identification of differentially expressed genes during a wool follicle growth cycle induced by...

8
Identi®cation of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin Nicholas W. Rufaut,1 Allan J. Pearson,* Allan J. Nixon,* Thomas T. Wheeler,* and Richard J. Wilkins² *AgResearch Ruakura, Hamilton, New Zealand; ²Department of Biological Sciences, University of Waikato, Hamilton, New Zealand The wool follicles of New Zealand Wiltshire sheep can be induced to undergo growth cycles by manipulating circulating prolactin levels. Altered patterns of gene expression through this cycle were examined using differential display, and nine sequence tags for differentially expressed genes were isolated. Four of these tags were identi®ed as fragments of known genes, encoding a wool keratin, KRTAP3.2, a desmosome component, desmoglein 1, an epithelial cell marker, strati®n, and a protein kinase, Clk3. All four genes were shown to be downregulated in telogen skin compared with anagen. In situ hybridization showed that all had localization patterns which included cells that are absent in telogen. The strati®n tag was used to clone a cDNA that incorporated a complete open-reading frame for ovine strati®n. Ovine strati®n is similar to the human form, showing only six single residue differences in the predicted amino acid sequence. Strati®n probably acts as a regulator of other proteins involved in trichocyte cell cycling and differentiation. Clk3 is involved in regulating RNA splicing. KRTAP3.2 and Dsg1 both play structural roles in hair follicles. The other ®ve tags, including two representing genes that were upregulated during catagen, could not be identi®ed by homology. Differential display is an effective means of identifying genes involved in follicle function and, potentially, of genes controlling the growth cycle. Key words: differential display/hair/seasonal growth/ strati®n. J Invest Dermatol 113:865±872, 1999 H air growth is seasonally regulated in many mam- malian species but the underlying molecular mechanisms are poorly understood. In sheep, seasonal variations in wool production have been described which differ in magnitude from breed to breed (Ryder, 1978). In the most seasonally responsive genotypes, such as the Wiltshire, synchronized cycling of wool follicles results in shedding of the ¯eece in late spring and early summer. We have previously shown that wool follicle cycling in New Zealand Wiltshire sheep is largely controlled by changes in photoperiod, acting through seasonal variations in secretion of the pituitary hormone prolactin (Pearson et al, 1996). Follicle cycling can be experimentally induced in these sheep, either indirectly by manipulating photoperiod (Pearson et al, 1996) or by altering prolactin secretion with the dopamine agonist bromocrip- tine (Nixon et al, 1997). Treatment with either short days or with bromocriptine suppresses circulating prolactin, during which time wool follicles remain in anagen. On release from treatment, prolactin levels rise and follicles pass through brief catagen and telogen phases before returning to anagen. In this study we used this inducible wool cycle to investigate changes in follicle gene expression through the transition from anagen to telogen. Differential display was used to isolate sequence tags for genes with a variable expression pattern through the cycle. Many earlier studies of the molecular biology of hair follicles have adopted a candidate gene approach, and have focused on particular classes of molecules such as growth factors and cytokines (Danilenko et al, 1996; Paus, 1996) or hair structural proteins (Powell et al, 1991; Rogers and Powell, 1993). Other classes of molecules, such as those involved in intracellular signaling, are less well studied. In contrast to this earlier work, our approach allows the possibility of identifying unknown genes, or genes not suspected of having a role in hair biology. Of the nine gene tags isolated in this study, ®ve could not be identi®ed by comparing them with known sequences available in public databases. This report describes results relating to the four tags that were identi®ed, designated WCG1±4 (Wool Cycle Gene-tag 1±4) and correspond- ing to genes encoding the keratin-associated protein 3.2 (KRTAP3.2), desmoglein 1 (Dsg1), strati®n, and the CDC-like kinase 3 (Clk3). Neither strati®n nor Clk3 have previously been implicated in hair follicle function. MATERIALS AND METHODS Skin RNA samples and differential display Sheep were selected from an inbred ¯ock of New Zealand Wiltshires (Parry et al, 1991). Two experiments were performed in which wool follicle cycling was induced by manipulation of circulating prolactin levels. In experiment 1, prolactin was suppressed with bromocriptine, as previously described by Nixon et al (1997). Sheep were treated for 3 mo with intramuscular injections of a slow-release formulation (Parlodel LA, Sandoz, Basel, Switzerland) and subsequently for 1 mo with bromocriptine (Sigma, St Louis, MO) delivered by subcutaneous osmotic pumps (Alzet, Palo Alto, CA). Co-ordinated increases in circulating prolactin levels were induced in all treated animals 0022-202X/99/$ 14.00 ´ Copyright # 1999 by The Society for Investigative Dermatology, Inc. 865 Manuscript received July 16, 1999; revised August 10, 1999; accepted for publication August 17, 1999. Reprint requests to: Dr. Allan J. Pearson, AgResearch Ruakura, Private Bag 3123, Hamilton, New Zealand. Email: [email protected] 1 Current address: Nicholas W. Rufaut, Department of Biological Sciences, University of Durham, Durham, DH1 3LE, U.K. Abbreviations: Clk, CDC-like kinase; dCTP, deoxycytidine-5¢- triphosphate; Dsg, desmoglein; HME1, human epithelial cell marker protein 1; KRTAP, keratin-associated protein; UTP, uridine-5¢-triphos- phate; WCG, wool cycle gene tag.

Upload: richard-j

Post on 06-Jul-2016

215 views

Category:

Documents


1 download

TRANSCRIPT

Page 1: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

����������� � ����� ������� ��� ����� ����� �� ��� �� ������� � ��� ����� ������� �� � �����

�������� �� ������� ����� � ��������� ����� � ������� ������ � �������� ��� ������� � ������������������ �������� ��������� ��� ������� �!�"������� � #��������� $�������� %��&�����' � ������� ��������� ��� �������

��� �� �������� � ��� ���� ������� � ������� �� ������� � ���� � � ��� ������ ��!��������� �� ������� � ����� ��"���# $��� ������ �� � ���� ��� ����� �� ��� ���� ����� �� ���!���� ����� ����� ����� ������% �� ������&����� ��� � ����� ������� ��� ����� ����� �� �������# �� � ����� ��� �� � ��������� �� �!���� � '��� �����% ������� �� '� ���%()�$�*#+% ���!�!� �!�����% ���!����� ,%� ��������� ���� ! '� % �� ����% �� � ����'����% ��'*# $�� �� ����� �� � ���� � ����� ������� �� ������ �'�� �!� �� ��������# �� ���� ��� ���-��� ����� ��� �� ������-��� ���� �� ����� �������� ����� ��� ������ �� ������# ��� �� ���� �� �� ���� � ���� ���$ ��� ��� � ��� �!����� ���. �����

� !� � "��� �� ����# /"��� �� ���� �� ��!�� ���� ��!� � !% ������ ��� ��� ������ ����������� ����� �� ��� � ������� !�� ��� ��&�����#0� ���� � ���� ��� � ����� � ��� � ����� ��"�"�� �� � ������� ���� ������� ������� �������# ��'* �� ��"�"�� �� �������� )�$��������# ()�$�*#+ �� ���, ��� ��� �� ���� � ��� �� �� ��������# ��� ��� �"� ���% ����������� �� �������� ����� ��� �� � �� ������� �� ��������% ���� �� �� ��������� �� �!���#����� ����� ������ �� � �������"� !��� ������������ ����� ��"�"�� �� ������� ������� ��%���������% � ����� ��� ����� ��� � ��� �����#�� �� �� ����������� ������������������� ��������������� � ������ �������� ������ !�"#$ �%%%

���� ������ �� ���������' ��������� �� ���' ���(������ �"����� )�� ��� ������'��� ������������������� ��� "����' ���������� *� ����"��������� &��������� �� ���� "��������� ��&� )���������)�� ����� �� �� �� ��������� ��� )���� ��

)���� +�'���� �,-./ *� ��� ���� ���������' ���"����&� �����'"������� �� ��� ��������� �'�������0�� �'����� � ���� �������� ��������� �������� � ��� 1���� �� ���� �"���� ��� ����' ������

� ��&� "��&�����' ����� ���� ���� ������� �'����� �� ���������� �������� ����" �� ������' ���������� )' ������� ��"����"������ ������ ������� �������� &��������� �� ��������� � ��� "�������' ������� "�������� +������� �� ��� �,,2/ 3��������'����� ��� )� ��"����������' ������� �� ����� ����"� ���������������' )' ����"������� "����"����� +������� �� ��� �,,2/ �� )'�������� "�������� ��������� ���� ��� ��"����� ������� )�������"(���� +����� �� ��� �,,-/ ��������� ���� ������ ����� ��'� �� ����)�������"���� ��""������ ����������� "��������� ������ ����� �������� �������� ������ �� ������ 4� ������� ��� ����������"�������� ��&��� ���� ��� �������� "��� ������� )��� ������� ���������� "����� )� ��� ��������� �� ������ *� ���� ����' �� �������� ������)�� ���� �'��� �� ��&�������� ������� �� ������� ����

��"������� ������� ��� ���������� ��� ������ �� �������!� �������� ���"��' ��� ���� �� ������� ��5����� ���� �� ��������� � &����)�� ��"������� "������ ������� ��� �'���

6��' ������� ������� � ��� ��������� )�����' � ���� ����������&� ���"��� � ��������� ���� �""������ ��� ��&� ������ ��"��������� ������� � ��������� ���� �� ������ ������ ��� �'�������+!�������� �� ��� �,,2 ����� �,,2/ �� ���� ���������� "�������+������ �� ��� �,,� ������ ��� ������� �,,7/ 4���� ������� � ���������� ���� �� ����� ��&��&�� �� ������������� ���������� ��� �������� ������� *� �������� �� ���� ������� ����� ��� �""����� ��������� "����)����' � ������ '��� ������� ������ �� ����� ������"����� � ��&��� � ���� �� ���� )�����' 4 ��� ���� ���� ������������ �� ���� ����'� 8&� ����� ��� )� ������8�� )' ���"��������� ���� ����� ��5������ �&����)�� �� "�)��� ����)���� ������"��� ������)�� ������� �������� �� ��� ��� ���� ���� ���� ������8������������� 9:�;< +��� 9'��� :���(��� �;</ ��� ������"���(��� �� ����� �������� ��� �������(���������� "������ 7=+>����7=/� ���������� � +!���/� ������8�� ��� ��� 9!9(���������� 7 +9��7/ ������� ������8� ��� 9��7 ��&� "��&�����' )�����"������� �� ���� ������� �������

6��?�*�@$ ��! 6?��4!$

0'�� )�$ �!���� �� ����� ����� ������ $���" ���� �������� ����� ��)��� 1��� � ��� ������� ��������� +����' �� ��� �,,�/ �����"�������� ���� "�� ����� �� ����� ���� ������� �'����� ��� ������� )'����"������� � ����������� "�������� ��&��� *� ��"������� �� "�������� �����""������ ���� )�������"����� �� "��&�����' ������)�� )' ����� �� ��+�,,-/ $���" ���� ������� �� 7 �� ���� ������������� ��A������� � �����(������� ���������� +�������� @�� $����0� #����� $���0������/ �����)��5�����' �� � �� ���� )�������"���� +$����� $� @����� 64/ ����&����)' ��)��������� ������� "��"� +��0��� ���� ����� 9�/ 9�(������������������ �� ����������� "�������� ��&��� ���� ������� �� ��� ������� �������

BB==(=B=CD,,DE �<BB F 9�"'����� � �,,, )' ��� $�����' �� *�&��������&� !���������'� *��

123

6�������"� �����&�� ���' �2� �,,, ��&���� ������ �B� �,,, ����"��� ��"�)�������� ������ �-� �,,,

��"���� ��5����� ��G !� ����� � �������� ���������� �������� ���&���#�� 7�=7� ��������� ��� ������� ?����G "�������H��������������0

�9������ �������G �������� �� ���� !�"������� � #���������$�������� %��&�����' � !������ !������ !�� 7@?� %>

�))��&�������G 9��� 9!9(���� ������ �9��� ����'�'������(I�(���"���"���� !��� ���������� �6?�� ����� �"�������� ���� ������"������ � >����� �������(���������� "������ %��� �������(I�(���"���("���� 9:� ���� �'��� ���� ���

Page 2: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

)' ����&�� � ��� "��"� *� ��"������� =� "�������� ��� ��""������ )'"����"����� ����"������� +������� �� ��� �,,2/ � ��� �7 �� ��"����� �� ��������� �����(��' "����"������ "�������� ��� ���&���� )' ��"����� �� ������'� ��� ��������� ������� ������� ���� �������� �� ��"������� � ��� ����� ��"������� = � ��� ������� ��� "�������� ��""������� ��� +��"��������/ �� ��� +��"������� =/ ����&����� ������� ���� ������ "����������'���������' �� �����&��� � 7 �� - � 6��(���� ���� ���"��� ���� ��������� ��������� ���" ��0�� �� 8��� �� "���"����()� ���� �BJ ������� �� =< � ���"�������� �� ��� 3�� ���� ������� ������� �'��� ������ ���� �����������������������'� )' ������� �""���������' �=I �������� �� �����&�����$�9�*9(������� �������� +������ �,,7/ #���� ��� ���"��� )' ������&����� ��������� �� ,;�B ��� ��� "�������� �������������� �� "����� �������������� )' ���������������' +������� �� ��� �,,2/

��� ��� ��������� ��� ��0�� ���� ���"��� ����� ��� ������ � 9����0'���� ��� $����� +�,.-/ ����� �� ����������� ���� ��� ��"�������� ��� "�������� )' ��'����������� "������� �� ��� ��� ��� ��� �""�� ��'������� ��������� ��� ��� ��� ��������� ��� �������� ���������� ��� ����� �������� ��� ��� ����������� ������ *����� ���� "����� ��� ��"������� =���� "�������� )' �������� �� "����� �� � ���0�� ���� +:��� 9�������$�������� 6��������� %>/ ��� ��� ������ �� �5����� �������� ���.B�9

%���� ��� ����&�� ��� ��"������� �� ��� �� �������� ���"��' ������� @���� �� �� +�,,7/ ��� ������� ��&���� ��������"���� ��� "��'����������� �������� +�9�/ ���� "�� ����� �� ���"������ ��� �9� "������ ����+4"���� ������������� �������� 9�/ ���� ��=K: +K L �� 9� ��� :���������� ���/ ��� ��� � 9�::999��9� �:99:�:9�:� �:�(9�:99�9� ���9:::9�:� �::::�9��:� ::�999�:�9�:���9:::�:� �� :�:�9:��:: � ��� !���� ���������� "�����D������ ��� ���������� ��� ���"��"���� "����"�������� B=�� � ��� �����&���� ��������)�� ���� IB "��� ��=K: ��� =B ����� $�"������"� ��&������������"���� +:�)�� #�@� :�������)���� 6!/� �� � =B�� &����� ����)������ <=�9 �� 2B ��� ���� I=�9 �� 7B ��� �9� ��"��8������ ��� ���������� �� ������)��� ����"� ���� ��������� ��������� �BJ ������'� ��� �����9��"����� �9� +�I��/ ���� ��)A����� �� �������"������� �� �����������<I ��� 2J "��'���'������ ����� ����� ���� ���� &����� ����� �������8������ ��� ��"���� �&������� �� C(4��� �� 8�� +>����� �����������M/ $������� �� ���������' ���"��'�� )���� ���� ����&���� ��� ����("��8�� �� ������)�� ����"��8�� �!�� ���� )������ ���� !��"��'������ * +�������� 6������� */ ��� �< ������ +:�)�� #�@�:�������)���� 6!/ ��� ������ ���� ��� ���* ���� � #�������"� ** $>"������ +$���������� @� ������ 9�/

� ��� � ������ ��� ���"��� +�B��/ ��� ��"������� = ������)A����� �� �������"������� �� �=J �������D7(+�(���"������/"��"������ ���� ����D ��������'�� ���� ��� ���� )������ �� �2 � ���� �'��� ���)���� +�')��� �� ��������� @����� 9��� ����#��������������� %>/ �')����0����� "��)�� ���� ���� ��� ������5����� ���� )' ������ ������� ��)����� +������ ������ !��@�)������ >��� #���������� 6�������� :�����'/ � ������� ��� "���8��"������ ������� ���� IB�9� N7=�O�9�� +��������/ 3�� ��� 9:< ������� "��)� ��� ���� ��� ������ "������ �� � =B(�'��� �9� ����� ��� $> ���>$ #�������"� &�����(�"���8� "������ �� ��������� ����� �������� =B �9�N7=�O�9�� ��� "������ ��� "����"������ ���� �������� ������� ����������� �����"����� �� ����� ��� ��"�������� ���� �'���������� ���� ��(����� "��)� ��� ���� )' ��� ������ ������� ������ ��� � ��&������������"����;�9� "������ ��"��8�� ��� �&��� ���� ���� ��� "������:9�9::99:::�9�::��:: ��� :�9::9::9::9::���(:�: ��� �������� )���� ���� �')����0�� �� ����� "��)�� �� 2I�9 �� �2 ��� B=I 6 ������ "���"����� B=I 6 ������ �����'���� ���� � �6���'���������������������� ����� ��� �J )�&��� ����� ��)����� "� -=

�� ���� ��� ���-��� $���� ��� ����(����� ���� "��)�� ���� ���� )'��������"���� ��� �������0�� "������� �� ��� "������� � N7I$O%��+6������� �� ��� �,,=/ �""���������' -IB �� "������ ��� ��������)�� ��7-�9 �� 2B ��� ���� =I ����� � ������ �- �� �7 ��� "��'������+�������/ �� =B�� � ��� ��""���� )� �� ���������� <I�9� N7I$O%��+�?� @� � $������� #������ 6�/� BI �6 � ���� � ������������"���"����� 9��� ��� ��������� ���"���"����� 7= ����� �����4%�+:�)�� #�@� :�������)���� 6!/� ��� �B �6 �������������� �!�����"���� ��� ���� �������� ���� �I ����� ����� ��� �P� !����+�������/ �� 7-�9 �� =B ��� ��)�"��)�� ���� ������� "����"������ �� ���"������� � I�� '���� ���� �������� ��������&�� �� �B �6 ������������������ ������ �� �.B�9

$������� +-��/ ���� ��� ��� �������(8��� ���� ��� ��"������� =� ��� ������� ������ �� ��'� �<� =�� ��� =.� ��� ��� �� ��������� ������������� �� ������ ��� �������� ���� ������� �� ���'���� ������ +?���$������8� 9��"��'� ����������� ��/� �������� ��� "��������� �� ������G ���� B= 6 �'���������� ���� �� �B ��� ���� =� �������������D�������� )� �� +$$9/ +7BB �6 ��9�� 7B �6 ������ ��������

"� -B/ �� � ��� ���� B= �� "��������� > +#���������/ �� �BB �� � = �6 ������� ��������� =BB �6 ����+�'����'����'�/�������������"� -= �� 7-�9 �� �I ��� ���� =� $$9 �� � ��� ����� ���� �7J���������������� �BJ ������ ���'������ "� .B �� I ��� ��� ���� =�$$9 �� I ��� $������� ���� ���� ���'������ �� ������� ��� ���(�����

$����� ��� �������� ��������� "��)� ���� "�������� ��� ���)����������� "���')����0����� ���)� +�<;�.� �B2 �"�/ ��� ����� �� ����������� �� 7I �� � �IB �6 ��9�� =� $$9� �B �6 ��������������� �B ��������� �"��� !�� "�� ��� =BB�� '���� ���� "�� ��� B< �� )�&�������� ��)���� "�� ��� �BJ ������� ��� ���� ��� IBJ ���������')����0����� ��� "�� ����� �&������� �� I7�9 $������� ���� ��)��(5�����' ������ ����� ����� ���� =� $$9� IBJ ��������� �B �6 �(�����"��������� �� I-�9 �� 7B ��� ���� ���� = � $$9� �B �6 �(�����"��������� �� I ��� ��� ����� ���� =� $$9 �� I ��� ������������ ������(�������� ��� ��� �������� �� 7B ��� ���� I�� "�� ������� � +$����/� �=I �� "�� �� ����� �� +#���������/ �� =� $$9�"�������� �� 7-�9 $����� ���� ���� ������ ���� =� $$9� �B �6�(�����"��������� ���� �� I ��� ��� ����� �� 7B ���� ���'������ ��������� ��� ���(����� ��� ������ ���� �"���� ���� >I "�������"����������� +*� ���� 6�))����'� 9�������� %>/� ��&���"�� � ��� =;�B ���"����� ��� ������' �������������� ���� B=J �����

������ � "��� �� ���� � �!�� ��)���' ��� ����������� �� ������� &����� +$���������� @� ������ 9�/ ��������� �� ��� ��""���������������� ��� ��� ��"������� = ��� ���� ?5��� ������� ��� ��� ����" ��"��������� ������� �������� �������� ��� "�������� ��������� �� ������ ���� ��� ��������� ��)���' �������� �!�� ��"�������������� ��"������ �� ��� ������ � ��� ������ �'��� ��� 8��� ��)���' �����"��8�� �B2( ��� ��� =I� �B2 "�����' ������� "�����������'���������� ������� � �;7 �) 4�� ������� ��� �����' �������� ������������ )' �')����0����� �� � 7=�(��)���� 9:7 "��)� ��� "��)� ������� )' �9�� �� �� ��� 9:< "��)� ������)�� �)�&� �� ���������')����0����� �')����0��� "��5��� ���� �������� )' ��"������ �� �����������' ��� ����������� ������� ������ ���� ����&���� )' � �� ����������� ������)�� �� ��� $��������� ��� ������������

0�&������� $�5������� � ���)��(�������� "������ !�� ��� ���������� �� ��� %��&�����' � ������ !�� $�5������� %��� +��������� ����������/� ����� ��� � � ��� ������ "������ 3�� ��� �&��� ������8� �!�������*� ���*� ���*� ��**� ���*� ��� ���* ����������� ����� ���� ���� �� �����&����""��� ��)������ ����������� �������� ���� )������ ��� ������ ������� ����K ���� � #�������"� ** >$ +$���������/ !��� ��� ��� ��)���������� �������� �� ��� � ������ ���������� ��5����� ��� "������� � ��� 8�����5����� ���� ���� ��� �� ����� ��� �� ����� ��)������

�?$%@�$

������� ������� �� ����� ����� ������ :����� �'����� ���������� �� ��� ���� �������� � ��� ������� �������� ����" ����� ��"��������� �� ����� "�������� ��������� ��� ����"������ )'�� ����� ������� *� )��� ��"��������� � ���������� ��� ������ ��������� ��� ���������� ���� ������ "�������� �������������� +��� ,���� ���� ������� �� ��� �,,2 ����� �� ��� �,,-/ 3�������� ����������� ������� ������� �������� �� ������ 3������� �'����� ������ ������� ������ ��� ��� "�� ����' �'�������0��� �� ���� �� �������"��� ��������� �������&��' ������� �������� +��� ����' �� ��� �,,I� �� � �������� ����������0����� � � ������� �'���/ *� ��"������� ����� ��""������� � ������� ����&��' ��� ���� ������ ���� ��' ��1���� )��� �� ������� "����� ���D�� ���� �'��������� �'��� ������ �������"������' ��� ����&��' ����� �� ��� ��' B ���"�� ��� )������)���� �� � ������ � ��� )�������"����(����&����� �������"��"� ����� �������� �� � "�������� ���&����� � "�������� +��� ,��8��� ����("����/

��� ���"�������� � 8&� ��� "�"��������� ��"��������� ����������� ��� ������ �� �������� ���� ���"���� )' �� �����������"��' +���� �/ ?���� ���)�������� � �9� "������ ���� �����"�������� 7I �� ���������' ���"��'�� )���� �����' )���� ��������"��8�� ��� �, ���� �������� )' �������� ����'��� !� ����������"������� ��� ���8���� �� ���� ������"������ �� ��&�� � ��� ����"��8�� �9� "������� � ������ 8&� "������� ���������� ������ ��� ��' ������ ������"��� �� ��� �)����������� �� �� ������������� !�� � ���� ���� ���� � �������"��8�� �9� "������� ���� �������������� ���������� ��&�����"����� �� ����� �� ��0� �� ��5����� ����� ���� ��&���� ������ ����

122 �%3�%� �� �� ��? �4%���@ 43 *�K?$�*:��*K? !?�6��4@4:M

Page 3: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

�������� ��� ���� �9� ��� ���� �������� )' ������ ������������'��� ����� �- ���5�� ������� ���� �')����0�� �� �� ���������'��"������ ���� $�&�� � ��� ���� ���� ������������� ��������� ��� ��� ���� �"���������

����� ���� ���� ���� ��5������ ��� ���"���� ���� ����� ��"�)��� ����)���� ����� ��� ����� "������ +�9#*� #��������6!/ 3��� � ��� ���� ����� )� ������8�� �� ��� )���� � ��������������' �� "��&�����' ����� ����� +��� +/ 9:� ������ ,-J���������' �� ��� �������� "������ � �&��� >����7=� �������� ����� ���������� "������ + ������' ����� �� ��� #***#= "�������3������ �� ��� �,.,/ 9:= ������ ,-J ���������' �� )�&������������� �� �������� � ���������� ��'��"������ +>��� �� ����,,B/ ��� "�)������ !��� ��5����� ���� ��� ������� � "��'+�/����� ��� ��� 9:= ��5����� ������� )�'��� ��� ���� "�)������������� 9:7 ������ -.J ��� -=J ���������' �� ��� �����������8� ������ +���������&��' ����� �6?�� ����� �"�������� ���������� "������/ +������ �� ��� �,,= @� ��� �� ��� �,,7 ��������� ��

��� �,,-/ 9:< ������ ���������' �� ����� +,.J/� ����� +,IJ/���� ��� +,<J/ 9��7� �������� � "�����&� "������ ������ +����� �� ����,,< #����� �� ��� �,,2 ��'��� �� ��� �,,-/ ��� 9��7 ������""��� �� ��&� ��"������ "��'����'������ ������� ��� "�)����������� ��� ����� �!�� ��� ����&�� ��� ��� 8���� )�� ���9:<� �� ���� �� ��&���� ����� ��� ����� ��"������ ��5���������� ��� ����&�� ��� ��� ������

��� ����� � ��������� ����� ����� !� �������� ��"�������� ��� ��� ������8�� ����� ��� ���8���� )' ���������')����0����� +��� */ ?��� ���� ��� �')����0�� �� � ���� ������� "��������&��' ������������� ������� ��� ���������� ��������� �� ������� ��"������)����' )������ ��"������ ������� ������ ����("���� ��� ���� ?�"������� ��&��� ���� ���� ������������ ������ ���� ��� ��������� ������� ����" ��� ������� ����������� �� ������� ������ ���"��� �� ��' B� ���8����� ������ �������� ��"������� ��� ��� � ��������� ���� ��� ��������� �� ������� �'����� ��� ��0�� � ��� ���� �� ����� 9:�� 9:=���� 9:7 �')����0�� ���� ���������� ���� "��&�����' "�)���������� �� ��� ������"������ ������ �����)������� ��� ���������� � ����� ���� ����&��� 9:< �')����0�� �� �� ����"������' ���������

��� �"����� ��"������� "������� � ��� ��� ����� ���� �������� )'� ���� �')����0����� ��"���������&� ������ ��� ������� �������� �������� �� ��� 4 ��� �"������� �� ��� 3 �� ��"������ >����7=��"������� ��� ���������� �� ��� ������������ 0��� � ������ �������� +��� 4�/ *� ��� ����� ������������ 0���� ��)����� ��� ������ ��� "�������� )�� ��� �� ��� "��������� ��A����� �� ���������"����� ����� ���� ������ �� ��"������� ��� ���� �� ������� �������� �� �� ��� ����� ��������� �"�������

!��� ��"������� ��� ���� ���� �������&� @�)����� ����'"�����' ���� ������� �� ��� �""�� )��) � ������ ���������"����������' �� ��� ����� ����� ���� ������ +��� 4�/ ��� ������"������� ����� � ����� �������� ���� ���� ��)����� ��������� �������� ���� ������ *� ������� ��������� !��� ��"������� ����)���&�� �� ��� ����� ���� ������ ��� ��� �"�������� ������*������ ��)����� ��� ���� �� ��� ��������� ���������'��� � �������� ��������� �"������� +��� 3&/� ����� �� ���� )��' ���� �� ����" �����' ��� �� ����� ����� �����

$�����8� ��"������� ��� ��������' �������&�� ���� ��)����� ���� ����� ��� �"������� ����� � ������ �������� +��� 4�/� �� ��� ����� ���������� ��� �"�������� ������ � ������� �������� +��� 4'/� ��� �� �������� ��������� �"������� +��� 3(/ 9��"���� ���� !���� ����&�������� ��� ������� &�������� � ��)����� ��������' �� �� ��������"�������� @�)����� ��� �������' ���� ������� �� ��� 8)��("�������� ����� � ������ ��������� "����������' �� ��� �""�� )��)?�"������� ��� ��� �������� �� ��� �������'��� ����� � ��� ������"�"����

9��7 ��)����� ��� ���� ���� ���������� ��� �"������� ����� � ������ �������� +��� 4�/ ��� �� ��� ����� ���� ������ ��� �"�������������� � ������� �������� +��� 4�/ ��� )��������� ��)����� ������� ����� "��)� �� ���� ���� ��� ������&��' ������� ����&���

���� � ,# ��� ������� � ��� ������# 3������� ����&��' ������ +�������/��� ����������� "�������� �������������� +�������/ ��� "������ �� ����" �������� &������ ����� � ��� �'��� ��������� +�/ $���� ��� 8��� ��"�������� �'������������ � ��� )�������"���� ��������� 3�� ��� ��' B ������� "����������&��� ���� ����"������' ����' +�/ $���� ��� ������ ��"�������� ���������� ��� ��"����� �� � ����� "����"����� *� +�/� ��� ���� &����� �� ���������� ��� "������ �� ���� ����("���� 3����� )���� ��"������ ����&��' ������ �� ���� ���"��� ��)��5�����' ���� �� ��� ���������� 3������� ����&��'������ ���� ���������� �������������'� ���� �������� �� ��� ������ "���� ���� ����' ������� �� "�������� ������ �� ����&� ��� ������ �� ������&���������� �������������� ���� �������� �� )���� "����� ���"��� ���������B;= � )� ��� )���� ������

���� �# ����� ����� ������ ���������

���)�� � "����� ���)�������� ���� .���)�� � �� ���������' ���"��'�� )���� �������� 7I���)�� � ����"��8�� )���� �������� )' �������� ����'��� �,���)�� "�������� � �������)�� ������ �< -<J�

���)�� �')����0��� �� �� ���������' ��"������ ���� - IBJ�

���)�� � ���5�� ������� �������� )' �������� ����'��� �-���)�� �')����0��� �� �� ���������' ��"������ ���� , I7J�

���)�� ������������� �� ������� - -.J�

���)�� �"��������� �� ������� = ==J�

���)�� ������8�� )' ��5����� < <<J�

����������� � ����"��8�� )���� �������� )' �������� ����'�������������� � ���� "�������� � �������)�� �������!��������� )' ��5����� ����'�������������� � ���5�� ������ �������� )' �������� ����'�������������� � ���8���� �� ���������' ��"������ ����

K4@ ��7� �4 2 !?9?6#?� �,,, :?�? ?C��?$$*4� !%�*�: 44@ 34@@*9@? 9M9@*�: 125

Page 4: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

"��)�)�' ��1������ ��� ������ ��"������ ��5����� �� ������ � ������*� ������ ��������� ��)����� �� ��� ����� ���� ������ ��� ����)��������� ��&��� "����������' �� ��� ��������� "������ �)�&� ���)��) ��&���������� � �"���8� ������ ��� ������' �""����� �� ���8)��("�������� �����

������ ����.������ "��� �� ���� ���$ ��� ��5��������������' � 9:7 �� ������8� ��� ��� ������ � ��� ��� ���� ������ ������8�� �� ���8�� ��� �������' � ���� ���� �� ��� ���� �������� � ����" ���� ��)���' �� � ������ �!�� � �7 �) ����� ���

�������� ���� �������� � ���(������ �"��(������� ���� ���������&��� ������8� +:��#��� ��������� ���)�� �3B-�BB./ �����5����� � 9:7 ��� ��������� �� ���� �!��� ����"� �� ���������� ���� ����� ��"�������� �����"������ �9� "������6��������� "����� ��������� �""���� �� ��&� �������� ��������"��8������ � ��� 9:7 ���� ��� +��� +(/

��� ���"���� �&��� ������8� �!�� ��5����� �� .IJ ������� ����� ����� ��� "�)������ )' @� ��� �� �� +�,,7/ ���� ���"���)�������������� �� ��� ��� �������' ��&������ ����� ��5������"�)������ )' ������ �� �� +�,,=/ ��� ��������� �� �� +�,,-/

���� � +# $����!��� � ��&����� ��� ���� '��� �����# +�/ 9:� ������� ���� >����7= +�/ 9:= ������� ���� )�&��� !��� +�/ 9:7������� ���� ����� ������8� ��� �6?�� ��� ���� ��� �&��� �!�� +:��#��� ��������� �� �3B-�BB./ +�/ 9:< ������� ���� ������ ���� ��� �����9��7 ��� ���� � ����� +:��#��� ��������� �� ��<.,BI7/ ��� ����� +:��#��� ��������� �� ���-<.,./ ��"������ ��5����� ��� $�� ���� �� �� ������� �� ���� ��5������ K������� )��� +Q/ ��"������ �������� ��������� �� �������� ���� �)�&�� ���� +/ �������� ��"� ���������� �� ������0� ��������� 9��������"��'����'������ ������� ��� ������ $�5����� ��"��������� �����"������ �9� "������ �� ����� �� ����� ���� � �� �������� ���� ���� ��� ��� ����������� � ��� �9� "������� ���� ����� ���� ���� )������ ��� :��#��� ��������� ���)��� �� ����� ���� ���G 9:�� �3B-�BB< 9:=� �3B-�BBI 9:7� �3B-�BB2 9:<� �3B-�BB-

121 �%3�%� �� �� ��? �4%���@ 43 *�K?$�*:��*K? !?�6��4@4:M

Page 5: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

#��� ��� �&��� ��� ����� ��5������ "������ =<. �������"��'"�"����� ��� "������ ������ ������� ��� ,7J ������� ��� ���"�������� ����� ���� ��5������ ���� ,.J ���������' ���� ��� ������������� ��)����������

!*$9%$$*4�

���� ����' ������������ ��� ������� �� �""�������� � �� �����������"��' �� ���� ������ � �� 4�� "��������(������� �'����� �������� � "���������' �� 8���� �'���� ��� ����� �� ������� �� ���������'��"������ ����� *�"�� ����' �'�������0�� ������� �'����� +����' ����� �,,I/ ����� )� ��"����� �� ������ ��� ��������� � ������ ������� �� ��"�������� �� �� ���� ��� �)�� �� ���"����������������� ������ ��� ������� ��� "�"��������3����������� ��� ��� "�"�������� ����� ���"������ ��������&�� ��� � ���"��� ������� � �� ����� ���� �'"��� ����������� �)������� � �������(�"���8� ���� � �������� 4� ��� ���������� ��� ����� ��� ��� ��&������ � )���� "�'�����������'���������� �� ���� �� �&���� ��� ��� � ������ ��"�������� ���� ������������� �������� ���"����� �� � "�������������� ���� ����������' ������ ��� ���� � ���� ��� ��� ��� 8��� ��������"������� �� �� �������� ���"��' ��� "���������' ������������'���� ��� ��� ��� ��� ������ �� ���8�� �� ����������"������� � �������� ������ ���� ���� ����("���� ��"�������� )'��"������ ������� ���� �������' ������� ���� ������� �� ������"������� ���� ��������' ���������� ���� ������� �'������ ������� ��� �����)���)�� �� ������� �� ������� )������ ����&������������� �� �� ����� ��"��������� ���� ����

� ����� ��� �� �������� ���"��' ������ �� ���� ����' )������� ��� �)����' �� ���"��� �����"�� ��� "�"�������� �������������'��� �� ������ 5���������&� �� ������� �� ������� �)������� ����� ����&��� ��������� ��� ��������� �� 8������� �������'���������� ���� ��� ������ $��� �� ���������' ���"��'�� )��������� ��� )� ����&���� ��� ����"��8�� ����� ����� ���� ���������� ������ ��&� �� ������ �� �������� ����'��� �� �')����0�� �� ����&������ ���� 4����� ��&� ���� �� �����"�� "������� �� �������*� ��� ������ � ����� �')����0�� �� � ���� ���� ��� �� ���������'��"������ )�� � � �� ����� ��0� �� ���� �������� )' ��� ����"��8��)��� ��� ����� ��� ����� ��� ����&�� �������� �������� ����������'� ����� ������ ���� ��&��������� ��� �� ���� ���� ���������' ��"������ ����� ���� �� ��� ��� "��&�����'������)�� ����� ���� ���� �� ������0� ��"������� �� �&��� ����

(� ���.������� � ���� *#+ >����7= ��� ���������'������ )' 3������ �� �� +�,.,/ ��� ������� � ���� �������� ����� ��� �� ������������ 8������(���������� "������ @�����0����� � ��"������� �� ��� �������� ������������ 0��� �� �'"���� � ����(��� �� ���� "������� +������ �� ��� �,,�/ !������������� � ����������� ����� �� ������� �� ��"������ �� 8)�� "��������� ��� ��������'������� ����� ������ ���� "���� !� �������� ��"������� �� ��������� ���� �'��� ��� "��&�����' )��� ��"����� �� ��� ������������ �� �������� +6���) �� ��� �,., ��� �� ��� �,,B/ ��� 8&� ����(��'����D�'������ �������� +���� �� ��� �,,-/ ����� ��� ��������� � ��� >����7= ���� ��� ���8���� ��� ������' � ��� �� �����������"��' ������ �� �""���� �� ��� �����

��� , ���� �� �� �������� ���)���� ��'��"������ ���� �� ����"����� � ���������� �� ���' ���� �'"�� ��� ��"������� � ���������� ���"������ �� ������� ��������� ��� ������� ������������� )' ��������� �� ��� ������� !��7 ���� @������ �� �������� ���� ������ ��� ����� ���������� ���� �)������ �'���� ���� ����+>��� �� ��� �,,- 6����������� �� ��� �,,-/ !��� ��"������� ���"��&�����' )��� ������� �� ��)�'���� ����� &�)������ +>��� �� ����,,-/ ��� �� ����� ��� ���� ����� �������� +>��0�� �� ��� �,,./?�"������� �� ���� �)������ �� ��� ����� ����� ���� ������ )�� ������ �������)�� �� ��� ����� ��'��� � ��� ������� )��) 4�� ����������� � ������� ��"������� "������ �� ��� ���� �������� � ����"

%����� ��� "�)������ !��� ��5������ ��� ���� 27 )" � 9:= ���� "�� ��� ���"��������' ��5����� �� )" 7;2I +��� +/ *� �� "����)������ ���� ��� ����� �� � �9� ���� ��� *� ����� ����&��� ��������<< )" � ��5����� �����' ��������� �� )�&��� !��� +��� +/� ��� ���')����0�� �� � ���� � ������� ��0� �� ��� )�&��� +>��� �� ����,,B/ ��� ����� +������ �� ��� �,,� ������ �� ��� �,,�/ ����+��� */ ��� ����� � ���� �')����0����� "��)� ��&� ���' � ���������� ���"��� ��� ��5����� ��&������ +��� 4/ 9:=� ����� �����""���� �� )� � ��� �� "��)� �� ��������� �&��� !��� ��"�������

���.��'� '���� * ������ ��� ��5����� ������� )������ ���9:< ���� ��� ��� 9��7 ��� ����� �"����� ���� &��' ������ ������ �')����0�� �� � ���� � ����"����� ��0� 4�� ������� ��������� ��0� � �""���������' �B �) �� ���"���� ���� �.;�, �) �������� ���� ��� ����� ���� +����� �� ��� �,,< #����� �� ����,,2 ��'��� �� ��� �,,-/ ��� ����� ���� ��������� ���������&��"������ �� "������ ��� ���� ��������������)�� )' ��0� 4���"���� &������ ������� � ��������� "������ ���� �� ��� "�������� ����&� ������ ����&��' � "����)�� ��"�������� �� ��� ������"���' ������� ��� �&��� ���� ��0�� ����� )� � �� ������ �� ��� �&����"������ ���������� �� ���� � ��������� 9��7 "������ �� ������� )'� ������� ���� *� ��' ����� ��� �B �) ���� �� �������� �� �������� �� ������ � ������(����&� 9��7 � ��������' ����� ���� ������ ������� �� ������ � ��������� ��� � ��� ������� 9��< ��� )����������� �� ������ ������ +��'��� �� ��� �,,-/� ��� 9��� ��� 9��=�"���� &������� ��&� ���� )��� ����������0�� ���� ��� "�������� �������� ������(������&� ��������� "������� +����� �� ��� �,,< !����� �� ��� �,,I/

�� ���� �� )���� ��� "������ � �� ���������&��' �"����� ���� ���9��7 "������ �""���� �� ������� �� ��� ��� �"������ ������������ ��� ����� 9�� ������� "���"���'���� ��&���� ��� �"������ ������ +9������ �� ��� �,,2 ��'��� �� ��� �,,-/ ��� �"������ ��������&� )��� ����� �� ������ ����� ��)������� ������)����� �����"���� �� "���"���'������ )' 9��� +9������ �� ��� �,,2 !������� ��� �,,-/ ��� �)������� � ��������� ���� � ��� 9��� ������&��� ��� ������(����&� ���� &����� )������ �� ����� ���� �'"��� ��� ��������� �� ��1����� &��������� �� ��� �"���8���' � ��� �"������+����� �� ��� �,,< !����� �� ��� �,,- ��'��� �� ��� �,,-/ 4���)���&������ � ��� ��"������� � � ����� 9��7 ���� �� ���� �������� ������� � ���� �� ��� ������������� � ��� �"�������"���8���' �� ������� ���������'���

0� ���� ���� �� �� �"�������� ���� ������ ��� � ���)�� � �������(������&�� �<;7;7 "������ ����' � ��&� �������� � �!������� ���� �������� �� �&��� ������8� �"��(������� ����� ��������� "�������� ����� ���� ��5����� �����' ������� �� ��� ����� ������ ��� ������ ������� ��)���������� ��� ����� �� ���� ����(������&��

���� � *# � ��� � ������ ��� !��� ����� ����� ��� ����� ������ �����# ��� ��� ��� ������ �'��� ��������� ��"������� ������� +��� ��� ,& �� ������"������ ������� ����&��' ������/ ��� ������"��� ���� ��������� ��� ��"������ ������� ������ �� B� -� �<� =�� ���=. � � ��� ������� ��� � ����� "����"����� +��)���� �B;�=. �)�&� ��������/ 3�������� �� ��� ���� � ������� ������� ��� ��)A����� �� �� ����8����"����"����� ���� �� ������ ?�"������� ��&��� � �(����� ���� ������������ ������ �5��� �������� � ��� ��� ��0�� � �')����0��� ���� �������� �� ��� �� �� ����� ���������� �� ��� �����

K4@ ��7� �4 2 !?9?6#?� �,,, :?�? ?C��?$$*4� !%�*�: 44@ 34@@*9@? 9M9@*�: 126

Page 6: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

������� � ��� �<;7;7 ����' ��� ��� �������' �� ��&� ��������������8����� +��� ��� $������ �,,2/ *� ��� )��� ��������� �����<;7;7 ����' ���)��� ������� �� ���"��� ���������� ������������ �����)�' � ������ ������������ ���"����� +6�������� �,,< ������� �,,I/ ���' ����)�� ���"�����(���� "��"������� "�'������'����������� ���� �������� ��������� "������� ���� ��� ������� �� )���&��&�� �� ������ ������������ $�����8� �� � ��� ������������� ������� ����� ��� "���� ������� ������ ���������� � ���� ���� ����������� +������ �� ��� �,,= @� ��� �� ��� �,,7 #'�A����� ����� �,,I 4���� �� ��� �,,I K������� �� ��� �,,I R��������� �� ����,,-/ *� ��� )��� ����� �� ������� :=D6 ���� �'��� ������ ��!��(������� ���������� ������ ����� +��������� �� ��� �,,-/6��� �"���8����'� ������8� ��� )��� ����� �� ��������� ��� ����&��'� ����� "������ ������ 9 ��� ���� �� � ����( ��� �'���� +!�����)���� ��� �,,I/

9���������� ��� �����"���� ��"������� �� ���� +���� 4 ��� 3/��� ���� �� ��� )���� ����������� �"���8������ � ����� �<;7;7��� ����� ������8� ��' ��&� ��&���� �������� �� ���� �������� ����� �� �� ������������ ����&��� �������� �� ����� �� "��� )'

"������ ������ 9� ����� )� ���������� ���� ��� � �����')����0����� ������� ������� ������ 9 �""���� �� )� ��&��&���� �������'�� �� �����������G ����)����� ��&� "��&�����' )�������� �� ������ ��� "��������&� ���� � ���� "���� ������� ���� ����� )��) � �������� �������� +������ �� ��� �,,-/� ������������������ ������� ��� ���� � "���� ������� ��� ������� ����������� � ������� ������ +������ �� ��� �,,I/ � ��&������ ���� ������8� ��"������� �� ���� �)������ �� �������������' "���"���� �����&� �������'��� � ��� �""�� �������)��) +��� 4/ *�����������'� "������ ������ 9 ��������� �� ������� ������� ��������"���� ��� "�������� ���������� ��� �����5����� +����� ��� >����� �,,� !��� �� ��� �,,</ ����� ��"������ �� ��&���� ���� ������� ����� +������ �� ��� �,,� ������ ��� ������� �,,7/ ����� � ���� ��� )� ��&������)������ ������8�� "������ ������ 9� ��� ��� ���������� � �������&��&�� �� ��� ������ ��� 8��� "�����'"� � �� �����������������'��� 3������ ��"������������ ����� )� ��5����� ������� ' ��� )���������� ���� � ������8� �� ���� ��������� ��� ���"�������� ������������ ���� "������ ������ 9

���� � 4# 7���-��� � ��� ����� �� ����.���� �� �� ���� ��� ���-���# $���� ��� ����(����� ��)�"��)�� �� ���� ��5����� ��� �����')����0�� �� ������ ��� ������� ���� ��������@����������� �������� ������� ����� �������� �������� +�� �� �/ $��� >����7= ��"������� +�� ���/ !��� ��"������� +�� � !/ ������8� ��"������� +���� �/ 9��7 ��"������� +�"�/ $��� ������ ������������ ����� "��)� +�"�/� ������ �������� ���� ����(����� "��)� +�"�/� ������� �������� ���� ����(�����"��)� ��� ��)���� ���������� ������� ���G 4$������ ���� ������ *$� ����� ���� ������ 94������� 9%� ������� #?� )���� ��� ?$ �"�������������� ����� ���G �BB ��

158 �%3�%� �� �� ��? �4%���@ 43 *�K?$�*:��*K? !?�6��4@4:M

Page 7: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

94�9@%$*4�$

��� ���� �������� � ��� ������� �������� ���� ��������� ���"�� ��� ��"������)�� ����' ���� ������� �� ���"���� ����"����������' ������� �'"��"������������� !� �������� ���"��'� ��� "�"�������� ��� ��� ���� � ����� ����" ��� �� � ����&������ � ������ '��� ����� ��&��&�� �� ���� ������ ��� ��� ����"������� ���� �� ������0�� ���� ��� ��"������ �� ���� ������������"��� ��� ������������' � ��� ���� ���� "�"�������� ��������"������

$�&�� � ��� ���� ����� �������� ���� ������������� �� ���������� ����� ��� �����' �� )� ��&��&�� �� ������ ���� ������ �����"������� "������� � ��� ��� ������0�� ���� "������� �������� �����'"�� �� �� ����������� ������ ���� ��� ��� "������ �� ������������������ ���� �� �������� ��"������� �� � �����5����� � ��� ���� � ��"������� ���� �'"�� ����� ����� ��� �������' �� ��&� � �������&����� �� ��� �'����� "������ ��� ���� �� �����' �� )� ���� � ������ ���������' ��"������ ����� �� ��� ������ ��������� �� ���������8������ � ����� ���������� ���� ������ ������� �������������� ���� ���� ��� �'����� "������ #�� �� 3�� ����"��� ��� � �������� ���� �� ������8��� ������8�� ��' )� ��&��&�� �� ���������������������� "�����'� �"������� �� �� ����������� �������'���

:���� ��&��&�� �� ��� ������� � ������� �'����� ��������&��������� )� �������)�� )' �� �������� ���"��' $���� ���� ����'��� ���"������ ��� � 8�����' � �� �������� ���"��' ��� )�����"��&�� )' ����&������ �� "����� ������� �9� "���������� ��������� ��5������� ���������� +K����� ��� ��)��� �,,- 6����� �� ����,,-/ ��8������� �� ��� ������ ����� ���� ����� ��� ���������� )�����(�'�������0�� ������� �'����� 3����� ���� ���� �����0������ ��"��&������ �� ������ ' ����� ���� �����' �� )� ��&��&�� ������������ "���������� ������� ��� ������� ������ �'���

$� %���� ��!� �� ���! �����& ����& ��� ��'������� ��� ����� �(#�������)

*��� $��������� ��� #������� #������� ����&�) +������� ,��� ��� ���������&

���������) �� ��& +��� ��� ������� �� ���&���- .�� /��� .��& �� 0������

���� ���������� ��& ���#��� ����������- ��� %��! %�� ����� �& ��� ��%

1����� ,������� ��� 0�������) ������) �� ������� &-

�?3?�?�9?$

������ �G �<(7(7 "������� �� ��� 6�� ����� ������� ��� =BG,I;,-� �,,I����� �� >���� 6G ��� ���� � ���� 3�� ��� ��� ��(� ���"��� �� ����("���� �������

��� ����� �������� ������� ���#�&� ���� �B-=G�=,;�I-� �,,����� �� *�� >� *�� 6G *�������� ��� ����������0����� � ����� ����(��'����D�'������

"������� * ���� +��� =-=G7BI�=;7B=�.� �,,-#����� � >�����" �� ������)��� �� ����� �(:G �!�� ������� ���

����������0����� � ��� 9��7� � @�66?� ������ "�����������' ��"������ �������� ������� ���#�&� ���� �7�=G27;2-� �,,2

#'�A����� *� @����� �6� 3�' $�� 9����������� 9G ����� ����������� "������� �����'���� ������� �� ��"������� ������ ��� ������ ��������� �'���G����������0����� )' "������ ��5����� ����'��� /�� 0�#��� �BG=-2B;=-22� �,,I

9����0'���� �� $����� �G $�����(���" ������ � ��� ��������� )' ����������������'�����("�����(������ ��� ���������� ��� ������� �2=G�I2;�I,� �,.-

9������ >� ������ �� ������� #� ������ �� 6����' �@� #��� �9� !����� �*G ���

9��D$�' "������ ������ "���"���'����� $� �"������ ������ ��� ��������� ����������������� ������)����� ���2 * �IG=2I;=-I� �,,2

!�������� !6� ���� #!� ������ :3G :����� ������ ��� �'������� �� ���� ���������&���"���� ��� �'�����G ������ �������� ��� ������ ������ ��� ��� "��������� �� �������� �����"' ��� ��� ����& ��&��)��G<2B;<2-� �,,2

!��� :� ?��������(��""� *� 3���� �(� ���""���� �� ��"" %�G ��� ��� ��� ����� �� ������� ����� ������� ��� �,G<-<;<.B� �,,<

!�����)�� ?� ������� 6� $"������� #� �� ��G $�����8�� � ���������'�� �"���8� �<(7(7"������� ���)���� � "��������� �������' +��/ ������ ��� �������� "������������ 9 ����&��' * +��� ��� �B.G7I2,;7I-,� �,,I

!����� �*� ������ #� 6����� �6� !������ $� !��&���� ?6�� #��� �9G���������&� �"������ � $�M� � ������� ���� �"���8���' ������ * ���� +���=-BG=�I=<;=�I7�� �,,I

!����� �*� $��A�� !3� 6����� �6� #��� �9G *� &�&� ���������� � ���������&� "��(���� �"������ )' ��� 9��� "������ ������ ��� +��� ���� �-GI,,2;2BB�� �,,-

3������ 6�� ������ #9� ��� >�� $����� 6�� ������ :?G ��� ������� #***# ���� ����'G ��������� � �!�� ������ ��� ��������� � � ���� ��� � �������"��������� 3������ <G�.=;�,�� �,.,

����� �� &�� ��� >����� �� >������' �� $����� >�G 9���������0����� )' �!��������� � ��� ��� ����� "������ ������� * ��� ���� =<<G22I;2-=� �,,<

������ 9$� ��&��� �!� #����� #G ������� ������ 9 ����)��� ����� ���� ������������� ��� ���� 8)�� "��������� �� ����� ������� �� * .������� �77G2.2;2,7��,,I

������ 9$� ��&��� �!� !����� �� @��0 !G #�������'���������� "������(������(9����)����� ����' ��� ������� �� !�� �'������� �� ����� ���� ������� ������������� �!� ��������� �BG-�;-.� �,,-

��������� �� @������� 9� ���'�� >� �� ��G �<(7(7� �� � "I7(��������� ����)���� � :=D6 "���������� ��� +��� �G7;��� �,,-

>��� *�� ����� #!� ���� !6� >����� 6� �������� �� #����� �$G ��������������"������� � ���������� ��������� ������ ������8�� �"�������� ���"����������� ��� ����� .������������ 2=G.7;,2� �,,-

>��� ��� ���� 6�� $�����0 6� :���������� 6!� ���)������ �� 3����� G*�����8������ � ����������� � ����������&� ���������� ��'��"������� �� ����)�� � ��� �������� ����' � ���� �������� ��������� ��� * +��� ���� I7G�;�=� �,,B

>��� ��� 6�����' 6:� *������� �� �� ��G �������� �����"���� � ��� "��"�����&������� ������� +���������� 7/ ���� �� ���� ������ ���� � ���������'�� ������������ ���� � "�����'"� ������� �� "��"����� &������� * +��� ���� �7-G�B,�;��B=� �,,-

>��0�� �� 6��� *� 6��� �� �� ��G 9��"����������' �� ����� ���������� �� ���&������ ���"�������� � ��� ����� ���� ������� .������������ 27G=,I;7B<��,,.

@� ��� �� 6����� �� ��������� ��� �� ��G 6�������� ������� ��� ��"������� � �������� �������� �������&� �"�������� ������ ������8� * ��� ���� =7�G,.=;,,.��,,7

@���� �� �&��)���� @� ������ �#G !�����)����� ��� ������� � �����'���� ���� )'����� � �� �������� ���"��'G ��8������� ��� �"����0����� ������� ����� 0��=�G7=2,;7=-I� �,,7

6����� >�� >��� 9�� $���� � � ������(��5�������()���� �������' �� ������ '������ ������� �!�� ��� �� �������� ���"��' ���� *�G @���� �� ������ �# +���/.���������� .��#��& ������� �� ��������� ������� ��G ������ ������ �,,-� ""--;.I

6���) ��� ��� @� ��������� �� :������ �� K����� :G �� ��������� ��� ��������� ���� �� ��"������ �"���8����' ������ ���� ������ * 4��� .�������,=G=27;=22� �,.,

6������� ��� !�&�� $�� ������ ��G ?�"������� � �(������)����� �($�(������ �������� ����� ����� �� ������������ �� ����" ��� ������ ������' ������ */�������� +&������ <BG2��;2�.� �,,=

6����������� C� @�������� �� #������� ��� :��S��� �(@� $���)��� ��G K������ �������� ��� ��������� ���� ������ ��"������� �� ���� ����0'���� ������������� ������� �� ��� )������ +���/ ����� * 4��� .������� �B,G7=<;7=.� �,,-

6������� !G �<(7(7G 6��������� � ��������� "�������T ������ =22GI2;I-� �,,<��'��� 4� $���� $� %������ �G 9���������0����� ��� ���"������ � ��� ������( ���

��������(���� +$�/ "������ ������� ������� * 7=2G2,7;-BB� �,,-������ @�� ����' !�!� ������ ??� ����� #!� ����� �6� :���� >�G $���������

���� � 3# 7���-��� � ���,% �� ����% �� ��'* ��� ����� �� ����� !�� �� �� ���� ��� ���-���# $���� ��� ����(����� ��)�"��)�� �� ������5����� ��� ���� �')����0�� �� �������� � ����" ���� +�/ !��� ����� "��)� +�/ !��� ����(����� "��)� +�/ ������8� ����(����� "��)� +�/ 9��7 ����(�����"��)� ��� �"������� �� ��������� )������ ��� �� � "������� ������� ��� �� ���������� ���� ��� ����� ���� ������ � ��� �""�� ������� ����� ����� ����������� )' ��� ����� "������� ������ ����� ���G �BB��

K4@ ��7� �4 2 !?9?6#?� �,,, :?�? ?C��?$$*4� !%�*�: 44@ 34@@*9@? 9M9@*�: 15,

Page 8: Identification of Differentially Expressed Genes During a Wool Follicle Growth Cycle Induced by Prolactin

����'��� ��� ��"������� � ����� ����������G � ��������(���� ���"����� � ��� ��������� * +��� ��� ,,G.B,;.=�� �,,�

����� ��G � ������ �� ����������� ��� ����&��' ����� � ���� �������� ���������/�������� 2.G7�2;7=I� �,,7

����� ��� 3��� 9�� 4����� �6� ������� ��G @�����0����� � �������(���� ������ ����� ����"���� �� ���� �������� � ����" +2�� �����/ ��� ������� ������ ��������� ������ �'��� +��# ������� ��&���� � ��&���� ��.G�=<-;�=I-� �,,-

4���� ?� ��������� ��� 9���� �?G *�����8������ � "������� ���� ��� �)�������'��������� �� �� ���������� �������� ����� ���������'��� �������#��������2G==<�;==<.� �,,I

R��������� 6� ��������� ��� ������� �?� K���� �� R���� � �3� �� �� 9�����?G �������� "��8���� � )������ �5������ ���� ����������G ������8������ � ������� ���� ��8�� ����� ������ � �� ����������� +���� 0�� I-G<���;<��-��,,-

����' �@� ������� ��� 6����� �� $���� @(�G �� �&�������� � ��� ��� ��������������� ����" �� � ����� �� ������� �� ��� "�'������' � 8)�� ������ �����1 ��� ��� ���� I�G72I;72,� �,,�

����' �@� ����� ��� 9��&�� ��� ������� ��G ��� �����������'� ���� ��"��������� ���������� ���� ��"������� � ���� �������� ������ � "����"�����(������� �������'��� �� ����" ���� ��� �I<G=.7;=,,� �,,I

���� �G 9������ � ��� ���� �'��� ��� ���� �������� �� �'����� ��������� +��� 2#�.������� 7G=<.;=I.� �,,2

������� ��� ����' �@� ���)' 6:� 9��' K�� ��������� �?� 9��&�� ��G *���)����'� ��� � ��������� "����"����� �� ���� ������� ������ * �������� �<.G�I-;�22� �,,2

������ #9� ����� �� ������ :? ���������� � ������� ���� ��"������� �� ���� ������� �� ����������� *�G $���� >$� 6�������� �:� #���� �� +���/ ������������ �� ���������� ����� & �� /��� ���� �� ��� ��% 5��! ������& �� ��������2<= ��� M���G ��� M��� ������' � $�������� �,,�� "" �;=B

������ :@� K��&����� ?6� 6�!� 8� ?� 9��"�� �@G 9��"��������' !�� �������� � ��&�� �"�������� ���� ������ "������� �6?�� ���� ��' )� ����(����������� ���"������ ������' ����� +��� 3��%�� .����� 7GIB-;I�7� �,,=

������ :?� ������ #9G 4�����0����� ��� ��"������� � ���� ������� ����� * 4���.������� �B�GIB$;II$� �,,7

�'��� 6@G :����� �'���� �� ��� ���� � ��������� 4� * +�������� IG72,;7,<� �,-.K������� K3� :������ 3�� ����� 6G 9������ � "�����&� ������ ���������' �����

��� "�����' ����� ���������'��� )' ��)������&� �')����0����� 3�� �22G=�7;==B� �,,I

K����� *� ��)�� @�G *� ������ � �� ���������' ��"������ ����� ��� "������� ����������#�&� ���� �7I,G�.-;�,,� �,,-

��� � $����� !9G 6�������� �&������� � ��� �<(7(7 "������ ����' * ��� ���<7G7.<;7,.� �,,2

������ :�� ������ �?� ������ 9@� �� ��G !��������� ��'��"������ !:*� ����"����� � ������������� ��������� A��������� �� ������� �� ��� �������� ����' � ���� �������� ��������� ���� ���� ���� ��� 6�� ..G<-,2;<.BB��,,�

��� @� 6���� 6� ���0��)����� �� K����� :G $�����(���� ����� ���� ��� �� "���������� ��"������� �� ������ ���� ��� ���� ������ ��� ���� �'��� * ���� +���=2IG=�7-I;=�7.B� �,,B

15+ �%3�%� �� �� ��? �4%���@ 43 *�K?$�*:��*K? !?�6��4@4:M