La regeneracin de hepatocitos ' brotes ' en la cirrosisa partir de clulas madre intrabiliarOlga Falkowski1,, Hee Jung An2,, I. Andreea Ianus3, Luis Chiriboga3, Herman Yee3,A. Brian West3, Neil D. Theise4,*1Department of Pathology, Albert Einstein College of Medicine, Yeshiva University, Bronx, NY, USAintroduccinEn los tejidos humanos clulas madre intrabiliar contribuyen a la reconstitucin de los hepatocitos despus de una lesin aguda grave este trabajo demostr con reconstruccin en tres dimensiones las reacciones ductular (DRS ) en necrosis heptica masiva, representan redes complejas de arborescente de clulas altamente proliferativas que provienen del arbol biliar , en gran parte de los canales de Hering, y diferenciarse en nuevos hepatocitos .el Anlisis del patrones de tincin pde marcadores especficos biliar y de hepatoitos crnicamente enfermos de diversas causas muestra un patrn tpico : los gradientes de las clulas que van desde tipo cholangiocito y tipo hepatocito interiniendo clulas de morfologa e inmunofenotipo intermedio

Tales gradientes celulares se pueden explicar como la activacin de clulas madre , o como la metaplasia de biliar daados crnicamente , hepatocitos colestasisicos .Para explorar esta cuestin hemos empleado dos enfoques . La primera considera la colestasis de los hepatocitos . Si la hiptesis de la metaplasia es correcta, entonces loss hepatocitos colestsicos ser ms probable que est asociado con la reaccin ductular .El segundo enfoque es similar al utilizado en este estudio, necrosis heptica masiva , tratando de establecer si surgen la reaccin ductular de el rbol biliar , los hepatocitos en regeneracin o , a la inversa , representar lesin hepatocelular grave . Debido a la dificultad de reconstrucciones tridimensionales de grandes ndulos hepatocelulares nos limitamos al estudio de pequeas agrupaciones de hepatocitos intraseptales ( ISHS ).se ha referido a estos pequeos ndulos como " brotes " , identificando como una de las ocho caractersticas de una "reparacin hepatocelular compleja " , el conjunto de cambios histolgicos que pueden conducir a regresin de la cirrosis [ 11 ] . 2 . Los procedimientos experimentales2.1 . Histologa de rutina e inmunohistoqumica

Bloques de parafina de hgados de pacientes sometidos a trasplante heptico ( ' explantes ' ) paraenfermedad primaria colestsica del hgado (cirrosis biliar primaria ,colangitis esclerosante ) y enfermedad heptica no colestsica (enfermedad alcohlica del hgado , hepatitis B , y ) . Se examinaron con hematoxilina y eosina y con inmunohistoqumica para citoqueratinas de tipo biliar . La inmunotincin se realiz usando anticuerpo monoclonal frente a la citoqueratina 19 Los heatocitoss itraseptales se definieron como hepatocitos redeados completamente de tejido fibroso, Se analizaron las siguientes caractersticas histolgicas de los hepatocitos intraseptales :1 . ndulos 2 . asociacin con citoqueratina 19 3 . colestasis

3 . ResultadosSe resumen en las tablas 1 y 2 .

El nmero de ndulEl grado de colestasis entre ndulos y suelta no fue estadsticamente significativa .Anlisis por categora de enfermedad (Tabla 2 ) , revela que ISH ndulos y agrupaciones sin reacciones ductular son ms comn en la enfermedad de colestasis biliar primaria crnica cirrosis y la colangitis esclerosante primaria.El anlisis tridimensional de los ndulos de ISH , reacciones ductular y conductos biliares interlobularesen la hepatitis C se resume en la Tabla 3 .

En las secciones Las tasas de proliferacin de los hepatocitos se elevan hasta la etapa tarda la enfermedad , es decir, la cirrosis, cuando aparecen a la baja, al mismo tiempo con un aumento en las tasas de proliferacin de reaccion ductular ms pronunciada.4 . discusin

Los estudios recientes de hgados gravemente enfermosla combinacin de inmunohistoqumica con Reconstruccin tridimensional o con biopsias seriadas ponen de manifiesto que las reacciones ductular son la activacin de clulas madre dentro del rbol biliar , particularmente los canales de Hering . Por otra parte , las clulas circulantes , probablemente en menos en parte derivadas de mdula sea , tambin puede contribuir a la regeneracin del hgado en lesin aguda.Los estudios definitivos de reacciones ductular de hgado crnicaenfermedad no han sido reportados. En este estudio, hemos yuxtapuestos las dos hiptesis opuestas sobre cmo reacciones ductular pudiera surgir.Nuestros datos apoyan la antigua hiptesis, clulas madre para la formacin de reacciones ductular y ISH en la cirrosis :1 . examen de los explantes cirrticos de diversas enfermedades revela que la mayora de los hepatocitos intra septales se asocian con reacciones ductular (Tabla 1 ) ;2 . reacciones ductular se asocian ms frecuentemente con hepatocitos que no son colestsica , implicando funcional vinculacin de ISH para el rbol biliar ( Tabla 2 ) ;3 . hepatocitos colestsicas se asocian con menos frecuencia con reacciones ductular , lo que implica que la metaplasia biliar de hepatocitos colestsicas no es un mecanismo de formacin de la reaccin ductular ( Tabla 2 ) ;4 . reconstruccin tridimensional de hepatocitos intraseptales en la hepatitis cirrosis demuestra que en se asocian con reacciones ductular que forman un vnculo estructural y probablemente fisiolgica al rbol biliar ( Tabla 3 ) ;

5 . la proliferacin de hepatocitos en las primeras etapas de la hepatitis C crnica cuenta con gran regeneracin de los hepatocitos , Este estudio es menos claro que los canales de Hering son la localizacin predominante de estas clulas ,lo que sugiere que otras porciones del rbol biliar puede tener esta capacidad. Mientras que en la figura . 4 el ndulo de hepatocitos enlaces de la va biliar por una ramificacin,cholangiocyte estructura forrada sin lumen obvia (es decir,un canal de Hering o ductule terminal) , fig. La figura 3 muestra un ISH ndulo pareciendo surgir de una bilis intralobular realconducto . Por lo tanto , las poblaciones de madre / progenitoras para el hgado no sonrestringido a los canales de Hering .

cuando la replicacin de hepatocitos es interferido , entonces el reservorio de clulas madre activa , dando lugar a la reaccin ductular . Las reacciones ductular sirven al menos dos distintos funciones fisiolgicas : son clulas progenitoras facultativos y , cholangiocytes tambin funcionales biliares conductor . , no podemos excluir la posibilidad de que hepatocitos atrapados dentro del tejido de la cicatriz pueden ser capaces de regenerar estructuras ductular que luego encuentran su camino , quizs quimiotcticamente , a travs del estroma , de ligar el rbol biliar a travs de una sola estructura lineal ( fig. 3 ) .En ese trabajo se sugieren que si el agente que causa la enfermedad en la cirrosis puede ser elimina o se detuvo , a continuacin, el hgado es capaz de gran remodelacin , tal vez volver a un funcionamiento normal . ellos describir el ' complejo de reparacin heptica ' como un conjunto de caractersticas histolgica de restitucin arquitectnica , uno de los cuales es el hepatocitos ' brote ' . Apoyamos su interpretacin de brotes de hepatocitos como ser un fenmeno regenerativa .( 1 ) del rbol biliar, por lo menos de sus ramas ms pequeas hasta los canales de Hering , se compone de clulas madre hepticas ; ( 2 ) celulass tienen funciones tanto regenerativa y fisiolgicas de bilis juegan un doble papel ( 3 ) ' brotes ' estos hepatocitos pueden jugar un papel en la regresin estructural de la cirrosis como sugiere Wanless y colegas.