la cytomÉtrie en flux par serge sénéchal. comment définir la cytométrie en flux ? la...
TRANSCRIPT
![Page 1: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/1.jpg)
LA CYTOMÉTRIE EN FLUXLA CYTOMÉTRIE EN FLUX
Par Serge Sénéchal
![Page 2: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/2.jpg)
Comment définir la Cytométrie en flux ?
La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer simultanément de multiples
caractéristiques physiques d’une cellule.
Le cytomètre enregistre le comportement de la cellule quand celle-ci passe devant le laser en mesurant:
1- La diffusion de la lumière incidente
2- L’émission de la fluorescence
![Page 3: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/3.jpg)
Un Cytomètre est une combinaison de 3 différents systèmes :
1) Système fluidique : Flux laminaire qui permet aux cellules en suspension de passer une à une devant le laser.
2) Système optique : Rayon laser et différents filtres qui permettent de sélectionner les longueurs d’ondes appropriées.
3) Système électronique : PMT qui capte la lumière émise,digitaliseur qui la transforme en signal électrique puis en signal numérique et finalement l’ordinateur qui gère et entrepose les données.
![Page 4: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/4.jpg)
Les renseignements transmis par le cytomètre à propos des cellules sont:
1- Sa taille relative (FSC)2- Sa granularité relative (SSC)3- L’intensité de la fluorescence émise (Fl)
FSC
SSC
![Page 5: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/5.jpg)
Filtre: Passe-haut
LP 500
480 500 520
![Page 6: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/6.jpg)
Filtre: Passe-bas
SP 500
480 500 520
![Page 7: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/7.jpg)
Filtre: Passe-bande
480 500 520
500/40
460 540
![Page 8: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/8.jpg)
Pics d’émission de fluorescence de différents fluorochromes
![Page 9: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/9.jpg)
- +
Tri cellulaire
Tube de collecte
Laser
Plaques de déflexion
Veine liquide d’entraînement
Non sélectionnées
![Page 10: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/10.jpg)
Cytométrie en flux
FL1
FL2
SSC
FSCLaser
Miroirsdichroïques
Filtres
PMT
PMT
PMT
Diode
![Page 11: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/11.jpg)
Perspectives d’avenir
Des analyseurs avec 3 ou même 4 différents lasers nous permettant de détecter jusqu’à 8 fluorescences (couleurs) simultanément sur la même cellule.
Des trieurs encore plus rapides avec une vitesse atteignant 60,000 évènements/seconde. Des tris à 4 voies donc, possibilité de trier 4 sous-populations cellulaires en même temps, à partir du même échantillon. Ces appareils peuvent lire jusqu’à 15 paramètres différents (FSC + FL1 à FL14).Un système électronique digital au lieu d’analogique qui nous donne une plus grande sensibilité et une plus grande précision.
L ‘apparition de nouveaux fluorochromes conjugués à différents anticorps et des ordinateurs toujours plus puissants pour gérer le tout.
Des appareils encore plus performants sont déjà sur le marché:
![Page 12: LA CYTOMÉTRIE EN FLUX Par Serge Sénéchal. Comment définir la Cytométrie en flux ? La Cytométrie en flux est une technologie qui nous permet de mesurer](https://reader035.vdocuments.mx/reader035/viewer/2022062404/551d9dc3497959293b8e1ad4/html5/thumbnails/12.jpg)
Liens utiles
Cytoguide
BD Biosciences
Purdue Cyto (Présentations PowerPoint)
Cliquez durant la présentation pour un accès direct au site