1963 4. Anatyse von biologischem Material 455

~am Stelle eines Photoelektrocolorimeters wird das 10fach empfindlichere Sloektro- [photometer SF-4 bei genau eingestelltem lO~ der Enditiissigkeit verwendet. I)ie i2eagentien shad mit bidest. Wasser bereitet. -- Arbeitsweise. Man pipettiert 0,1 ml Fingerbeerenblut in ein 0,5 ml 0,9% ige NaCl-L6sung enthaltendes 4 cm langes Zentrifugenglas, versetzt sofort mit 0,5 ml 10~ Trichloressigs/~ure (TCES), mischt urld zentrifugiert nach 20 rain. Der i)-5ers~ancl wird ir~ ein zweites Zentri- fugenglas dekantiert, der Riickstand mit 0,5 ml 3~ TCES gewaschen. Nach neuerlichem Abschleudern werden beide Zentrifugate vereinigt. -- Zur Ent[ernung yon BegleitstoMen wird eine Adsorption bei genau 9H 5 ausgefiihrt; enth~lt das Filtrat nur wenig an adrenalin~.hnlichen Substanzen, so wird das loll dutch vor- sich~ige Titration mit 0,5 n Ammoniak eingestellt. Hierauf verse~zt man die L6sung mit 0,5 ml gut durchgeschiitteltem Adsorbens (siehe unten), wirbelt auf und zentrifugier~. [Das Zentrifug~ wird in ein sauberes Zentrifugenglas tibertragen und mit 0,5 ml Adsorbens versetzt. Nun warden Adrenalin uM damit verwandte NtoHe adsorbiert; wie folgt: Man bringt das log dutch Zusatz yon 0,1 ml 1 n Ammoniuk auf 8--8,5, miseht, zentrffugiert, gieBt den Uberstand ab und entfernt dessen I~este dutch Auskiploen des Zentrifugenglases auf Filtrier10apier; man wiiseht den Nieder- scMag mit 0,5 ml redest. Wasser, ohne durehzumischen, zentrifugiert und entfernt das Waschwasser sorgfMgig. ])er Niederschlag (e~wa 0,2 ml) wire[ mit 0,6 ml redest. Wasser his zu einem Ges~m~votumen yon 0,8 ml verse~zt, darm mit 0,I4 ml I n Schwefels&ure, naeh 2 rain mit 0,8 ml NaHSOa-L6sung (2 g Na2S03/10 ml, davon 2 ml in 14 ml 50~ Schwefels~ure) und 0,3 ml ArsenomolybdatlSsung (siehe unten). Naeh jedem Reagenszusatz wird gemiseht, dann 10 rain im koehenden Wasserbad und 60 rain in kaltem Wasser belassen, l)ie spektrophotometrische Bestimmung wird bei 630 nm in Kiivetten yon 1 em z Quersehnitt ausgefiihrt. Unter der Kiivette wird ein 3 mm hoher I)ichtungsring angebracht, Parallel mit den Proben warden 2 Kontrolten angese~z~, d/e 0,5 ml 0,9o/~ige NaCt-L6sung und so viel 0,5 n Ammoniak enthalten als zur Einstellung der Versuehsprobe auf pt~ 5 verbraueh~ wurde. Darm stellt man das px der Kongrolle dm'ch Neugralisieren mit 5~ TCES auf 5 ein trod verf~hrt weiterhin wie mig den Versuchsproben. Der Gehalt an ,,adrenalini~hnlichen Substanzen" wird in Adrenalin ausgedriiekt. Die Standardproben sollen einer Adrenalinkonzentration im Blur yon 10#g-0/0 adrenalinghnlichen Substanzen entsprechen. Ein Umrechnungsfaktor ist an- gegeben. -- Arsenmolybgc~tg~sung. Man I6st 60 g krist. Na2~oO ~ und 10 g NasAsO~ in 250 ml Wasser, filtriert, wgschg das Filter aus und setzg 5 ml Bromwasser (1 Tr. auf 250 ml Wasser) zu. Das Filtrat wird in einem Megkolben mit Wasser auf 500 ml aufgefiillt und einert Tag im Dunkein aufbewahrt. Vor Gebraueh warden 10 ml dieser L6sung mit 0,8 ml konz. Sohwefelsgure gemiseht. -- Adsorbens [AI(OH)3 ]. Man 16s~ 25 g Kalium-Aluminiumalann unter Erwgrmen in 200 ml Wasser, lggg auf Zimmertemperatur erka,lten tmd setzt tropfenweise 20 ml 25% ige Kalilauge unter M'gf~igem S&/itgeIn zu. Der entstandene Niedersehlag wird in einem groflen GeNii mit Schliffstopfen 10real mit Wasser gewasehen, wobei man jedesmal nazh Ab- sitzen des Niedersehlages dek~ntierg. Des Endvolumen des Adsorbens betr~gt 200 ml.

z Lab. I)elo 8, Nr. 5, 26--30 (1962) [t~ussisch]. Laborat. f. neuro-humorale t~egulierung des Inst. f. h6here Nervent~tigkeig der Akad. Wiss. der UdSSI~, Moskau (UdSSl~). -- 2 ]3iochem. J. 32, 19 (1938). P. I t ~ s

Fiir die Bestimmung yon Adrenal in und Noradrenalin baut A. S. S~_~ov ~ ein t~Iuorimeter sowjetischer Bauart (iY~oskip E'F-3) ~uf die 10-- 15fache Empflndlichkeit urn. Die im Original abgebildete und eingehend beschriebene Anderung der elektroni- schen Verst~rkeranlage ermSglicht die fluorimetrische Bestimmung der beiden Stoffe.

Lab. Delo 8, Nr. 6, 53--55 (1962) [t~ussisch]. Inst. f. hShere Nervent~tigkeit u. Neurophysiologie, Akad. Wiss., Moskau (UdSSt~). P. ga~s