galeria api 20e

Galeria API 20E(Sistemas de identificacin multipruebas)La batera de pruebas API20E es un sistema de identificacin rpida para bacterias de la familiaEnterobacteriaceaey otras bacterias Gram -. Bsicamente consta de 21 tests bioqumicos estandarizados y miniaturizados, y una base de datos. Este sistema presenta las ventajas de ser rpido, eficaz y de permitir realizar numerosas pruebas a la vez. Cada tira de API 20E contiene 20 microtubos o pocillos con distintos sustratos deshidratados. Cada tubo es una prueba bioqumica distinta. La prueba nmero 21, la oxidasa, se hace de forma independiente a la tira.

Las pruebas de que consta la galeria son las siguientes:PruebaReaccin / Enzimas

ONPGBeta-galactosidasa

ADHArginina deshidrolasa

LDCLisina descarboxilasa

ODCOrnitina descarboxilasa

CITUtilizacin del citrato

H2SProduccin de H 2 S

UREUreasa

TDATriptfano desaminasa

INDProduccin de indol

VPProduccin de acetona (Voges-Proskauer)

GELGelatinasa

GLUFermentacin/oxidacin de glucosa

MANFermentacin/oxidacin de manitol

INOFermentacin/oxidacin de inositol

SORFermentacin/oxidacin de sorbitol

RHAFermentacin/oxidacin de ramnosa

SACFermentacin/oxidacin de sacarosa

MELFermentacin/oxidacin de melobiosa

AMYFermentacin/oxidacin de amigdalina

ARAFermentacin/oxidacin de arabinosa

OXCitocromo oxidasa

A patir de una colonia bien aislada del microorganismo, hacer una suspensin en 5 mL de solucin salina (1% de NaCl) o 5 mL de agua estril.

Llenar con la suspensin de bacterias los tubos, no la cpula (cada pocillo tiene un tubo y una cpula, parte aerobia), de todos los pocillos.

Llenar la cpula de los pocillos CIT , VP, GEL con la suspensin de bacterias.

Cubrir con parafina las cpulas de los pocillos ADH, LDC, ODC, URE, H2S para obtener anaerobiosis.

Poner la tira en su propia cmara hmeda de incubacin. Previamente poner agua en los alvolos de la cmara para proporcionar una atmsfera hmeda durante la incubacin.

Incubar a 37 C durante 18-24 h.

Tras la incubacin se anotan los resultados inmediatos, es decir, los que no requieren ser revelados.Determinadas pruebas requieren ser reveladas, para el revelado se tienen que tener en cuenta dos criterios: Si la glucosa da negativo y los tests positivos son dos o menos de dos, no hay que aadir reactivos. Cuando sto ocurre se hacen otros tipos de API como el API 20NE, API OF, el API M o el API 10S para ver determinados metabolismos especiales. Si la glucosa es positiva y/o tres o ms tests son positivos se revelan los test que requieren reactivos:TDAAadir una gota de FeCl310 %.VPAadir una gota del reactivo 1 (KOH al 40%) y una gota del reactivo 2 (C2H5OH).INDAadir una gota de reactivo de Kovacs o de Dimetilamino-cinamaldehido.OxidasaAadir una gota del reactivo (tetrafenilendiamina) recin preparado.

InterpretacinLa lectura de los resultados se lleva a cabo por comparacin de los colores de cada pocillo con los de las tablas de lectura, y anotando el resultado como positivo o negativo (ms adelante se explicar con detalle).PruebaReaccin / EnzimasNegativoPositivo

ONPGBeta-galactosidasasin coloramarillo

ADHArginina deshidrolasaamarillorojo o naranja

LDCLisina descarboxilasaamarillorojo o naranja

ODCOrnitina descarboxilasaamarillorojo o naranja

CITUtilizacin del citratoverdeazul oscuro o turquesa

H2SProduccin de H 2 Ssin precipitado negroprecipitado negro

UREUreasaamarillorojo o naranja

TDATriptfano desaminasaamarillomarrn-rojo

INDProduccin de indolamarillocolor rosa o anillo rosa-rojo

VPProduccin de acetona (Voges-Proskauer)sin colorrosa-rojo

GELGelatinasasin difusindifusin de pigmento

GLUFermentacin/oxidacin de glucosaazul o verdeamarillo

MANFermentacin/oxidacin de manitolazul o verdeamarillo

INOFermentacin/oxidacin de inositolazul o verdeamarillo

SORFermentacin/oxidacin de sorbitolazul o verdeamarillo

RHAFermentacin/oxidacin de ramnosaazul o verdeamarillo

SACFermentacin/oxidacin de sacarosaazul o verdeamarillo

MELFermentacin/oxidacin de melobiosaazul o verdeamarillo

AMYFermentacin/oxidacin de amigdalinaazul o verdeamarillo

ARAFermentacin/oxidacin de arabinosaazul o verdeamarillo

OXCitocromo oxidasa

Del conjunto de reacciones y resultados se obtiene un perfil numrico de 7 cifras. Los pocillos estn separados en grupos de tres: en total tenemos 7 grupos de tres tubos o tripletes (el test nmero 21 corresponde al test de la oxidasa).Para obtener el perfil nmerico de 7 cifras, a cada pocillo se le dar el valor 0, 1, 2 4, de acuerdo a los siguientes criterios: Si la reaccin es negativa se pone 0. Si la reaccin es positiva se pone: 1 si es el primer pocillo de un triplete, 2 si es el segundo, 4 si es el tercero. Se suman los valores de cada triplete, con las sumas de los siete tripletes se obtiene un cdigo de 7 cifras.

Con este cdigo se busca en la tabla de identificacin la especie de que se trata, para realizar esta operacin hay programas informticos.

Perfiles numricos.0104140Shigella flexneri

0104452Salmonella paratyphi A

0104504Pasteurella multocida

0104521Yersinia enterocolitica

0140004Pasteurella multocida

0144042Shigella boydii

0206042Acinetobacter calcoaceticus

0210004Achromobacter sp.

0210004Alcaligenes faecalis

0210004Alcaligenes sp.

0314000Proteus mirabilis

0504512Salmonella paratyphi A

0676001Proteus vulgaris

0776000Proteus mirabilis

1000004Pasteurella sp.

1014743Klebsiella ozaenae

1104112Shigella sonnei

1214012Yersinia pseudotuberculosis

1214773Klebsiella pneumoniae

2206004Pseudomonas aeruginosa

2504752Salmonella spp.

3005573Enterobacter cloacae

3246527Aeromonas hydrophilia

4004550Salmonella cholerasuis

4004550Salmonella typhi

4104100Salmonella gallinarun

4357106Vibrio parahemolyticus

4404112Salmonella gallinarum


4404540Salmonella tiphy

4504010Salmonella pullorum



5004024Pseudomonas cepacea

5044124Vibrio cholerae

5046753Serratia odorifera

5100100Yersinia ruckeri

5104111Hafnia alvei

5104542Salmonella arizonae

5144572Escherichia coli

5207323Serratia rubidae

5255573Klebsiella oxytoca

5346761Serratia marcescens

5314173Enterobacter gergoviae

5317761Serratia marcescens



6004540Salmonella typhi

6144204Plesiomonas shigelloides





6704532Salmonella spp

6704752Salmonella gallinarum

7244126Aeromonas hydrophila

7305773Enterobacter cloacae



galeria api 20e

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