IMUNOLOGI DASAR

Wahyu Siswandari

Bagian Patologi Klinik

PPD UNSOED

Definisi

Imunitas

reaksi tubuh thd masuknya substansi asing

Respon imun

kumpulan respon thd substansi asing yg terkoordinasi

Sistem imun

sel & molekul yg bertanggung jawad dlm imunitas

Imunologi

experimental science

SISTEM IMUN

1. Bawaan (the innate immune system )

respon imun non spesifik

2. Diperoleh (the adaptive/acquired immune system)

respon imun spesifik

- Respon langsung thd antigen

- Tidak ditujukan terhadap mikroorganisme tertentu

- Terdiri dariFisik / mekanik

kulit, selaput lendir, silia, batuk bersin

Biokimia & faktor terlarut

- Biokimia : asam lambung, lisozim, laktoferin, asam neuraminik

- Humoral : komplemen, interferon, CRP

Seluler

- Sel fagosit : monosit, makrofag, neutrofil, eosinofil

- Sel nul : sel NK dan K

- sel mediator : basofil, mastosit, trombosit

SISTEM IMUN NON SPESIFIK

BIOKIMIA

- lisozim (keringat, ludah, air mata, ASI) menghancurkan dinding sel kuman gram positif

- Laktoferin & asam neuraminik (ASI) anti bakterial E coli & staphylococus

- HCl, enzim proteolitik, empedu lingkungan ~ cegah infeksi bakteri

- Laktoferin & transferin (dr makrofag) ikat zat besi

- Lisozim (dr makrofag) hancurkan kuman gram negatif

CRP

- protein fase akut

-kadar me pd infeksi akut, kerusakan jaringan

-Cara kerja opsonisasi CRP melapisi bakteri shg mudah dikenali & dimakan oleh makrofag fagositosis >>

INTERFERON

- Glikoprotein yg dihasilkan sel tubuh sbg respon thd infeksi virus

- Sifat antivirus

induksi sel sekitar shg resisten thd virus

aktifkan sel NK

KOMPLEMEN

- Komplemen meningkatkan fagositosis dgn cara :

1. Hancurkan membran bakteri

2. Melepas bahan kemotaktik makrofag >> ke tempat bakteri

3. Opsonisasi memudahkan makrofag mengenali dan memakan bakteri

- Td 9 komponen C1 – C9

- C3 >> kadar C3 serum ~ gamb biologik konsentrasi C

- Aktivasi interaksi Ag-Ab

kontak dg dinding sel sasaran

- Jalur reaksi :

a. Jalur klasik/intrinsik

b. Jalur alternatif/ekstrinsik

Jalur klasikC1qrs (esterase) pengenalan

C4 C4b & C4a

C2 C2a & C2b

C4b2a + Mg C3 konvertase aktivasi

C3 C3b & C3a

C4b2a3b C3 peptidase

C5 C5b & C5a

penghancuran C5-6-7 C5-6-7-8 C5-6-7-8-9

Jalur alternatif

- Aktivasi langsung melalui C3

- Pencetus : endotoksin

zymosan

IgA

bisa ular kobra

Fungsi komplemen

-Sitolisis C56789

-Anafilatoksin C3a, C4a, C5a

-Kemotaksis C3a, C5a, C567

-Kinin C2 bebas

-Imunoderens C3b, C4b

SELULER

1. Sel NK

sifat sitotoksik virus, keganasan

aktivasi oleh interferon

2. Mononuklear (MN) monosit & makrofag- Siklus hidup lama- Granul lisozim, komplemen, interferon, sitokin- Gerak lambat 7-8 jam

3. Polimorfonuklear (PMN) neutrofil, eosinofil- Siklus hidup pendek- Granul enzim hidrolitik, laktoferin- Gerak cepat 2-4 jam

Fagositosis makrofag/monosit, segmen eosinofil, netrofil memakan, mamasukan, menghancurkan Dibantu oleh :

- C3a, C5a, C567 kemotaksis- C3b pengenalan Ag sasaran oleh sel fagosit- opsonin

Proses fagositosisTerdiri dari :1. Kemotaksis gerakan sel fagosit ke tempat infeksi2. Menelan 3. Memakan (fagositosis) dgn pembentukan fagosom4. Membunuh lisozom, H2O2, mieloperoksida

( membentuk fagolisosom)5. Mencerna

Kemampuan mengenal benda asing/antigen spesifik menghancurkan antigen yg sdh dikenal sebelumnya

SISTEM IMUN SPESIFIK/ DIPEROLEH

Cara sistem ini didapat :

1. Aktif

2. Pasif

Dasar INGATAN/MEMORI !!

Respon imun spesifik terdiri dari : Sistem humoral - Diperankan oleh limfosit B - Rangsangan antigen sel B proliferasi & diferensiasi sel plasma membentuk antibodi - Pertahanan thd bakteri ekstra seluler, netralisir toksinSistem seluler - Diperankan oleh limfosit T : Th, Ts, Tdh, Tc - pertahanan thd bakteri intraseluler, virus, jamur,

parasit, keganasan Antibody dependent cellular immune respons

sel null sel K

SEL T

Dibentuk di sumsum tulang, pematangan di timusMempunyai petanda permukaan membedakan dg sel B pemeriksaan rosette (+)Mempunyai petanda CD (cluster differentiation) sel T dlm berbagai fase pertumbuhanMempunyai petanda fungsional concanavalin A & phytohemaglutininFungsi :- membantu sel B dlm memproduksi antibodi

- mengenal & menghancurkan sel yang terinfeksi virus- mengaktifkan makrofag dlm fagositosis- mengontrol ambang & kualitas sistem imun

Jenis : sel Th (helper), Ts (supresor), Td (delayed hypersensitivity), Tc (cytotoxic)

SEL B

- Dibentuk & dimatangkan di sumsum tulang

- Proses pematangan sel asal pre B sel B imatur sel B matur proliferasi & diferensiasi sel plasma

antibodi /Ig (imunoglobulin)

- Rangsangan antigen I terbentuk IgM

- Selanjutnya akan terjadi switching Ig A, Ig E. Ig D, Ig G

Syarat antigen yg baik :

-BM besar 40.000

-Kekakuan struktur

-Keasingan molekul

-Larut/tidak

-Kecepatan dihancurkan sel tubuh

-Jumlah antigen

ANTIGEN

Sifat

-dapat melekatkan Ab pd antigenic determinant/epitop

-dapat merangsang pembentukan Ab

ANTIBODI

Molekul antibodi imunoglobulin

Dibentuk oleh sel plasma dr limfosit B

Macam :

1. Ig M

2. Ig G

3. Ig A

4. Ig D

5. Ig E

Sistem imun non spesifik & spesifik tidak dapat dipisahkan secara tegas :

-aktivasi fagositosis dibantu oleh komplemen dan antibodi

-Aktivasi komplemen antibodi melapisi sel sasaran

Respon imun terkendali Autoimun, keganasan

Aplikasi kilnik ?

-Infeksi bakteri respon imun non spesifik : CRP , leukositosis

-Infeksi virus respon imun non spesifik : interferon, sel NK

respon imun spesifik : antibodi, sel T sitotoksik

-Peny autoimun limfosit B, T makrofag >>

DASAR PEMERIKSAAN LABORATORIUM IMUNOLOGI

Macam :

1. Uji respon imunologik non spesifik

2. Uji respon imunologik spesifik

3. Deteksi antigen

Uji respon imunologik non spesifik

Seluler

• Kuantitatif pe atau pe jumlah leukosit, monositosis, eosinofilia

• Kualitatif uji hambatan migrasi leukosit, uji gangguan fagositosis, uji fungsi membunuh mikroba

Humoral

• Kadar CRP me > 100 x pd infeksi atau kerusakan jaringan

• Kadar komplemen C3, C4, faktor B, properdin

Uji respon imunologik spesifik

Seluler

1. Kualitatif uji transformasi limfosit (dg PHA & con A)

uji sitotoksisitas

uji produksi limfokin

2. Kuantitatif tes rosette

Humoral

Elektroforesis protein

Imuno elektroforesis

UJI INTERAKSI ANTIGEN ANTIBODI

1. Reaksi presipitasi

- utk antibodi/antigen terlarut terbentuk presipitat

- jml antigen & antibodi hrs seimbang

2. Reaksi aglutinasi

- utk antibodi/antigen btk partikel terbentuk aglutinasi

- jml antigen & antibodi hrs seimbang

- m/ : Widal, gol darah, tes kehamilan

3. Interaksi antigen antibodi tingkat molekuler

RIA (radio immunoassay)

ELISA ( enzyme linked immunosorbent assay)

APLIKASI KLINIK PEMERIKSAAN LABORATORIUM IMUNOLOGI

DIAGNOSIS TYPHOID

1. Tes Widal

- Prinsip px : reaksi aglutinasi

- Reagen : antigen S. typhi dan S. paratyphi H, O, PA, PB

- Sampel : serum, puasa (-)

- Cara :

a. Slide agglutination test

b. Tube agglutination test

penegenceran

- Nilai rujukan :

(+) jika : aglutinin O titer ≥ 1:160

aglutinin H titer ≥ 1:160

aglutinin PA titer ≥ 1:160

aglutinin PB titer ≥ 1:160

2. Uji ELISA

a. Melacak antibodi thd S. typhi

b. Melacak antigen S. typhi

DIAGNOSIS TB

1. Uji fiksasi komplemen, aglutinasi, aglutinasi dilapisi antibodi, hemaglutinasi, presipitasi, imunofluoresens, RIA

2. EIA ELISA, Dot-EIA, imunoperoksidase

TB DOT

- Prinsip px : reaksi ELISA

- Tujuan : deteksi IgG spesifik thd M. tuberculosis

- Reagen : antigen polimer dr sitoplasma M. tuberculosis

- Sampel : serum

- (+) dot merah

- Nilai rujukan : (+) : TB paru titer 1: 3200

TB di luar paru titer 1 : 2600

UJI ICT TB

- Prinsip px : imunokromatografi

- Reagen : antigen M. tuberculosis yg diimobilisasi dlm bentuk 4 grs di kertas selulose astetat,

garis ke 5 sbg kontrol

- Sampel : serum

- (+) terbentuk garis merah

DIAGNOSIS SIFILIS

Titer antibodi sifilis pada berbagai stadium

// 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 2 3 4 5 10 20 30 40 50

minggu tahun stlh infeksi

sifilis sifilis stad II sifilis stad III

primer

Sero

reaktivitas

reaktif

Tdk reaktif

IgG spesifik anti treponema

IgM spesifik anti treponema

IgG anti cardiolipin

IgM anti cardiolipin

Imunoasai utk sifilis banyak :

1. Uji VDRL (Venereal Disease Research Laboratory)

- Prinsip px : Ag (cardiolipin-lecithin-cholesterol) + reagin dlm serum penderita presipitasi

- Cara tabung & slide

- Interpretasi :

a. Kualitatif (+) : gumpalan besar

(+) : gumpalan kecil

(-) : tidak ada gumpalan

b. Semikuantitatif titer (1/2, ¼, 1/8, 1/16, dst)

Titer ≥ ¼ dianggap sbg sifilis

2. Uji TPHA (Treponema pallidum Hemagglutination)

- Prinsip px : Ag T. pallidum dilekatkan pd eritrosit kalkun + Ab dlm serum penderita aglutinasi

+

- Interpretasi : (+) aglutinasi

3. ELISA

+ + + substrat-kromogen

spektrofotometer

- Interpretasi : (+) warna coklat yg dibaca dgn spektrofotometer

IgM / IgG

DIAGNOSIS DHF

UJI DENGUE BLOT

Paling banyak dipakai

- Tujuan : memeriksa Ab thd virus dengue1,2,3,4

- Prinsip px : uji ELISA utk deteksi Ab dgn kertas selulose sbg fase padat

- Interpretasi :

(+) terbentuk garis biru/ungu/merah di C & test

(-) terbentuk garis biru/ungu/merah di C

invalid

negatif

IgM (+), IgG (+) Acute secondary infection

IgM (+), IgG (-) Acute primary infection

IgM (-), IgG (+) Acute secondary infection