iva flisar, univ. dipl. inž. kem., spec. med. biokem. lahke verige v serumu klinični center...

Proste lahke verige v serumu

Klinični center Ljubljana------------------------------------------------------------------------

Strokovni sestanek Združenja hematologov Slovenije in Združenja za transfuzijsko medicino Slovenskega zdravniškega društva, Kranjska Gora, 13. in 14. april 2007

Živa Flisar, univ. dipl. inž. kem., spec. med. biokem.Proteinsko-lipidni laboratorij, KC-Ljubljana

proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------Število opravljenih analiz v Proteinskem laboratoriju:

Število analiz kapa / lambda

leta 2005 leta 2006

Ambulante 669 1544

Bolnišnice 161 578

Skupaj 830 2122

Zunanji naročniki Število analiz v 2006SB Novo Mesto 32SB Izola 25SB Murska Sobota 12SB Celje 4SB Brežice 1Skupaj zunanji 74

proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------

1

10

100

1000

1 10 100 1000

Serum Kappa (mg/L)

Seru

m L

ambd

a (m

g/L) Normal sera

Kappa LCMMLambda LCMMIIMMHigh pIgGAL AmyloidosisRenal impairmentNSMM

3

2

4

5

6

7

1

8

9

17 18

15

14

10

13

16

12

11

19

Proste lahke verige in različna kliničnastanja:

Povzeto po:Bradwell AR, Serum Free Light Chain Analysis,2nd Ed., The Binding Site Ltd, Birmingham, 2004

proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------Kappa Lambda κ/λ Ratio Interpretation

1 Normal Normal Normal Normal serum

2 Normal BM suppression without Monoclonal Gammopathy

3 High

4 Low

5 Normal Normal serum

6 Low

7 High Low

8 High

9 Normal Normal serum

10 High

11 Low

12 Normal pIg or renal impairment

13 Low Monoclonal Gammopathy

14 Low High Monoclonal Gammopathy

15 High Monoclonal Gammopathy

16 Normal

17 Normal

18 High

19 LowMonoclonal Gammopathy with

renal impairment

HighpIg or renal impairment

Normal

High

High

Monoclonal GammopathyNormal

LowNormal

Monoclonal Gammopathy

Normal

Monoclonal Gammopathy

LowLow

Klasifikacija monoklonskihgamopatij glede nakoncentracijo serumskihprostih lahkih verigkapa in lambda, ter količnika k/λ

With BM suppression

Without BM suppression

Povzeto po:Bradwell AR, Serum Free LightChain Analysis,2nd Ed., The Binding Site Ltd,Birmingham, 2004


Komentarji k izvidu na osnovi prikazane klasifikacije:

Normalen serum (N)

Poliklonalno zvečanje sinteze imunoglobulinov ali okvara ledvic (P/O)

Monoklonski imunoglobulin (M)

Monoklonski imunoglobulin z okvaro ledvic (M+O)

Zavora sinteze imunoglobulinov (Z)

Monoklonski imunoglobulin z zavoro sinteze (M+Z)

Normalen serum z zavoro sinteze (N+Z)


Prikaz rezultatov prostih lahkih verig v logaritemski skali

Klasifikacija monoklonskihgamopatij glede nakoncentracijo serumskihprostih lahkih verigkapa in lambda, ter količnika k/λ

Vertikale:Meje referenčnihvrednosti za kapa

Horizontale:Meje referenčnihvrednosti za lambda

Diagonale:Meje referenčnihvrednosti za količnik S-Proste kapa

Op.: Diagonale ločijo monoklonske od poliklonalnih imunoglobulinov

S-P

rost

e la

mbd

a


Primer izvidaz referenčnimivrednostmi:


Sinteza imunoglobulinovSintetizira se več kape kot lambde; razmerje sinteze ĸ : λ = 2 : 1

V serumu je več lambde kot kape; razmerje koncentracij ĸ : λ = 1 : 1,5

Polimerizacija lambde

Vzrok za večjereferenčne vrednosti lambda jepolimerizacija

Bradwell AR, Serum Free Light Chain Analysis,2nd Ed., The Binding Site Ltd, Birmingham, 2004

Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------

Primerjava rezultatovdveh analiznih metod

Proste lahke verige:Monoklonski imunoglobulinM

Proteinogram:Monoklonski zobec


1

2

3

M

Zmanjševanje koncentracijelahkih verig lahko potekav več smeri.

Količnika sta enaka za točki:M in 12 in 3

M 1: izboljšana funkcija ledvicob enaki tumorski sintezikapa in zavori sintezelambda

M 2: znižana sinteza kapa

M 3: znižana sinteza kapa ali odpoved ledvic


1. primer neskladja rezultatov:

1

K/L = normalen serumProteinogram = monoklonski

zobec nad 20 g/L

IgG/kapa (imunofiksacija)Peak: 32 g/LU-Protein/kreatinin: 11,3 g/mol


2. primer neskladja rezultatov

2 K/L = normalen serumProteinogram = monoklonski

zobec pod 20 g/L

IgM/kapa + kapa (imunofiksacija)Peak: 11,4 g/LU-Proteini/kreatinin: 71,9 G/L



3

K/L = poliklonalni Ig ali okvara ledvicProteinogram = monoklonski

zobec pod 20 g/L

IgG/lambda (imunofiksacija)Peak: 6 g/LU-Proteini/kreatinin: 8,6 g/mol



Količnik kapa/lambda je v območju poliklonalnih imunoglobulinovali okvare ledvic (P/O)

IgG/ lambda + lambda (imunofiksacija)

Proteinogram ima dva monoklonskazobca: peak 1 = 4 g/L (IgG lambda)Peak 2 = 3 g/L (proste lambda)

U-Proteini/kreatinin: > 200 g/mol

Od 665 pregledanih vzorcev je bilo 150 takih, ki kažejo neskladje rezultatovmed kapa/lambda (K/L) in S-Elektroforeza proteinov (ptg)

Razvrstili smo jih v dve skupini:

1. Ptg: monoklonski Ig (oznaka:M)K/L je normalen (N) ali poliklonalni Ig z okvaro ledvic (P/O)112 od 150 vzorcev

7 vzorcev - K/L: N, ptg: M > 20 g/L,38 vzorcev - K/L: N, ptg: M < 20 g/L,1 vzorec - K/L: Z, ptg: M < 20 g/L,2 vzorca - K/L: P/O, ptg: M > 20 g/L,

14 vzorcev - K/L: P/O, ptg: M < 20 g/L, U-Protein/Kr > 50 g/mol50 vzorcev - K/L: P/O, ptg: M < 20 g/L, U-Protein/Kr < 50 g/mol

2. K/L monoklonski Ig (M)Ptg: hipogamaglobulinemija ali slika brez monoklonskih Ig38 od 150 vzorcev21 vzorcev – K/L: M ptg:hipogamaglobulinemija17 vzorcev – K/L: M ptg: 11 vz – oligoklonalne fr.

2 vz – imunski kompleksi3 vz – brez komentarja1 vz – poliklonalna gama


A.R. Bradwell navaja(Serum Free Light Chain Analysis, p168-169, 4th Edition, 2006, The Binding Site Ltd.)

tri neodvisne dejavnike tveganja za razvoj MGUS v MM:

- nenormalen količnik kapa / lambda,- monoklonski zobec večji od 15 g/L,- IgA ali IgM monoklonski imunoglobulin.

Iz tega sledi, da so potrebne vse tri preiskave:S-Proste lahke verige kapa in lambda S-Elektroforeza proteinov (proteinogram)S-Monoklonski imunoglobulini (imunofiksacija ali imunotipizacija)

? U-Vrsta proteinurije


The Lancet, 1847

Figure 2.1. Henry Bence Jones. (Courtesy RA Kyle & Br J Haematology) iz Serum Free Light Chain Analysis, 4th Edition, 2006, The Binding Site Ltd

Letos mineva 160 let od objave članka o novi beljakovini v urinu

iva flisar, univ. dipl. inž. kem., spec. med. biokem. lahke verige v serumu klinični center...

Documents