Hylasome®  EG10  Excellent  Moisturizing  Through  the  Delivery  of  Water  

Hylasome®  is  a  registered  trademark  of  Genzyme  Corpora�on.  US  Patents  5,143,724;  5,246,698;  5,399,351;  other  patent  pending  

•  Hylasome®  is  the  tradename  of  Hylan  B  gel    (cross-­‐linked  hyaluronic  acid)  used  in  topical  applica�ons.  

•  HylaMed  Research,  Inc.  has  the  exclusive,  global  license  for  Hylasome  technology  for  use  in  the  topical  cosme�c  and  skin  care  field.  

•  Lipo  Chemicals  is  the  exclusive  worldwide  distributor  for  HylaMed  Research.  

•  Medical  Products  containing  Hylan  B  gel:  

–  Synvisc®  :  treatment  for  osteoarthri�s;  injec�on  of  Synvisc  (Hylan  B  gel/Hylan  A  HA  mixture)  into  the  knee  relieves  the  pain  of  osteoarthri�s.  

–  Hylaform®:  so�  �ssue  augmenta�on-­‐  correc�on  of  facial  wrinkles  and  scars  by  intradermal  injec�on  of  Hylaform  (composed  of  Hylan  B  gel)  

•  INCI  name:  Sodium  Hyaluronate  Crosspolymer  

•  CAS  No.:  380600-­‐88-­‐4  

•  EINECS  No.:    Polymer,  Exempt  

•  Consists  of  an  aqueous  gel  of  crosslinked    hyaluronic  acid.      

•  Polymer  content:  6%  by  weight  of  polymer  plus  bound  water  

Chemical  Structure  

Sulfonyl-­‐bis-­‐ethyl  crosslinks  and  hydroxyethyl  sulfonyl  ethyl  pendant  groups  

O

O

HO

HH

H

OHO

COO -

O

OH

H

OH

H

H

NHH

OH

H

OCH3

O

HO

HH

H

OHHO

COO -

O

O

OH

H

OH

H

H

NHH

O

O

OCH3

O

O

HO

HH

H

OHHO

COO-

O

O H

H

OH

H

H

NHH

OH

H

OCH3

O

HO

HH

H

OHHO

COO-

O

O

OH

H

OH

H

H

NHH

O

O

OCH3

S OO

SO O

OH

Crosslinking  

Delivery  of  Water  •  Unique  non-­‐equilibrium  gel.  

•  Developed  specifically  in  a  non-­‐equilibrium  state  with  gel  domains  that  are  not  completely  swollen.  

•  Gel  domains,  which  contain  �ghtly  bound  water,  are  surrounded  by  free  water.  

•  The  gel  forms  a  smooth  film  on  the  skin  and  con�nuously  delivers  the  bound  water.  

Skin  Moisturiza�on  Study:  

•  Confocal  Raman  Spectroscopy  

•  Ex  vivo  –  surgically  removed  skin  (including  stratum  corneum,  viable  epidermis,  and  some  dermis).  

•  Hylasome®  EG10  vs.  Hyaluronic  Acid,  both  at  0.1%  polymer  weight  in  D2O  

•  Performed  at  Rutgers  University  

Experimental  Procedure  •  5  µL  D2O-­‐based  test  material  applied  to  2x2  cm2  

surgically  removed  skin.  

•  Held  at  55%  rela�ve  humidity  (D2O)  and  room  temperature  for  24  hours.  

•  Placed  in  milled  brass  sample  holder  and  covered  with  glass  cover  slip.  

•  D2O  content  in  the  skin  measured  by  confocal  Raman  spectroscopy  in  the  x  and  z  axes.  

Confocal  sampling  •   skin  sec�ons  parallel  to  surface    •   placed  in  a  brass  block  (SC  up)  •   sealed  with  cover  slip  

Cover  glass  

Brass  block  

Skin  sample  

A  well  is  milled  into    the  brass  block  

785  nm  in   Raman    out  

100  X  objec�ve  (oil  immersion)  Raman  out  

Measure  along  Z-­‐line  

785  nm  in  

Confocal  Raman  Spectoscopy  

Raman  Spectra  of  Materials  

0  

5000  

10000  

15000  

20000  

 2100      2200      2300      2400      2500      2600      2700      2800      2900      3000      3100    

Hyaluronate  prep  Hylasome  prep  Ethylhexyl  glycerin  Pentylene  glycol  

Raman  cou

nts  

D2O  stretching  mode  

CH2  CH3  stretching  region  

Raman  Shi�  (cm-­‐1)  

0  

500  

1000  

1500  

2000  

2500  

 300      400      500      600      700      800      900      1000      1100      1200      1300      1400      1500    

CH2,  CH3  scissoring  region  

CH2  twis�ng  

Typical  Raman  spectrum  of  surgically  removed  human  skin  stratum  corneum  exposed  to  100%  Rela�ve  humidity    D2O  

Integrated  band  area  ra�o  of  D2O  /  Phe  is  used  to  quan�fy  the  rela�ve  concentra�on  of  D2O  in  skin.  Skin  protein  component  phenylalanine  (Phe),  band  area  is  used  as  an  “internal  standard”  to  correct  for  sca�ering  losses  with  depth.  The  ra�o  of  the  D2O  peak  to  the  Phe  peak  indicates  the  moisture  content  at  the  measurement  site.  

Wavenumber  (cm-­‐1)  

1000   1500   2000   2500   3000  

0  

2000  

4000  

6000  

8000  

10000  

12000  

Raman  intensity  

700   800   900   1000   1100   1200  -­‐600  

-­‐400  

-­‐200  

0  

200  

400  

600  

Raman  intensity  

D2O  stretching  band  

Phe  ring  breathing  mode  

Phe  ring  breathing  mode  

This  skin  sec�on  had  Hylasome  EG10  applied  to  the  top  of  the  SC.  

Wavenumber  (cm-­‐1)  

Applica�on  in    55%  Rela�ve  Humidity  D2O  environment  D2O  /  Phe  band  area  ra�o  

400  Across  skin,  µm  

30  

Hylasome®  EG10  En�re  sample  area    Mean  ra�o:  693  

500  

600  

700  

800  

900  

1000  

1100  

1200  

1300  

Depth  into  skin,  µm  

0   10   20   30  

0  

5  

10  

15  

20  

25  

Depth  into  skin,  µm  

Across  skin,  µm  

50  

100  

150  

200  

250  

300  

0   5   10   15   20  

0  

5  

10  

15  

20  

25  

30  

Hyaluronic  Acid  En�re  sample  area  Mean  ra�o:  111  

Skin  appears  to  dry  over  �me  while  exposed  to  Raman  laser.  Spectra  acquired  le�  to  right.  

A�er  24  hour  incuba�on  at  55%  Rela�ve  Humidity  in  a  D2O  environment,  the  results  show  that  the  sec�on  treated  with  the  Hylasome®    prepara�on  contains  more  D2O  in  the  skin  and  in  the  stratum  corneum  than  the  sec�on  treated  with  the  0.1%  HA  formula�on.  Higher  ra�o  numbers  indicate  higher  D2O  concentra�on.  

55%  Rela�ve  Humidity  D2O  environment    D2O  /  Phe  band  area  ra�o  for  stratum  corneum  region  using  same  color  scale  

•  A�er  24  hrs  at  55%  Rela�ve  Humidity:  

–  Hylasome®  EG10  treated  skin  contained  6x  more  moisture  in  the  total  sample  and  5x  more  moisture  in  the  stratum  corneum  than  hyaluronic  acid  treated  skin.  

Conclusion  

Free  Radical  Scavenger  •  Hyaluronic  Acid  (HA):    

–  Natural  scavenger  of  free  radicals  (Greenwald  &  Moy)  

–  Protects  against  free  radical-­‐induced  cell  damage,  molecular  weight  dependent  (Pres�  &  Sco�  1994)  

–  Prevents  free  radical    damage  to  healing  �ssue  (Foschi,  et  al  1990)  

–  Inhibits  lipid  peroxida�on  (Alber�ni,  et  al  2000)  •  Hylasome®  gel:    

–  Inhibi�on  of  free  radical    produc�on;  free  radical    consump�on    (Larsen  et  al  1992)  

–  Accelerates  healing  of  full  thickness  wounds  in  rats      (SBIR  grant  final  report,  1987,  Biomatrix,  Inc.)  

An�oxidant  Ac�vity:  Free  Radical  Scavenging  by  Hylasome®  [xanthine  oxidase/hypoxanthine]  Measured  in  vitro  

Perc

ent  

Redu

c�on

 of  F

ree  

Radi

cals

 

Hylasome®  is  :  •  Nonirrita�ng    

•  Nonsensi�zing  •  Noncytotoxic  •  Nonphototoxic  •  Nonhemoly�c  

•  Nonpyrogenic  •  Nonmutagenic  

•   Passes  HRIPT  and  Epi-­‐Ocular  Tests.  

Safety  

•  Skin  Care  Creams  and  Lo�ons  

•  Skin  Care  Gels  

•  Skin  Care  Treatment  Products  

•  Facial  Masks  

•  Liquid  Founda�on  Make  ups  

•  Leave-­‐in  hair  condi�oners  and  styling  aids  (without  ca�onic  compounds)  

•  Recommended  Use  Level:  1  to  3%  

Product  Formula�on  Types  

Benefits:  •  Five  �mes  the  water  binding  capacity  of  hyaluronic  acid  

•  Free  radical  scavenger  •  Smooth  elegant  skin  feel  

•  Slow  delivery  of  water  –  Long  Term  Moisturiza�on  Claim  

091212