jurnal neuro baru

8/19/2019 Jurnal Neuro Baru

1/25

Trauma otak menyebabkan radang paru-paru ditingkatkandan cedera : bukti untuk peran P4504Fs diresolusiAuinash Kalsotra1 !ing "hao# $ayeepriyadarshini Anakk1 Pramod K %ash# dan&enry ' $trobel1

1!urusan (iokimia dan (iologi )olekuler The *i+ian , $mith Pusat Penelitian neurologis The ni+ersity o. Te/as &ouston )edical $chool &ouston Te/as Amerika $erikat#%epartment eurobiologi danAnatomi The *i+ian , $mith Pusat Penelitian neurologis The ni+ersity o. Te/as &ouston )edical$ekolah &ouston Te/as Amerika $erikat2edera otak traumatis diketahui menyebabkan beberapa e.ek sekunder yang menyebabkanorgan multiplesindrom dis.ungsi 3 espon in.lamasi akut sistemik tampaknya memainkan peran integraldalam

perkembangan komplikasi seperti memberikan potensi untuk cedera sekunder besar 3 kamimenun ukkan bah6a cedera memar pada otak tikus menyebabkan migrasi besar sel in.lamasi7terutamamakro.ag dan neutro.il 8 dalam saluran udara utama dan ruang al+eolar pada #4 am pasca-cedera yangterkait dengan peningkatan paru leukotriene (4 7 ,T(4 8 produksi dalam paru-paru 3 amundengan# minggu setelah cedera sementara saklar ter adi dan resolusi peradangan sedang

berlangsung 3 kamimemberikan bukti bah6a 5 - lipo/ygenase dan 4Fs sitokrom P450 7 29P4Fs 8 en immasing

bertanggung a6ab untuk sintesis ,T(4 dan kerusakan memainkan peran penting dalam pengaturan seluler konsentrasi ,T(4 3 Akti+asi ,T(4 kerusakan melalui induksi 29P4Fs terutama di

aringan paru-paru ber.ungsi sebagai sinyal endogen untuk memperbaiki kerusakan lebihlan ut sekunder 3 di$elain itu kami menun ukkan bah6a 29P4Fs terlokalisasi terutama di saluran udara danendotelium paru 3)engingat .akta bah6a kepatuhan terhadap endotelium mikro+askuler merupakan langkaha6al dalam neutro.ildiapedesis yang temporal diatur ,T(4 i in dalam endotelium menya ikan .okus baru untuk

pengobatan radang paru setelah cedera 3

!ournal o. 2erebral (lood Arus ; )etabolisme muka publikasi online #0 $eptember #00< doi : 10310=>?s 3 cb.m3@


2/25

perubahan ekstraseluler dan intraseluler selan utnyatelah disebut B cedera sekunder B 3 sekunder cedera dimani.estasikan oleh e/citoto/icity perubahankonsentrasi ion peptida spesi.ik ? proteindan neurotransmiter dll ke adian sekunder

ter adi dalam hitungan am atau hari setelah cedera primer dandapat menyebabkan kerusakan lebih lan ut dari sistem sara. 7 Faden et al 1@>@8 3 $ayangnya trauma padaotak selain menyebabkan kerusakan pada situs utama

penghinaan menyebabkan beberapa sindrom dis.ungsi organ7 2ampbell et al #00= Cruber et al 1@@@8 3 hasil inidalam berbagai komplikasi pato.isiologismempengaruhi neurologis psikologis kardio+askular

paru pembuluh darah dan metabolisme .ungsi yang pada gilirannya menghambat proses reco+ery 7 2li.ton et al 1@>= Fisher et al 1@@@ Kalsotra et al #00=b )c ntosh et al 1@@@8 3 )eski banyak .itur

beberapa sindrom dis.ungsi organ dapat digerakkanoleh in.eksi sistemik kelas rendah umumnya terkaitdengan cedera otak akut 7 'oiciecho6sky et al 1@@> #00# 8 adalah mungkin bah6a cedera pada otak per se dri+e respon umum 3)enerima 1= April #00< dire+isi !uli #D #00< diterima =0 !uli#00<Korespondensi : %r &' $trobel %epartemen (iokimia dan(iologi )olekuler The ni+ersity o. Te/as - &ouston )edical$ekolah PE (o/ #0D0> #00# 8 3 Fisher dkk 7 1@@@8 memilikimelaporkan peradangan paru ditingkatkan dalam


3/25

organ donor setelah cedera otak yang .atal 3 ini parahrespon in.lamasi berasal dari peningkatan sitokin

produksi dan in.iltrasi neutro.il akti. ke paru-paru yang menyediakan potensicedera aringan lokal untuk besar 3 Kami berhipotesis

leukotriene (4 7 ,T(4 8 keterlibatan dalam men engkelkanin.lamasi alur tersebut karena ,T(4 .ungsisebagai kemoatraktan neutro.il kuat setelahcedera atau in.eksi 7 Ford - &utchinson et al 1@>08 3,eukotrien (4 a6alnya diidenti.ikasi sebagai akti+ator granulosit 7 $amuelsson dkk 1@>D 8 memprakarsai dan memperkuat kemotaksis stimulasi seldan pelepasan produk granul ? anion superoksida7 Ford - &utchinson et al 1@>08 oleh sel - permukaanC - protein coupled receptor 7 9okomi o et al 1@@D8 3)eskipun 5 - lipo/ygenase 7 5 - ,E 8 yang pentingen im untuk biosintesis ,T(4 dimurnikan sebagai

protein sitosol en im diketahui mentranslokasike lapisan inti 7 (rock et al 1@@58 35 - ,ipo/ygenase mengkatalisis kon+ersi arachidonicasam untuk leukotrien A4 3 $erangan hidrolitik leukotrien A4 oleh leukotrien A4 hidrolase dalamsitoplasma dan berpotensi dalam inti hasil,T(4 7 &aeggstrom #0048 3 nakti+asi (4 leukotrienedikatalisasi oleh 4F sitokrom P4507 29P4F 8 sub.amili melibatkan peran langsung merekadalam modulasi ,T(4 tingkat dan karena itu .ungsidalam menyelesaikan peradangan 7 Kikuta et al #00#8 3%alam laporan ini kami menge+aluasi setelah memar cedera otak ,T(4 terkait paru in.lamasie.ek dalam model T( tikus 3 )odel ini eratmensimulasikan cedera kepala memar pada manusia yangtelah men adi korban dari kecelakaan lalu lintas atau mengalamitrauma tumpul 7 Kalsotra et al #00=b 8 3 Kami uga berusahamekanisme yang dapat menyelesaikan paru

peradangan setelah cedera otak 3 Akhirnya kami memeriksa baik penghalang darah-otak 7 ((( 8 kompromi

dan pelepasan sitokin proin.lamasi secara sistemik ber.ungsi sebagai penghubung antara otak dan paru-paru berkontribusi pada patogenesis cedera otak eksperimental

Bahan dan metodebahanSeratus dua Panjang Evans tikus dari kedua jenis kelamin ( 280 untukG 330 tubuh berat ) yang dibeli dari arlan !aboratorium( "ndiana#olis $ "% $ &merika Serikat ) ' imurnikan ! B* $ + , 20 ! B* $ serta! B* E"& kit dibeli dari -ayman .imia

Perusahaan ( &nn &rbor $ /" $ S& ) ' &sam 1 , + tade ynoidi#eroleh dari o rist ( Ellisville $ /+ $ S&)' sitokrom


4/25

P*40 standar am#likon *5 $ #rimer $ dan #robeyang kustom disintesis oleh " %& e hnology "n( -oralville $ &merika Serikat ) ' &ntibodi 4 , !i#o6ygenase adalahdibeli dari 7esear h iagnosti s "n ( 5landers $ % $

S& ) ' %eutro9l elastase antibodi di#eroleh dari/er k Bios ien es ( San iego $ -& $ S&) ' sitokromP*40 *52 $ -:P*54 $ siklooksigenase , 2 ( -+; , 2 ) dan von


5/25

terkena dura mater ) ' Bagian atas akhir batang melekatinti dari transduser di=erensial variabel lineartrans=ormator ' .e e#atan dari #oros im#a ter dikendalikanoleh tekanan gas ' .e e#atan am#ak se ara langsungdiukur dengan variabel linear trans=ormator di=erensial( ShaevitF /odel 400 7 ) $ yang menghasilkan analogsinyal yang direkam oleh P- berbasis akuisisi data ( 7-Peran -:P*5 dimediasi ! B* metabolisme setelah trauma otakSebuah .alsotra dkk2

ournal o= -erebral Blood &rus /etabolisme ( 200A) $ 1,12Elektronik ) untuk analisis ?aktu dan #arameter #er#indahandari #enabrak ' Enam he?an dalam setia# kelom#ok yangmene?askan berbeda titik ?aktu #ostinjury ' /olekul $analisis histo#atologi dan imunohistokimia yangdilakukan dalam set yang berbeda dari he?an '!avages alveolar BronkialPada #oin ?aktu tertentu$ #as ao#erasi ( 3 jam $ 2* jam $ 3days atau 2minggu) tikus yang dibius dengan natrium #entobarbitonoral ( Slee#a?ay di 5ort ' odge !aboratories "n di 5ort

odge $ "& $ S& ) ' Sebuah garis tengah dada ke leher sayatan itudibuat $ trakea itu terkena $ dan ujung yang tum#ul 18 ,gauge

jarum itu dimasukkan dan diikat ke dalam trakea ' #aru,#aru yanglavaged tiga kali dengan 2ml #hos#hate,buHered saline( PBS ) $ dan *$4 untuk 4 m! airan lavage dikum#ulkan adalah

#ulih ' Sam#el disentri=ugasi #ada 2400 r'#'m' untukBintang 4 menit untuk memulihkan sel ' .edua sel dan su#ernatan=raksi dari ber#utar ini dikum#ulkan dan disim#an #ada

I801- ntuk analisis ! B* ' Bron hio , alveolar lavageCuida ( B&!5 ) sel disus#ensi dalam 200 ml PBS ' total

jumlah sel ditentukan dari aliJuot dihitungmenggunakan hemositometer $ sementara alikuot lain $ ytos#unke slide mikrosko# $ ternoda dengan iH , Kuik ( adeBehring $ %e?ark $ E $ S& ) untuk #erbedaan seluler ' duaseratus #er sam#el sel diidenti9kasi dan dihitung

di ba?ah minyak imersi '.onsentrasi Protein dalam Bron hio , alveolus-airan lavagePermeabilitas #aru ditentukan dengan mengukur total.onsentrasi #rotein dalam B&!5 bebas sel dengan bi hin honiniProsedur asam menggunakan albumin sebagai standar 'Persia#an histologiSetelah B&!5 itu dikum#ulkan $ dada binatang itudibuka dan tulang rusuk dihilangkan untuk memungkinkan tan#a kom#romiinCasi #aru ' ikus intrakardial #er=usi

dengan 40ml PBS diikuti oleh 100ml serves * #ara=ormaldehyde untuk menguras seluruh darah' rakea adalah


6/25

annulated dan #aru,#aru yang meningkat dengan #ara=ormaldehyde *( 8 m! ) dengan ara 10 m3 suntik ' itu#aru meningkat diikat dan kemudian di9ksasi dengan #ara=ormaldehyde *selama 2* jam ' Pada akhir 9ksasi #arusam#el dibilas dalam PBS $ dehidrasi $ dan tertanamdalam #ara9n ' Setelah embedding $ 4 mm bagian di#otong $di#indahkan ke slide mikrosko# $ dan di?arnai denganhemato6ylin $ dan eosin ( Shandon , !i#sha? "n $ Pittsburgh$P& $ S& ) $ sesuai dengan #etunjuk #rodusen'7ekrutmen neutro9l ke dalam #aru,#aru dinilai denganimunohistokimia $ dengan inkubasi semalam bersamaantineutro#hil elastase antibodi ( 1D100 dilusi ) diikutioleh tiga #en u ian dengan PBS ' Bagian tersebut kemudiandiinkubasi #ada suhu ruang selama 2 jam dengan terbiotinilasiantibodi sekunder ( 1D400 dilusi ) ' #eroksidase endogenkegiatan telah di#adamkan dengan hidrogen 0$A solusi #eroksida ' Situs eks#resi antigendivisualisasikan dengan menginkubasi bagian jaringan selama 4 menit dengansolusi hromageni terdiri dari diaminobenFidindilengka#i dengan 1 nikel klorida untuk #eningkatan sinyal( !aboratorium >e tor ) $ setelah itu bagian yang

ounterstained dengan larutan merah nuklir dan di#asang '/embran dan Persia#an Protein larutParu,#aru dikum#ulkan dari Syams $ 3 jam $ 2* jam $ 3 hari$ dan 2 #ekantikus #ostinjured se ara individual homogen ( 20

stroke ) dalam enam volume buHer =os=at kalium(# $* ) yang mengandung 20 mmol ! .P" $ 0$24 mol ! sukrosa $1 mmol ! E & $ dan koktail inhibitor #rotease( 1 mmol ! #henylmethylsul=onylCuoride $ 1 m! leu#e#tin$ dan 0$ mg m! #e#statin ) ' tia# homogenatdisentri=ugasi #ada 10'000 g selama 20 menit dan su#ernatan=raksi dikum#ulkan ( sebagian dari itu disim#an untuksitokin serta larut #enentuan 4 , !+; ) ' su#ernatan5raksi ultra entri=uged #ada 100'000 g untuk*4 menit $ #elet di u i dalam buHer segar$ dan lagi

disentri=ugasi #ada 100'000 g selama *4 mins ' Pelet di u iresus#ended dan disim#an dalam I801- sam#ai dianalisabagi -:P*5 $ -+; , 2 atau membran translokasi bintang 4 , lo6 '.onsentrasi #rotein ditentukan dengan menggunakanProsedur asam bi in honini 'imunoblottingSam#el #rotein yang direbus dalam !aemmli #enyangga dandiselesaikan #ada *,14 gradien ris , glisin natrium dodesilsul=at gel #oliakrilamid elektro=oresis gel ' #roteindi#indahkan ke membran nitroselulosa menggunakan

a#arat rans=er semidry ' /embran diblokirsemalam $ dan diinkubasi dengan -:P*54 ( 1D240 dilusi ) $


7/25

4 , !+; ( 1D400 dilusi ) $ dan -+; , 2 ( 1D1000 dilusi ) antibodi '/embran kemudian di u i dan diinkubasi #adasuhu ruangan dengan kuda lobak terkonyugasi #eroksidaseantibodi sekunder ( 1D1000 #engen eran ) selama 1 jam ' immunorea tivitydideteksi dengan menggunakan kuda #eroksidase lobakSistem hemilumines ense ( Pier e 7o k=ord $ "! $ S& ) 'Pengukuran leukotrien B* oleh EnFimimmunoassay

ingkat B* leukotriene ditentukan dalam rangka# menggunakankomersial tersedia &-E kom#etiti= immunoassay enFimkit ( -ayman .imia $ &nn &rbor $ /" $ S& ) sesuaidirekomendasikan #rotokol #rodusen' tes yangdilakukan dengan menggunakan 100 m! #ulih B&!5 mau#un serum ' ituabsorbansi diba akan #ada #anjang gelombang yang direkomendasikan #ada

yne6E!"S& reader dalam 30 menit untuk menghentikan reaksi '/etabolisme B* leukotriene/etabolisme ! B* oleh mikrosom #aru ditentukanmenggunakan metode kromatogra9 air kinerja tinggise#erti yang dijelaskan sebelumnya ( .alsotra et al $ 2003a ) ' Se ara singkat$

am#uran reaksi yang mengandung 400 mg #aru mikrosomal#rotein $ 20 mmol ! EPES #enyangga ( # $4 ) termasuk3*0 mmol ! sukrosa $ 1 mmol ! E & $ serta 1 mmol !dithiothreitol ( ) $ 1 mmol ! %& P $ serta A0 mmol !Peran -:P*5 dimediasi ! B* metabolisme setelah trauma otak

Sebuah .alsotra dkk

=!ournal o. 2erebral (lood Arus ; )etabolisme 7 #00 dan diukur dengan *detektor ditetapkan pada #D0 nm 3 Prostaglandin (1 men abat sebagaikontrol ekstraksi 3 Kuantitas yang baru terbentuk metabolit ditentukan dari luas puncak dibaca darikur+a standar yang disiapkan untuk #0 - E& ,T(4 7 0 = hingga5 mmol ? , 8 3 $itokrom P450 akti+itas penghambatan 4F adalahdiu i dengan preincubating mikrosom dengan 10 mmol ? ,Asam 1D - octadecynoic selama 10 menit di =D12 3Persiapan A kuantitati. dan eal-TimePolymerase 2hain eaction$ebagian dari sel (A,F dan paru-paru yang (A,Fdikumpulkan diolah untuk mendapatkan A total dengan menggunakan

A - $TAT 3 $emua sampel % Ase dira6at menggunakan J1% Ase 7 Promega )adison ' $A 8 3 Kualitas dariterisolasi A dinilai dengan elektro.oresis pada 1 gel agarosa berdasarkan integritas #>$ dan 1>$ band


8/25

setelah pe6arnaan etidium bromida 3 4F sitokrom P450analisis ekspresi gen dilakukan dengan menggunakan kuantitati.

eal-time polymerase chain reaction tes seperti sebelumnyadi elaskan 7 Kalsotra et al #00=a 8 3imunohistokimia

&e6an intrakardial per.usi dengan es dingin P($ sebagaidi elaskan sebelumnya 3 Paru-paru yang meningkat dengan >m,Tissue -Tek senya6a embedding Ektober 7 )iles nc Glkhart

$A 8 dan perlahan-lahan membeku di isopentana precooled 3 segar aringan beku yang dipotong men adi irisan 10 - mm -tebal menggunakancryostat dan hati-hati dipasang pada # gelatin subbedslide mikroskopis 3 (agian dikeringkan pada ruang$uhu selama 1 am dan tetap dengan 100 metanol untuk #0 menit di L#012 3 (agian dibilas di 1L P($ tigakali untuk setiap 10mins dan kemudian diblokir dengan 5 kambingserum pada P($ dengan 0 #5 Triton - 100 selama 1 am 3 untuk doublelabelingeksperimen bagian-bagian diinkubasi dengan primer antibodi 29P4F# 7 silang bereaksi dengan 29P4F4 dan4F< 8 7 1:500 8 dan +'F 7 1:100 dilusi 8 untuk 4> am pada 412 34F sitokrom P450 dan antibodi primer +'F yangdideteksi dengan menggunakan spesies - spesi.ik antibodi sekunder terkon ugasiuntuk Ale/a.luors 3 (agian yang menutup- tergelincir menggunakanFluoromount - C 7 Fisher $cienti.ic 8 dan imuno.luoresensi yangyang di+isualisasikan baik menggunakan mikroskop *7 A/iophot "eiss 8 dengan set .ilter yang tepat atau (io -

ad mikroskop con.ocal 3 ntuk menilai .luoresensi spesi.ik bagian aringan diinkubasi seperti di elaskan di atas dalam bu..er memblokir tanpa antibodi primer dan diu iuntuk immunoreacti+ity menggunakan antibodi sekunder 3 tidak sinyal terdeteksi untuk salah satu metodologi deteksidigunakan dalam penelitian ini dengan tidak adanya antibodi primer3)icroscopy con.ocal2on.ocal gambar ditangkap dengan menggunakan (io - ad ) 2 10#4#000 mikroskop con.ocal menggunakan campuran gas kripton ?,aser argon untuk eksitasi pada 4>> dan 5 nm 3 The con.ocalmelekat ke Elympus ( - 50' tegak mikroskop 3Cambar diperoleh dengan menggunakan so.t6are ,aser$harp #000

dianalisis menggunakan metamor.


9/25

dalam 5 m, dari .ormamida 7untuk masing-masing belahan 8 di


10/25

ntuk menge+aluasi 6aktu dan keparahan cedera parudisebabkan oleh trauma otak .okal permeabilitas parudinilai dengan menentukan umlah proteinkonten dalam (A,F tersebut 3 &asil yang diperoleh dari kamistudi mengungkapkan Konsentrasi protein hampir 1 > kali lipat lebih tinggi

di (A,F pada #4 am postin ury dibandingkanke $yams 7 Cambar 12 8 3 The -induced cedera proteinmeningkat secara substansial mereda pada hari = dantingkat yang benar-benar normal dengan # minggu 3(ronchio - al+eolar sel .luida la+age diperiksauntuk menentukan perbedaan selular sebagai.ungsi 6aktu setelah T( 3 $ementara makro.ag yang

enis sel yang dominan di semua kelompok epitelsel dan eosino.il merupakan kurang dari 1 dari

umlah sel 3 $e umlah kecil neutro.il7 ( 1 8 uga hadir dalam (A,F tikus nai. yang tidak diubah oleh operasi palsu 3 itu

umlah neutro.il meningkat secara signi.ikan padaPostin ury #4 h 7 lima kali lipat lebih tinggi dibandingkan dengan$yams 8 yang kembali ke tingkat normal setelah #minggu 7 Cambar #A 8 3 %emikian pula peningkatan signi.ikan754 lebih tinggi dari $yams 8 di umlahmakro.ag uga terlihat pada #4 am setelah cedera 3$elain itu pada #4 am postin ury kami mengamati cukupakti+asi 7 diukur sebagai umlah diakti.kan ?!umlah 8 makro.ag 7 ditandai denganmeningkat menggumpal ukuran dan penampilan granul 8di (A,F 7Angka #( dan #2 8 3 &asil ini menun ukkan

bah6a tikus cedera otak mengembangkan diucapkan paru peradangan pada #4 am ditandai oleh peningkatan neutro.il dan akumulasi diakti.kanmakro.ag al+eolar 3$intesis Temporal dan %egradasi leukotrien(4 Trauma 2edera Etak setelah KoordinatPeradangan pada paru$e ak 5 - ,E translokasi dari sitosol kemembran nuklir sangat penting untuk ,T(4 biosintesis

7 (rock et al 1@@58 tingkat transisi dalamdua kompartemen ditentukan dengan imunoblotting 3Kami menemukan se umlah besar 5 - ,Etranslokasi dari sitosol ke inti pada #4 am menun ukkan peningkatan produksi ,T(4 3 %emikian pula Gkspresi 2E -# meningkat men adi maksimum pada #4 amdengan penurunan berikutnya oleh # minggu 7 Cambar =A 8 3Ketika immuno - reakti. ,T(4 tingkat diukur di (A,F peningkatan mencolok 7 sampai tu uh kali lipatlebih tinggi dari pura-pura 8 terlihat pada #4 am postin uryA a

(2


11/25

c d bsebuahc d

b

03#503#031031503050

palsuO

#4h in n =d in # 6k !umlah Protein 7 mg ? m, 8Cambar 1 7 A 8 analisis histopatologi paru-paru setelah cedera otak 3&emato/ylin dan eosin bagian para.in dari paru-paru

aringan menun ukkan reaksi peradangan akut pada paru-paru di#4 am setelah T( 3 7 a8 $yam 7 b 8 postin ury #4 am 7 c 8 postin ury =hari dan 7 d 8 postin ury # minggu 3 Panah merah menun ukkan penebalanmembran basement dan panah hitam menun ukkan kehadiransel-sel in.lamasi 3 Pada hari ke = in.iltrat in.lamasi dimulaiuntuk menghilang dan dengan # minggu paru-paru tikus terluka otak yang

benar-benar normal dibandingkan dengan $yams 3 (ronkiolus 7 ( 8dan pembuluh darah 7 (* 8 3 (ar 100 mm untuk L10 pembesarandan 50 mm untuk perbesaran L40 7 di set 8 3 7(8neutro.il 7 panah 8 dideteksi dengan imunohistokimiamenggunakan antibodi elastase antineutro.il 3 7 a8 $yam 7 b 8 postin ury#4 h 7 c 8 postin ury = hari dan 7 d 8 postin ury # minggu 3 penting

umlah neutro.il yang hadir hanya dalam paru pada #4 amsetelah cedera otak 3 7 2 8 konsentrasi !umlah protein dalam (A,Fmenampilkan peningkatan permeabilitas paru pada #4 am setelah cedera otak 3$etiap data titik me6akili n Q < 3 O )enun ukkan P N 0 05dibandingkan dengan pura-pura dan menun ukkan P N0 05 dibandingkandengan pasca-cedera #4 am 3Peran 29P4F dimediasi ,T(4 metabolisme setelah trauma otak

$ebuah Kalsotra dkk 5!ournal o. 2erebral (lood Arus ; )etabolisme 7 #00


12/25

dengan 6aktu setelah cedera dengan ekspresi maksimumterdeteksi pada # minggu 7 Cambar 4A 8 3 untuk Muantitate 29P4F akti+itas spesi.ik di paru-paru setelah

kromatogra.i cair kiner a tinggi cederaanalisis ,T(4 metabolisme dilakukan dan

umlah yang baru terbentuk #0 - E& metabolitditentukan 7 Cambar 4( 8 3 &asilnya menun ukkan bertahap

peningkatan akti+itas 29P4F terhadap 6aktu 3 duaminggu setelah cedera ada hampir dua kali lipat

peningkatan ,T(4 o - hidroksilasi dibandingkan dengan para $yams 7 Cambar 42 8 3 Asam 1D - Ectadecynoic sebuahdikenal 29P4F inhibitor bunuh diri saat diu i untuk

penghambatan seluruhnya menghapuskan #0 - E& ,T(4 pembentukan oleh paru mikrosom pada # minggu postin ury 3 Peningkatan ekspresi 29P4F sertaterkait ,T(4 akti+itas o - hidroksilase menyarankandengan cahaya dari .ase resolusi untuk peradangan 3O $hamO>0#13510350


13/25

(ahan dan bagian metode 3 7 a8 $yam 7 b 8 postin ury #4 am 7 c 8 postin ury # minggu 3Panah merah titik untuk akti+asi al+eolar makro.ag 3 (ar #0 mm 3 7 2 8 Penghitungan akti+asi makro.ag setelah cedera 3 $etiap titikdata me6akili n Q < 3 O menun ukkanP N0 05 dibandingkan dengan palsu dan menun ukkan P N0 05 dibandingkan dengan

postin ury #4 h3Peran 29P4F dimediasi ,T(4 metabolisme setelah trauma otak $ebuah Kalsotra dkk <!ournal o. 2erebral (lood Arus ; )etabolisme 7 #00


14/25

maksimal antara #4 am sampai = hari setelah T( yangmereda secara bertahap setelahnya3 %ua minggu setelahcedera nilai ekstraksi pe6arna secara signi.ikanlebih rendah dari #4 am 7 Cambar 5( 8 3 $ebuah peningkatan dalam

permeabilitas diamati pada kontralateral

belahan 7#4 am dan = hari titik 6aktu 8 meskipun perubahan ini secara statistik signi.ikan 3$elan utnya kami menge+aluasi tingkat serum ,- 1b dan

, - < setelah T( untuk menyelidiki apakah komunikasidari otak ke paru-paru dimediasimelalui sitokin dilepaskan dalam darah setelahkebocoran transient dalam ((( 7 Cambar 52 8 3)eskipun , - 1b adalah sederhana lebih tinggi dalam serum pada

postin ury titik 6aktu # minggu , - < tidak terdeteksidalam serum dengan u i en yme-linked immunosorbent dititik 6aktu diperiksa 3 $ebaliknya , - 1bdan , - < tingkat diregulasi secara signi.ikan dalam

paru-paru pada postin ury #4 am yang kembali ke dasar dengan# minggu 3 7 Cambar 52 8 3diskusi2edera otak sering dikaitkan dengan sekunder cedera yang ternyata men adi penyumbang utama

pato.isiologi luas T( 7 Faden dkk 1@>@8 3 )eskipun ada beberapa data klinis menghubungkancedera otak dengan radang paru-paru 7 Fisher et al 1@@@ &olland et al #00=8 untuk pengetahuan kita ini adalah

palsuin =hin #4hin =din # 6k Anti- 5 - ,EAnti- 5 - ,EAnti- 2E - #7 ,arut 87 )embran 87 )embran 8

pemuatankontrol pemuatankontrol1040

0>0


15/25

100@8 3 $elain itu masuknyaneutro.il ke dalam ruang udara diduga menyebabkan

ban ir al+eoli dengan cairan dan protein plasma7 Kaslo+sky et al 1@@=8 3 Peningkatan protein

permeabilitas melintasi endotel dan epitelhambatan dari paru merupakan karakteristik a6al paru-parucedera3&asil kami memberikan bukti bah6a ada yang signi.ikan

perekrutan sel-sel ke dalam paru-paru setelah otak trauma yang bertindak untuk memperkuat in.lamasi


16/25

memodulasi respon dan kerusakan aringan menengah3Kami menun ukkan bah6a cedera otak mengarahkan paruneutro.il mobilisasi selama a6al .ase #4 h 3Gntah peningkatan yang besar pada neutro.il dan makro.agdiamati pada tahap ini memberikan kontribusi terhadap peningkatan

permeabilitas paru masih belum elas amun demikian diucapkan neutrophilia serta palsuin =hin #4hin =d# 6k in

palsuin =hin #4hin =d# 6k in1D - E%9A

pemuatanAnti - 29P4F7 )ikrosomal 8kontrolAbsorbansi nit 7 #D0 nm 829P4F4 m A 7 $ham 8#0 - E& ,T(4 7 pmoles ? menit ? mg 8$ham in =h in #4h in =d in # 6k 03040 0=030#030103003040 0=030#03010300304

0 0=030#0301030

etensi 'aktu 7 min 8@O OO >>00 a b cd e .

A ( 2% G


17/25

aringan paru-paru(A,FOOO

D00


18/25

konsisten dengan tingkat tinggi peradanganditun ukkan dalam paru-paru orang yang meninggal karenacedera otak yang .atal 7 Fisher et al 1@@@8 3 $erupa dengan kami

pengamatan kandungan neutro.il tinggi di (A,Fkorban kecelakaan lalu lintas ditemukan 7 Fisher et

al 1@@@8 3 Para penulis menyatakan lebih lan ut bah6a paru prein.lamed korban tersebut tidak bolehdigunakan untuk transplantasi karena mereka dapat berkontribusi untuk dis.ungsi gra.t a6al 3)enariknya kita melihat pemulihan spontan.ase mulai sekitar = hari 3 Eleh # minggu setelahcedera a6al resol+e peradangan dan paru-parutelah dasarnya dipulihkan3 Karena ,T(4 merekrutneutro.il ke dalam paru 7 )artin et al 1@>@8 yang

peran dalam mobilisasi P) , setelah cedera otak adalahdipertimbangkan3 Penelitian sebelumnya telah menun ukkanmeningkat ,T(4 dalam otak tikus setelah sara. pusatcedera sistem 7 ,indgren et al 1@>48 disertaioleh akumulasi P) ,s dan edema serebral7 %en linger et al 1@>5 $choettle et al 1@@0 Tarlo6eet al #00= u et al 1@@08 3 %alam studi ini kami menemukantingginya tingkat ,T(4 immuno - reakti. dalam

paru-paru pada #4 am postin ury yang terkait dengan5 - ,E ditingkatkan translokasi dari sitosol kemembran nuklir yang pada gilirannya memobilisasi danmengakti.kan sel-sel in.lamasi 3 $erupa dengan 5 - ,Emeningkat kami mengamati tergantung 6aktu dan in urydri+eninduksi paru 2E - # en im

bertanggung a6ab untuk sintesis prostaglandin selamakondisi patologis 7 Funk #0018 3 Peran yang tepatdan si.at kenaikan 2E - # dalam hal ini tidak elassaat ini namun banyak bukti yang ada untuk

perannya dalam memperburuk respon in.lamasi baik di otak maupun di pinggiran 7 (a an #001Gk et al #00183 $e ak 5 - ,E dan immunoreacti+e,T(4 tingkat pada # minggu setelah cedera masih tinggidibandingkan dengan kontrol 2E - # prostanoids berasal

saat ini dapat memainkan peran penting dalam menyelesaikan peradangan3 %emikian pula produksi counterregulatorymediator seperti lipo/ins pada # minggu yangdapat menghambat sinyal ,T(4 merupakan kemungkinan alternati. 7 $erhan dan $a+ill #005 8 34Fs sitokrom P450 mengkatalisis degradasi ,T(4 yang memani.estasikan peran penting bagi mereka dalammembatasi peradangan3 Kami telah dilaporkan sebelumnya

bah6a ekspresi 29P4F diubah dalam03>sebuah

A (2


19/25

sebuah b b c03<034

03#030E3%3 nilai ? aringan g,ung , - 1 7 pg ? mg protein 8,ung , - < 7 pg ? protein mg 8$erum , - 1 7 pg ? mg ? ml 8$ham 2edera 2edera #4h =d # 6k 2edera$ham 2edera 2edera #4h # 6k $ham 2edera 2edera #4h # 6k $ham 2edera 2edera #4h #6k

OOOOO#001


20/25

- < dalam paru-paru3 Tidak ada , - < terdeteksi dalam serum padatitik 6aktu diperiksa 3 $etiap titik data me6akili n Q < 3 O )enun ukkan P N0 05dibandingkan dengan palsu dan menun ukkan P N0 05dibandingkan dengan postin ury #4 h3Peran 29P4F dimediasi ,T(4 metabolisme setelah trauma otak

$ebuah Kalsotra dkk @!ournal o. 2erebral (lood Arus ; )etabolisme 7 #00


21/25

Faktor dalam menentukan hasil klinis 7 Fisher et al 13@@@ Cruber et al 1@@@ 'oiciecho6sky dkk 1@@> #00#8 3$ementara induksi berbasis 6aktu , - 1b dan , - <terlihat pada paru-paru hanya sedikit peningkatan dalam

tingkat , - 1b dalam darah tampak elas pada # minggusetelah T( 3 Eleh karena itu kemungkinan spillo+er humoraldari sitokin ke dalam paru-paru tetap kurang 3Atau mekanisme sara. mungkin beroperasimelalui e..erents +agal untuk secara tidak langsung mengontrol perangkatsitokin dan kemokin sintesis 3 peningkatan intrakranialTekanan dikenal untuk merangsang neuroimmune

alur seperti hipotalamus -hipo.isis - adrenal dan sara. simpatissistem yang dapat memperburuk kekebalan sistemik

perubahan yang dihasilkan dari cedera dipicu in.lamasirespon di otak 3 $elain itu parasimpatis!alur seperti rilis +agal asetilkolindapat memodulasi pelepasan sitokin dalam hati7 (oro+iko+a et al #0008 3 Ampli.ikasi sara. yang serupa!alur dapat men elaskan parurespon sitokin setelah T( 3%alam sebuah studi terpisah kami menun ukkan bah6a proin.lamasisitokin - , - 1b dan , - < - dapat mengatur Gkspresi 29P4F dalam hepatosit tikus 7 Kalsotra et al #00=a 8 3 (erdasarkan bukti itu kami berspekulasi bah6a

produksi lokal sitokin setelah trauma otak mungkin memainkan peran saklar molekuler untuk menghasilkantergantung 6aktu sangat diatur peningkatan 29P4F di

paru-paru 3 Aspek dinamis seperti peradangantelah dipela ari sebelumnya 7 $erhan et al 1@@<$erhan dan $a+ill #0058 3 ,e+y et al 7#001 8 memilikiditampilkan s6itching berbasis 6aktu dari proin.lamasiuntuk eikosanoid antiradang setelah tumor necrosis .actor-a in.lamasi dimediasi dalammurine dorsal kantong rambut3 Kami percaya bah6a model inis6itching kelas mediator mungkin berlaku untuk T( sebagai

baik 3$ecara ringkas hasil dari penelitian ini menun ukkan bah6atrauma pada otak dapat menghasilkan perubahan akut padaorgan auh dari situs cedera yang berkontribusike beberapa sindrom dis.ungsi organ 3 Kami menyimpulkan

bah6a dalam .ase proin.lamasi meningkat produksi lokal ,T(4 menyebabkan mobilisasisel-sel in.lamasi seperti neutro.il dan makro.agke paru-paru 3 Pada .ase resolusi 29P4Fekspresi dan akti+itas yang terkait dengan peningkatan6aktu 3 &ubungan sementara antara 29P4F

ekspresi dan perubahan ,T(4 tingkat konsistendengan hipotesis bah6a penurunan ,T(4


22/25

Konsentrasi disebabkan oleh induksi 29P4Fs 3Penelitian lebih lan ut seperti pengobatan .armakologishe6an dengan inhibitor 5 - lo/ atau ,T(4antagonis reseptor akan men elaskan penyebab dane.ek hubungan antara ,T(4 sinyal dan paru

cedera dimulai setelah trauma otak 3 $ebuah studi paraleldilakukan pada tikus dalam 5 - lo/ atau 29P4Flatar belakang KE uga akan mendirikankepentingan relati. ,T(4 alur katabolik untuk menyelesaikan radang paru-paru pada korban cedera otak 3

capan Terima KasihPara penulis berterima kasih kepada %r 2heri ) Turman dan%r Gric T 'illiams untuk bantuan teknis mereka3Terima kasih tulus kami pergi ke %r 9asushi Kikuta dan %r )ichael (lackburn untuk bantuan kolegial mereka3

e.erensi(a an C 7 #0018 2E - # sebagai sara. multi.ungsimodulator 3 at )ed D:414-5(oro+iko+a ,* +ano+a $ ) "hang 9ang & (otchkina C 'atkins , 'ang & Abumrad Gaton !' Tracey K!7 #0008 stimulasi sara. +agus melemahkan sistemik respon in.lamasi terhadap endotoksin 3 ature 405 :45>-4


23/25

#=0:==0-#Gk ) Gngblom % $aha $ (lomM+ist A !akobsson P! Gricsson %ahlstrand A 7 #0018 espons in.lamasi :

alur melintasi penghalang darah - otak 3 ature 410 :4=0-1

Faden A %emediuk P Panter $$ *ink 7 1@>@8 Peranasam amino rangsang dan reseptor )%A dalamcedera otak traumatis 3 ilmu #44:D@>->00Fisher A! %onnelly $2 &irani (urdick )% $trieter

) %ark !& 2orris PA 71@@@ 8 Peningkatan paru peradangan pada organ donor mengikuti nontraumatic yang .atalcedera otak 3 lanset =5=:141#-=Ford &utchinson A' (ray )A %oig )* $hipley )G $mith )! 7 1@>08 leukotrien ( yang chemokinetic ampuhdan menggabungkan substansi dilepaskan dari polymorphonuclear leukosit 3 ature #>


24/25

#:48 ,eukotrienes dalam sistem sara. pusat tikus 3Proc atl Acad $ci $A >1:


25/25

%& &auser 2! 7 #00=8 n.lamasi chemoreceptor cross-talk menekan leukotrien (4 reseptor 1 -dimediasi kalsium mobilisasi neutro.il dan kemotaksissetelah trauma 3 ! mmunol 1D1:#08 akti+asi simpatis memicusistemik interleukin - 10 rilis pada Penekanan kekebalandisebabkan oleh cedera otak 3 at )ed 4:>0>-1=Peran 29P4F dimediasi ,T(4 metabolisme setelah trauma otak $ebuah Kalsotra dkk 11!ournal o. 2erebral (lood Arus ; )etabolisme 7 #00

jurnal neuro baru

Documents