HRANLJIVE PODLOGE

Hranljive podloge obavezno sadrže:

• Vodu

• Izvor ugljenika

• Esencijalne minerale

• Faktore rasta (vitamini, aminokiseline, purini...)

Moraju da budu:

• Sterilne

• Bistre

• Dovoljno vlažne

• Optimalnog pH

Na osnovu sastava razlikuju se:

• Prirodne → pripremljene od sastojaka

nepoznatog sastava (ekstr. goveđeg mesa, ekstr.

kvasca...)

• Veštačke → pripremljene od prečišćenih

jedinjenja poznatog hemijskog sastava

Na osnovu namene razlikuju se:

• NESELEKTIVNE → kompleksne podloge koje omogućuju rast MO sa različitim potrebama u ishrani (LA, hranljivi agar...)

• SELEKTIVNE → sadrže bar jedan sastojak (boje, antibiotici...) koji inhibira rast nepoželjmih MO (minimalna podloga, Simonsov citratni agar...)

• DIFERENCIJALNE → sadrže sastojke koji na neki način omogućuju razlikovanje nekih MO od ostalih, ali ne inhibaraju rast nijedne grupe MO (endo agar)

Neselektivne podloge:

K 12

SY

252

Citrobacter sp.

LA podloga – očekuje se rast svih zasejanih bakterija

Uvr A

Neselektivne podloge:

Selektivne podloge:

Minimalna podloga (MM) – sadrži samo mineralne soli i glukozu

kao izvor ugljenika i služi za diferenciranje mutanata u ishrani.

PROTOTROFI → MO koji ne nose mutacije za sinteze hranljivih

materija, mogu da rastu na MM podlozi.

AUKSOTROFI → mutanti u ishrani, ne mogu da sintetišu sve

nutrijente, te ne mogu da rastu na minimalnoj podlozi. Dodavanjem

jednog po jednog nutrijenta u MM podlogu može se zaključiti za šta je

MO auksotrof (bakterije koje nisu izrasle na MM podlozi, a izrasle su

na MM sa argininom su auksotrofi za arginin).

Podloge sa antibioticima- Rastu samo mikroorganizmi koji su

rezistentni na antibiotik koji je stavljen u podlogu.

Selektivne podloge:

LA + tetraciklin – na podlozi će izrasti samo bakterije koje su rezistentne na tetraciklin

K 12

SY

252

Citrobacter sp

.

Uvr A

Selektivne podloge:

K12

SY

252

Citrobacter sp

.

K12

SY

252

Citrobacter sp.

Uvr A

Uvr A

MM

MM+arg

MM

MM+arg

Selektivne podloge: SCA

Simonsov citratni agar (SCA) – omogućuje rast samo bakterijama koje

mogu da koriste citrate kao izvor ugljenika, koriščenje citrata menja pH

podloge iz kisele u baznu što dovodi do promene boje iz zelene u plavu.

Bacillus subtilis

Selektivne podloge: SCA

Bacillus subtilis

Diferencijalne podloge:

Endo agar → podloga služi za razlikovanje bakterija koji fermetišu laktozu

od onih koji je ne fermentišu, laktoza i pepton - izvor ugljenika. Kiseli

produkti pri fermentaciji laktoze snižavaju pH podloge i menjaju boju

indikatora.

Bacillus subtilis

Diferencijalne podloge:

Specijalne podloge:

• Proizvođači hranljivih podloga kombinuju različite selektivne i

diferencijalne sastojke i tako dobijaju podloge za precizniju izolaciju

pojedinačnih hrupa MO ili čak određene grupe.

Eozin-metilensko plavo (eosin

methylene blue - EMB) → izoluje

koliformne bakterije, odnosno G-

bakterije koje fermentišu laktozu.

Sadrži boje eozin i metilensko plavo

koje inhibiraju rast većine G+

bakterija i u kiseloj sredini stvaraju

kompleks tamne boje i metalno-

zelenog sjaja.