implementaciÓn de un nuevo protocolo de recogida de tejido prostÁtico para...
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IMPLEMENTACIÓN DE UN NUEVO PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO PARA
INVESTIGACIÓN
IV Congreso de la Red Nacional de Biobancos. Madrid, 18-19 Octubre.
Egia A.1, Ugalde A.2, Fernandez S.2, Castillo M.3, Castro E.1, Del Villar A.1, Cordon-Cardo C.3, Bilbao R. 1
1Biobanco Vasco para la Investigación, 2Hospital Universitario
Basurto, Bilbao, 3Mont Sinai Hospital, New York
DEMANDA DESDE INVESTIGACIÓN
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• Sangre, orina….
• Tejido parafinado, en OCT
• …
DEMANDA DESDE INVESTIGACIÓN
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• Sangre, orina….
• Tejido parafinado, en OCT
• …
Tejido
Fresco
Proteómica
Transcriptómica
Metabolómica
…
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO
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PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO
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1. Las áreas con patologías neoplásicas en la pieza en fresco
NO SON MACROSCÓPICAMENTE DISTINGUIBLES.
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO
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Pieza quirúrgica de colon que
presenta adenocarcinoma. Pieza quirúrgica de una próstata
con adenocarcinoma.
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO
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1. Las áreas con patologías neoplásicas en la pieza en fresco
NO SON MACROSCÓPICAMENTE DISTINGUIBLES.
2. Tiempo de isquemia (caliente y fría) transcurrido
por la cirugía Robótica (Da Vinci)
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO
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1. Las áreas con patologías neoplásicas en la pieza en fresco
NO SON MACROSCÓPICAMENTE DISTINGUIBLES.
2. Tiempo de isquemia (caliente y fría) transcurrido
por la cirugía Robótica (Da Vinci)
3. Manipulación de la muestra: Tinta china y Ac. Acético.
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO
PROSTÁTICO EN FRESCO
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PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO
PROSTÁTICO EN FRESCO
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PUNCH DERMATOLÓGICO 4 mm
Redirigir el uso del…
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO
PROSTÁTICO EN FRESCO
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• Medir la próstata • Marcar con tinta
• Fijar la tinta con Acético • Corte sagital
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PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO
PROSTÁTICO EN FRESCO
• Punch de un lóbulo • Aislar punch
• Corte longitudinal del punch • Primera mitad, bloque de Parafina
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO
PROSTÁTICO EN FRESCO
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• Marcaje con Eosina en zona de punch • Mitad de tejido en fresco para Biobanco
• Congelación rápida • Almacenaje a -80ºC
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO
PROSTÁTICO EN FRESCO
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Adenocarcinoma de próstata. 4 X Adenocarcinoma de próstata. 20X
Tejido prostático benigno. 4 X, Tejido prostático benigno. 20X
CALIDAD DE LA MUESTRA (RNA)
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Muestras contaminadas con tinta china y acético durante
la manipulación de la pieza. Gradiente de contaminación
de izq (menos) a drcha (más).
Primera separación de fases. Sin restos de tinta
en la fase acuosa.
CALIDAD DE LA MUESTRA (RNA)
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> Muestras contaminadas con tinta china y acético
durante la manipulación de la pieza. Gradiente de
contaminación de izq (menos) a drcha (más).
> Primera separación de fases. Sin restos de
tinta en la fase acuosa.
Gel del RNA obtenido de las muestras. Electroferogramas obtenidos de las muestras.
6.4 6.3 7.5 6.9 8.4 7.6 RIN
18s
28s
CONCLUSIÓN
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Ventajas adquiridas con el protocolo:
Permite aumentar el número de muestras (punch) por pieza.
Mayor % de muestra neoplásica obtenida.
Diagnóstico más preciso de la muestra congelada en el Biobanco.
Se preserva la calidad del RNA de las muestras.
CONCLUSIÓN
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Ventajas adquiridas con el protocolo:
Permite aumentar el número de muestras (punch) por pieza.
Mayor % de muestra neoplásica obtenida.
Diagnóstico más preciso de la muestra congelada en el Biobanco.
Se preserva la calidad del RNA de las muestras.
Protocolo aplicable a otros tejidos con difícil visualización
macroscópica de la zona tumoral.
AGRADECIMIENTOS
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Servicio de Urología del Hospital Universitario de Basurto (HUB)
Servicio de Anatomía Patológica del HUB
Jon Diez Beldarrain (Reportaje fotográfico del protocolo)
Muchas Gracias! Eskerrik asko!
Ainara Egia
944 00 64 26