icb –usp disciplina: bioinformática aplicada ao estudo de doenças parasitárias jaques franco

14
ICB –USP Disciplina: Bioinformática Aplicada ao Estudo de Doenças Parasitárias Jaques Franco Plataforma SOLiD

Upload: angie

Post on 23-Feb-2016

40 views

Category:

Documents


0 download

DESCRIPTION

Plataforma SOLiD. ICB –USP Disciplina: Bioinformática Aplicada ao Estudo de Doenças Parasitárias Jaques Franco . Carvalho e t a l ,2010. Andreonte ,2011. Roche -454. Illumina- Solexa. ABI- SOLiD. c. c. ATGTCGTGCTGCCGAGCGGAGGTGAATGAGCCAGTAACTCCCAGCTCCGCTTCATCATTGGAGTCTGACG. - PowerPoint PPT Presentation

TRANSCRIPT

Page 1: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

ICB –USPDisciplina: Bioinformática Aplicada ao Estudo de Doenças

ParasitáriasJaques Franco

Plataforma SOLiD

Page 2: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Carvalho et al ,2010

Page 3: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Andreonte ,2011.

Page 4: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Base -code Color-code

ATGTCGTGCTGCCGAGCGGAGGTGAATGAGCCAGTAACTCCCAGCTCCGCTTCATCATTGGAGTCTGACG

T012301123321023021123021001232332

ABI-SOLiDIllumina-SolexaRoche-454

c c

Page 5: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco
Page 6: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

SOLiD 4 SOLiD 5500

Page 7: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Reação é catalisada por uma DNA ligase

Page 8: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Nesse método os fragmentos de DNA são gerados e ligados aos adaptadores P1 e P2 que se ligam especificamente a uma microesfera

Page 9: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco
Page 10: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Ciclo de hibridização a cada

35pb

Page 11: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Código 0 1 2 3Fluorocrom

osFAM Cy3 TXR Cy5

AA AC AG ATCC CA GA TAGG GT CT CGTT TG TC GC

Page 12: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Saída do SequenciadorOs arquivos que representam as sequências obtidas estão no formato “csfasta”.

Valor da qualidade associada a cada transição de base das sequências lidas estão no formato “qual”.

Page 13: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Pipeline De novoÉ um conjunto de softwares utilizados para montagens de genomas onde não se conhece a referência, ele faz a montagem dos “reads” e gera sequências maiores como contigs e scaffolds.

Page 14: ICB –USP Disciplina: Bioinformática  Aplicada ao Estudo de Doenças  Parasitárias Jaques Franco

Limitações

1.Leituras curtas de 35 pares de bases2. Regiões repetitivas3. Construção de bibliotecas 4. Custo das máquinas5. Erros de montagem6. Processamento, análise e interpretação de dados 8. DNA barcode