laporan resmi praktikum biokimia uji karbohidrat

8/18/2019 Laporan Resmi Praktikum Biokimia Uji Karbohidrat

1/35

UJ I K ARBOHIDRAT

Muh. Junaidi Fitriawan T.

15030244025

BIO2015

UNIVERSITAS NEGERI SURABAYA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN

ALAM

JURUSAN BIOLOGI


2/35

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Dewasa ini, pangan merupakan salah satu hal pokok yang

dibutuhkan manusia. nutrisi yang terkandung dalam pangan

membantu metabolisme tubuh yang dijalankan manusia. salah

satu nutrisi yang dibutuhkan manusia adalah karbohidrat.

Karbohidrat atau hidrat arang adalah suatu zat gizi yang

fungsi utamanya sebagai penghasil energi, dimana setiap gramnya

menghasilkan 4 kalori. Secara umum definisi karbohidrat adalah

senyawa organik yang mengandung atom karbon, hidrogen, dan

oksigen. Dengan atom hidrogen dan oksigen dalam komposisi

menghasilkan H2O.(Hutagalung,Halomoan.2004)

Terlepas dari itu, karbohidrat dalam pangan dapat diuji

menggunakan beberapa jenis uji. Beberapa diantaranya: uji

Molish, uji Benedict, uji Seliwanoff, dan uji Iodin. Ui tersebut dapat

digunakan untuk menentukan ada tidaknya kandungan karbohidrat

dalam jenis pangan tersebut.

Oleh karena itu, diperlukan uji kandungan karbohidrat

dalam pangan dapat menggunakan jenis-jenis uji tersebut.

Sehingga diketahui ada atau tidaknya kandungan karbohidrat

dalam pangan tersebut.

B. Rumusan Masalah

1. Bagaimana mengidentifikasi adanya karbohidrat

(monosakarida, disakarida, dan polisakarida) pada uji

Molish, uji Benedict, uji Seliwanoff, dan uji Iodin?

2. Bagaimana Mengidentifikasi kandungan karbohidrat dalam

buah menggunakan uji Molish, uji Benedict, uji Seliwanoff,

dan uji Iodin?


3/35

C. Tujuan

1. Mahasiswa dapat mengidentifikasi adanya karbohidrat

(Monosakarida, Disakarida, dan Polisakarida) pada uji

Molish, uji Benedict, uji Seliwanoff, dan uji Iodin.(Tim

biokimia biologi FMIPA UNESA,2016)

2. Mahasiswa dapat mengidentifikasi kandungan karbohidrat

dalam buah menggunakan uji Molish, uji Benedict, uji

Seliwanoff, dan uji Iodin.

D. Manfaat

Agar mahasiswa dapat menngetahui, mengenal secara

langsung dan nyata tentang kandungan karbohidrat di dalammakanan.


4/35

BAB II

KAJIAN PUSTAKA

Karbohidrat, secara umum didefinisikan senyawa organik yang

mengandung atom karbon, hidrogen, dan oksigen. Dan pada umumnya

unsure hidrogen dan oksigen dalam komposisi menghasilkan H2O.

Sebagian besar karbohidrat diperoleh dari bahan makanan yang

dikonsumsi sehari-hari, terutama sumber makan yang berasal dari

tumbuh-tumbuhan. (Hutagalung,Halomoan.2004)

Sumber karbohidrat nabati dalam glikogen. Glikogen, hanya

dijumpai pada otot dan hati. Karbohidrat dalam bentuk laktosa hanya

dijumpai pada susu. Pada tumbuh-tumbuhan, karbohidrat dibentuk darihasil reaksi CO2 dan H2O melalui proses foto sintese di dalam sel-sel

tumbuh-tumbuhan yang mengandung hijau daun (klorofil). Matahari

merupakan sumber dari seluruh kehidupan, tanpa matahari tanda-tanda

kehidupan tidak akan dijumpai. (Hutagalung,Halomoan.2004)

Reaksi fotosintese:

6 CO2 + 6 H2OS. matahari C6H12O6 + 6 O2

Pada proses fotosintesis, klorofil pada tumbuh-tumbuhan akan

menyerap dan menggunakan energi matahari untuk membentuk

karbohidrat dengan bahan utama CO2 dari udara dan air (H2O) yang

berasal dari tanah. Energi kimia yang terbentuk akan disimpan di dalam

daun, batang, umbi, buah, dan biji-bijian.(Hutagalung,Halomoan.2004)

Karbohidrat yang terdapat pada makanan dapat dikelompokkan:

Available Carbohydrate (karbohidrat yang tersedia) yaitu karbohidrat

yang dapat dicerna dan dimetabolisme sebagai karbohidrat, dan

Unavailable Carbohydrate (karbohidrat yang tidak tersedia) yaitu

karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis oleh enzim-enzim pencernaan

manusia sehingga tidak dapat diabsorpsi.(Hutagalung,Halomoan.2004)

Penggolongan karbohidrat yang paling sering digunakan dalam

ilmu gizi berdasarkan jumlah molekulnya: Monosakarida terdiri dari


5/35

heksosa ( glukosa, fruktosa, galaktosa ) dan Pentosa ( Ribosa,

Arabinosa, Xylosa ), Disakarida ( Sukrosa, maltose, dan laktosa ),

Polisakarida ( amilum, dekstrin, glikogen, dan selulosa ).

(Hutagalung,Halomoan.2004)

Monosakarida, karbohidrat yang paling sederhana, oleh karena

tidak bias lagi dihidrolisa. Monosakarida larut di dalam air dan rasanya

manis, sehingga secara umum disebut juga gula. Terdapat 3 jenis

monosakarida:

- Glukosa

Biasa disebut gula anggur atau dekstrosa. Banyak

dijumpai di alam. Terutama pada buah-buahan, sayur-sayuran, madu, sirup jagung, dan tetes tebu.di dalam tebu

glukosa didapat dari hasil akhir pencernaan amilum,

sukrosa, maltose, dan laktosa.


- Fruktosa

Disebut gula buah atau levulosa. Merupakan jenis

sakarida yang paling manis, banyak dijumpai pada mahkota

bunga, madu, dan hasil hidrolisa dari gula tebu. Di dalam

tubuh didapat dari hasil pemecahan sukrosa.


- Galaktosa

Tidak dijumpai dalam bentuk bebas di alam. Di dalam

tubuh merupakan hasil hidrolisa dari

laktosa.(Hutagalung,Halomoan.2004)

Disakarida, merupakan gabungan antara 2 monosakarida, pada

bahan makanan, terdapat 3 jenis disakarida:

- Sukrosa

Gula yang dipergunakan sehari-hari. Biasa disebut gula

meja atau gula pasir. Mempunyai 2 molekul monosakarida


6/35

yang terdiri dari 1 molekul glukosa dan 1 molekul fruktosa.

Ditemukan pada tebu, bit, gula nira, jelly.


-Maltosa

Mempunyai 2 molekul monosakarida yang terdiri dari 2

molekul glukosa. Di dalam tubuh didapat dari hasil

pemecahan amilum. Dengan Jodium, amilum akan berubah

menjadi warna biru. Ditemukan pada serellia.


- Laktosa

Mempunyai 2 molekul monosakarida yang terdiri dari 1molekul glukosa dan 1 molekul galaktosa. Laktosa kurang

larut dalam air. Ditemukan pada susu.


Polisakarida, merupakan senyawa karbohidrat kompleks, dapat

mengandung lebih dari 60.000 molekul monosakarida yang tersusun

membentuk rantai lurus ataupun bercabang. Polisakarida memiliki rasa

tawar (tidak manis). Di dalam ilmu gizi ada 4 jenis polisakarida:

- Amilum (zat Pati)

Merupakan sumber energi utama bagi orang dewasa di

seluruh penduduk dunia, terutama di negara sedang

berkembang oleh karena dikonsumsi sebagai bahan

makanan pokok. Ditemukan pada umbi-umbian, serellia,

dan biji-bijian. Amilum tidak larut di dalam air dingin, tetapi

larut di dalam air panas membentuk cairan yang sangat

pekat seperti pasta, peristiwa ini disebut gelatinisasi.


- Dekstrin

Merupakan zat antara dalam pemecahan amilum.

Molekulnya lebih sederhana, mudah larut di dalam air,


7/35

dengan jodium akan berubah menjadi warna merah.


- Glikogen

Glikogen merupakan pati hewani, terbentuk dari 1000

molekul, larut di dalam air (pati nabati tidak larut dalam air)

dan bila bereaksi dengan Jodium akan menghasilkan warna

merah. Ditemukan pada otot hewan, manusia, dan ikan.

Glikogen disimpan di dalam hati dan otot sebagai cadangan

energy. Selain itu ditemukan pada kecambah, serellia, susu,

dan sirup jagung. (Hutagalung,Halomoan.2004)

-

SelulosaHamper 50% karbohidrat yang berasal dari tumbuh-

tumbuhan adalah selulosa, karena selulosa merupakan

bagian yang terpenting dari dinding sel tumbuh-tumbuhan.

Selulosa tidak dapat dicerna oleh tubuh manusia, oleh

karena tidak ada enzim yang memecah selulosa. Selulosa

berfungsi sebagai sumber serat yang dapat memperbesar

volume dari faeses, sehingga akan memperlancar defekasi.


Terdapat beberapa uji karbohidrat yang dapat dilakukan.

Diantaranya:

- Uji Molish

Reaksi ini berdasarkan pembentukan furfural atau

derivate-derivatnya dari karbohidrat yang didehidrasi oleh

asam sulfat pekat. Hasilnya akan bereaksi dengan -

napthol membentuk senyawa ungu kemerah-merahan.

Contohnya: sakarida dengan penambahan asam sulfat

pekat akan didehidrasi menjadi senyawa furfural atau

derifatnya seperti hidroksimetil furfural. (Tim Dosen Biokimia

jurusan biologi FMIPA UNESA.2016)


8/35

- Uji Benedict

Semua monosakarida dan disakarida kecuali sukrosa dan

trekalosa akan bereaksi positif bila dilakukan uji benedict.

Larutan-larutan tembaga yang alkalis bila direduksi oleh

karbohidrat yang mempunyai gugus aldehid atau keton

yang bebas akan membentuk Cupro Oksida (Cu2O) yang

berwarna hijau, merah oranye, atau merah bata dan adanya

endapan merah bata pada dasar tabung reaksi. (Tim Dosen

Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016)

- Uji Seliwanoff

Prinsip reaksi berdasarkan atas pembentukan 4-hidroksimetal furfural yang akan membentuk suatu senyawa

berwarna ungu dengan adanya resorsinol (1,3-dihidroksi

benzene) reaksi ini spesifik untuk ketosa yang ditandai

dengan hasil reaksi berubah warna menjadi merah. (Tim

Dosen Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016)

- Uji Iodin

Prinsipnya polisakarida akan membentuk reaksi denan

iodine dan memberikan warna spesifik tergantung jenis

karbohidratnya. Amilosa dan iodine berwarna biru,

amilopektin merah coklat, glikogen dan dekstrin berwarna

merah coklat. (Septorini,Ragil.2008)

Uji pada buah untuk mengetahui jenis karbohidrat yang ada pada

buah, karena sejalan dengan proses pematangan buah biasanya

kandungan karbohidrat dalam buah dapat mengalami perubahan

komposisi akibat aktivitas enzim. Pada buah masak dan manis akan

banyak ditemukan glukosa dan fruktosa, sedang pada buah yang

mentah banyak ditemukan karbohidrat dalam bentuk amilum yang tidak

menutup kemungkinan akan ditemukan bentuk karbohidrat yang lain.

(Tim Dosen Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016)


9/35

BAB III

METODA PRAKTIKUM

A. Alat dan Bahan

1. Uji Molish

Alat yang dibutuhkan:

- Tabung reaksi- Pipet tetes- Rak tabung reaksi- Penjepit tabung reaksi- Gelas ukur

Bahan yang dibutuhkan:

- H2SO4 Pekat- Pereaksi Molish- Selulosa 1%- Fruktosa 1%- Sukrosa 1%- Laktosa 1%- Amilum 1%- Maltosa 1%

-Glukosa 1%

2. Uji Benedict


- Tabung reaksi- Pipet tetes- Rak tabung reaksi- Penjepit tabung reaksi- Gelas ukur

-Waterbath


- Pereaksi Benedict- Selulosa 1%- Fruktosa 1%


10/35

- Sukrosa 1%- Laktosa 1%- Maltosa 1%- Glukosa 1%

3. Uji Seliwanoff


- Tabung reaksi- Pipet tetes- Rak tabung reaksi- Penjepit tabung reaksi- Gelas ukur - Waterbath


- Pereaksi Seliwanoff - Selulosa 1%- Fruktosa 1%- Sukrosa 1%- Laktosa 1%- Amilum 1%- Maltosa 1%- Glukosa 1%

4. Uji Iodine


- Tabung reaksi- Pipet tetes- Rak tabung reaksi- Penjepit tabung reaksi- Gelas ukur - Waterbath- Pencatat waktu


- HCl 6N- NaOH 6N- Larutan Iodin 1M- Selulosa 1%


11/35

- Amilum 1%

5. Uji Buah


- Tabung reaksi- Pipet tetes- Rak tabung reaksi- Penjepit tabung reaksi- Gelas ukur - Waterbath- Cawan petri


- Pereaksi Molish- Pereaksi Benedict- Pereaksi Seliwanoff - Larutan Iodin 1M- Ekstrak buah pisang mentah- Ekstrak buah pisang ranum- Ekstrak buah pisang matang

B. Prosedur kerja

1. Uji Molishi. Disiapkan semua jenis karbohidrat menjadi larutan

dengan konsentrasi 1%ii. Dimasukkan 2mL larutan karbohidrat 1% ke dalam

tabung reaksi yang berbeda.iii. Ditambahkan 2-3 tetes pereaksi Molish, dikocok

perlahan selama ±5 detik.iv. Dimiringkan tabung reaksi, diteteskan 1mL (±20

tetes) H2SO4 melalui dinding tabung reaksi.ditegakkan tabung reaksi dan diamati apakah adacincin berwarna merah ungu pada perbatasan kedualarutan. (Tim Dosen Biokimia jurusan biologi FMIPAUNESA.2016)

2. Uji Benedicti. Disiapkan semua jenis karbohidrat menjadi larutan

dengan konsentrasi 1%ii. Dimasukkan 2mL pereaksi benedict ke dalam tabung

reaksi.


12/35

iii. Ditambahkan 5 tetes larutan glukosa1%, kemudiandipanaskan dalam waterbath (Penangas) selama 5menit, dibiarkan dingin dan dibandingkan perubahanwarna yang terjadi.

iv. Dilakukan pengujian dengan cara yang samaterhadap larutan karbohidrat 1% yang lain. (TimDosen Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016)

3. Uji Seliwanoff i. Disiapkan semua jenis karbohidrat menjadi larutan

dengan konsentrasi 1%ii. Dimasukkan 1mL pereaksi Seliwanoff ke dalam

tabung reaksi.iii. Ditambahkan 2 tetes larutan amilum 1%. Pada waktu

bersamaan, tabung reaksi larutan tersebutditempatkan ke dalam waterbath sampai terbentukwarna (dicatat kecepatan terbentuknya warna darimasing-masing tabung reaksi ).

iv. Dilakukan pengujian dengan cara yang samaterhadap larutan karbohidrat 1% yang lain. (TimDosen Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016)

4. Uji Iodinei. Disiapkan 3 tabung reaksi, masing-masing diberi 3mL

larutan amilum 1%ii. Ditambahkan 2 tetes air ke dalam tabung pertama, 2

tetes HCl ke dalam tabung kedua, 2 tetes NaOH kedalam tabung ketiga. Dikocok semua tabung.Diperhatikan perubahan warna yang terjadi.

iii. Dipanaskan tabung yang berwarna lalu dinginkan.Diperhatikan perubahan-perubahan yang terjadi.

iv. Dilakukan pengujian terhadap larutan selulosa 1%dan glikogen 1%. (Tim Dosen Biokimia jurusanbiologi FMIPA UNESA.2016)

5. Uji Karbohidrat pada Buahi. Dilakukan uji buah seperti uji-uji sebelumnya pada uji

Molish, uji Benedict, dan uji Seliwanoff.ii. Untuk uji iodine, masing-masing 1 tetes ekstrak buah

mentah,ranum,dan matang ditempatkan pada cawanpetri, kemudian diberi 1 tetes iodine pada masing-masing ekstrak, dan catat perubahan warna yangterjadi.


13/35

C. Alur Kerja

1. Uji Molish

- Dimasukkan dalam tabung reaksi

yang berbeda-beda

- Ditambahkan pereaksi Molish

sebanyak 2-3 tetes

- Larutan dikocok perlahan selama ±5

detik

- Tabung sedikit dimiringkan

- Diteteskan ±20 tetes H2SO4 pekat

melalui dinding tabung- Diamati perubahannya dan ditulis

dalam tabel

2. Uji Benedict

-

Dimasukkan dalam tabung reaksiyang berbeda-beda

- Ditambahkan 5 tetes larutan

karbohidrat 1% berbeda (glukosa,

fruktosa, sukrosa, laktosa, seluosa,

dan maltose) pada masing-masing

tabung reaksi

- Larutan dipanaskan menggunakan

waterbath selama 5 menit

- diangkat

-Dibiarkan dingin

- Diamati perubahannya dan ditulis

dalam tabel

2mL larutan karbohidrat 1% (selulosa, fruktosa,

sukrosa, laktosa, amilum, maltose, glukosa)

Hasil berupa terbentuknya cincin ungu dengan variasi

ketebalan

2mL Pereaksi Benedict

Hasil berupa larutan berwarna biru, oranye, dan merah

dengan endapan berwarna merah bata


14/35

3. Uji Seliwanoff


yang berbeda-beda

- Ditambahkan 2 tetes larutan

karbohidrat 1% berbeda (glukosa,

fruktosa, sukrosa, laktosa, seluosa,

amilum, dan maltose) pada masing-

masing tabung reaksi

- Dimasukkan dalam waterbath

- Dihitung waktu perubahan warna

yang terjadi

-

Dicatat hasil waktu dan perubahanwarna yang terjadi dalam tabel

4. Uji Iodin

i. Percobaan 1


- Diberi 2 tetes air H2O

-Tabung dikocok hingga berubah

warna

j

- Ditambahkan iodine 3 tetes

- Tabung dipanaskan

-

tabung diangkat, dan didinginkan.

1mL pereaksi Seliwanoff

Hasil berupa larutan berwarna orange hingga merah

3mL larutan polisakarida amilum atau selulosa 1%

Larutan berwarna putih keruh

Larutan terdapat endapan biru kehitaman

Larutan berwarna biru kehitaman


15/35

ii. Percobaan 2


-Diberi 2 tetes HCl

- Tabung dikocok hingga berubah

warna

j


- Tabung dipanaskan

-

tabung diangkat, dan didinginkan.

iii. Percobaan 3


- Diberi 2 tetes NaOH

- Tabung dikocok hingga berubah

warna j


- Tabung dipanaskan

- tabung diangkat, dan didinginkan.


Larutan terdapat endapan biru kehitaman

Larutan berwarna biru kehitaman



Larutan bening terdapat endapan kuning

Larutan terdapat endapan putih



16/35

5. Uji Buah

Percobaan 1 “uji Molish”


yang berbeda-beda

- Ditambahkan pereaksi Molish

sebanyak 2-3 tetes

- Larutan dikocok perlahan selama ±5

detik

- Tabung sedikit dimiringkan

- Diteteskan ±20 tetes H2SO4 pekat

melalui dinding tabung


dalam tabel

Percobaan 2 “uji Benedict”


yang berbeda-beda- Ditambahkan ekstrak pisang berbeda

secukupnya pada tiap-tiap tabung

reaksi

- Larutan dipanaskan menggunakan

waterbath selama 5 menit

- diangkat

- Dibiarkan dingin


dalam tabel

Hasil berupa endapan coklat, terbentuknya cincin ungu

ada dasar tabun

Ekstrak buah masak, ranum, mentah

Hasil berupa endapan coklat, buih, dengan larutan

berwarna hijau kekuningan hingga merah bata

2mL Pereaksi Benedict


17/35

Percobaan 3 “uji Seliwanoff”


yang berbeda-beda

- Ditambahkan ekstrak pisang yang

berbeda pada masing-masing

tabung reaksi

- Dimasukkan dalam waterbath

- Dihitung waktu perubahan warna

yang terjadi

- Dicatat hasil waktu dan perubahan

warna yang terjadi dalam tabel

Percobaan 4”uji Iodine”

- Diteteskan pada cawan petri

- Ditambahkan 1 tetes iodine

- Diamati perubahan warna yang

terjadi

- Dicatat hasil perubahan warna pada

tabel

Hasil berupa endapan kuning kecoklatan

1mL pereaksi Seliwanoff

1 tetes ekstrak buah masak, ranum, mentah

Hasil endapan berwarna hitam


18/35

BAB IV

HASIL PRAKTIKUM

A. Data

1. Tabel hasil pengamatan uji Molish

No. ReaksiHasil Pengamatan

Sebelum Sesudah

1 Selulosa 2mL 1% + Tidak terbentuk Terbentuk cincin

Pereaksi Molish+ Cincin ungu Ungu (++)

H2SO4 1mL Larutan keruh Larutan keruh

2 fruktosa 2mL 1% + Tidak terbentuk Terbentuk cincin

Pereaksi Molish+ Cincin ungu Ungu (+++)

H2SO4 1mL Larutan bening Larutan bening

3 Sukrosa 2mL 1% + Tidak terbentuk Terbentuk cincin


H2SO4 1mL Larutan bening Larutan keruh

4 Laktosa 2mL 1% + Tidak terbentuk Terbentuk cincin


H2SO4 1mL Larutan bening Larutan bening

5 Amilum 2mL 1% + Tidak terbentuk Terbentuk cincin


H2SO4 1mL Larutan keruh Larutan keruh

6 Maltosa 2mL 1% + Tidak terbentuk Terbentuk cincin

Pereaksi Molish+ Cincin ungu Ungu (+)


7 Glukosa 2mL 1% + Tidak terbentuk Terbentuk cincin



Keterangan: (+) =sedikit

(++) =sedang

(+++) =banyak


19/35

2. Tabel hasil pengamatan uji Benedict


Sebelum Sesudah

1 Pereaksi Benedict+ Glukosa tidak berwarna Larutan warna5 tetes glukosa 1% Benedict berwarna biru Biru, endapan

Dipanaskan → Merah bata (++)

2 Pereaksi Benedict+ Fruktosa tidak berwarna Larutan warna

5 tetes fruktosa 1% Benedict berwarna biru Merah bata, endapan

Dipanaskan → Merah bata (+++)

3 Pereaksi Benedict+ Sukrosa tidak berwarna Larutan warna biru

5 tetes sukrosa 1% Benedict berwarna biru

Dipanaskan →

4 Pereaksi Benedict+ Maltosa tidak berwarna Larutan warna lapis

5 tetes maltosa 1% Benedict berwarna biru oranye biru, endapanDipanaskan → Merah bata (+)

5 Pereaksi Benedict+ Selulosa putih keruh Larutan warna biru

5 tetes selulosa 1% Benedict berwarna biru

Dipanaskan →

6 Pereaksi Benedict+ Laktosa tidak berwarna Larutan warna

5 tetes laktosa 1% Benedict berwarna biru Biru kehijauan, endapan

Dipanaskan → Hijau


(++) =sedang

(+++) =banyak


20/35

3. Tabel hasil pengamatan uji Seliwanoff


Sebelum Sesudah

1 Glukosa 1%+ Glukosa 1% tidak berwarna Warna orange (+)Pereaksi Seliwanoff Seliwanoff kuning Waktu: 11.50 detik

Dipanaskan →Glukosa1% + Seliwanoff tidak

berwarna

2 Fruktosa 1%+ Fruktosa 1% tidak berwarna Warna merah

Pereaksi Seliwanoff Seliwanoff kuning Waktu: 1.50 detik

Dipanaskan →Fruktosa1% + Seliwanoff tidak

berwarna

3 Sukrosa 1%+ Sukrosa 1% tidak berwarna Warna merah


Dipanaskan →

Sukrosa1% + Seliwanoff tidak

berwarna4 Laktosa 1%+ Laktosa 1% tidak berwarna Warna orange (++)


Dipanaskan →Laktosa1% + Seliwanoff tidak

berwarna

5 Selulosa 1%+ Selulosa 1% warna putih Warna orange (++)


Dipanaskan →Selulosa1% + Seliwanoff tidak

berwarna

6 Amilum 1%+ Amilum 1% warna putih Warna orange (+)


Dipanaskan → Amilum1% + Seliwanoff tidak

berwarna

7 Maltosa 1%+ Maltosa 1% tidak berwarna Warna orange (++)


Dipanaskan →Maltosa1% + Seliwanoff tidak

berwarna

Keterangan: (+) =pudar

(++) =cerah

(+++) =keruh


21/35

4. Hasil pengamatan uji Iodine

No. Reaksi

Hasil Pengamatan

Sebelum Sesudah

1 2 mL Amilum 1%+2 tetes H2O+ Amilum 1% +H2O= putih keruh Endapan biru kehitaman

Iodine +iodine= biru kehitaman (+)

dpanaskan→

2 2 mL Amilum 1%+2 tetes HCl+ Amilum 1% +HCl= putih keruh Endapan biru kehitaman

Iodine +iodine= biru kehitaman (++)

dpanaskan→

3 2 mL Amilum 1%+2 tetes NaOH+ Amilum 1% +NaOH= putih keruh Bening

Iodine +iodine= endapan putih

dpanaskan→

4 2 mL Selulosa 1%+2 tetes H2O+ Selulosa 1% +H2O= putih keruh Endapan biru kehitaman

Iodine +iodine= hitam keunguan

dpanaskan→

5 2 mL Selulosa 1%+2 tetes HCl+ Selulosa 1% +H2O= putih keruh Endapan biru kehitaman

Iodine +iodine= hitam keunguan

dpanaskan→

6 2 mL Selulosa 1%+2 tetes NaOH+ Selulosa 1% +H2O= putih keruh Bening,

Iodine +iodine= endapan putih Endapan putih

dpanaskan→


(++) =sedang


22/35

5. Tabel hasil pengamatan pada buah

Uji ReaksiHasil Pengamatan

Sebelum Sesudah

Molish Buah masak Endapan coklat Endapan coklatEkstrak pisang+ P.Molish+ Cincin ungu didasar tabung

H2SO4

Buah ranum Endapan coklat Endapan coklat

Ekstrak pisang+ P.Molish+ Cincin ungu didasar tabung

H2SO4

Buah Mentah Endapan coklat Endapan coklat

Ekstrak pisang+ P.Molish+ Cincin ungu didasar tabung

H2SO4

Benedict Buah masak Endapan coklat Endapan coklat

Ekstrak pisang+ Benedict Warna biru pada bagian atas

Ekstrak pisang+ Benedict+ Endapan coklat, ada warna biru Buih(+++++), tengah bening(+

Dipanaskan Pada bagian atas Warna hijau kekuningan

Merah bata pada bagian bawa

Buah ranum Endapan coklat Endapan coklat, biru pada

Ekstrak pisang+ Benedict Bagian atas

Ekstrak pisang+ Benedict+ Endapan coklat, biru bagian Buih(+++), tengah bening(+++

Dipanaskan Atas Warna hijau kekuningan lalu

Merah bata (++)Buah mentah Endapan coklat Endapan coklat, biru

Ekstrak pisang+ Benedict

Ekstrak pisang+ Benedict+ Endapan coklat, biru Buih(++), tengah bening(+)

Dipanaskan Warna hijau kekuningan lalu

Merah bata(+++)


23/35

Uji ReaksiHasil Pengamatan

Sebelum SesudahSeliwanoff Buah masak Endapan kuning kecoklatan Endapan kuning kecoklata

1mL Seliwanoff+ (++) (++)

Ekstrak pisang

Buah Ranum Endapan kuning kecoklatan Endapan kuning kecoklata

1mL Seliwanoff+ (+++) (+++)

Ekstrak pisang

Buah mentah Endapan kuning kecoklatan Endapan kuning kecoklata

1mL Seliwanoff+ (++++) (++++)

Ekstrak pisang

Iodine Buah masak Endapan coklat kekuningan Endapan warna hitamEkstrak pisang+ Iodine (+++)

Buah ranum Endapan coklat (++) Endapan warna hitam

Ekstrak pisang+ Iodine (++++)

Buah Mentah Endapan coklat (+++) Endapan warna hitam

Ekstrak pisang+ Iodine (++++)

Keterangan: (+) = sedikit

(++) = cukup sedikit(+++) = sedang

(++++) = cukup banyak

(+++++) = sangat banyak


24/35

B. Analisis Data dan Pembahasan

Pada praktikum kali ini dilakukan 4 jenis metode uji karbohidrat

dengan 1 uji karbohidrat pada buah pisang. Percobaan pertama

adalah uji molish. Dari hasil praktikum diperoleh hasil: selulosa 2mL1% + P.Molish. + H2SO4 1mL menghasilkan cincin ungu(++),

fruktosa 2mL 1% + P.Molish + H2SO4 1mL menghasilkan cincin

ungu(+++), sukrosa 2mL 1% + P.Molish + H2SO4 1mL

menghasilkan cincin ungu(+++), laktosa 2mL 1% + P.Molish +

H2SO4 1mL menghasilkan cincin ungu(++), Amilum 2mL 1% +

P.Molish + H2SO4 1mL menghasilkan cincin ungu(++), maltose 2mL

1% + P.Molish + H2SO4 1mL menghasilkan cincin ungu(+), dan

glukosa 2mL 1% + P.Molish + H2SO4 menghasilkan cincin

ungu(+++). Disimpulkan dari uji ini semua jenis karbohidrat yang

diuji menghasilkan cincin ungu walaupun dengan ketebalan yangbervariasi. Ketebalan yang bervariasi diurutkan dari yang tebal yaitu

fruktosa, sukrosa, dan glukosa. Kemudian selulosa, laktosa, dan

amilum. Kemudian yang paling sedikit pada maltose. Hal ini sesuai

dengan tinjauan pustaka bahwa reaksi ini berdasarkan

pembentukan furfural atau derivate-derivatnya dari karbohidrat yang

didehidrasi oleh asam sulfat pekat. Hasilnya akan bereaksi dengan

-napthol membentuk senyawa ungu kemerah-merahan. (Tim

Dosen Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016).

Konsentrasi asam sulfat dalam reaksi ini bertindak sebagaiagen dehidrasi yang bertindak pada gula untuk membentuk furfural

dan turunannya yang kemudian dikombinasikan -naftol untuk

membentuk produk berwarna keunguan. Cincin ungu yang

terbentuk pada monosakarida lebih banyak dibandingkan pada

polisakarida karena polisakarida perlu dihidrolisis terlebih dahulu

menjadi monosakarida(nurul,siti.2013). jika dibandingkan dengan

hasil praktikum memiliki kesesuaian antara data dan fakta. Namun,

pada maltose yang tergolong disakarida justru lebih sedikit

menghasilkan cincin ungu. Untuk percobaan pertama yaitu uji

Molish didapatkan hasil yang tidak sesuai pada maltose. Hal ini

diakibatkan pengujian ini dilakukan terakhir dan H2SO4 diletakkan

dalam keadaan terbuka. Serta masih adanya sisa air pada dinding

tabung dalam bagian samping bawah mempengaruhi konsentrasi

larutan.


25/35

Pada percobaan kedua adalah uji benedict. Pada uji ini

diperoleh hasil: P.Benedict + 5 tetes glukosa 1% lalu dipanaskan

menghasilkan larutan berwarna merah bata dengan endapan

merah bata (++), P.Benedict + 5 tetes fruktosa 1% lalu dipanaskan

menghasilkan larutan berwarna merah bata dengan endapanmerah bata (+++), P.Benedict + 5 tetes sukrosa 1% lalu dipanaskan

menghasilkan larutan berwarna biru, P.Benedict + 5 tetes maltosa

1% lalu dipanaskan menghasilkan larutan berwarna lapis oranye

dan biru dengan endapan merah bata (+), P.Benedict + 5 tetes

selulosa 1% lalu dipanaskan menghasilkan larutan berwarna biru,

P.Benedict + 5 tetes laktosa 1% lalu dipanaskan menghasilkan

larutan berwarna biru kehijauan dengan endapan hijau.

Disimpulkan bahwa jenis monosakarida yaitu glukosa dan fruktosa

menghasilkan larutan berwarna merah dengan endapan merah

bata. Sementara pada disakarida yaitu maltose dan laktosa

menghasilkan warna hijau sampai oranye, kecuali pada sukrosa

yang tetap berwarna biru. Hal ini sama dengan tinjauan pustaka

dimana Semua monosakarida dan disakarida kecuali sukrosa dan

trekalosa akan bereaksi positif bila dilakukan uji benedict. Larutan-

larutan tembaga yang alkalis bila direduksi oleh karbohidrat yang

mempunyai gugus aldehid atau keton yang bebas akan membentuk

Cupro Oksida (Cu2O) yang berwarna hijau, merah oranye, atau

merah bata dan adanya endapan merah bata pada dasar tabung

reaksi. (Tim Dosen Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016).

Dari data didapat bahwa fruktosa memiliki jumlah endapan

merah bata paling tinggi. Hal ini sesuai karena fruktosa merupakan

larutan yang lebih cepat bereaksi daripada larutan karbohidrat lain.

Hal ini disebabkan adanya kecepatan mereduksi dari fruktosa yang

didapatnya karena molaritas yang tinggi. Fruktosa mengandung

gugus keton yang bereaksi lebih cepat daripada gugus aldehid

pada glukosa.(nurul,siti.2013)

Pada percobaan ketiga merupakan uji Seliwanoff. Dari

percobaan tersebut diperoleh hasil: Glukosa 1% + P.Seliwanoff

kemudian dipanaskan akan menghasilkan warna oranye(+) dalam

waktu 11.50 detik, Fruktosa 1% + P.Seliwanoff kemudian

dipanaskan akan menghasilkan warna merah dalam waktu 1.50

detik, sukrosa 1% + P.Seliwanoff kemudian dipanaskan akan

menghasilkan warna merah dalam waktu 1.10 detik, laktosa 1% +


26/35

P.Seliwanoff kemudian dipanaskan akan menghasilkan warna

oranye(++) dalam waktu 13.21 detik, selulosa 1% + P.Seliwanoff

kemudian dipanaskan akan menghasilkan warna oranye(++) dalam

waktu 16.01 detik, amilum 1% + P.Seliwanoff kemudian dipanaskan

akan menghasilkan warna oranye(+) dalam waktu 17.02 detik,maltosa 1% + P.Seliwanoff kemudian dipanaskan akan

menghasilkan warna oranye(++) dalam waktu 10.32 detik. Dari

praktikum ini disimpulkan bahwa perubahan warna paling cepat

terjadi pada monosakarida dan disakarida yan mengandung

fruktosa. Dan perubahan terlama pada polisakarida yaitu amilum.

Hal ini sesuai denga tinjauan pustaka dimana prinsip reaksi

berdasarkan atas pembentukan 4-hidroksi metal furfural yang akan

membentuk suatu senyawa berwarna ungu dengan adanya

resorsinol (1,3-dihidroksi benzene) reaksi ini spesifik untuk ketosa

yang ditandai dengan hasil reaksi berubah warna menjadi merah.

(Tim Dosen Biokimia jurusan biologi FMIPA UNESA.2016)

Adanya warna merah merupakan hasil kondensasi dari

resorsinol yang sebelumnya didahului dengan pembentukan

hidroksi metil furfural. Proses pembentukan hidroksi metil furfural

berasal dari konversi fruktosa oleh asamklorik panas yang

kemudian menghasilkan asam livulenik dan hidroksi metil furfural.

Menurut data fruktosa dan sukrosa menghasilkan warna merah

dengan waktu perubahan tercepat. Hal ini sesuai karena kedua

jenis ini memiliki gugus keton (ketosa).(nurul,siti.2013)

Pada percobaan keempat, merupakan uji iodine.dari hasil

percobaan tersebut diperoleh hasil: 2mL amilum 1% + 2 tetes H2O

+ Iodine kemudian dipanaskan menghasilkan endapan biru

kehitaman (+), 2mL amilum 1% + 2 tetes HCl + Iodine kemudian

dipanaskan menghasilkan endapan biru kehitaman (+), 2mL amilum

1% + 2 tetes NaOH + Iodine kemudian dipanaskan menghasilkan

larutan bening, 2mL selulosa 1% + 2 tetes H2O + Iodine kemudian

dipanaskan menghasilkan endapan biru kehitaman (+), 2mL amilum

1% + 2 tetes HCl + Iodine kemudian dipanaskan menghasilkan

endapan biru kehitaman (+), 2mL amilum 1% + 2 tetes NaOH +

Iodine kemudian dipanaskan menghasilkan larutan bening dengan

endapan kuning. Disimpulkan bahwa larutan bereaksi pada air dan

suasana asam. Dan menghasilkan endapan biru kehitaman. Dari

tinjauan pustaka yaitu prinsip polisakarida akan membentuk reaksi


27/35

dengan iodine dan memberikan warna spesifik tergantung jenis

karbohidratnya. Amilosa dan iodine berwarna biru, amilopektin

merah coklat, glikogen dan dekstrin berwarna merah coklat.

(Septorini,Ragil.2008) maka jenis kandungan dalam larutan amilum

dan selulosa mengandung banyak amilosa karena menghasilkanendapan biru kehitaman. Hal ini menunjukan amilum dan selulosa

termasuk jenis polisakarida.

Dalam reaksi ketiga pada percobaan iodine. NaOH yang

terdapat dalam larutan akan mengalami reaksi terlebih dahulu

dengan Iodine sehingga membentuk NaI dan NaOI, sehingga

amilum tidak bereaksi dengan iodine dan tidak menghasilkan warna

(bening) dengan sedikit warna kekuking-kuningan.

Pada percobaan kelima menggunakan buah pisang dengan 3perbedaan fase usia. Dan dilakukan uji menggunakan keempat uji

sebelumnya. Pada uji Molish diperoleh hasil: ekstrak buah masak +

P.Molish + H2SO4 menghasilkan endapan berwarna coklat dengan

cincin ungu didasar tabung, ekstrak buah ranum + P.Molish +

H2SO4 menghasilkan endapan berwarna coklat dengan cincin ungu

didasar tabung, ekstrak buah mentah + P.Molish + H2SO4

menghasilkan endapan berwarna coklat dengan cincin ungu

didasar tabung. Dari percobaan ini disimpulkan bahwa setiap jenis

buah pisang menghasilkan cincin ungu didasar tabung.

Menandakan bahwa buah pisang dalam keadaan mentah, ranum,dan matang mengandung karbohidrat. Kemudian dilakukan uji

benedict. Diperoleh hasil: ekstrak pisang masak + benedict

kemudian dipanaskan menghasilkan buih (+++++) bening bagian

tengah (++) warna hijau kekuningan lalu merah bata pada bagian

bawah, ekstrak pisang ranum + benedict kemudian dipanaskan

menghasilkan buih (+++) bening bagian tengah (+++) warna hijau

kekuningan lalu merah bata (++) pada bagian bawah, ekstrak

pisang mentah + benedict kemudian dipanaskan menghasilkan buih

(++) bening bagian tengah (+) warna hijau kekuningan lalu merah

bata pada bagian bawah(+++). Disimpulkan bahwa semakin muda

pisang maka semakin banyak endapan merah bata yang terbentuk.

Menunjukkan bahwa pisang mentah memiliki jumlah monosakarida

dan disakarida kecuali sukrosa dan tekralosa. Kemudian dilakukan

uji Seliwanoff. Diperoleh hasil: 1mL seliwanoff + ekstrak pisang

masak menghasilkan endapan kuning kecoklatan (++),1mL


28/35

seliwanoff + ekstrak pisang ranum menghasilkan endapan kuning

kecoklatan (+++),1mL seliwanoff + ekstrak pisang mentah

menghasilkan endapan kuning kecoklatan (++++). Dari hasil ini

diperoleh kesimpulan bahwa pisang tidak memiliki senyawa ketosa

karena tidak terbentuknya perubahan warna menjadi merah.Kemudian terakhir dilakukan uji Iodine. Diperoleh hasil: ekstrak

pisang masak + iodine menghasilkan endapan warna hitam (+++),

ekstrak pisang ranum + iodine menghasilkan endapan warna hitam

(++++), ekstrak pisang mentah + iodine menghasilkan endapan

warna hitam (++++). Diperoleh kesimpulan bahwa pisang

mengandung senyawa jenis amilosa yang cukup tinggi. Pada

percobaan kedua mengalami perbedaan dengan tinjauan pustaka

dimana Pada buah masak dan manis akan banyak ditemukan

glukosa dan fruktosa, sedang pada buah yang mentah banyak

ditemukan karbohidrat dalam bentuk amilum (Tim Dosen Biokimia

jurusan biologi FMIPA UNESA.2016). hal ini terjadi karena tidak

menutup kemungkinan akan ditemukan bentuk karbohidrat selain

amilum. Sehingga perbedaan ukuran endapan merah bata pada

percobaan uji buah dengan benedict tidak terlihat jelas.

C. Diskusi

Menjawab pertanyaan-pertanyaan dari buku panduan

praktikum Biokimia terbagi menjadi 5 bagian:

o Uji Molish

1) Mengapa terbentuk cincin merah ungu pada bahan

yang mengandung karbohidrat?

Jawab: Konsentrasi asam sulfat dalam reaksi ini

bertindak sebagai agen dehidrasi yang bertindak

pada gula untuk membentuk furfural dan turunannya

yang kemudian dikombinasikan -naftol untuk

membentuk produk berwarna keunguan

2) Samakah intensitas warna cincin berwarna merah

dan ungu pada bahan uji yang anda gunakan dalampraktikum ini? Jelaskan!

Jawab: tidak sama, terdapat perbedaan dikarenakan

jenis karbohidrat yang digunakan berasal dari

monosakarida, disakarida, dan polisakarida. Dan

pada monosakarida mengalami pembentukan cincin


29/35

ungu paling cepat dibandingkan disakarida, dan

polisakarida. Karena harus menghidrolisis terlebih

dahulu membentuk monosakarida.

o Uji Benedict

1) Apa Warna dari endapan yang terbentuk? Mengapa

demikian?

Jawab: Merah bata, karena larutan-larutan tembaga

yang alkalis bila direduksi oleh karbohidrat yang

mempunyai gugus aldehid atau keton yang bebas

akan membentuk Cupro Oksida (Cu2O) yang

berwarna merah bata

2) Pada uji Benedict mengapa sukrosa bukan termasuk

gula reduksi?

Jawab: karena sukrosa tidak mengandung atom

karbon anomer yang bebas, dikarenakan karbon

anomer kedua komponen monosakarida pada

sukrosa berikatan satu dengan yang lain

o Uji Seliwanoff

1) Gugus apa dari karbohidrat yang memberikan reaksi

positif terhadap uji Seliwanoff? Mengapa?

Jawab: Ketosa, karena apabila di dehidrasi olehpereaksi seliwanoff memberikan turunan furfural yang

selanjutnya berkondensasi dengan resorsinol

memberikan warna merah.

2) Dapatkah uji Seliwanoff dipakai untuk membedakan

sukrosa dan fruktosa?

Jawab: tidak, dikarenakan sukrosa dan fruktosa

sama-sama memiliki gugus keton. Dan uji seliwanoff

hanya mampu menentukan perbedaan gugus antara

aldehid atau keton.

o Uji Iodine

1) Mengapa terjadi perubahan warna setelah

dipanaskan?

Jawab: karena ketika dipanaskan rantai pada amilum

akan merenggang sehingga iodine terputus dari


30/35

ikatan dengan amilum. Namun perubahan yang

terjadi hanya bersifat semu, sehingga apabila

didinginkan kembali ke warna semula.

2) Zat manakah selain amilum yang memberikan warnadengan iodine?

Jawab: selulosa

o Uji Buah

1) Mengapa pada buah masak masih ditemukan

adanya karbohidrat dalam bentuk polisakarida?

Jawab: dikarenakan tidak adanya salah satu enzim

untuk memecah salah satu jenis polisakarida,

sehingga molekul polisakarida tetap berbentuk

semula pada buah.

2) Jelaskan proses hidrolisis amilum secara enzimatis!

Jawab: ikatan polimer dari amilum dapat dipecah

menggunakan enzim. Reaksi hidrolisis secara

enzimatis

nH2O nH2O

C6H10O6 C12H22O11 (C6H12O6)2n

(polisakarida) (Disakarida) (Monosakarida)

H-

H-


31/35

BAB V

PENUTUP

A. Simpulan

Dari praktikum ini simpulan dibagi menjadi 2 bagian:1. Uji molish dapat menentukan ada atau tidaknya

karbohidrat. Dengan cara mencampurkan zat uji denganpereaksi molish ditambah asam sulfat sehingga menghasilkancincin ungu yang menandakan adanya karbohidrat.

Uji Benedict dapat menentukan adanya monosakarida dandisakarida kecuali sukrosa dan tekralosa. Dengan caramencampurkan pereaksi benedict yang kemudian dipanaskansehingga menghasilkan endapan merah bata yangmenandakan adanya karbohidrat dalam bentuk monosakaridadan disakarida.

Uji Seliwanoff dapat mengidentifikasi jenis karbohidratyang memiliki gugus keton (ketosa). Dengan caramencampurkan pereaksi seliwanoff dengan zat uji kemudiandipanaskan sehingga menghasilkan larutan berwarna merahyang menandakan karbohidrat yang terkandung di dalam zatuji memiliki gugus keton. Sehingga kandungan didalamnyadapat berupa fruktosa atau sukrosa

Uji Iodin dapat mengidentifikasi karbohidrat dalam bentukpolisakarida. Dengan cara mencampurkan zat uji denganpereaksi iodine akan menghasilkan endapan berwarna birukehitaman yang menandakan adanya amilosa, maka zat ujitersebut masuk jenis polisakarida

2. Dalam uji buah, dapat menggunakan uji Molish, uji Benedict,uji Seliwanoff, dan uji Iodine. Akan menghasilkan data yangberbeda beda. Dari uji buah pisang dapat disimpulkan bahwabuah pisang memiliki karbohidrat dengan jenis paling banyakpolisakarida. Hal ini ditandai dengan uji Molish yang positif karena terbentuk cincin ungu, uji Benedict yang menyebutkanbahwa buah pisang memiliki sedikit endapan merah makakandungan monosakarida dan disakaridanya relative sedikit,pada uji Seliwanoff negatif terdapat gugus keton, dan pada ujiiodine positif terdapat endapan biru kehitaman yangmenunjukkan polisakarida.


32/35

B. Saran

Pada praktikum ini praktikan menyarankan agar praktikanselanjutnya memperhatikan penggunaan waktu dengan sebaik-

baiknya sehingga praktikum berjalan dengan baik danmemanfaatkan waktu dengan baik. Disarankan agar ekstrak buahyang digunakan dibawa dengan ampas (sisa) untuk nanti sebelumdigunakan disaring dengan kertas saring sehingga karbohidratdalam buah tidak terbuang bersama sisa dan disaring agar mempermudah praktikan mencampur ekstrak buah denganpereaksi.


33/35

DAFTAR PUSTAKA

Hutagalung, Halomoan. 2004. “Karbohidrat”. Jurnal IlmuGizi,(online), (library.usu.ac.id/download/fk/gizi-halomoan.pdf, diunduh

21 Maret 2016).

Septorini, Ragil.2008.”Perbedaan kadar glukosa pada onggokyang dihidrolisis dengan asam klorida, asam sulfat, dan asam oksalat”.Jurnal Ilmu Gizi,(online), (digilib.unimus.ac.id/files/disk1/107/jtptunimus-gdl-ragilsepto-5315-2-bab2.pdf, diunduh 21 Maret 2016).

Rahayu, Yuni Sri. dkk. 2016. Petunjuk Praktikum Biokimia.Surabaya:Jurusan Biologi FMIPA UNESA

Nurul,siti. 2013. “Karbohidrat”. Jurnal (online), (siti-nurul-fst12.web.unair.ac.id, diunduh 22 Maret 2016).


34/35

LAMPIRAN

Lampiran I

Foto: - uji molish:

- Uji benedict:


35/35

-Uji Seliwanoff

- Uji Iodine

- Uji Buah

MuhammDigitally signed by MuhammaJunaidi Fitriawan TrisnandaDN: cn=Muhammad JunaidiFit i T i d

laporan resmi praktikum biokimia uji karbohidrat

Documents