Imunologi & serologi

bab 13 : ujian serologi

TEKNIK IMUNOASAI:ENZYME:LI

NKED IMMUNOSORBENT

ASSAY(ELISA)1. Salah satu kumpulan ujian imunoasai enzim2. Prinsip : antibodi digabungkan dengan suatu

enzimFosfatasePeroksidase

3. Tindak balas antara antibodi dan antigen boleh dilihat dengan penambahan substrat untuk enzim

4. Tindak balas terhadap substrat boleh dilihat melalui perubahan berwarna

5. Kuantiti bahan yang diuji diukur menggunakan spektrofotometer

6. Mikrotiter plat dasar bulat sering digunakan7. 2 kaedah asas

Kaedah ELISA langsung – untuk mengesan AgKaedah ELISA tidak langsung – untuk mengesan AbKebaikan

• Cepat & mudah

CONTOH UJIANHepatitis AHepatitis BHBs AgHBe AgHIV Ab & HIV AgRubella virus (IgG & IgM)

LANGKAH-LANGKAH TEKNIK

ELISA(kaedah tidak langsung)1. Ag dimasukkan dan dilekatkan pada

dinding tabung uji plastic (TUP)2. TUP dieramkan incubator3. Tabung uji di cuci4. Serum pesakit ditambahkan5. TUP dieram dalam incubator dan

dicuci

6. Antiglobulin yang digabung dengan enzim ditambahAntiglobulin : Ab terhadap imunoglubulinEnzim : fosfatasa atau peroksidase

7. Tabung uji dicuci8. Substrat berwarna kepada enzim ditambah9. Enzim bertindak balas dengan substrat memberikan

perubahan warnaSemakin terang warna,semakin banyak Ab dihasilkanPerubahan warna berkadar terus dengan Ab yang dihasilkan

Perubahan

warna dalam plat

mikrotiter

LANGKAH-LANGKAH DAN KEPUTUSAN DALAM TEKNIK

ELISA TIDAK LANGSUNG

SPEKTROFO

TO

METER YANG

DIGUNAKAN

DALAM TEKNIK

ELISA

ELISA KIT TEST

RADIOIMUNOASAI (RIA)

1. Mentukan kepekatan bahan-bahan yang berkepekatan rendah didalam darah seperti igE

2. Proses tindakbalas saingan antara antibodi yang spesifik

KEBAIKAN Sensitive Boleh mengesan kuantiti Ag / Ab yg trlalu sedikitKEBURUKAN Mahal Isotop tidak stabil

UJIAN RIA SEBELUM & SELEPAS INKUBASI

SEKIAN TERIMA KASIH