Hemograma El Hemograma es un exmen que analiza las variaciones cuantitativas y morfolgicas de los elementos constituyentes de la sangre, y aporta datos clnicos para auxiliar al mdico en la formulacin de un diagnstico hipottico.

Para que sirve?El Hemograma es una prueba que sirve para orientar hacia el diagnstico de diversas enfermedades que se han sospechado por la historia clnica y la exploracin fsica. A veces, los datos que nos da son suficientes para confirmar o descartar la enfermedad sospechada, pero con frecuencia se necesita utilizar otras pruebas diagnsticas que aporten ms informacin.

HEMOGRAMARecuento de Glbulos Rojos Concentracin de HemoglobinaHematocritoVCMHCMCHCMRDW ( IDE )Recuento de PlaquetasIDP Recuento de LeucocitosFrmula Diferencial% neutrfilos% eosinfilos% basfilos% monocitos% linfocitos Valor Absoluto del Recuento CelularTambin se realiza un reporte citomorfolgico de cualquier anormalidad de cada lnea celular

Factores que IntervienenSerie Roja:

Alteracin en el tamao de los hemates Un nmero muy alto de leucocitos Hemodilucin: aumento de la cantidad proporcional de agua en la sangre. Deshidratacin: prdida de agua del organismo, que se refleja en la sangre. Embarazo: porque se produce hemodilucin. Residencia a gran altitud: por ejemplo, la gente que vive en el altiplano andino. Hemorragia inmediatamente previa a la prueba. Medicamentos.

Serie Blanca :

La ingestin de algunos alimentos, la actividad fsica y el estrs pueden aumentar el nmero de leucocitosDurante el ltimo mes de embarazo y en el parto, puede aumentar la cifra de leucocitosLas personas a las que se les ha extirpado el bazo pueden tener una elevacin leve y persistente de la cifra de leucocitos Medicamentos, que pueden aumentar o disminuir los niveles.

Serie Tromboctica :

La residencia a gran altitud puede aumentar el nmero de plaquetasEl ejercicio intenso puede aumentar el nmero de plaquetasMedicamentos

Sistemas de Extraccin al Vacio ( Vacutainer )

Se conoce como recuento celular sanguneo ( RCS ) a la determinacin de la concentracin de las clulas presentes en la sangre circulante ( hemates, leucocitos, plaquetas y eventualmente reticulocitos ). De acuerdo con el SI de unidades, los valores de esta determinacin se expresan como concentracin de nmero ( C ) por litro ( L ) de sangre.Hoy en da el RCS requiere de mtodos basados en la citometra de flujo y el anlisis electrnico de las clulas, muchos mas fiables, econmicos y rpidosEn la actualidad ya no se recomiendan estos mtodos para el RCS de hemates y leucocitos porque su CV es muy alto ( > 20% ).Recuento Celular Sanguneo

Por eso el ISCH recomienda como mtodo de referencia el recuento electrnico normalizadoEl recuento de leucocitos en cmara de Neubauer a quedado limitado a situaciones como intensa leucopenias o leucocitosis frente a las que el mtodo electrnico pierde fiabilidadCuando el conteo electrnico de plaquetas no coincide con la lmina perifricaTambin se utiliza en el recuento celular de lquidos biolgicos

Lquidos para Recuentos CelularesRecuento de Hematesa. Liquido de Hayemb. Liquido de GowerRecuento de Leucocitosa. Liquido de TurckRecuento de Plaquetasa. Oxalato de Amonio al 1%b. Clorohidrato de Procaina al 1%

Frasco DispensadorPipetas AutomticasCmara de Neubauer

L : Recuento de Leucocitos

R : Recuento de Hemates y Plaquetas RRRRR

Modo de conteo sugerido en el Hemocitmetro

No No No Si Clulas que deben ser contadas

Causas de Error en el Recuento CelularExtraccin sanguneaa. puncin capilar: no desechar las primeras gotas ( efecto sobre el recuento de plaquetas debido a su adherencia al tejido lesionado )b. puncin venosa: agitacin insuficiente de la sangre

Pipetas dilutoras o capilares mal calibradas, sucias o hmedasa. no eliminar el exceso de sangre de las paredes antes de introducir la pipeta en el liquido dilutorb. llenado incompleto o excesivo de la pipeta dilutorac. falta de suficiente agitacin de la sangre diluida en la pipeta o tiempo de reposo insuficienteEnvejecimiento del especmen ( lisis de leucocitos )

Cmara de Neubauera. no desechar las primeras tres gotasb. llenado incompleto de la cmarac. llenado en tiempos de la cmarad. empleo de un cubreobjetos inadecuadoe. clulas mal distribuidas en la cmaraf. cmara ,mal ajustada, sucia o humeda

Errores al realizar el recuento

Errores al efectuar los clculos

Recuento de Glbulos RojosLos hemates son las clulas sanguneas que contienen en su interior la hemoglobina. Los glbulos rojos son los principales portadores de oxgeno a las clulas y tejidos del cuerpo. Tienen una forma bicncava para adaptarse a una mayor superficie de intercambio de oxgeno por dixido de carbono en los tejidos. Adems su membrana es flexible lo que permite a los glbulos rojos atravesar los ms estrechos capilares.Los glbulos rojos se producen en la mdula sea, a partir de clulas madre que se multiplican a gran velocidad.La produccin de glbulos rojos esta regulada por la eritropoyetina, que es una hormona producida por el rin. Una disminucin de la oxgenacin de los tejidos aumenta la produccin de eritropoyetina, que acta en la mdula sea estimulando la produccin de glbulos rojos.

Funcin de los Glbulos rojosEl oxgeno que es necesario para producir energa en los diferentes tejidos entra en el cuerpo humano a travs de los pulmones. Atraviesa las membranas de los alvolos pulmonares y es captado por los glbulos rojos unido a la hemoglobina.Luego es transportado por el sistema circulatorio a los tejidos. El oxgeno se difunde a travs de la pared de los capilares para llegar a las clulas. Al mismo tiempo, el CO2 que producen las clulas es recogido por la hemoglobina de los glbulos rojos y es transportado a los pulmones, en donde es expulsado.

Fundamento : el recuento de hemates consiste en la determinacin del n de hemates en 1 mmc. Para ello se diluye la sangre en un lquido apropiado y luego se deposita en la cmara de recuento celular, y se procede a leer la zona estipulada.Reactivos : Lquido de hayem

- 2.5 g de sulfato sdico- 0.5 g de cloruro sdico- 0.25 g de cloruro mercrico- 100 ml de agua destilada- si hubiera precipitados, filtrarMuestra : sangre capilar o sangre con EDTA K3

Tcnica : - colocar 5 ml de lquido de hayem en u tubo- aadir 0.02 ml de sangre EDTA K3 ( retiro previamente 20 l del rvo )- dejar reposar x 5 mnutos- Cargar cmara de recuento y leer a 40x los cuadrantes correspondientes

Valores de Referencia para el Recuento de Glbulos Rojos

Valores disminuidos

Alteraciones en la dieta Anemias de diversa ndole Cncer Enfermedades sistmicas Embarazo Fibrosis de mdula sea Hemorragias

Valores aumentados

Policitemia veraCardiopatas Enfermedades pulmonares crnicas Estancias en lugares de gran altitud Poliglobulia de diferentes causas Hemoglobinopatas Tumores formadores de EPOEnfermedades renales

N GR = ( R1 + R2 + R3 + R4 + R5 ) X 10,000RBC = H X 5 X 10 X DH = GR CONTADOS EN 5 CUADRADOS MEDIANOS

D = FACTOR DE DILUCIN ( 200 ) 10,000 ?

Recuento de Glbulos BlancosLos leucocitos o GB son clulas que estn principalmente en la sangre y circulan por ella con la funcin de combatir las infecciones o cuerpos extraos; pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del propio cuerpo. Es una parte de las defensas inmunitarias del cuerpo humano.Se llaman glbulos blancos ya que ste color es el de su aspecto al microscopio.Hay diferentes grupos de glbulos blancos: los llamados polimorfonucleares (neutrfilos, eosinfilos y los basfilos) y los mononucleares (los linfocitos y los monocitos).El origen de todas las formas de leucocitos es a partir de clulas madres de la mdula sea.

La modificacin de la cantidad de leucocitos puede orientar al diagnstico de enfermedades infecciosas, inflamatorias, cncer y leucemias, y otros procesos. Por ello el recuento es muy orientativo en diferentes enfermedades. Adems el porcentaje de cada grupo de leucocitos nos ofrecer una mayor informacin para precisar un diagnstico.

Cuando en la medicin de leucocitos se ven clulas jvenes aparecen los neutrfilos en forma de ncleo en forma de bastn (cayados), y un aumento del porcentaje de los glbulos blancos polimorfonucleares, esto se denomina como desviacin "a la izquierda". ( > 800 cel pmm3 )Este trmino sugiere infecciones bacterianas agudas.

Fundamento : El recuento de leucocitos consiste en la determinacin del del n de leucocitos presentes en un volumen determinado de sangre ( 1 mmc )

Material : el mismo que para los hemates, pero la pipeta dilutora ser de shal o GB

Rectivo : lquido de Turck

- 2 ml de cido actico glacial- 1 ml de solucin acuosa de violeta de genciana al 1% o azul de metileno- 100 ml de agua destilada

Tcnica : la misma que para el recuento de GR0.28 ml ( rvo )0.02 ml ( sangre EDTA k3 )dejar reposarcargar cmara y leer a 10x

Valores de Referencia para el Recuento de Glbulos Blancos

Causas de Leucopenia

Fallo de la mdula sea (por tumores, fibrosis, intoxicacin, etc...) Enfermedades autoinmunes (Lupus, etc...) Enfermedades del hgado o rin Exposicin a radiaciones Presencia de sustancias citotxicas ( benceno y derivados )Medicamentos Tifoidea BrucelosisHepatitis infecciosa, influenza, rubolaCausas de Leucocitosis

Dao de tejidos en quemaduras Enfermedades infecciosas agudas o crnicas Enfermedades inflamatorias (por autoinmunidad-reumticas por alergia) Estrs nervioso (corticoides)Leucemia Embarazo y RNEnfermedades malignas

Medicamentos que Alteran el Recuento LeucocitarioAumentaAlopurinol Epinefrina Cortisona Cloroformo Heparina Quinina Triamterene

DisminuyeAntibiticos Anticonvulsivantes Antihistamnicos Antitiroideos Arsenicales Barbitricos Diurticos Quimioterpicos Sulfonamidas

RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOSN GB = ( L1 + L2 + L3 + L4 ) X 50N GB = L X 10 X D 4L = LEUCOCITOS CONTADOS EN 4 CUADRADOS

D = FACTOR DE DILUCIN ( 20 )

Recuento PlaquetarioLas plaquetas son clulas producidas por los megacariocitos en la mdula sea mediante el proceso de fragmentacin citoplasmtica, circulan por la sangre y tiene un papel muy importante en la coagulacin.Para ello forman nudos en la red de fibrina, liberan substancias importantes para acelerar la coagulacin y aumentan la retraccin del cogulo sanguneo.En las heridas las plaquetas aceleran la coagulacin, y adems al aglutinarse obstruyen pequeos vasos, y engendran substancias que los contraen.

Recuento de Plaquetas ( Mtodo Manual )Colocar en un tubo 12 x 75, 0.38 ml de reactivoAadir 20 l de ST anticoagulada con EDTA k3Dejar en reposo aprox. 15 minutos,hasta que se observe la muestra de color rojo cristalinoCargar la camara de NeubauerDejar en reposo x 10 mnutos en camara humedaLeer en microscopio de contraste de fase a 40X, R1 R5Multiplicar el resultado de ( R1 R5 ) por milValor Normal : 150,000 - 450,000 pmmc

Disminuye

Coagulacin intravascular diseminada (C.I.D) Anemia hemoltica microangioptica Hiperesplenismo (exceso de funcin del bazo) Disminucin de la produccin en el caso de anemia aplstica, Invasin de la mdula sea por enfermedades malignas como leucemias, neuroblastoma, linfoma. Quimioterapia por cncer Prpura trombocitopnica idioptica (PTI) Leucemia Prtesis de vlvula coronaria Transfusin de sangre Choque anafilctico Algunas infecciones que producen hemorragias (prpuras con trombocitopenia), en las que se hallan muy disminuidas. Aumenta

Anemia por dficit de hierro Enfermedad de Kawasaki Sndrome nefrtico Sndrome post-esplenectoma (tras extraer el bazo) Traumatismos Tumores Trombocitosis primaria LMCSindrome MieloproliferativoAnemia HemolticaInflamaciones CrnicasHemorragias Neoplasias Adrenalina o Corticoides

Hemoglobina Es el pigmento rojo de los hemates Constituye aprox. el 33% de la masa total del eritrocitoExisten aprox. 300 millones de molculas de Hb por hemateEl contenido de Hb por hemate oscila ente 27 32 picogramosEs el principal componente del citoplasma del GR y constituye aprox.El 90% del peso seco de las clulas maduras.Es la protena transportadora de oxigeno e intercambio de CO2

Funciones :Componente funcional mas importante del hemateMediante la Hb el eritrocito realiza su funcin transportadora de oxigeno ( O 2 ) desde los pulmones hacia los tejidosTransporta el CO2 en sentido inversoEn los pulmones, el O2 se fija a la Hb y da lugar a la formacin de oxihemoglobina ( HBO2 )De esta forma es transportada a los tejidos donde el O2 es liberadoLa Hb se reduce a desoxihemoglobina El catabolismo de la Hb es un proceso inherente a la destruccin natural de los hemates envejecidos por los macrfagos del SMF

Estructura : Es una protena conjugada con un peso molecular cercano a los 64,500. la molcula es casi esfrica con un dimetro mximo de 6.4 nm. Es un tetrmero que consta de dos pares de cadenas polipeptdicas ( 2 cadenas A y 2 cadenas b ) Cada una de estas tiene adosado un grupo prosttico muy coloreado, el hem, un complejo de hierro y protoporfirina. La porcin proteca se denomina Globina.

Hemoglobinas Normales Tipo de Hb cadenas etapa del desarrollo

Hb A a2b2 adulta normal (97%)

Hb A2 a2d2 adulta normal ( 3 - 3.5%)

HB F a2g2 adulta normal ( 5% ) Fetal ( 98% )

Gower I z2e2 embrionaria

Gower II a2e2 embrionaria

Portland z2g2 embrionaria

Valores Normales de la HemoglobinaEdad Rango de referencia

Recin nacido19,0 4 gr/dlA los 3 meses9,5 a 12,5 gr/dlAl ao de edad11 a 13 gr/dlEntre los 3 y 5 aos12 a 14 gr/dlDe los 5 a los 15 aos11,5 a 15 gr/dlHombre adulto13 a 16,5 gr/dlMujer adulta11,5 a 15,5 gr/dl

Determinacin de la HemoglobinaMtodo de la Cianmetohemoglobina ( ICSH OMS ) La sangre es diluida en una solucin de ferrocianuro de potasio y cianuro de potasio. El ferrocianuro de potasio oxida a la Hb a hemiglobina ( Hi; metahemoglobina ), y el cianuro de potasio provee iones cianuro ( CN- ) para formar hemiglobinocianuro ( HiCN ), que tiene un mximo espectro de absorcin de 540 nm. La absorbancia es medida de la solucin es medida en un fotmetro o espectrofotmetro a 540 nm y es comparado contra una solucin standard de HiCN.

1.Hemoglobina + ferricianuro potsico = metahemoglobina ( Hi )2.Hi + cianuro potsico = cianmetahemoglobina ( HiCN )

Solucin de Drabkin ( pH 7.0 7.4 )K3Fe(CN)6............................................ 0.200 grKCN....................................................... 0.050 grKH2PO4................................................ 0.140 grDetergente no- ionico.. 1.0 mlAgua destilada c.s.p. ........................... 1,000 ml

Detergentes no inicos : Triton X 100 ( Rohn & Haas ) Nonic 215 ( Pensalt Chemicals ) Mtodo :

Colocar en tubo 5.0 ml del reactivoAadir 20 microlitros de sangre total anticoagulada con EDTA k3Homogenizar Reposar por 10 minutos y leer a 540 nm contra blanco de reactivoRealizar clculos de conversin ( D.O. X Factor ) Hemoglobina G/L

Errores en Hemoglobinometra

Pueden ser de la muestra, el mtodo, el equipo, o el operador. Equpo : a. la exactitud de los equipos no es uniformeb. precisin en el pipeteo es indispensablec. pipeta debe estar correctamente calibrada d. las cuvetas de lectura deben ser originales y estar limpiase. el fotmetro debe estar calibrado y en la longitud de onda apropiada, o con el filtro apropiadoMuestra : a. una venipuntura inapropiada con hemoconcentracinb. una tcnica inapropiada en sangre capilarMtodo : a. reactivos correctamente almacenados ( frasco oscuro )b. es imprescindible un standard de calidad, que sea reproducible.c. soluciones turbias de HiCN Humanos : a. se requiere personal bien entrenado en la tcnicab. debe estar familiarizado con el equipoc. debe ser capaz de reconocer a que nivel del proceso se produjo un probable error.

Disminuido en :

Anemias primarias Cncer Embarazo Enfermedades renales Enfermedades autoinmunes Hemorragias Linfomas Problemas de alimentacin

Aumentado en :

Cardiopatas Deshidratacin Enfermedades pulmonares crnicas Estancias en lugares de mucha altitud

HematocritoEs el nombre que se da a la fraccin de volumen eritrocitarioEs el volumen ocupado por los eritrocitos en relacin con el volumen total de sangreEsta directamente relacionado con la concentracin de hemoglobinaEl valor diagnstico del Hto depende de que el volumen plasmtico sea normalEl hematocrito obtenido en sangre venosa es siempre inferior al obtenido en sangre capilar

Por tanto, las punciones digitales suministrarn valores ligeramente ms elevados que la puncin venosaEl Hto, la Hb y el recuento eritrocitario se relacionan entre si mediante los ndices eritrocitarios

VCM, HCM y CHCM

Estos ndices son indispensables para el estudio de la anemia

Determinacin del HematocritoEl valor de Hto se determina aplicando a la ST una fuerza de 12-15 x 103rpm por 5 mnutosSi el Hto es mayor a 0.5 g/l se debe aplicar 10 mnutos de centrifugadoEl mtodo de referencia es el micromtodo. Recomendado por la ICSH y el NCCLSTambin puede emplearse el tubo de wintrobe ( macromtodo )Se centrifuga los tubos a 2000 3000 rpm por 30 mnutosSi el Hto total es mayor a 0.55, el centrifugado debe ser 1 hora Este mtodo posee mayor inexactitud e impresicin

Ambos mtodos se basan en la medicin del empaquetamiento de la columna de eritrocitos, sometidos a una fuerza centrfugaPor eso entre sus causas de error estar siempre el plasma que queda atrapado entre los GREfecto mas notorio cuando los hemates son poco deformables

Centrifugas para Microhematocrito

12000 15000 rpm x 5 minutos

Causas de error en la determinacin del hematocrito por centrifugacinEmpleo de una relacin sangre:anticoagulante incorrecta ( retraccin del hemate ) del HtoPoca cantidad de anticoagulante Extraccin defectuosa de la sangre (hemoconcentracin )Retraso mayor a 6 horas despus de la extraccin ( falso aumento del Hto )Cuando la sangre se obtiene directamente de un catter ( dilucin )

Temperatura elevado y se utiliza heparinaEmpleo de una fuerza centrifuga insuficienteTiempo inadecuadoRecalentamiento de la centrifuga a > 40C ( hemlisis )Error en la identificacin del tuboCapilar inadecuadoHomogenizacin defectuosa de la muestra antes de llenar el capilar

Valores normales de Hematocrito Recin nacido 55 a 68%. Recin nacido de 1 semana 47 a 65%. Recin nacido de 1 mes 37 a 49%. Recin nacido de 3 meses 30 a 36%. Nio de 1 ao 29 a 41%. Nio de 10 aos 36 a 40%. Mujer adulta 38 a 46%. Hombre adulto 42 a 54%.

ndice Bajo

Anemia Fallos en la mdula sea (Radiaciones, toxinas, fibrosis, tumores, etc...) Embarazo Hemorragias Hipertirodismo Hemolisis (destruccin de glbulos rojos), por una transfusin Leucemia Problemas de alimentacin Artritis reumatoide

ndice Alto

Cardiopatas Deshidratacin Eclampsia (en el embarazo) Enfermedades pulmonares crnicas Exceso de formacin de hemates (Eritrocitosis) Policitemia vera Choque (shock)

Volumen Corpuscular Medio :

Es el valor medio del volumen de los hematesSe calcula a partir de los Hematocrito y del recuento del nmero de hemates

HCT VCM = x 10 = fml ( 10-15 L ) RBCHemoglobina Corpuscular Media :

Es el valor medio del contenido de Hemoglobina en los hematesSe calcula a partir de la concentracin de Hb y del nmero de hemates

Hb HCM = x 10 = pg ( 10-12 g ) RBC

Concentracin de la hemoglobina corpuscular media :

Es el valor de la cantidad de hemoglobina en gr contenido en un dl de hematesSe calcula a partir de la concentracin de hemoglobina y del hematocrito

Hb CHCM = x 100 = g/dl HCTValores Normales :

VCM = 80 - 88 femtolitros ( fml )

HCM = 27 - 32 picogramos ( pg )

CHCM = 32 - 36 g / dl Importante :

En la actualidad no se recomiendaaplicar constantes corpusculares a los mtodos manuales, debido asu alta impresicin

Formula DiferencialEs la denominacin usual que se da al recuento porcentual de los diferentes leucocitos que circulan en la sangreSe basa en la observacin microscpica de 100 a 200 clulas convenientemente teidasEs muy importante una correcta tcnica en el momento de realizar el frotis sanguneoEl frotis debe constar de las tres partes conocidas como : cabeza, cuerpo y colaEs en este ltimo donde se debe realizar la lectura de los elementos formes de la sangreEl frotis debe ser una pelcula delgada, que permita leer a travs de ella Al momento de realizar el frotis se debe tener en cuenta el valor del hematocritoDe acuerdo a ello se aplicar el ngulo adecuado al realizar el frotisUn frotis muy grueso dificultar la identificacin de las clulas y alterar la adecuada distribucin celular

Cabeza Cuerpo Cola Frotis Sanguneo

Eritrocito

Neutrfilo

Nios Valores de referencia de los diferentes tipos de leucocitos

Recin nacido1 semana 1 mes 2 aos4 aos10 aosAdultos Neutrfilos Relativo ( % )Absoluto ( x 109 /L )509394,7283,1403,6514,155 752,5 7,5EosinfilosRelativo ( % )Absoluto ( x 109 /L )20,3620,3630,3330,2730,241 40,05 0,5 BasfilosRelativo ( % )Absoluto ( x 109 /L ) 0.60,1080,40,050,40,0440,60,0540,50,040,2 1,20,01 0,15LinfocitosRelativo ( % )Absoluto ( x 109 /L )315,6414,95606,6504,5383,0417 451,5 4,5MonocitosRelativo ( % )Absoluto ( x 109/L )61,191,150,5550,4540,322 80,2 0,8