inta- guía cuidado y uso de animales

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    INDICE

    Introduccin............................................................................................................................6Definiciones............................................................................................................................7

    Animal de laboratorio.........................................................................................................7Bienestar animal ................................................................................................................. 7Trato Humanitario en Animales de laboratorio..................................................................7Stress...................................................................................................................................8Eutanasia Humanitaria........................................................................................................8

    1. POLTICAS Y RESPONSABILIDADES INSTITUCIONALES.....................................8Atencin veterinaria ........................................................................................................... 8Entrenamiento y capacitacin del personal ........................................................................ 8Salud Ocupacional y Seguridad del personal ..................................................................... 9Identificacin de Peligros y Evaluacin de Riesgos...........................................................9Higiene Personal...............................................................................................................10Instalaciones, Procedimientos y Supervisin ................................................................... 10Riesgos de Experimentacin con Animales ..................................................................... 10Proteccin Personal .......................................................................................................... 11Evaluacin Mdica y Medicina Preventiva para el Personal ........................................... 12

    2. ANIMALES DE EXPERIMENTACION ........................................................................ 122.1- TRANSPORTE Y DESCARGA DE LOS ANIMALES ......................................... 122.2.- MANTENIMIENTO................................................................................................13

    Microambiente y Macroambiente.................................................................................14Encierro Primario ......................................................................................................... 14Refugios o Alojamientos al Aire Libre.........................................................................15

    Ambientes Naturales.....................................................................................................16Recomendaciones de Espacio.......................................................................................16Temperatura y Humedad .............................................................................................. 22Ventilacin ................................................................................................................... 23Iluminacin...................................................................................................................23Ruido ............................................................................................................................ 25

    2.3. MANEJO CONDUCTA............................................................................................25Estructura del Medio Ambiente....................................................................................25Ambiente Social ........................................................................................................... 26Actividad ...................................................................................................................... 26

    2.4. MANEJO DIARIO....................................................................................................27

    Alimentacin ................................................................................................................ 27Agua ............................................................................................................................. 27Lecho ............................................................................................................................ 28Sanidad ......................................................................................................................... 28Medicina preventiva ..................................................................................................... 31Cuarentena y separacin...............................................................................................31Perodo de adaptacin...................................................................................................32Vigilancia, diagnstico, y control de enfermedades.....................................................33Ciruga .......................................................................................................................... 33Dolor, analgesia y anestesia..........................................................................................36

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    Eliminacin de los Desechos........................................................................................372.6. EMERGENCIAS, FINES DE SEMANA Y DIAS FESTIVOS ...............................382.7. MANEJO DE LAS POBLACIONES ....................................................................... 38

    Identificacin y Registro .............................................................................................. 383. PROCEDIMIENTOS ....................................................................................................... 39

    3.1.MUESTREO...............................................................................................................39Ambiente del muestreo.........................................................................................................39

    3.1.1. EXTRACCION DE SANGRE...........................................................................39Preparacin del lugar....................................................................................................40Sujecin del animal ...................................................................................................... 40Lugar de extraccin ...................................................................................................... 40Volumen ....................................................................................................................... 40Instrumental..................................................................................................................41Retirada de la aguja ...................................................................................................... 41

    Efectos adversos ........................................................................................................... 41Mtodos de puncin venosa no recomendados ............................................................ 41ANEXO Sangrado retro-orbital....................................................................................42Sangrado en roedores....................................................................................................423.1.2. CANULACIN..................................................................................................42Canulacin de corta duracin (menos de un da) ......................................................... 43Canulacin de larga duracin (2 das o mas)................................................................43Equipamiento y material...............................................................................................43Fijacin de la cnula.....................................................................................................43Toma de muestra .......................................................................................................... 44Efectos adversos ........................................................................................................... 44

    3.1.3. SANGRADO ARTERIAL ................................................................................. 44Puncin con aguja (especialmente en conejos) ............................................................ 44Canulacin....................................................................................................................443.1.4. PUNCIN CARDACA.....................................................................................45Materiales ..................................................................................................................... 45Toma de muestra .......................................................................................................... 45Cuidados posteriores del animal y efectos adversos potenciales ................................. 463.1.5. VOLUMEN DE SANGRE A EXTRAER ......................................................... 473.1.6. SIGNOS DE SHOCK HIPOVOLMICO Y DE ANEMIA .............................493.1.7. MUESTRAS DE MATERIA FECAL................................................................493.1.8. HISOPADOS......................................................................................................49

    3.2. ADMINISTRACIN DE SUSTANCIAS ................................................................ 50Va oral (PO) ................................................................................................................ 50Va Subcutnea (SC) .................................................................................................... 50Va Intraperitoneal (IP).................................................................................................50Va Intramuscular (IM).................................................................................................51Va Endovenosa (EV)...................................................................................................51Va Intradrmica (ID) ................................................................................................... 51

    3.3. EUTANASIA ............................................................................................................ 513.3.1. INTRODUCCION..............................................................................................51Consideraciones de comportamiento animal................................................................52Aspecto humano ........................................................................................................... 53

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    Clasificacin de mtodos de eutanasia ......................................................................... 53Mtodos de eutanasia....................................................................................................53Mecanismo de accin de los agentes eutansicos ........................................................ 54

    Instrumentos. ................................................................................................................ 54Signos de dolor y angustia............................................................................................55Reconocimiento y confirmacin de la muerte..............................................................55Manejo e inmovilizacin .............................................................................................. 55Eliminacin de cadveres y residuos............................................................................55Comentarios generales sobre mtodos de eutanasia.....................................................563.3.2. METODOS ACEPTABLES DE EUTANASIA ................................................ 56

    1. Mtodos fsicos.............................................................................................................561.1. Disparo ...................................................................................................................... 561. 2. Concusin ( aturdimiento por golpe o stunning)......................................................571. 3. Aturdimiento elctrico..............................................................................................58

    1. 4 Dislocacin cervical .................................................................................................. 581.5. Maceracin ................................................................................................................ 591.6. Irradiacin con microondas ....................................................................................... 592. Mtodos qumicos ........................................................................................................ 602.1 Agentes inhalatorios ................................................................................................... 60

    Dixido de carbono ...................................................................................................... 60Monxido de carbono...................................................................................................62

    2.2. Anestsicos inhalatorios voltiles..............................................................................62Halotano ....................................................................................................................... 62Enflurano ...................................................................................................................... 62Isoflurano......................................................................................................................63

    2.3. Agentes para animales acuticos, para su absorcin a travs de la piel y las agallas63Benzocaina (etil aminobenzoato) ................................................................................. 63Tricana metano sulfonato (MS-222 tamponado).........................................................63Etomidato y metomidato .............................................................................................. 63Quinaldina (2-metilquinolina)......................................................................................63

    2.4 Agentes inyectables....................................................................................................642.4.1. Barbitricos ............................................................................................................ 64

    Pentobarbital sdico ..................................................................................................... 64T-61 .............................................................................................................................. 65

    3. Mtodos aceptables con animales inconscientes..........................................................653.1. Insercin de aguja......................................................................................................65

    3.2. Congelacin rpida....................................................................................................653.3. Exanguinacin ........................................................................................................... 663.4. Nitrgeno/argn.........................................................................................................663.5. Etanol.........................................................................................................................663.6. Hidrato de cloral........................................................................................................663.7. Cloruro potsico ........................................................................................................ 663.8. Embolia gaseosa ........................................................................................................ 674. Mtodos que no son aceptables para eutanasia ............................................................ 674.1. Descompresin/vaco.................................................................................................674.2. Hipotermia.................................................................................................................674.3. Hipertermia................................................................................................................67

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    4.4. Ahogamiento/extraccin del agua ............................................................................. 674.5. Rotura de cuello.........................................................................................................674.6. Estrangulamiento.......................................................................................................68

    4.7. Protxido de nitrgeno .............................................................................................. 684.8. Ciclopropano ............................................................................................................. 684.9. ter (ter dietlico).....................................................................................................684.10. Cloroformo .............................................................................................................. 684.11. Metoxiflurano .......................................................................................................... 684.12. Tricloroetileno ......................................................................................................... 684.13. Gas Cianhdrico ....................................................................................................... 694.14. 2-fenoxietanol.........................................................................................................694.15. Uretano .................................................................................................................... 694.16. Agentes bloqueantes................................................................................................694.17. Ketamina..................................................................................................................69

    4.18. Sedantes...................................................................................................................694.19. Sulfato magnsico ................................................................................................... 694.20. Otros anestsicos inyectables .................................................................................. 704.21. Otros agentes ........................................................................................................... 704.22. Agentes administrados por va oral ......................................................................... 704.23. Analgsicos narcticos ............................................................................................ 70ANEXO Eutanasia en especies silvestres........................................................................ 70

    4. RESTRICCIONES DE NECESIDADES BSICAS DURANTE LAEXPERIMENTACIN ........................................................................................................ 71

    Restriccin Fsica ......................................................................................................... 71Restriccin de Lquido o Alimento .............................................................................. 71

    Mltiples Intervenciones Quirrgicas Mayores ........................................................... 72ANEXO RUMIANTES........................................................................................................73(Bovinos, Ovinos y Caprinos) .............................................................................................. 73ANEXO EQUIDOS..............................................................................................................81(Caballos, Mulas y Burros)...................................................................................................81ANEXO AVES.....................................................................................................................85(Gallinas, Pavos y Patos)......................................................................................................85ANEXO ROEDORES..........................................................Error! Marcador no definido.(Ratas, Ratones, Cobayos)....................................................Error! Marcador no definido.

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    Introduccin

    "El creciente uso de cultivos celulares, de sistemas microbianos, de simulacincomputarizada y otras tcnicas del reemplazo, indican claramente que la comunidadcientfica se ha comprometido a aplicar el principio de las "Tres R" de Russell-Burch(reduccin, reemplazo y refinamiento) en cuanto al uso de animales de experimentacin.Sin embargo, estos procesos son complementarios y dependen ante todo sobre lainvestigacin efectuada a partir de los animales. En efecto, dichos procesos son aplicables amedida que se hayan realizados estudios sobre los animales y estudios clnicos. Pero si elinvestigador desea confirmar la precisin de sus investigaciones, con frecuencia estaobligado a recurrir al animal entero."(Manual sobre el Cuidado y Uso de los Animales deExperimentacin del Consejo Canadiense de Proteccin de los Animales (CCPA). CaptuloI).

    El Reemplazo de los animales por otros mtodos (cultivos: rganos, tejidos, clulas.-Microorganismos.- Sistemas fsico-qumicos: mimetizantes de funcin biolgica "in vivo"),debera ser una inquietud en todos los investigadores, el refinamiento de los experimentos yla reduccin en el nmero de animales utilizados son aspectos fundamentales de los cualesse ocupa esta nueva rama de las ciencias biolgicas.El Refinamiento involucra, fundamentalmente, la normalizacin segn parmetrosinternacionales, la definicin gentica y del estado microbiolgico de los animalesutilizados (animales definidos) y la calidad del ambiente donde son criados, antes y durantela experimentacin (perfeccionamiento de mtodos para detectar dolor, uso de anestsico,analgsicos y tranquilizantes, uso de tcnicas no invasivas o telemtricas, uso de radiografa(tomografa) para detectar tumores o deterioro orgnico, aplicar eutanasia anticipada).Los progresos en el refinamiento de los experimentos llevarn, por s solos, a la Reduccinen el nmero de animales utilizados (DL50/ test lmite (5 g / kg 500 mg 5 mg),coordinacin para uso conjunto, calidad sanitaria, gentica y ambiental (menor dispersinde los datos menor numero de animales), banco de datos: publicacin de resultadosnegativos para no repetir.- Acceso a la literatura especializada.- Metodologa bioestadsticaavanzada).El seguimiento de estos aspectos en la literatura cientfica ha puesto en evidencia un usoineficiente de animales debido al pobre diseo experimental, al inapropiado anlisisestadstico de los resultados, o a ambas causas. Cabe destacar que el nmero de animalesutilizados debe ser el mnimo necesariopara poder evaluar la hiptesis y dar resultadosestadsticamente tiles. Por lo tanto, podemos resumir que la Ciencia de Animales deLaboratorio se ocupa, simultneamente, de mejorar la investigacin biomdica y deasegurar el bienestar animal.

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    DefinicionesPara el correcto uso de esta gua, a continuacin se definirn algunos trminos quepermitirn tomar contacto con la importancia del Cuidado y Uso de Animales deExperimentacin.

    Animal de laboratorioCualquier especie animal (mamferos, aves, reptiles, anfibios y peces), que se mantienebajo condiciones determinadas y se utiliza con fines cientficos.

    Bienestar animalEl bienestar animal (BA) es todo lo relativo al confort animal y que est mas all de la mera

    falta de enfermedad, abarcando el complejo estado de bienestar fsico. Es la realidad queconsidera al animal en un estado de armona en su ambiente y la forma por la cualreacciona frente a los problemas del medio, tomando en cuenta su confort, su alojamiento,trato, cuidado, nutricin, prevencin de enfermedades, cuidado responsable, manejo yeutanasia humanitaria cuando corresponda (Leopoldo Estol, Universidad del Salvador).La asociacin Mundial de Veterinarios (AMV) acepta y afirma la primaca de la profesinen el diagnstico, tratamiento y control de las enfermedades animales, pero tambinreconoce la responsabilidad sobre todo lo necesario para disminuir el sufrimiento, dolor yangustia, promoviendo el BA.El Comit Permanente de la AMV, desde mayo de 1990, adopt una poltica sobre BA conalcance mundial, la que es difundida y promovida a travs de los miembros representantes

    por los continentes y subcontinentes (Africa, Amrica Latina, Asia, Australasia y Europa)ante el Comit respectivo sobre BA y Etologa. A travs de las actividades de esteComit, se trata de estimular la implementacin en todos los pases de las polticas sobreBA aprobadas por dicha AMV.

    Las mismas, expresamente, manifiestan que se deben respetar las NECESIDADES de losanimales, que son esenciales para este BA:

    Que no sufran hambre ni sed Que no sufran malestar fsico ni dolor Que no sufran heridas ni enfermedades Que no sufran miedo ni angustia Que puedan ajustarse a su comportamiento normal y esencial

    Trato Humanitario en Animales de laboratorioSon todas las maniobras, mtodos y actitudes del personal e investigadores a cargo delcuidado de los animales de laboratorio que cumplen con las disposiciones legalesnacionales e internacionales de los derechos del animal. Cualquier violacin a la LeyNacional 14.346, del Cdigo Penal Argentino, Ley Nacional 22421/81 de Conservacin deFauna Silvestres, Derechos Internacionales de los Animales (aprobados por la ONU yla UNESCO)y la OMS (Principios para el Uso de Animales de Experimentacin basados

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    en las Guas Internacionales para la Investigacin Mdica, THE COUNCIL PORINTERNACIONA ORGANIZATION OF ANIMAL SCIENCES - OMS 1985, serconsiderado trato NO HUMANITARIO y conducirn a las penalizaciones

    correspondientes.

    StressEl stress se define como cualquier factor (stressors) psquico, fisiolgico o emocional queinduce alteraciones en la homeostasis o en la capacidad adaptativa de los animales(Kitchen,N. et al, 1987). La respuesta de un animal al stress representa un procesoadaptativo que se hace necesario para reestablecer el estado mental y fisiolgico. Estarespuesta involucra cambios en los sistemas neuroendcrinos, sistema nervioso autnomo yestado mental que resultan en cambios comportamentales.La respuesta de un animal vara de acuerdo a la experiencia, edad, especie, raza y estadoactual fisiolgico (Nacional Research Council, 1992).El stress y la respuesta resultante se clasifican en tres fases (Breazile, JE, 1987): Eustress:cuando un estmulo inofensivo inicia una respuesta adaptativa que beneficia al animal;Stress Neutral: cuando la respuesta de los animales frente a un estmulo no causa efectobenfico ni daino; Distress: cuando la respuesta de los animales a un estmulo interfierecon el bienestar y el confort de los mismos (McMillan FD, 1987).

    Eutanasia HumanitariaSe aceptar como eutanasia humanitaria todo aquel mtodo que produzca una rpidainconciencia y la subsiguiente muerte, sin evidencias fsicas y fisiolgicas de dolor odistress, o bien cualquier mtodo que utilice un agente anestsico que produzca prdida deconciencia sin evidencias fsicas y fisiolgicas de dolor o distress y la subsiguiente muerte.

    1. POLTICAS Y RESPONSABILIDADESINSTITUCIONALES

    Atencin veterinariaDebe brindarse atencin veterinaria adecuada, incluyendo a todos los animales para laevaluacin de su salud y bienestar. La misin institucional, las metas programticas y laenvergadura del programa animal determinarn la necesidad de tiempo completo, tiempoparcial o servicios de asesora veterinaria. Las visitas del asesor o del veterinario de tiempo

    parcial debern hacerse a intervalos apropiados segn las necesidades del programa.Consideraciones ticas, humanitarias y cientficas en ocasiones requieren el uso detranquilizantes, analgsicos o anestsicos en los animales. El veterinario responsable (i.e.,un veterinario que tenga autoridad directa o delegada) debe asesorar al personal deinvestigacin para asegurar que se cumplan las necesidades humanitarias y que a la vezsean compatibles con los requerimientos cientficos.

    Entrenamiento y capacitacin del personalLa institucin debe ofrecer capacitacin formal o entrenamiento durante el desempeo deltrabajo, para facilitar la implementacin eficaz del programa y el cuidado y uso

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    humanitarios de los animales. Se deben brindar al personal expuesto a riesgoprocedimientos claros y definidos para conducir sus responsabilidades, deben entender lospeligros involucrados y deben ser diestros en implementar los dispositivos de seguridad

    requeridos.La necesidad de personal experto en otras disciplinas, tales como: crianza animal,administracin, medicina y patologa de los animales de laboratorio, salud y seguridadocupacional, manejo de conducta, manejo gentico y otros aspectos varios de apoyo a lainvestigacin cientfica, ser acorde con los alcances del programa.Los investigadores, personal tcnico, aprendices e investigadores visitantes que realicenanestesia, ciruga u otras manipulaciones experimentales en animales deben estarcapacitados a travs de entrenamiento o experiencia para efectuar estas labores de unamanera humanitaria y cientficamente apropiada.El personal debe ser entrenado acerca de las zoonosis, seguridad qumica, peligrosmicrobiolgicos y fsicos (incluyendo aquellos relacionados con la radiacin y las alergias),

    condiciones extraordinarias o agentes que podran ser parte de los procedimientosexperimentales (incluyendo el uso de animales con ingeniera gentica y el uso de tejidoshumanos en animales inmunosuprimidos), manejo de los materiales de desecho, higienepersonal y otras consideraciones (ej. se deben tomar las precauciones durante el embarazo,enfermedad o inmunodeficiencia del personal), que sean apropiadas para los peligrosimpuestos en el centro de trabajo.

    Salud Ocupacional y Seguridad del personalEl programa de salud y seguridad ocupacional deber ser parte del programa general decuidado y uso de los animales (CDC y NIH 1993; CFR 1984 a, b, c; PHS Policy). El

    programa debe conducirse de acuerdo a regulaciones federales, estatales y locales y debeenfocarse al mantenimiento de un lugar de trabajo seguro y saludable. El programadepender de las instalaciones, actividades investigativas, riesgos para la salud y lasespecies animales involucradas. La responsabilidad de la operacin cotidiana y la seguridaden el lugar de trabajo reside en el supervisor del laboratorio o instalaciones (ej., elinvestigador principal, el director del bioterio o el veterinario) y depende del desempeo delas prcticas de seguridad laboral por todos los empleados.

    Identificacin de Peligros y Evaluacin de RiesgosEl personal profesional que lleve a cabo y apoye programas de investigacin queinvolucren agentes fsicos, qumicos o biolgicos peligrosos (incluyendo radiacionesionizantes y no-ionizantes) deben estar capacitados para valorar los peligros asociados a losprogramas y para seleccionar los dispositivos de seguridad apropiados para los riesgos. Unprograma eficaz de salud y seguridad ocupacional asegura que los riesgos asociados con eluso experimental de los animales se reduzcan a niveles apropiados. Tambin debenidentificarse y evaluarse los peligros potenciales tales como mordidas, agentes qumicos delimpieza, alergenos y zoonosis, que son inherentes o intrnsecos al uso de los animales. Enla evaluacin de riesgos asociados con las actividades peligrosas y en el desarrollo de losprocedimientos para manejar tales riesgos se deben involucrar especialistas en salud yseguridad con conocimiento de las disciplinas apropiadas.

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    El grado y nivel de participacin del personal en el programa de salud y seguridadocupacional debe estar basado en los peligros planteados por los animales y los materialesusados; en la intensidad de la exposicin, su duracin y frecuencia; en la susceptibilidad del

    personal; y en la historia de lesiones y enfermedades ocupacionales del centro de trabajo enparticular (Clark 1993).

    Higiene PersonalEs esencial que todo el personal mantenga altos estndares de limpieza personal. Lainstitucin debe suministrar lavandera y ropa apropiada para vestirse en el bioterio y loslaboratorios en donde se utilizan animales. En muchas situaciones es aceptable un serviciocomercial de lavandera; sin embargo, se deben hacer los arreglos necesarios paradescontaminar la ropa expuesta a peligros potenciales. En algunas circunstancias podranser desechables los guantes, cubrebocas, gorras, batas, overoles y cubrezapatos. El personaldebe lavarse las manos y cambiarse de ropa tan frecuente como sea necesario paramantener la higiene personal. La ropa de trabajo usada en los cuartos de los animales nodeber usarse fuera de las intalaciones. No se debe permitir al personal que coma, beba,fume o se aplique cosmticos en los cuartos de los animales.

    Instalaciones, Procedimientos y SupervisinSon variables las instalaciones requeridas para apoyar lo relacionado con la salud yseguridad ocupacional asociadas a los programas de cuidado y uso de los animales. Debidoa que es esencial un alto estndar de limpieza personal se deben proveer las instalaciones einsumos para cumplir con esta obligacin. Deben estar disponibles baos con lavabos yduchas, acordes con el programa. Las instalaciones, el equipo y los procedimientos deben

    estar diseados, seleccionados y desarrollados para ofrecer operaciones ergonmicamentesaludables, que reduzcan el potencial de lesiones fsicas al personal (tales como las quepuedan causarse por levantar equipo o animales pesados y por la realizacin demovimientos repetitivos). El equipo de seguridad se debe mantener correctamente ycalibrarse rutinariamente. La seleccin de los sistemas de alojamiento animal apropiadosrequieren de conocimientos y criterio profesional y dependen de la naturaleza del peligro encuestin, los tipos de animales utilizados y del diseo de los experimentos. Los animales enexperimentacin deben alojarse de tal manera que el alimento, el lecho, las heces y la orinacontaminados puedan manipularse de una forma controlada. Debern proveerse deinstalaciones, equipo y procedimientos adecuados para la eliminacin de desechos. Cuandoexista la posibilidad de exceder (CFR 1984 b) los lmites de exposicin permitidos (PELs)

    se debern usar los mtodos idneos para valorar la exposicin al peligro potencial deagentes fsicos, qumicos y biolgicos.

    Riesgos de Experimentacin con AnimalesAl seleccionar los dispositivos de seguridad especficos para la experimentacin conagentes peligrosos en animales se debe prestar especial atencin a los procedimientos decuidado y alojamiento de animales, almacenamiento, distrubucin de los agentes,preparacin y administracin de dosis, manejo de fluidos y tejidos corporales, disposicinde los desperdicios y cadveres y proteccin del personal. El equipo especial de seguridadse debe usar en combinacin con las prcticas de seguridad y manejo apropiados. Como

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    regla general, la seguridad depende del personal entrenado que observa rigurosamente lasprcticas de seguridad.Son necesarias instalaciones y equipo especiales de seguridad para proteger al personal

    encargado del cuidado animal y de la investigacin, a otros ocupantes del edificio, alpblico, los animales y el medio ambiente, de la exposicin a agentes peligrosos fsicos,qumicos y biolgicos usados en experimentacin animal. Las instalaciones empleadas enexperimentacin animal con agentes peligrosos deben estar separadas de otras reas dealojamiento animal, reas de apoyo, de los laboratorios de investigacin y clnicos, ascomo de las reas para la atencin de los pacientes y deben estar identificadasapropiadamente; el acceso a ellas estar limitado al personal autorizado. Tales instalacionesdebern estar diseadas y construidas para facilitar la limpieza y el mantenimiento desistemas mecnicos. Un diseo de doble corredor correctamente administrado y usado o unsistema de barrera con entrada controlada son medios efectivos para reducir lacontaminacin cruzada. Los drenajes del piso siempre deben contener lquidos o sellarse

    eficazmente por otros medios. Se pueden colocar trampas de llenado automtico paraasegurar que siempre permanezcan llenas de lquido.Los agentes peligrosos deben ser confinados al medio ambiente en donde se realice elestudio. El control de flujo de aire (tal como el uso de gabinete de seguridad biolgica) quereduce al mnimo el escape de contaminantes es una barrera primaria utilizada para lamanipulacin y administracin de agentes peligrosos y para llevar a cabo necropsias deanimales contaminados (CDC 1995; Kruse y otros 1991). Las barreras secundarias talescomo los vestbulos ventilados, la presin de aire negativa, los filtros de aire y el equipomecnico de respaldo con encendido automtico, estn dirigidos a evitar la liberacinaccidental de los peligros fuera del medio ambiente de trabajo y de la instalacin.Se debe limitar la exposicin a los gases sobrantes de la anestesia, esto generalmente se

    logra utilizando varias tcnicas de purificacin-expulsin. Si se usa ter se debe asegurarseal personal mediante el uso apropiado de letreros, equipos y procedimientos que reduzcanal mnimo los riesgos asociados con su explosividad.

    Proteccin PersonalSe debe proveer el equipo de proteccin personal y cuando sea necesario se deben adoptarotras medidas de seguridad. El personal que cuida a los animales debe vestir ropa adecuadabrindada por la institucin, tal como: zapatos o cubrezapatos y guantes. Se debe suministrarropa protectora limpia cuantas veces sea necesario. Cuando est indicado el personal debeducharse cuando abandone las reas de cuidado animal, de procedimientos o de preparacin

    y dosificacin. Las ropas y el equipo protector no se deben usar fuera de los lmites del reade trabajo de agentes peligrosos. Al personal con exposicin potencial a los agentespeligrosos se le debe proporcionar el equipo de proteccin personal apropiado, de acuerdo alos agentes en cuestin (CFR 1984 c). Por ejemplo, al personal expuesto a primates no-humanos se le debe suministrar artculos protectores, tales como: guantes, protectores parabrazos, cubrebocas y caretas. En reas de ruido intenso debe proporcionarse proteccinauditiva. Al personal que trabaja en reas en donde puede estar expuesto a aerosoles ovapores contaminantes se le debe suministrar proteccin respiratoria adecuada (CFR 1984c).

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    Evaluacin Mdica y Medicina Preventiva para el PersonalEl desarrollo e implementacin de un programa de evaluacin mdica preventiva debeinvolucrar la participacin de profesionales capacitados, tales como mdicos y enfermerasespecialistas en salud ocupacional. Se deben considerar otros factores mdicos y legalestales como la confidencialidad, en el contexto de las regulaciones federales, estatales ylocales aplicables.Es aconsejable hacer una evaluacin de la historia clnica antes de asignar el trabajo, paravalorar los riesgos potenciales para cada uno de los empleados. Son recomendablesevaluaciones mdicas peridicas para la gente que trabaja en ciertas categoras de riesgo. Sedebe adoptar un calendario apropiado de inmunizaciones. Es importante inmunizar contrael ttanos al personal que cuida a los animales. Adems, se debe ofrecer inmunizacin a lagente expuesta o con riesgo de infeccin, antes de la exposicin, a agentes tales como larabia o el virus de la hepatitis B. Si se realiza investigacin con agentes infecciosos y estdisponible una vacuna eficaz, se recomienda la inmunizacin.La vigilancia de las zoonosis debe ser parte del programa de salud ocupacional (CDC yNIH 1993; Fox y otros 1984). El personal debe ser instruido para notificar a lossupervisores de exposiciones conocidas o potenciales ante la sospecha de peligros para lasalud y enfermedades. Se deben establecer procedimientos claros para el reporte de todoslos accidentes, mordidas, rasguos y reacciones alrgicas (NRC por imprimirse).Las enfermedades de los primates no-humanos transmisibles al hombre pueden ser un seriopeligro. Los tcnicos en cuidado animal, clnicos, investigadores, estudiantes de pre yposgrado, los tcnicos en investigacin, asesores, trabajadores de mantenimiento, personalde seguridad y otras personas que tengan contacto con primates no-humanos o que tenganresponsabilidades en las reas de alojamiento de esos animales deben ser examinadosrutinariamente para tuberculosis. El personal que trabaja con macacos debe tener acceso a y

    ser instruido en el uso de estaciones de emergencia para la atencin de mordidas yrasguos, debido a la exposicin potencial al Cercopithecine herpesvirus I (antesHerpesvirus simiae). Se debe establecer un procedimiento que asegure la atencin mdicade las mordeduras y rasguos.

    2. ANIMALES DE EXPERIMENTACION

    2.1- TRANSPORTE Y DESCARGA DE LOS ANIMALES

    Acondicionamiento de los vehculos y traslado hacia los Centros de InvestigacinPara el trasporte de los animales que ingresarn a las experiencias, los vehculos debernestar acordes a la especie, tamao, edad y estado fisiolgico de los animales que setransportan. El piso del vehculo deber contar con una superficie anti-deslizante (enrejadoo bien una cama de pasto seco) y deber tener los laterales y el techo cerrados, para evitarescapes por saltos, en las especies que pudieran hacerlo.El nmero mximo de animales permitido por metro cuadrado depender de la especie ydel tamao, pero deber tenerse en cuenta que los mismos no podrn deambular por elvehculo ni estar amontonados, impidiendo que cambien la posicin de su cuerpo, paraestar mas cmodos. En caso de que el nmero de animales sea menor a la cantidad deindividuos permitidos para ser transportados en ese vehculo, se podrn utilizar sogascruzadas de lateral a lateral, para disminuir la superficie y de esta manera limitar el

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    movimiento de los animales. Ante la presencia de animales intranquilos, los mismos sepodrn inmovilizar colocndoles bozales y atndolos a las paredes del vehculo y en loscasos extremos, se podr recurrir a la anestesia, por un veterinario habilitado, siempre que

    se consulte previamente al investigador responsable.El traslado deber realizarse con personal entrenado en el manejo de los animales, paraagilizar las maniobras de carga y descarga y poder solucionar cualquier inconveniente quepudiera surgir durante el traslado.Al momento de la carga de los animales en el establecimiento proveedor, se deber contarcon la reglamentacin legal sanitaria (DTA-SENASA) que permite el trnsito de losanimales dentro del Territorio de la Repblica Argentina. En caso de que se trasladenespecies de fauna silvestre, se deber obtener el permiso de Fauna Provincial (de origen delos animales) y de Fauna Nacin que correspondan para la especie.El transportista tambin deber contar con una copia del Proyecto, ya aprobado por esteComit, donde debern figurar los datos del Investigado responsable, por cualquier

    inconveniente que se presente durante el viaje.En caso de que la duracin del viaje lo requiera, se debern realizar paradas para brindarlesagua o tratamientos veterinarios especficos a los animales en trnsito, siempre que elproyecto de investigacin lo permita.La hora de llegada de los animales al Centro de Investigacin debe ser notificada a lasautoridades del mismo, para que prevean la disposicin de personal auxiliar para ladescarga y alojamiento de los animales en sus respectivos boxes de asilamiento.El comit no aceptar para cargar, levantar o descargar a un animal , el uso de picanaelctrica.

    2.2.- MANTENIMIENTO

    Medio Ambiente, Alojamiento y Manejo de los animales (Extrado de Edicion Mexicana de la Gua para el

    Cuidado y Uso de los Animales de Laboratorio. Institute of Laboratory Animal Resources. Commission on

    Life Sciences National Research Council auspiciada por la Academia Nacional De Medicina. 1999. Copyright

    National Academy Press, Washington, D.C. 1996.)

    Son esenciales el manejo y alojamiento apropiados de las casas para animales delaboratorio, tambin llamadas bioterios, para su bienestar, la calidad de los resultados de lainvestigacin cientfica y los programas de pruebas de control y de enseanza, en las cualesse utilicen dichos animales y para la salud y seguridad del personal. Un buen programa de

    manejo ofrece el ambiente, alojamiento y cuidado que permite a los animales crecer,madurar, reproducirse y mantener una buena salud.Al planear un adecuado ambiente fsico y social, hospedaje, espacio y manejo se debenconsiderar muchos factores entre ellos:

    Las especies, variedad y raza de animales y sus caractersticas individuales talescomo sexo, edad, tamao, conducta, experiencia y salud.

    La habilidad de los animales para integrar grupos con sus semejantes, a travs de lavista, olfato y posible contacto, ya sea que los animales se mantengan aislados o engrupos.

    El diseo y construccin del alojamiento.

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    La disponibilidad y adecuacin de elementos que enriquezcan el medio ambiente. Las metas del proyecto y el diseo experimental (ej., produccin, crianza,

    investigacin, pruebas de laboratorio y educacin). La intensidad de la manipulacin animal y el grado de dao que causen los

    procedimientos. La presencia de materiales peligrosos o que causen enfermedad. La duracin del perodo de permanencia de los animales.

    Los animales deben alojarse con el objeto de permitir el despliegue completo de conductasespecficas y normales de cada especie y disminuir al mnimo conductas inducidas porestrs. En el caso de las especies gregarias, esto normalmente requiere el alojamiento enparejas a grupos compatibles.

    MEDIO AMBIENTEMicroambiente y MacroambienteEl microambiente de un animal es el ambiente fsico que lo rodea de manera inmediata, locompone la temperatura, humedad y la composicin gaseosa y particulada del aire, sulmite es el medio de encierro primario (es decir la jaula del animal). El medio ambientefsico del encierro secundario, es decir el cuarto, establo o corral al aire libre, constituye elmacroambiente. An cuando el micro y el macroambiente estn vinculados por laventilacin entre los encierros primario y secundario, pueden ser totalmente diferentes entreellos, siendo afectados por el diseo de ambos.En los encierros primarios pequeos puede ser difcil medir las caractersticasmicroambientales. La informacin disponible indica que la temperatura, humedad y

    concentracin de gases y partculas a menudo son mas altas en el microambiente del animalque en el macroambiente (Besch 1980; Flynn 1959; Gamble y Clough 1976; Murakami1971; Serrano 1971). Las condiciones microambientales pueden inducir cambios en losprocesos metablicos y fisiolgicos o alteraciones en la susceptibilidad a enfermedades(Broderson y otros 1976; Schoeb y otros 1982; Vesell y otros 1976).

    ALOJAMIENTOEncierro PrimarioEl encierro primario (generalmente una jaula, corral o casilla de caballeriza o establo)constituye los lmites del ambiente inmediato del animal. Los encierros primariosaceptables permiten:

    Satisfacer las necesidades fisiolgicas y de conducta de los animales incluyendo lamiccin y la defecacin, el mantenimiento de la temperatura corporal, losmovimientos normales y postura, y cuando est indicado la reproduccin.

    Las interacciones sociales entre individuos de la misma especie y el establecimientode jerarqua dentro del encierro o entre encierros.

    Que los animales permanezcan limpios y secos (de acuerdo con los requerimientosde las especies).

    Una ventilacin adecuada.

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    El acceso de los animales al agua y alimento, y tambin brindar facilidades para ellleno, relleno, cambio, servicio y limpieza de los utensilios con los cuales seproporcione el agua y el alimento.

    Tener un medio ambiente seguro, que impida el escape de los animales o elentrampamiento de sus apndices entre superficies opuestas o en aberturasestructurales.

    La ausencia de bordes cortantes o proyecciones que puedan causar lesiones a losanimales.

    Permitir la observacin de los animales con la mnima molestia para ellos.

    Los encierros primarios deben construirse con materiales que equilibren las necesidades delanimal con la facilidad para llevar a cabo la sanidad. Deben tener superficies lisas,impermeables, con el mnimo de rebordes o sobresalientes, ngulos, esquinas y superficiesque se traslapen, de tal manera que la acumulacin de suciedad, desechos y humedad se

    reduzcan y sea posible una limpieza y desinfeccin satisfactoria. Deben estar construidoscon materiales durables que resistan la corrosin y que soporten la manipulacin ruda sindesportillarse, cuartearse u oxidarse. En algunas situaciones, materiales menos durables,como la madera, pueden ofrecer un ambiente mas apropiado (tales como perreras ocorrales) y pueden usarse para construir perchas, estructuras para que trepen, reas dedescanso y rejas perimetrales para los encierros primarios. Puede ser necesario elreemplazo peridico de los objetos de madera, debido a su deterioro y dificultades parasanearlo.Todos los encierros primarios deben mantenerse en buenas condiciones de uso para evitarlos escapes o las lesiones en los animales, promover la comodidad fsica y facilitar lasanidad y el servicio. El equipo oxidado o enmohecido que amenace la sanidad o seguridad

    de los animales debe ser reparado o reemplazado.Con frecuencia los roedores se hospedan sobre pisos de alambre que mejoran la sanidad delas jaulas, al permitir el paso de heces y orina para recolectarse en una charola colocadadebajo. Sin embargo, algunas evidencias sugieren que los alojamientos sobre piso slido ymaterial de cama son preferidos por los roedores (Fullerton y Gilliatt 1967; Grover-Johnsony Spencer 1981; Ortman y otros 1983). Por lo tanto, se recomiendan las jaulas de pisoslido con lecho para los roedores. Para otras especies como perros y primates no-humanoscon frecuencia se usan pisos recubiertos de vinil.

    Refugios o Alojamientos al Aire LibreLos refugios o alojamientos al aire libre tales como graneros, corrales, pastizales e islas son

    el mtodo primario comn de hospedaje para algunas especies y en muchas situaciones esaceptable. En la mayora de los casos est vinculado al mantenimiento de animales engrupos.Un manejo exitoso de las instalaciones al aire libre esta basado en las siguientesconsideraciones:

    Cuando los animales son colocados por primera vez en alojamientos al aire libre seles debe brindar un perodo de aclimatacin adecuado, previo al cambio de estacion.

    Entrenar a los animales para que cooperen con el personal de investigacin, usarjaulas para restringir sus movimientos o para trasladarlos.

    Brindar un medio ambiente social apropiado para la especie.

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    Agrupar animales compatibles. Ofrecer seguridad adecuada, mediante una reja perimetral o por otros medios.

    Ambientes NaturalesIslas y Pastizales brindan la oportunidad de ofrecer un ambiente idneo para lareproduccin o el mantenimiento de los animales y para algunos tipos de investigacin. Suutilizacin resulta en la prdida parcial del control de nutricin, supervisin de salud ycontrol de genealoga. Estas limitaciones son balanceadas por los beneficios de teneranimales que viven en condiciones mas naturales. En este escenario la inclusin, remocino retorno de los animales a los grupos sociales deben hacerse con apropiada consideracinde los efectos que tendrn sobre el individuo y sobre el grupo. Se debe asegurar eladecuado suministro de alimento y agua potable y de refugios naturales o construidos.

    Recomendaciones de Espacio

    La necesidad de espacio para los animales es un asunto complejo y considerar nicamentesu peso o superficie corporal es insuficiente. Por esta razn, las recomendaciones deespacio que se presentan aqu estn basadas en el juicio profesional y la experiencia. Estosespacios deben considerarse como recomendaciones de los tamaos apropiados de jaulapara los animales alojados bajo las condiciones encontradas comnmente en lasinstalaciones para hospedar animales de laboratorio. El alto, la estructuracin del espacio ylos medios de enriquecimiento afectan el uso que el animal pueda darle al mismo. Algunasespecies se benefician mas del espacio con paredes (ej. los roedores thigmotacticos), o delos refugios (ej. algunos primates del Nuevo Mundo) o de complejidades en la jaula (ej.gatos y chimpancs) que del simple aumento del rea de piso (Anzaldo y otros 1994;Stricklin 1995). Por lo tanto, basar las recomendaciones para el tamao de jaula slo en el

    rea de piso es inadecuado.La asignacin de espacios se debe revisar y en caso necesario modificar para resolver lassituaciones individuales de alojamiento y satisfacer las necesidades de los animales (ej.,para el cuidado prenatal y postnatal, los animales obesos y el alojamiento individual o degrupo). Para valorar la adecuacin del hospedaje se pueden usar ndices del rendimientoanimal, tales como: salud, reproduccin, crecimiento, conducta, actividad y utilizacin delespacio. El requerimiento mnimo es que el animal disponga de espacio suficiente paravoltearse y para expresar las posturas normales, debe tener fcil acceso al agua y alimento ydebe tener un rea suficiente con material de lecho limpio y sin obstculos para moverse ydescansar. Para los gatos debe incluirse una superficie horizontal elevada para el descanso.A menudo tambin son deseables superficies elevadas de descanso para perros y primates

    no-humanos. Las superficies de descanso cercanas al piso, que no permiten al animalocupar el espacio debajo de ellas, debe considerarse como parte del rea de piso. El espacioocupado por los comederos, bebederos, nidos y otros utensilios, no deben considerarseparte del rea de piso.La evaluacin de las necesidades de espacio de los animales debe ser un proceso continuo.A lo largo del tiempo o en protocolos de largo plazo se deben considerar ajustes en elespacio de piso y de altura y cuando sea necesario modificarlos.No est dentro de los objetivos y extensin de la Gua discutir los requerimientos dealojamiento para todas las especies empleadas en investigacin cientfica. Para las especiesque no se mencionan, se puede usar como punto de partida el espacio y la altura asignada aindividuos de un tamao equivalente y con un patrn de actividad y conducta similares, y

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    despus hacer las adaptaciones necesarias tomando en consideracin las necesidadesespecficas de la especie y del individuo.Siempre que sea apropiado los animales gregarios deben alojarse en parejas o grupos en vez

    de solos, asumiendo que esta prctica no est contraindicada en el protocolo en cuestin yque no constituye un riesgo excesivo para los animales (Brain y Bention 1979).Dependiendo de una variedad de factores biolgicos y de conducta los animaleshospedados en grupo pueden necesitar ms o menos espacio total por animal que losanimales alojados individualmente. Las recomendaciones que se ofrecen ms adelante estnbasadas en la hiptesis de que el alojamiento en pares o en grupos generalmente espreferible al hospedaje individual, an cuando los miembros del par o del grupo dispongande un poco menos espacio por animal que si estn solos. Por ejemplo, cada animal puedecompartir el espacio asignado a los animales con los cuales se encuentra alojado. An mas,algunos roedores o cerdos hospedados en grupos compatibles buscan la compaa de otrosy comparten el espacio acurrucndose a lo largo de las paredes, acostndose uno sobre el

    otro durante los perodos de descanso o reunindose en las reas de retiro (White 1990;White y otros 1989). El ganado, ovejas y cabras exhiben la conducta de agruparse en hato orebao y buscan la asociacin en grupo y contacto fsico cercano. De manera contraria,algunos animales tales como varias especies de primates no-humanos puede necesitarespacio individual adicional cuando se encuentran alojados en grupo, para reducir el nivelde agresin.La altura de los encierros puede ser importante para la conducta normal y losacomodamientos de postura de algunas especies. Para la altura de las jaulas se debe tomaren cuenta las posturas tpicas del animal y proveer suficiente espacio para los componentesnormales de la jaula, tales como comederos y bebederos, incluyendo las pipetas de estosltimos. Algunas especies de primates no-humanos usan las dimensiones verticales de la

    jaula en mayor medida que el piso, para ellos la posibilidad de colgarse de una percha y ladisponibilidad de espacio suficiente para mantener todo el cuerpo por encima del piso de lajaula puede mejorar su bienestar.La asignacin del espacio para los animales debe basarse en los siguientes cuadros, sinembargo puede ser aumentado o disminuido de acuerdo a los criterios enlistadospreviamente y con la aprobacin del CEICUAE.En la Tabla 2.1. se muestran las recomendaciones del espacio asignado a las especiescomunes de roedores alojados en grupos; si se alojan individualmente o exceden los pesoslistados, podran requerir de ms espacio.

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    Tabla 1. Espacio Recomendado para Roedores de Laboratorio de Uso Comn,Alojados en Grupo

    Animales Peso Corporalg

    Area dePiso/Animal

    cm2

    Alturaacm

    Ratones 25b

    38.7151.6177.4296.77

    12.712.712.712.7

    Ratas 500b

    109.68148.39

    187.1258.1387.1

    451.61

    17.7817.78

    17.7817.7817.7817.78

    Hamsteres 100b

    64.5283.87

    103.23122.58

    15.2415.2415.2415.24

    Cobayos 350b

    387.1651.6

    17.7817.78

    a. De piso a techo de la jaulab. Los animales mas grandes pueden requerir mas espacio para satisfacer los estndares derendimiento (vea el texto)

    La Tabla 2 agrupa las asignaciones de espacio recomendadas para otros animales delaboratorio comunes; en general, estn basadas en las necesidades de animales alojadosindividualmente. Los espacios asignados deben ser reevaluados para brindar elenriquecimiento del encierro primario o para acomodar a los animales cuyos pesos excedanlos indicados. Para el hospedaje en grupo, la determinacin del espacio total necesario noest basado obligatoriamente en la suma de las cantidades recomendadas para elalojamiento individual de animales. El espacio para animales alojados en grupo debe estarbasado en las necesidades individuales de la especie, conducta, compatibilidad de losanimales, nmero de animales y metas de las circunstancias del alojamiento.

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    Tabla 2. E s p a c i o R e c o m e n d a d o p a r a C o n e j o s , G a t o s , P e r r o s , P r i m a t e s

    N o - h u m a n o s y A v e s .

    Animales Peso CorporalKg

    Area dePiso/Animal

    cm2m2

    Alturabcm

    Conejos 5.4c

    0.13940.27870.37160.4645

    35.5635.5635.5635.56

    Gatos 15 0.27870.3716 60.9660.96

    Perrosd 30c

    0.74321.11482.2297

    ------

    Monose,f(incluyendo babuinos)Grupo 1Grupo 2Grupo 3

    Grupo 4Grupo 5Grupo 6Grupo 7

    Hasta 1Hasta 3

    Hasta 10

    Hasta 15Hasta 25Hasta 30

    >30c

    0.14860.27870.3716

    0.55740.74320.92901.3935

    50.876.276.2

    81.2891.44116.84116.84

    Simios(Pongidae)fGrupo 1Grupo 2Grupo3

    Hasta 20Hasta 35

    >35g

    0.92901.39352.3226

    139.7152.4

    213.36

    Pichonesh -- 0.0743 --

    Codornicesh

    -- 0.0232 --Pollosh 3.0c

    0.02320.04650.09290.18580.2787

    ----------

    b. De piso a techo de la jaula.

    c. Los animales mas grandes pueden requerir mas espacio para lograr los estndares de

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    rendimiento (vea el texto).

    d. Estas recomendaciones pueden requerir modificaciones de acuerdo a la conformacin corporal

    de los individuos y de las razas. Algunos perros, especialmente aquellos que estn cerca del lmitesuperior de cada uno de los rangos de peso pueden requerir mas espacio para asegurar elcumplimiento de las regulaciones delAnimal Welfare Act.. Estas regulaciones (CFR 1985)obligan a que la altura de las jaulas sea suficiente para permitir que su ocupante se ponga de piecmodamente y que el rea de piso mnima en pies cuadrados sea igual al cuadrado de la suma dela longitud del perro medida desde la punta de la nariz hasta la base de la cola, en pulgadas, masseis (para convertir pies cuadrados en metros cuadrados multiplique por 0.0929030).

    e. Las siguientes familias de primates pueden requerir mas altura que otros monos: Callitrichidae,Cebidae, Cercopithecidae y Papio. Los babuinos pueden requerir meyor altura que otros monos.

    f. Para algunas especies (ej. Brachyteles, Hylobates, Symphalangus, Pongo y Pan) la altura de lajaula debe ser tal que el animal extendido pueda columpiarse del techo de la jaula sin que sus piestoquen el piso. El diseo del techo debe promover el movimiento braquial.

    g. Los grandes simios que pesan mas de 50 Kg. pueden alojarse con mayor efectividad enestructuras permanentes de tabique o concreto con paneles de barrotes que en jaulasconvencionales.

    h. La altura de las jaulas debe ser suficiente para que los animales puedan pararse erectos sobre elpiso de la jaula.

    La Tabla 3 muestra las asignaciones de espacio recomendadas para los animales de granjacomnmente utilizados en el laboratorio. Cuando los animales se alojan individualmente o

    en grupos exceden los pesos enlistados, podra requerirse mas espacio. Si se alojan engrupo se debe brindar un acceso adecuado al agua y al alimento (Larson y Hegg 1976;Midwest Plan Service 1987).

    Tabla 3. Espacio Recomendado para las Especies de Granja UtilizadasComnmente

    Animal/EncierroPeso Corporal

    KgArea de Piso/Animal

    m2

    Ovinos y Caprinos

    1 50b

    0.92901.39351.8580

    2-550b

    0.78971.16131.5794

    >550b

    0.69681.04981.3935

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    21

    Cerdos

    1

    200b

    0.7432

    1.11481.39352.22974.45935.5741

    2-5 200b

    0.55740.92901.85803.71614.8310

    >5 200b

    0.55740.83611.67223.34454.4593

    Ganado

    1650b

    2.22974.45936.6890

    8.918711.511013.3780

    2-5650b

    1.85803.71615.57427.43229.7548

    11.1483

    >5

    650b

    1.6722

    3.34455.01676.68908.6310

    10.0335

    Caballos -- 13.3780

    Ponies

    1-4 -- 6.6890

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    22

    >4/Pen 200b

    5.57426.6890

    b. Los animales mas grandes pueden requerir mas espacio para lograr los estndares derendimiento

    Temperatura y HumedadEl mantenimiento de la temperatura corporal dentro de los lmites de la variacin normal esesencial para el bienestar de los homeotermos. Generalmente la exposicin de los animalesno adaptados a temperaturas superiores a los 29.4 C o por debajo de 4.4 C, sin que tenganacceso a proteccin en un refugio u otro mecanismo, pueden producir efectos clnicos(Gordon 1990), que pueden poner en peligro la vida. Los animales se pueden adaptar acondiciones extremas mediante mecanismos morfolgicos, fisiolgicos y de conducta, perotales adaptaciones llevan tiempo y pueden alterar los resultados experimentales o afectar losrendimientos (Garrard y otros 1974; Gordon 1993; Pennycuik 1967).La temperatura ambiental y la humedad relativa pueden depender del diseo y practicas delalojamiento y pueden ser considerablemente diferente entre los encierros primario ysecundario. Los factores que contribuyen a la variacin de temperatura y humedad,incluyen los materiales y la construccin del alojamiento, uso de filtros, nmero deanimales por jaula, ventilacin forzada de los encierros, frecuencia del cambio de materialde lecho y tipo de lecho.Algunas situaciones pueden requerir temperaturas ambientales mas altas, tales como larecuperacin post-operatoria, el mantenimiento de pollitos recin nacidos, el hospedaje deroedores sin pelo y de neonatos que han sido separados de sus madres. La magnitud delincremento de temperatura depende de las circunstancias del alojamiento, algunas veces essuficiente elevar la temperatura en el encierro primario en vez de elevarla en el encierrosecundario.Debido a la carencia de estudios bien controlados, las temperaturas de bulbo secorecomendadas (Tabla 2.4) para varias especies animales estn basadas en el criterioprofesional y la experiencia. En el caso de animales en espacios confinados, se debemantener al mnimo el rango de flujo diario de la temperatura, para evitar grandesdemandas repetidas de los procesos metablicos y de conducta, necesarios para compensarlos cambios trmicos en el medio ambiente. La humedad relativa tambin se debe controlar,pero no tan estrechamente como la temperatura; el rango aceptable de humedad relativa esde 30 a 70%. Los rangos de temperatura mostrados en la Tabla 2.4 no podran seraplicables a animales silvestres cautivos, animales silvestres mantenidos en su medioambiente natural o animales en encierros al aire libre que no hayan tenido la oportunidad deadaptarse mediante la exposicin a los cambios estacionales de las condicionesambientales.

    Tabla 4. Temperaturas de Bulbo Seco Recomendadas para los Animales de LaboratorioComunes

    Especie Animal Temperatura deBulbo Seco C

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    Ratn, rata, hmster, gerbo, cuyosconejos

    Gato, perro y primates no-humanosAnimales de Granja y Aves

    18-2616-22

    18-2916-27

    VentilacinLos propsitos de la ventilacin son suministrar oxgeno adecuadamente; eliminar la cargatrmica producto de la respiracin animal, la iluminacin y los aparatos; diluir los gases ypartculas contaminantes; ajustar el contenido de humedad del aire del cuarto; y en dondesea apropiado crear diferencia de presin de aire entre espacios adyacentes. Sin embargo, elestablecer un ndice de ventilacin en el cuarto no asegura la adecuacin de la ventilacinen el encierro primario del animal y por lo tanto no garantiza la calidad del microambiente.El grado de movimiento del aire o corriente de aire (chifln) causa incomodidad y

    consecuencias biolgicas, que en la mayora de las especies, aun no han sido establecidas.El volumen y las caractersticas fsicas del aire suministrado a un cuarto y su patrn dedifusin, influyen en la ventilacin del encierro primario del animal y por eso sonimportantes determinantes de su medio ambiente. El tipo y la localizacin de los difusoresdel suministro de aire, las ventanillas de salida del mismo y su interrelacin con el nmero,localizacin, disposicin y tipo de encierro primario en el cuarto u otro encierro secundario,afecta la eficiencia de la ventilacin del encierro primario y por lo tanto deben tomarse enconsideracin.Se pueden reducir la concentracin de gases txicos y de aquellos que causan olor en el airede los cuartos de animales con el cambio frecuente de material de cama y el lavado dejaulas, junto con prcticas de cuidado, tales como: baja densidad de poblacin animal y

    temperatura y humedad medio ambiental ms bajas en los cuartos de animales. Eltratamiento del aire reciclado tanto para eliminar partculas as como contaminantesgaseosos es caro y puede resultar ineficiente si no se le da unmantenimiento suficiente y apropiado a los sistemas de filtracin. Estos sistemas deben sermantenidos debidamente y verificados para mantener al mximo su efectividad.Para que la operacin de cualquier sistema HVAC sea exitosa se requiere mantenimiento yevaluacin regulares, incluyendo la evaluacin de su funcionamiento a nivel del encierrosecundario; estas evaluaciones deben incluir el volumen de entrada y salida de aire ycuando sea aplicable los diferenciales de presin esttica.

    Iluminacin

    La luz puede afectar la morfologa, fisiologa y conducta de varios animales (Brainard yotros 1986; Erkert y Grober 1986; Newbold y otros 1991; Tucker y otros 1984). Losfotoestresores potenciales son: fotoperiodo, fotointensidad y calidad espectral de la luz(Stoskopf 1983) inapropiados, al establecer los niveles de iluminacin apropiados para loscuartos de ocupacin animal, se deben considerar numerosos factores que puedan afectarlas necesidades que tienen los animales; entre estos se incluyen la intensidad de la luz; laduracin de la exposicin, la longitud de onda, la exposicin previa, la pigmentacin delanimal, las horas de exposicin en relacin al ciclo circadiano, la temperatura corporal, elstatus hormonal, la edad, especie, sexo, variedad o lineaje del animal (Brainard 1989;Duncan y O'Steen 1985; O'Steen 1980; Saltarelli y Coppola 1979; Semple-Rowland yDawson 1987; Wax 1977).

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    En general, la luz debe difundirse a travs de las reas de alojamiento animal y brindarsuficiente iluminacin para el bienestar de los animales y para permitir las buenas prcticasde su atencin, inspeccin adecuada, incluyendo las jaulas colocadas en el entrepao ms

    inferior del estante; y de las condiciones de trabajo seguras para el personal. La luz en loscuartos de los animales debe ser suficiente para una visin adecuada y para la regulacinneuroendcrina de los ciclos circadianos y diurnos (Brainard 1989).En muchas especies animales el fotoperodo es un regulador crtico de la conductareproductiva (Brainard y otros 1986; Cherry 1987) y tambin puede alterar la ganancia depeso corporal y la ingestin de alimento (Tucker y otros 1984). Se debe evitar o reducir almnimo la exposicin accidental a la luz durante el ciclo de obscuridad. Debido a quealgunas especies no comen en condiciones de baja intensidad de luz u obscuridad, taleshorarios de iluminacin se deben limitar a una duracin que no comprometa el bienestar delos animales. Se debe usar un sistema de control de la iluminacin que asegure un ciclodiurno regular y el funcionamiento del reloj interruptor debe verificarse peridicamente

    para asegurar un ciclo apropiado.Los animales de laboratorio de uso ms comn son nocturnos. Debido a que la rata albinaes mas susceptible a la retinopata fototxica que otras especies se le ha utilizado comoreferencia para establecer los niveles de iluminacin de los cuartos (Lanum 1979). Noexisten datos basados en estudios cientficos acerca de las intensidades de luz para otrasespecies. Parece ser que niveles de luz de aproximadamente 325 luxes (30 bujas pie) a 1 m.aproximadamente (3.3 pies) del piso son suficientes para el cuidado de los animales, sincausar signos clnicos de retinopata fototxica en ratas albinas (Bellhorn 1980), y se haencontrado que niveles superiores a 400 luxes (37 bujas pie) medidas en un cuarto vaco a1 metro del piso son satisfactorios para los roedores siempre y cuando se sigan prcticas demanejo que eviten dao retinal en animales albinos (Clough 1982). Sin embargo, la

    experiencia previa del individuo puede afectar su sensibilidad a la fototoxicidad; se hareportado que de acuerdo a evidencias histolgicas, morfomtricas y electrofisiolgicas, laluz de 130-270 luxes por encima de la intensidad en que ha sido criado es cercana al umbralde dao retinal en algunas ratas albinas (Semple-Rowland y Dawson 1987). Algunas guasrecomiendan una intensidad de luz tan baja como 40 luxes medidos a nivel de una cajaintermedia del estante (NASA 1988). Los ratones jvenes albinos y pigmentados, prefiereniluminaciones mucho ms bajas que los adultos (Wax 1977), an cuando la mayora de lasveces el potencial dao retinal asociado con el alojamiento de estos roedores en niveles deluz ms altos es reversible. Por lo tanto, la intensidad de luz a nivel de la jaula, paraanimales que han mostrado ser susceptibles a la retinopata fototxica, debe ser entre 130 y325 luxes.

    Se pueden usar prcticas de cuidado para reducir la estimulacin lumnica inapropiada delos animales; tales como rotar la posicin de la jaula en relacin con la fuente de luz(Greenman y otros 1982) u ofrecer a los animales formas de modificar por s mismos laexposicin a la luz por medios de conducta (ej., haciendo tneles o escondindose enestructuras). Se puede considerar la instalacin de controles de intensidad variable de luz,como un medio de asegurar que las intensidades sean consistentes con las necesidades delos animales y del personal que trabaja en los cuartos de los mismos y con el ahorro deenerga. Tales controles, deben tener alguna forma de escala vernier y permitir el ajuste fijode la intensidad y no usarse meramente como un interruptor de encendido y apagado. Elmanual de laIlluminating Engineering Society of North America (IESNA) (Kaufman 1984,1987) puede ayudar en la toma de decisiones concernientes a la uniformidad de la

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    iluminacin, ndice de emisin de calor, mamparas, control de los fulgores deslumbrantes,reflejos, vida media, generacin de calor y seleccin de balastras.

    RuidoEl ruido que producen los animales y las actividades de cuidado son inherentes a laoperacin de un bioterio (Pfaff y Stecker 1976). Por lo tanto, el control del ruido se debeconsiderar en el diseo y operacin de las instalaciones (Pekrul 1991). La evaluacin de losefectos potenciales del ruido sobre los animales justifica la consideracin de la intensidad,frecuencia, rapidez de inicio, duracin y vibracin potencial del sonido y el rango deaudicin, historia de la exposicin al ruido y susceptibilidad a su efecto de la especie, tipo osubtipo.La separacin de las reas de ocupacin humana y animal reduce al mnimo las molestias aambos ocupantes de las instalaciones. Los animales ruidosos, como los perros, cerdos,caprinos, y primates no-humanos deben alojarse lejos de los animales silenciosos como los

    roedores, conejos y gatos. Los ambientes deben estar diseados para alojar animalesruidosos en vez de recurrir a mtodos de reduccin del ruido. La exposicin a sonidos msaltos de 85 dB puede tener tanto efectos auditivos como no auditivos (Fletcher 1976;Peterson 1980), que incluyen eosinopenia y aumento del peso de las adrenales y (Geber yotros 1966; Nayfield y Besch 1981) disminucin de la fertilidad en roedores (Zondek yTamari 1964), e incremento de la presin sangunea en primates no-humanos (Peterson yotros 1981). Muchas especies pueden or frecuencias de sonidos que son inaudibles para losseres humanos (Brown y Pye 1975; Warfield 1973), por eso se deben considerarcuidadosamente los efectos potenciales de equipo y materiales que producen ruido en elrango de audicin de los animales cercanos, tales como terminales de repeticin de videos(Sales 1991). Las actividades que puedan ser ruidosas deben realizarse, en la medida de lo

    posible, en cuartos o reas separadas de las de alojamiento y uso de los animalesl.Debido a que los cambios en el patrn de la exposicin al sonido tienen diferentes efectosen los diferentes animales (Armario y otros 1985; Clough 1982) el personal debe tratar dereducir al mnimo la produccin de ruido innecesario. Se puede reducir al mnimo el ruidointermitente y excesivo entrenando al personal en prcticas alternativas a las que producenruido y con el uso de rodajas y defensas acojinadas en los vehculos y estantes. No se debenusar radares, alarmas y otros generadores de sonidos en los cuartos de los animales, amenos que sean parte de un protocolo aprobado o de un programa de enriquecimiento delmedio ambiente.

    2.3. MANEJO CONDUCTA

    Estructura del Medio AmbienteLa estructura del medio ambiente esta integrada por los componentes del encierro primario,jaula, equipo de enriquecimiento ambiental, objetos para que manipulen los animales ycomplejidades de las jaulas. Dependiendo de las especies animales y de su uso, la estructuradel medio ambiente debe incluir plataformas de descanso, entrepaos o perchas, juguetes,utensilios de entretenimiento, materiales para nido, tneles, columpios y otros objetos quebrinden oportunidades para la expresin de posturas y actividades tpicas de la especie y elbienestar del animal. En aos recientes se ha aprendido mucho acerca de la historia naturaly de las necesidades ambientales de muchos animales, sin embargo, se promueve lacontinua investigacin cientfica de aquellos ambientes que aumenten el bienestar de losanimales de experimentacin.

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    Ambiente SocialSe deben tomar en consideracin las necesidades sociales de los animales. El medio

    ambiente social usualmente comprende la comunicacin y el contacto fsico entreindividuos de la misma especie (conespecficos) aunque puede inducir la comunicacin sincontacto entre los individuos a travs de seas (visual), seales olfatorias o auditivas. Losanimales gregarios deben alojarse con sus conespecficos, siempre y cuando sea oportuno ysean compatibles. Por ejemplo, agrupar a primates gregarios o especies caninas es confrecuencia benfico para ellos si los grupos estn formados por individuos compatibles. Sonesenciales las interacciones sociales apropiadas entre conespecficos para el desarrollonormal de muchas especies. La compaa social puede aminorar una situacin estresante(Gust y otros 1994), reducir las anormalidades de conducta (Reinhardt y otros 1988, 1989),aumentar las posibilidades de ejercicio (Whary y otros 1993) y expandir las conductastpicas de la especie y la estimulacin cognoscitiva. Deben evaluarse factores tales como la

    densidad de poblacin, la habilidad de dispersarse, la familiaridad inicial entre los animalesy la estratificacin social para formar los grupos animales (Borer y otros 1988; Diamond yotros 1987; Drickamer 1977; Harvey y Chevins 1987; Ortiz y otros 1985; Vandenbergh1986, 1989). Al seleccionar un medio ambiente social conveniente se debe prestar atencina si los animales son naturalmente territoriales o comunales, o si deben alojarse en parejas oen grupos; la comprensin de la conducta social natural tpica de la especie facilita unalojamiento socialmente exitoso.Sin embargo, no todos los miembros de una misma especie gregaria pueden o debenmantenerse en sociedad, razones experimentales, de salud o conducta podran impedir elexito de este tipo de alojamiento. El agrupamiento puede incrementar la posibilidad deheridas por peleas (Bayne y otros 1995), aumentar la susceptibilidad a desordenes

    metablicos como la ateroesclerosis (Kaplan y otros 1982) y alterar la fisiologa y conducta(Bernstein 1964; Bernstein y otros 1974 a, b). Adems, se han observado en varias especiesdiferencias en compatibilidad debidas al sexo (Crockett y otros 1994; Grant y Macintoch1963; Vandenbergh 1971; vom Saal 1984). Estos riesgos del alojamiento grupal se reducenen gran medida si los animales son socialmente compatibles y las unidades socialesestables.Es deseable que los animales gregarios se hospeden en grupos; sin embargo, cuando tenganque alojarse solos se deben brindar otras formas de enriquecimiento, tales como lainteraccin inocua y positiva con las personas que los cuidan y el enriquecimiento de laestructura medio ambiental, para compensar la ausencia de otros animales.

    ActividadLa actividad de los animales implica tpicamente la actividad motriz, pero tambin incluyela actividad cognoscitiva y la interaccin social. Los animales mantenidos en el laboratoriopueden tener un patrn de actividad mas restringido que aquellos que se encuentran enestado libre. Al evaluar la adecuacin del alojamiento se debe considerar la actividadmotriz del animal, incluyendo los desplazamientos en sentido vertical y constatar que lacantidad y calidad de la actividad desplegada por el animal sean apropiadas. Se debe evitarforzar la actividad por otras razones que no sean teraputicas o para cumplir los objetivosdel protocolo experimental. En la mayora de las especies se considera indeseable laconducta repetitiva, sin una meta o propsito y que excluye la posibilidad de otras

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    conductas (AWIC 1992; Bayne 1991; NRC por imprimirse; tambin vea el captulo"Enriquecimiento del Medio Ambiente" en el Apndice A).Se deben dar a los animales oportunidades de exhibir los patrones tpicos de actividad de su

    especie. Los perros, gatos y otros muchos animales domsticos se benefician de lainteraccin con las personas (Rollin 1990). Se les puede brindar la oportunidad de actividada los perros caminandolos con una correa, teniendo acceso a una perrera o cambiandolos derea (como a un cuarto, a una jaula ms grande, o a una perrera al aire libre), para que tengacontacto social, juegue o explore. A menudo las jaulas se usan para el alojamiento de losperros a corto plazo, para atencin veterinaria y para propsitos de investigacin, pero serecomienda el uso de perreras o corrales y otras reas que no sean jaulas y que ofrezcanmas espacio para el movimiento (Wolff y Rupert 1991). Para los animales de granjagrandes, tales como caballos, ovejas y ganado, son deseables reas de relajamiento, terrenosde ejercicio y pastizales.

    2.4. MANEJO DIARIOAlimentacinLos animales deben ser alimentados con dietas apetitosas, no-contaminadas ynutricionalmente adecuadas, diariamente o de acuerdo a sus requerimientos particulares, amenos que el protocolo en el que estn siendo empleados lo demande de otra manera.Los gerentes de las colonias de animales deben emplear su buen juicio al comprar,transportar, almacenar y manipular los alimentos para reducir al mnimo la introduccin deenfermedades, parsitos y vectores potenciales de enfermedades (ej., insectos y otrasplagas) y contaminantes qumicos a las colonias animales.

    AguaDiariamente, los animales deben tener acceso a agua potable no contaminada y de acuerdoa sus necesidades particulares. La calidad y definicin de agua potable puede variar segnla localidad (Homberger y otros 1993). Puede ser necesaria la determinacin peridica delpH, dureza y contaminacin qumica y microbiolgica para asegurar que la calidad de elagua es aceptable, especialmente si los componentes normales de el agua de una localidaddada pueden influir en los resultados del estudio en que se use esa agua. Cuando losprotocolos experimentales requieren agua altamente pura, se le puede tratar o purificar paraeliminar o reducir al mnimo la contaminacin. Se debe considerar cuidadosamente laseleccin del tratamiento del agua porque muchas de ellas tienen el potencial de causaralteraciones fisiolgicas, cambiar la microflora o alterar los resultados experimentales

    (Fidler 1977; Hall y otros 1980; Hermann y otros 1982; Homberger y otros 1993). Porejemplo, la clorinacin del agua suministrada puede ser til para algunas especies, perotxico para otras (ej. animales acuticos).Los utensilios para dar de beber, tales como las pipetas de los bebederos y las vlvulasautomticas, se deben revisar diariamente para verificar un adecuado mantenimiento,limpieza y operacin. En ocasiones, los animales tienen que ser entrenados a utilizar loscomponentes de los sistemas de provisin automtica. Es mejor cambiar bebederos querellenarlos, debido a la potencial contaminacin microbiolgica cruzada; pero en caso derellenar bebederos se debe tener cuidado de regresarlos a la misma jaula de donde fuerontomados. Los animales alojados al aire libre podran tener acceso a otra agua que no sea lasuministrada deliberadamente, como por ejemplo la de arroyuelos o charcos formados por

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    lluvia, se debe tener cuidado de que tales fuentes adicionales de agua no constituyan unpeligro, aunque su disponibilidad no necesita evitarse rutinariamente.

    LechoEl material de cama de los animales es un factor controlable del medio ambiente, que puedeinfluir en su bienestar y en los resultados experimentales. El veterinario o el gerente de lacasa de los animales, de acuerdo con los investigadores, deben seleccionar el material decama mas apropiado. Ningn lecho es ideal para ninguna especie en particular bajo todaslas condiciones de manejo y experimentales y ninguna es ideal para todas la especies (ej. elmaterial de cama que permite amadrigarse solo se recomienda para algunas especies).Varios autores han descrito las caractersticas deseables del lecho y los medios paraevaluarlo (Gibson y otros 1987; Jones 1977; Kraft 1980; Thigpen y otros 1989; Weichbrody otros 1986). Se han utilizado camas de maderas blandas, aunque el uso de madera blandapicada o de sus virutas, sin tratamiento, est contraindicado en algunos protocolos, debido a

    que puede afectar el metabolismo animal (Vesell 1967; Vesell y otros 1973, 1976). No serecomiendan las virutas de cedro porque emiten hidrocarburos aromticos inductores de lasenzimas microsomales hepticas y citotoxicidad (Torronen y otros 1989; Weichbrod y otros1986) y se ha reportado que aumentan la incidencia de cncer (Jacobs y Dieter 1978;Vlahakis 1977). Para reducir la concentracin de hidrocarburos aromticos y poder prevenireste problema se ha usado el tratamiento con calor, aplicado a estos materiales previo a suutilizacin. Al comprar los materiales de lecho se deben examinar los mtodos demanufactura, control de calidad y almacenamiento seguido por los fabricantes.El lecho no se debe colocar sobre el piso durante el transporte y almacenamiento sino entarimas, estantes o carros, de tal manera que se preserve su calidad y se reduzca al mnimola contaminacin. Durante la esterilizacin en autoclave la cama puede absorber humedad,

    resultando en una menor capacidad de absorcin y favoreciendo el crecimiento demicroorganismos; por lo tanto, se deben dar los tiempos de secado y las condiciones dealmacenaje apropiadas.La cantidad de lecho en la jaula debe ser suficiente para que los animales se mantengansecos durante el lapso comprendido entre los cambios y en el caso de los animales delaboratorio pequeos se debe tener cuidado de que las pipetas de los bebederos no toquen ellecho, porque esto causa derrame de agua dentro de la jaula.

    SanidadSe entiende por sanidad el mantenimiento de condiciones conducentes a la salud ycomprende el cambio de cama (como sea apropiado), la limpieza y la desinfeccin. La

    limpieza elimina las cantidades excesivas de desperdicios y mugre y la desinfeccin reduceo elimina las concentraciones inaceptables de microorganismos.La frecuencia e intensidad de la limpieza dependern de las necesidades para brindar alanimal un medio ambiente saludable, de acuerdo a sus caractersticas fisiolgicas yconducta normal. Los mtodos y frecuencia sanitarios varan de acuerdo a muchos factores,entre ellos el tamao, tipo y propiedades fsicas del encierro; el tipo, nmero, tamao, edady la condicin reproductiva de los animales; el tipo y uso de los materiales de cama; latemperatura y humedad relativa; la naturaleza de los materiales que crean la necesidad de lasanidad; la fisiologa normal y las caractersticas de conducta de los animales; y la rapidezcon la que se ensucian las superficies del encierro. Algunos sistemas de alojamiento o

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    protocolos experimentales pueden requerir tcnicas de manejo especficos, tales como lamanipulacin asptica o la modificacin de la frecuencia del cambio de cama.En las instalaciones usadas para alojar animales no se deben usar agentes que enmascaren

    los olores, no pueden sustituirse las buenas prcticas de sanidad o ventilacin adecuada ytampoco exponer a los animales a compuestos voltiles que podran modificar los procesosfisiolgicos y metablicos bsicos.

    Cambio de LechoLa cama sucia debe retirarse y reemplazarse por material limpio, tan frecuente como seanecesario para mantener a los animales limpios y secos. La frecuencia del cambio dependedel criterio profesional del personal que cuida a los animales, de acuerdo con elinvestigador y depende de factores tales como el tamao y nmero de animales en elencierro primario, el tamao