LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA DARAH

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIADARAHOleh : Widiyanti (4301410001)Prita Sri Sulastri (4301410017)Fransisca Ditawati N.P (4301410034)JURUSAN KIMIAFAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAMUNIVERSITAS NEGERI SEMARANGMemahami komponen utama yang terdapat dalam darahTerampil membuat plasma darah dan serum darahTerampil melakukan uji terhadap plasma darah, uji Fe dalam hemoglobin, uji albumin dan globulin dalam serum darah dan uji zat-zat non protein dalam serum darahTUJUANDarah adalah jaringan yang beredar dalam pembuluh darah yang tertutupDarah tersusun dari 55% bagian cair (plasma darah) dan 45% bagian padat (eritrosit dan leukosit)Darah pada umumnya bersifat: bersifat agak alkalis dengan pH = 7,36 Bersifat sebagai alat transport oksigen Mengatur adanya reaksi yang konstan Regulasi pada tubuh Pelindung kemungkinan terjadinya infeksi

DASAR TEORIKomponen darah yang bertugas mengangkut oksigen adalah sebuah pigmen dengan struktur kimia kromoproteida, berkomponen protein globin, dan zat warna hem. hem adalah derivat protoforfin yang di tengahnya terdapat ion Fe(II) termasuk gugus prostetik.Hemoglobin adalah zat warna darah tersusun dari gugus prostetik protohem dan protein globin.Protohem mudah terkoagulasi, untuk mencegahnya di tambah zat anti koagulan seperti oksalat, sulfat, atau EDTALANJUTANN. . .Alat MikroskopGelas objekPamanas spiritusKaki tigakasa Tabung reaksiCawan porselinPengaduk gelas

ALAT DAN BAHANBahan darahAsam asetat glasialNaCl encer (0,9%)Zn(OH)2 5%Kalsium klorida 20 %Asam klorida encerKalium ferosianidaKalium rodanidaAsam nitrat pekatAmonium sulfat jenuhAmonium sulfat padatGliserolNatrium karbonat padatAsam cuka 2 % asam nitrat encerPerak nitrat encerCupri sulfat encerBarium kloridaAmonium oksalat encer 10%Indikator klor phenol merah

Uji Plasma DarahUji Kristal Darah (Teichman) 1. Diletakkan di atas 1. Ditutup dengan gelas penutup gelas objek2. Dipanaskan sampai mendidih 2. Ditetesi setetes asam asetat3. Dibiarkan sampai dingin glasial dan NaCl encer

1. Diamati kristal haemin di bawah mikroskop2. Digambar kristal yang diamatiCARA KERJADarahDarah di atas gelas objekDarah di atas gelas objek dingin2. Uji Fe dalam Hemoglobin

1. Diletakkan dalam cawan porselin 1. Dicampurkan dalam tabung reaksi 2. Dipanaskan hingga terbakar 2. Dituangkan dalam cawan porselin

Dipanaskan hingga abu larut

Ditambah kalium ferosianida Ditambah Kalium rodanidaTabung 1HCl encer dan HNO3 Larutan DarahCairan DarahTabung 2Uji Senyawa dalam Serum DarahUji Albumin dan GlobulinUji Albumin

1. Dituangkan ke dalam tabung reaksi Disaring 2. Ditambah amonium sulfat jenuh 3. Dikocok kuat-kuat hingga terbentuk endapan

1. Dimasukkan dalam Dicuci dengan amonium tabung reaksisulfat setengah jenuh 2. Ditambah aquades dan dikocok

Serum DarahSerum darah yang ada endapanEndapanEndapanii. Uji Globulin Dimasukkan ke dalam Ditambah amonium sulfat padatTabung reaksi hingga berlebihan

1. Dimasukkan dalam Disaring 2. Ditambah aquades dan dikocok

Filtrat yang diperoleh dalam uji albuminFiltrat dalam tabungFiltrat dalam tabungEndapan2.Uji Zat-zat Non ProteinDimasukkan ke dalam Ditambahkan 10tabung reaksitetes aquades Ditambah asam cuka 2% tetes demi tetes. Hingga Terbentuk suspensi

Diatur pHnya = 5,4Disaring

Serum DarahSerum Darah dalam tabungSerum Darah dalam tabungSerum Darah dalam tabungFiltrat Ditambah amonium Ditambah perak nitrat 2 tetes gliserolBarium Klorida Oksalat dan asam nitrat natrium karbonat panatencer cupri sulfat encerFiltratUji Ion KalsiumUji Ion KloridaUji GlukosaUji Ion SulfatFiltratFiltratFiltratFiltratNoPercobaanSampelPerlakuanHasil pengamatn1Uji kristal darahDarah+ asam cuka glasial,+ Nacl encer, dipanaskan,Didinginkan,Diamati dengan mikroskopUji Fe dalam hemoglobindarahDipanaskan,+HCl, + HNO3 Dipanaskan, Disaring,Filtrat + Kalium ferosianida

Filtrat + KSCNFiltrat berwarna kuning kecoklatan

Fliltrat berwarna hijau pekat

Filtrat berwarna merah keclokatan2Uji AlbuninSerum darah+amonium sulfat jenuh,Dikocok dan disaring,Endapan dicuci dengan amonium sulfat jenuh.Endapan + aquadesTerbentuk endapan

Endapan larut

Uji globulinFiltrat yang dihasilkan dari uji albumin+amonium sulfat padatDikocok dan disaringEndapan + aquades =Terbentuk endapan putih

Endapan larut dan terbentuk larutan keruh

3Uji Zat non proteinSerum darah+ aquades,+ asam cukaKeruh, terbentuk suspensiUji Ion KalsiumFiltrat+ ammoium oksalatTerbentuk endapan putih.Larutan keruh.Uji Ion KloridaFiltrat+ perak nitrat encer+ asam nitrat encerTerbentuk endapan putih.Larutan keruh.Uji Glukosafiltrat+ gliserol, + natrium karbonat, + cupri sulfatTerbentuk endapan merah bata, dan larutan biruUji ion sulfatfiltrat+ barium klorida encerTerbentuk endapan putih.Larutan keruh.HASIL PERCOBAAN

Uji Plasma DarahUji kristal darahDari hasil pengamatan yang dilakukan di bawah mikroskop didapatkan kristal yang agak memanjang seperti jarum-jarum kecil.Reaksi yang terjadi :Hb + HCl globin + ferohemeFeroheme+O2+2HCl 2 feriheme klorida(haemin)Hb + alkali (basa) globin + ferohemeFeroheme + O2 +2HCl 2feriheme hidroksida(alkali hematin)

PEMBAHASAN2. Uji Fe dalam HemoglobinHem adalah suatu kandungan yang terdapat di dalam hemoglobin dan merupakan derivat dari protein yang mengandung besi.Besi yang terkandung dalam Hb adalah dalam bentuk Fe(II)

Dalam percobaan ini, sampel darah dipanaskan hingga terbakar semua, dengan tujuan untuk mengoksidasi Fe(II) menjadi Fe(III)Fe2+ Fe3+ + e

Penambahan aquaregia (HCl dan HNO3) berfungsi untuk mengikat Fe dalam reaksiFe3+ + 3Cl- FeCl3

Filtrat ditambah larutan K4[Fe(CN)4] menghasilkan larutan berwarna hijau Fe3+ + K4[Fe(CN)4] FeK[Fe(CN)6] + 3K+

Filtrat ditambah larutan KSCN menghasilkan larutan berwarna merah kecoklatanFe3+ + 3KSCN Fe(SCN)3 + 3K+

Uji senyawa dalam serum darahDalam uji albumin dan globulin menggunakan teknik salting out dengan teknik utama yaitu pengendapan.Uji albuminDari hasil pengamatan didapatkan bahwa endapan larut dalam aquades. Hal ini menunjukkan uji albumin dalam serum darah positif (+)2. Uji globulinDari hasil pengamatan didapatkan bahwa endapan larut dalam aquades dan terbentuk larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji globulin dalam serum darah positif (+)

3. Uji zat-zat non proteinUji ion kalsiumDari hasi pengamatan, filtrat ditambahkan larutan (NH4)2C2O4 didapatkan endapan putih CaC2O4 dengan larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji adanya ion kalsium dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi:Ca2+ + (NH4)2C2O4 CaC2O4 + 2NH+

b. Uji ion kloridaDari hasi pengamatan, filtrat yang ditambah larutan AgNO3 encer dan HNO3 didapatkan endapan putih AgCl dengan larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji adanya ion klorida dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi:Cl- + AgNO3 AgCl + NO3-c. Uji glukosaDari hasi pengamatan, filtrat yang ditambah larutan gliserol, natrium karbonat padat, dan larutan cupri sulfat menghasilkan endapan merah bata Cu2O. Hal ini menunjukkan uji adanya glukosa dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi: o +2Cu2+ + 4OH- + Cu2O + 2H2O

d. Uji ion sulfatDari hasi pengamatan, filtrat yang ditambah larutan BaCl2 didapatkan endapan putih BaSO4 dengan larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji adanya ion sulfat dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi: SO42- + BaCl2 BaSO4 + 2Cl-Uji Fe dalam hemoglobin memberi hasil positif.Kristal darah berbentuk seperti jarum-jarum kecil yang memanjangSerum darah mengandung protein yaitu albumin dan globulin.Albumin larut dalam air.Globulin tidak larut dalam air.Uji adanya ion kalsium memberi hasil positif, dengan terbentuknya endapan putih kalsium oksalat.Uji adanya ion klorida memberi hasil positif, dengan terbentuknya endapan putih perak klorida.Uji adanya glikosa memberi hasil positif, dengan terbentuknya endapan merah bata Uji adanya ion sulfat memberi hasil positif, dengan terbentuknya endapan putih barium sulfat

KESIMPULANBerhati-hati dalam menggunakan alat dan bahan laboratoriumDalam melaksanakan praktikum, setiap kelompok harus dapat bekerjasama dengan baik, serta dapat membagi tugasTeliti dalam mengamati perubahan warna yang terjadiSARANSawaldi dan Titik Agus. 2008. Buku Ajar Biologi. Solo: CV SindhunataTim Dosen Biokimia. 2012. Petunjuk Praktikum Biokimia. Semarang: Laboratorium Kimia Bioorganik Kimia FMIPA UNNESDaftar pustakaTerima kasih