علفیة باستخدام حامض مركز ویتم في هذه الخطوة هضم المادة العضویة الموجودة في المادة ال فتتحرر العناصر األساسیة المكونة للمادة العضویة بسبب تحطم مساعدعامل المزیج بوجود وتسخین

یتأكسد ، وثاني اوكسید الكربون والنتروجیناألواصر الببتیدیة وتكون غازات الهیدروجین واألوكسجین النتروجین لتكوین األمونیا التي مع جزء من الهیدروجین لتكوین الماء فیما یتحد الهیدروجین المتبقي

عملیة الهضم وخالل ، 2SO4(NH4)تفاعل مع حامض الكبریتیك المركز مكونة كبریتات األمونیوم ت .تتحول جمیع المواد النتروجینیة الموجودة في العینة العلفیة الى ملح كبریتات األمونیوم

2NH3 + H2SO4 → (NH4)2SO 4

Stages of distillationالتقطیر مرحلة -2 NaOHقاعدة قویة مع تفاعل كبریتات األمونیوم الناتجة من الخطوة األولى الخطوة في هذه یتم

لكبریتیك حامض االكبریتات المتكون نتیجة ألضافة كافیة لمعادلة تضاف الى العینة المهضومة بكمیة في خطوة الهضم فتتحرر األمونیا نتیجة لذلك ویتم تكثیفها في وسط استقبال یحتوي على المركز

ویدل ، ورديالذي یضاف الیه الكاشف األحمر فیتكون محلول وریكبال حامضض خفیف مثل حامكما في المعادلتین تغیر هذا اللون الى اللون األصفر على تكوین مركب بورات األمونیوم القاعدي

:التالیتین

(NH4)2SO4 + 2NaOH → 2NH3 + Na2SO4 +2H2O

3NH3 + H3BO4 → (NH4)3BO4

Stages of titrationالتسحیح مرحلة -3ضي محلول حامضدصفراء اللون ال بورات األمونیوم محلولتسحیح مرحلةهذه الیتم في

ألمونیا في مركب لتحدید كمیة الحامض الالزمة لمعادلة ا) او الكبریتیكحامض الهیدروكلوریك( حامض البوریكلمحلول ن الوردي حیث یستدل على ذلك من خالل ظهور اللو، بورات األمونیوم

: مجددا كما في المعادلة التالیة والصبغة

3HCl + (NH4)3BO4 → H3BO4 + 3NH4Cl

وتستخدم كمیة الحامض المخفف الالزم لمعادلة القاعدة في عملیة التسحیح مباشرة في معادلة كلدال :ا یلياب نسبة البروتین الخام وكملحس

28

1000 ÷) 100 × 14.008 × (6.25و یمثل حاصل هو ثابت كلدال في المعادلة 8.775العدد 14.0076 للنتروجین )الذریة الكتلة( یمثل الوزن المكافئ 14.008 العدد المستخدم في التسحیح تمثل عیاریه حامض الهیدروكلوریك0.1Nویمثل

تروجین الى بروتین ثابت تحویل الن6.25ویمثل العدد عینة وذلك لتقدیر اي بنفس الخطوات على دورق خالي من و اجراء كامل للتحلیل السابق : بالنك

وتطرح كمیة ، المحالیل المستخدمةأوالنتروجین غیر الراجع للعینة والذي قد یكون مصدره ورقة الترشیح . الموجود في العینةNالزمة لمعادلة من كمیة الحامض الالمقدر بالبالنك Nالحامض الالزمة لمعادلة

لذلك فان األجراء الروتیني في ، وقد یكون تركیز النتروجین في البالنك صفرا او قیمة منخفضة جدا .المختبرات قد تركز على تقدیر النتروجین في البالنك مرة واحدة خالل التحلیالت الخاصة بالبروتین

Materials and equipmentsالمواد واألجهزة المستخدمة

:ما یليالبروتین الخام تضم األجهزة والمعدات المستخدمة في تقدیر نسبة Keldahl device كلدالجهاز - 1

sensible balance میزان حساس یقیس الوزن الى رقمین عشریین - 2 glass centrifugeجفنات زجاجیة لترشیح العینة بعد األستخالص - 3 vacuum pumpمضخة شفط - 4 سیلندر لقیاس واضافة القاعدة ومحلول حامض البوریك والصبغة - 5 spatulaملعقة صغیرة ألخذ العینات - 6 .كفوف قماشیة سمیكة - 7 حامض الكبریتیك المركز وحامض الهیدروكلوریك المركز و مسحوق حامض البوریك - 8 حبیبات هیدروكسید الصودیوم - 9

و أیثانول bromocrysol green و methyl red صبغة -10

) للبالنك HCl مل – للعینة HClمل ( ×0.1 × 8.775

100× = %خامنسبة البروتین ال

وزن العینة

29

Procedureطریقة العمل : تتضمن طریقة العمل الخطوات التالیة

: مرحلة الهضم– أوالنظیف (تنقل الى دورق كلدال غم من العینة وتوضع في ورقة ترشیح وتلف جیدا و 2-1یتم وزن - 1

غم من العامل 10 مل من حامض الكبریتیك المركز مع 30 بهدوء وحذر إلیهویضاف ) وجاف Na2SO4كبریتات الصودیوم % 5 وCuSO4كبریتات النحاس % 95د الذي یتكون من المساع

.)قرص 2 -1 حیث یتم استخدام tablets او اقراصشكل حبوببیتوفر في بعض المختبرات (یستمر التسخین مع التحریك ، یل مروحة تفریغ الغازات المتسربةیوضع الدورق على المسخن مع تشغ - 2

وقد یتطلب ، اخضر مزرق رائق خالي من الشوائبأون تكون محلول ازرق مخضر ان لزم األمر لحی .حتى تبردالدوارق هربائي عن المسخن وتترك یقطع التیار الك، ساعات10 من أكثرذلك مرور

: مرحلة التقطیر–ثانیا الذي یحضر ( %2 مل من حامض البوریك المخفف بتركیز 50 بإضافة االستقبالیحضر وسط - 3

وذلك باستخدام دورق ) لتر من الماء المقطر مع التسخین غم من حامض البوریك في20 بإذابة 250 بإذابةقطرة من دلیل المثیل األحمر الذي یحضر 3-2 مل مع اضافة 1000حجمي سعة

ومن خصائص هذا الدلیل ، %50مل من الكحول األثیلي بتركیز 500ملغم من مسحوق الدلیل في بحدود pH واللون األصفر عندما یكون 4.4 الوسط بحدود pHمر عندما یكون اكتسابه اللون األح

6.2 . مل من الماء المقطر لتخفیف كبریتات األمونیوم الحامضیة تمهیدا 250یضاف الى دورق كلدال - 4

مل من 90 حبة من الزنك لتفادي الفرقعة والفوران الشدید عند اضافة 3-2 مع وضع القاعدةإلضافة غم من هیدروكسید الصودیوم 400 بإذابةالذي یحضر % (40وكسید الصودیوم بتركیز هیدرمحلول

بهدوء مع التحریك ویتم ذلك ) دریجیا مع التحریك المستمرالنقي الجاف في لتر من الماء المقطر تبالكامل الى دورق إضافتهافیة حتى قلیل من القاعدة مع التحریك ثم تكرار العملیة بهذه الكیبإضافة

.مة بحامض الكبریتیك المركز العینة المهضوحتوي علىلدال الذي یكیوضع دورق كلدال ، ن انسیابیة الماء الداخل والخارج التقطیر وفتح الماء للتأكد ممنظومةیتم تجهیز - 5

قطرات مستمرة في دورق بصورة غاز األمونیا المتحرر بالتكاثف وینزل یبدأحیث ، على المسخنتستمر عملیة التقطیر حتى ، والصبغة الورديحامض البوریكمحلول ي على الذي یحتواالستقبال

.یتغیر لونه من الوردي الى األصفر و مل 200-150 حجم المحلول الى صلی : مرحلة التسحیح–ثالثا

الذي یحضر بتخفیف (0.1N األصفر مع حامض الهیدروكلوریك المخفف بتركیز محلولالیتم تسحیح - 6السحاحة والذي یضاف عن طریق ) لتر من الماء المقطرفيلحامض المركز مل من ا 8.33 حوالي

30

لتفكك مركب بورات نتیجةعملیة التسحیح حتى ظهور اللون الورديوتستمر ، التي تكون مملوءة بهسجل ی.الوردي) والصبغة( األمونیوم وحامض البوریك األمونیوم في محلولها األصفر الى ملح كلورید

الى معادلة محلول بورات األمونیوم القاعدي كما تبین سابقا إضافته أدت الذي حجم الحامضبدقة .أخرى ویعاد تصفیر السحاحة أي مألها ألجراء عملیة تسحیح بة البروتین حسب المعادلةلحساب نس

طرق اخرى لتقدیر النتروجین

فنیة اال انها تشترك ان طرق تقدیر البروتین الخام تختلف في الكمیات وبعض التفاصیل ال مل من حامض 4لة هضم العینة یمكن ان تتم باضافة وبناءا على ذلك فان مرح، س العلميباألسا

دة مل وتركه لم50في دورق مخروطي سعة ) غم0.2(الكبریتیك المركز الى العینة المجففة والمطحونة . ینة بسرعة حال اضافة الحامضحیث یالحظ اسوداد الع، ساعة24 ویوضع الدورق HClO4 مل من حامض البیركلوریك 1.5 مضي الوقت المحدد یضاف الى العینة بعد

. لمدة ساعة او لحین تكون المحلول الرائق العدیم اللونhot plateعلى الصفیحة الساخنة 10 مل منه في عبوة بالستیكیة فیما یستخدم 40 مل یحفظ 50یكمل حجم المحلول بالماء المقطر الى

مرحلة التقطیر التي تتم بنقل تلك الكمیة الى انبوبة التقطیر الطویلة الخاصة بجهاز التقطیرمل فيدأ التقطیر وجمع الألمونیا المتحررة في محلول مل من هیدروكسید الصودیوم لیب10ا ویضاف الیه

مل من40-35حامض البوریك والصبغة الموجود في دورق األستقبال ویستمر التقطیر حتى جمع ).حسب الصبغة المستخدمةاو األخضر (المحلول األصفر

حیث یسحح المحلول المتجمع في ، بجمع الحجم المذكور تنتهي مرحلة التقطیر وتبدأ مرحلة التسحیح من حامض 0.005او تركیز عیاري من محلول حامض الهیدروكلوریك 0.01دورق األستقبال ضد

بظهور اللون الوردي یسجل حجم الحامض بدقة وحساب نسبة الكبریتیك وعند الوصول الى نقطة التعادل :البروتین في العینة بموجب المعادلة التالیة

6.25 × 50 × 14× حجمھ × عیاریة الحامض

100 × (%) =نسبة البروتین الخام

100 ×وزن العینة

31

یرجع الى نوع الحامض المستخدم او حجم العینة والمحالیل اختالف تركیز الحامض المستخدم بالتسحیحیطرة على التعادل بین الحامض ستخدمة حیث یقل تركیز الحامض بانخفاض مستوى التحلیل وذلك للسمال

.والقاعدة وبالتالي تحدید نقطة التعادل بدقة عالیة