Colegio Adventista Porvenir Subsector de Biología

“Práctico de extracción de ADN”

Integrantes: Annibeth OjedaAndrea Iturra

Susana PasténNicolás Soto

Profesora: Jimena Aravena

Fecha: 19/06/2012

Curso: IV A

Introducción

El ADN es la molécula de la herencia en todos los organismos vivos (procariontes y eucariontes).1 Éste controla la vida de la célula y del organismo. Se encuentra principalmente en el núcleo celular; y para ser extraído de la célula, se debe seguir una serie de procedimientos, especificados en el este informe.

El presente trata sobre la extracción de ADN de plátano y su posterior análisis frente a un lente convergente biconvexo. Al practicar este experimento es inevitable que surja la pregunta: ¿Es posible extraer con lavalozas ADN de células vegetales? Es fácil suponer que sí, es posible, ya que éste es un solvente de grasas, las cuales están presentes en la membrana plasmática de las células, sean vegetales o no. También se manifiesta la interrogante: ¿A qué material corresponde lo que queda retenido en la gasa al filtrar la mezcla homogénea? Consecutivo al filtrado del plátano, lo que no atraviesa la gasa hidrolica son los restos celulares removidos por el lavalozas

Por lo tanto, con el fin de conocer y analizar la morfología del ADN se propone realizar la extracción de ésta estructura mediante la utilización de un vegetal, en este caso el plátano. La actividad es realizada en clase de biología el día miércoles 13 de junio, en el laboratorio del colegio adventista porvenir, el cual es un lugar físicamente adaptado para poder llevar a cabo con éxito el propósito de conocer a fondo la estructuras y funcionamiento del material genético, teniendo así plena noción de la complejidad que posee esta estructura realmente maravillosa.

1 Riquelme, Alejandro (2001), Biosíntesis de las moléculas de la vida, Universidad de Chile, Facultad de ciencias agronómicas , p2

Materiales para el procedimiento

Para poder realizar este experimento de extracción de ADN se requieren los siguientes materiales (también visibles en el libro):

Un tejido vegetal, en este caso un plátano

Agua destilada

Lava lozas o detergente

Aguja de disección

Tubo de ensayo

Vaso precipitado (2)

Recipiente

Mechero

Pipeta

Cuchara

Tenedor

Gasa hidrófila

Sal

Procedimiento

Al tener los materiales requeridos, se puede comenzar la extracción de ADN de un plátano:

Antes de comenzar es necesario tener las manos limpias, para no afectar el proceso. Además, los materiales deben estar esterilizados y listos para usar.

1. En una balanza pesar 30 GRS del tejido vegetal (plátano)

2. Mezclar el tejido vegetal con una taza de agua destilada, Moler por 15 segundos con el tenedor, hasta obtener una mezcla homogénea, luego mezclar la solución con una cuchara.

3. En una taza mezclar una cucharada de lava lozas y dos pizcar de sal, Agregar 20 ML de agua destilada, Disolver la sal con el lavalozas lentamente con una cuchara, evitando producir espuma.

4. Agregar a la solución de lava lozas y sal, una cucharada sopera colmada de la mezcla del tejido vegetal con agua. Luego con la cuchara mezclar la solución por 5 a 10 minutos, evitando producir espuma.

5. En otro recipiente o vaso precipitado tapar su orificio con gasa y doblar bien sus orillas para poder utilizarla como filtro.

6. Filtrar la mezcla sobre la gasa, Dejar pasar la solución hasta obtener aproximadamente 5 ML filtrados.

7. Llenar un tubo de ensayo con el alcohol frío para obtener un mayor resultado.

8. Llenar una pipeta con la solución filtrada.

9. Agregar la solución de alcohol, Dejar reposar por 2 o 3 minutos, Es importante no agitar el tubo de ensayo, en el cual se verá el ADN como tejido blanco.

10.En el mechero calentar la punta de la aguja para poder enrollar el ADN y apreciarlo con mayor facilidad.

11.Al finalizar dejar el lugar de trabajo limpio

12.Exponer los resultados con el curso y compartir experiencias.

13.Responder preguntas de análisis de resultados ubicadas en la página 43.

Análisis de resultados

1. ¿Qué papel juegan el lavalozas y moler el tejido en la primera etapa de la extracción?

R: El papel que juegan es desestabilizar la membrana celular, liberándola de los lípidos que la protegen tanto interna como externamente rompiendo así primero la pared celular.

2. ¿Qué habría pasado si antes de agregar la solución de ADN al alcohol, la hubieran agitado fuertemente?

R: Si antes de agregar el alcohol la hubiéramos agitado, la hebra de ADN se habría partido o desarmado. Esto ocurre porque el alcohol juega un papel de soporte para la hebra de ADN. Al insertar la solución de ADN en el alcohol, la mezcla me permite agitar el tubo sin el peligro de desarmar la hebra de ADN.

3. ¿De qué estará compuesto el precipitado blanco obtenido, en el cual se encuentra el ADN?, ¿Contendrá otras porciones celulares? Explique.

R: El precipitado blanco está compuesto solo por ADN ya que el alcohol hace que precipite y se desenrolle, separándose de la mezcla.

4. ¿Difiere el contenido de ADN obtenido por cada grupo?, ¿A qué creen que se deben estas diferencias?

R: Si difiere la cantidad de ADN obtenido de cada grupo, ya que las medidas que cada grupo utilizaron no fueron exactas para todos.

Conclusión

Posteriormente a la extracción de ADN en células vegetales, se llega a concluir que el material genético es un componente completamente esencial dentro de los seres vivos, puesto que en su ausencia no se llega a concretar el control de las células y de los organismos en sí. Además, mediante el experimento, se pueden confirmar las hipótesis planteadas anteriormente, ya que el lavalozas, al ser un solvente orgánico apolar rompe los lípidos presentes en la estructura de la membrana de la célula, permitiendo así entrar al núcleo, y extraer su ADN. También, al filtrar la mezcla lo que queda sobre la gaza hidrófila son los restos de célula que fueron lisados. Es decir, membrana plasmática, membrana nuclear, proteínas de gran tamaño y restos de organelos que no puedan por el filtro.

Además, se ha observado la compleja morfología del ADN, y se ha comprobado que cada uno de sus componentes es de vital importancia dentro de su funcionamiento, y que cada una de sus estructuras es imprescindible e irreemplazable, las cuales, se espera investigar en futuras investigaciones

Bibliografía