Informe laboratorio Bioqumica computacionalCuantificacin de protenas y actividad enzimtica mediante espectrofotometra *RESPONDER SOLO EN EL ESPACIO INDICADO PARA CADA PREGUNTA.Nombre: FELIPE ANTONIO BECERRA GOMEZPARTE I1. Usted realiza la medicin de una muestra problema de albmina mediante el mtodo de Bradford, y obtiene una absorbancia de 0,231. Utilizando su curva de calibracin confeccionada en el laboratorio, determine la concentracin de la muestra problema.(Aadir grficos si fuese necesario) Al analizar los datos obtenidos e interpretarlos en un en un grfico podemos establecer una referencia para calcular la muestra de albumina con una absorbancia de 0,231 nm, lo que en nuestros datos equivaldran aproximadamente a la concentracin de 12,5 microgramos/ml.

2. En que se fundamenta la tcnica de espectrofotometra?La espectrofotometra se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbidas por una muestra en funcin a su longitud de onda.3. En la experiencia de laboratorio realizada, usted utiliz el mtodo de Bradford como mtodo de cuantificacin de protenas. Que otra metodologa utilizara para cuantificar protenas? Justifique su respuesta (exceptuando Bradford obviamente) Una opcin sera el mtodo de Biuret, el cual se basa en la unin de un colorante entro los Cu+2 y los grupos NH de los enlaces peptdicos. Este es un mtodo sensible, simple, rpido y adems pocas sustancias interfieren en la determinacin de sus resultados.PARTE II

1. Realice un grfico utilizando los datos obtenidos en el laboratorio, el grfico debe ser tiempo vs absorbancia. Con respecto a lo observado en su grfico responda. Puede determinar la Vmax de esta enzima? Justifique Puede aproximar un valor para la Km? Justifique-Segn los datos obtenidos en el experimento, en nuestra ltima medicin los niveles de absorbancia en relacin al tiempo an no se mantienen constantes respecto al punto anterior, por lo que se asume que esta ltima muestra, con una absorbancia de 0,624 nm a los 30 min. De reaccin, representa nuestra velocidad mxima.-En base a esto NO se puede establecer un valor aproximado para la Km ya que en nuestro grafico tenemos absorbancia en relacin al tiempo de la concentracin de producto que produjo la reaccin, mientras que la km representa a la concentracin de sustrato.

2. Explique la reaccin de la enzima analizada en clases. Utilice dibujos si es necesario

P-Nitrofenilfosfato es un sustrato que cataliza la hidrlisis del compuesto para formar P-Nitrofenol mas fosfato inorgnico, el cual reacciona en un medio bsico (en esta caso NaOH) tindose de amarillo como respuesta a la reaccin y con una absorcin mxima de 405nm.