familia micobacteiaceae-clase (1).ppt

7/22/2019 FAMILIA MICOBACTEIACEAE-clase (1).ppt

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CLASIFICACION TAXONOMICA

Dominio: Bacteria

Filo: Actinobacteria

Orden: Actinomycetales

Suborden: Corynebacterineae

Familia: Mycobacteriaceae

Gnero: Mycobacterium.


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Caractersticas GeneralesAerobias estrictas (excepto en estado latente)

No mviles

Pared celular rica en lpidosM. tuberculosissu nico hospedero es el humano

Tiempo de replicacin muy lento, 15-20 horas

Clasificacin: Complejo Tuberculoso: Niacina y nitritos positivos,

catalasa a 68C negativa


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CARACTERISTICAS


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PARED CELULAR

PECTIDOGLICANO

POLIMEROS DE ARABINOSA Y GALACTOSA.ACIDOS MICOLICOS

LIPIDOS SUPERFICIALES: Cord factor

Micosidos

Sulfolipidos.


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PARED CELULAR MICOBACTERIAS


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Pared celular micobacterial: 1-lpidos externos, 2-cido miclico,

3-polisacridos (arabinogalactano), 4-peptidoglicano, 5-membrana

plasmtica,

6-lipoarabinomanano (LAM), 7-fosfatidilinositol manosido, 8-paredcelular.


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CARACTERISTICAS GENERALES

BACILOS ACIDOALCOHOL RESISTENTE

AEROBIAS Y NOMOVILES

POSEEN PAREDCELULAR

NO TIENEN:ENDOSPORA,CAPSULA

GLICEROL COMOFUENTE DE CARBONO

EN PRESENCIA DESALES MINERALES

UTILIZAN AMONIACOCOMO FUENTE DE

NITROGENO PARA SUCRECIMIENTO

LA MAYORIA SON DECRECIMIENTO LENTO


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COMPLEJOS

TUBERCULOSISM. tuberculosis

M. bovis

M. africanum

COMPLEJO LEPRAM. Leprae

M. Lepraeemurium

MICOBACTERIAS ATIPICAS

M. kansassi-intermedium-marinum

Scrofulaceum-xenopi-avium-Intracelular

Fortuitum y chelonei-gordonae-szulgai

GENEROS


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Epidemiologa

El mtodo ms efectivo de control de la TB es labsqueda activade casos bacilferos y su

tratamiento, ya que desde el punto de vistaepidemiolgico la infectividad del pacientedisminuye en forma importante a las pocassemanas de iniciado un buen tratamiento, y por el

contrario un paciente bacilfero infecta de 10 a 15personas por ao.


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ANTIGENICIDAD

LIPIDOS Cord factor

PROTEINAS TuberculinaMICOBACTINAS

EXOQUELINAS


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Determinantes de patogenicidad

Factor cordn: Adoptan la forma serpenteante constituido porbacilos que se disponen de manera paralela y compacta, eldesarrollo en cordones puede correlacionarse con la presencia delglucolipido trehalosa 6,6dimicolato.

Sulfatados: Son glicolpidos localizados de forma perifricaresponsables de la reactividad al rojo neutro, aunque lossulfatados no son txicos pero cuando se administran de formasimultanea con el factor cordn potencia de manera sinrgica latoxicidad de este.

Intracelularidad: promover su propia supervivencia dentro delhusped actuando desde el interior de los fagosomas paraprevenir la formacin de los fago lisosomas con lo que evita suexposicin a enzimas hidrolticas ( lizosomicas).


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MYCOBACTERIUM - TUBERCULOSO

CUADRO CLINICO

Se establece en tres fases:INFLAMACION

FORMACION DEL TUBERCULO

CACEIFICACION


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CUADRO CLINICO

ESTADIOS

PRIMO-INFECCION REINFECCION


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Ciclo de vida


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Patognesis Durante la fase de invasin tisular, el transporte de microorganismos

por el macrfago a travs de la pared alveolar, permite el acceso delbacilo a la sangre a travs de la va linftica.

Este perodo de micobacteremia le proporciona al microorganismo elacceso y posibilidad de permanecer en el sistema mononuclearfagoctico y sitios que le proveen un medio ambiente favorable (altapresin de oxigeno) , como es el rea apical de los pulmones y sitios conalto flujo sanguneo como nodos linfticos, riones, epfisis de huesoslargos, cuerpos vertebrales y reas menngeas.

La reactivacintarda de estos focos da origen a la tuberculosisextrapulmonary a la forma pulmonar apical de ms frecuentepresentacin.


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Patognesis

Las vas de entrada del bacilo tuberculoso al organismo sonla inhalacin, ingestin e inoculacindirecta. La msimportante es la inhalacin de partculas infectantesexpulsadas por medio de la tos de un paciente bacilfero.Partculas mayores de 10 m son filtradas en la nariz y

menores de 5 m evitan las barreras mecnicas y puedenpenetrar y depositarse en la superficie respiratoria.

La respuesta inmune celular efectiva, cura la lesinprimaria espontneamente con calcificacin del foco

parenquimatoso (Foco de Gohn y ndulos hiliares)constituyendo el complejo de Ranke.


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Patognesis

Los linfocitos T, sensibilizados con antgenos delM. tuberculosis

determinan la aparicin del fenmeno de hipersensibilidad retardadamedida a travs de la prueba de tuberculina.

Los linfocitos (especficamente CD4) de individuos con fuertehipersensibilidad retardada, son capaces de producir linfoquinas queactivan la capacidad microbicida del macrfago y junto con el linfocito

organizan el granuloma, el cual sirve para detener la infeccin, reducirel crecimiento del bacilo y restringir la movilidad de los macrfagosinfectados, evitando la diseminacin de la infeccin.

En individuos con inmunodeficiencia como la producida por infeccinpor VIH,hay falta de formacin de granuloma y no se restringe la

movilizacin del macrfago infectado, resultando en la tuberculosismiliar o de diseminacin hematgena.


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Manifestaciones

clnicas. Debilidad

Malestar general

Perdida de peso

Perdida del apetito

Fiebre de predominio visceral

Sudoracin nocturna

El compromiso particular pulmonar

caractersticamente se asocia a tos hemoptoica(tos con expectoracin y presencia de sangre)Dolor Torxico


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Formas Clnicas

La entrada del bacilo al organismo produce la PRIMO-INFECCION TUBERCULOSA, con lesiones generalmentelimitadas, pero con persistencia de bacilos en formalatente, sin multiplicacin, pero que se expresan en unaprueba de tuberculina positiva en pacientes asintomticos.

Estas lesiones pueden permanecer inactivasel resto de lavida, o sufrir reactivacinposterior cuando el estadoinmune del husped lo permita.

La mayor parte de los casos de ENFERMEDADTUBERCULOSA son producidos por la reactivacinendgena y menos frecuentemente por nueva infeccin oinfeccin exgena, la cual puede ser reconocida por lacaracterizacin del genotipo delM.tuberculosis.


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Presentaciones clnicas Tuberculosis pulmonar.

Tuberculosis menngea.

Tuberculosis extra pulmonar.

Tuberculosis milliar.

Tuberculosis linftica.

Tuberculosis genitourinaria.

Tuberculosis gastrointestinal.


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Formas Clnicas

L a forma pulmonar es a mas frecuente, pero el compromiso extrapulmonares la mas frecuente en pacientes con algn factor de inmunosupresin.

Las manifestaciones clnicas de la tuberculosis pueden ser:

Sistmicasrelacionadas con la infeccin por s misma (fiebre, malestargeneral, prdida de peso, diaforesis nocturna, anorexia, adinamia, anemia,leucocitosis o leucopenia.

Localesdeterminadas por el rgano o sistema comprometido.

Metablicascomo hiponatremia por secrecin inapropiada de hormonaantidiurtica y anormalidades neurosicolgicas como depresin.


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Patognesis en Tuberculosis

10% de personas que se infectan con Tb y tienen unsistema inmune normal desarrollarn Tb en algnmomento de su vida

Pacientes con HIV tienen el mayor riesgo dedesarrollar Tb, 7-10% cada ao

Otras patologas tambin incrementan el riesgopara que la infeccin progrese a enfermedad.


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El Panorama Actual de la Tuberculosis en el

Mundo

Un tercio de la poblacin mundial est infectado conel baciloM. tuberculosis.

7.5 millones de casos nuevos por ao

Se presentan 2,8 millones de muertes por ao


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Problema Actual

Aumento en el nmero de casos

Fallas en los programas de salud pblica que manejan lavigilancia de casos y controles

La no supervisin del tratamiento (TAS-DOTS)

Retardo en el diagnstico tanto clnico comomicrobiolgico

Aumento de la resistencia a medicamentos tradicionales

Disminucin de las posibilidades teraputicas


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MDR - XDR

MDR: aislamiento resistente al menos a isoniazida yrifampicina

XDR: aislamiento MDR con resistencia a la quinolona (ofloxacina, ciprofloxacina) y algunos de losinyectables: kanamicina, amikacn o capreomicina


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Plan Nacional de Salud pblicaColombia 2007-2010

Estrategias para disminuir los riesgos para las

enfermedades transmisibles y las zoonosis:

Implementar el Plan EstratgicoColombia Libre de TB 2006-2015


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Metas Mundiales y Adoptadas en losNiveles Nacionales

2005:

Diagnosticar al 70% de los casos TBP Bk+

Curar al 85% de los casos TBP Bk+

2015 (objetivos de desarrollo del milenio)

Disminuir de forma significativa la prevalencia ymortalidad

2050

Eliminar la TB como un problema de saludpblica (


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Desafos del Control de TB

Pobreza Desnutricin

Poblaciones vulnerables

Indgenas

Desplazados

Poblacin carcelaria y penitenciaria

Coinfeccin TB/VIH MDR- XDR TB

Reformas del sector salud


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Niveles de LaboratorioNivel I:

Recoge muestras y realiza baciloscopia y remite muestras a nivelsuperior.

Nivel II: Realiza baciloscopia

Cultivos en medios a base de huevo

IdentificaM. tuberculosis

Pruebas de sensibilidad a primera lnea

Nivel III: Mismos procesos del nivel II mas:

Mtodos de cultivo diferentes a a LJ O OK

Identificacin de MNT

Sensibilidad a medicamentos de primera y segunda lnea


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DIAGNOSTICO

PRUEBA DE

TUBERCULINA

RADIOGRAFIA DE

TORAX

MICROBIOLOGIA

Baciloscopia

Cultivo

Tcnicas moleculares


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Elementos en el Diagnstico de

Tuberculosis

SINTOMTICOS RESPIRATORIOS

Historia Clinica

Examen fisico

tuberculina

Estudios radiolgicos

Baciloscopia: Examen directo con coloracin parabacilos cido alcohol resistentes

Cultivo


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Proceso de la Muestra en el Laboratorio

+

CDMGIT

Centrifugacin 4C

Incubacin

IdentificacinFenotpica-Genotpica

MGIT LJ

AR

PulmonaresDescontaminacin:

NaOH 4%Mucoltico: N-acetyl cistena

Estriles siembradirecta

Sedimento

Inocular


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PulmonaresDecontaminacin +

CD MGIT

Extra-pulmonares

Muestra

Centrifugacin

Incubacin

Identificacin

MGIT LJAR

AR

Proceso de las muestras

KY

Incubacin 36C


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Adenosin Deaminasa (ADA)

Citoquinas

Enzima producida por linfocitos Evaluada extensamente en tuberculosis pleural, peritoneal,

meningitis

Citoquinas: Interferon y TNF

Mtodos rpidos, simples, no invasivos Poca precisin si se utilizan como nica prueba


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PRUEBA DE TUBERCULINA

INYECCCION INTRADERMICA:

SU POSITIVIDAD INDICA:

Seguridad de proteccin

Vacunacin previa

Riesgo de desarrollar enfermedad por reactivacin

INDURACION MAYOR DE 10 mm de dimetro, consintomatologa Enfermedad actual.


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DIAGNOSTICO

POSITIVA +10 mm

DUDOSO 5-9 mm

Tiempo de

Lectura 72 horas


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MUESTRAS PARA INVESTIGAR

Mycobacterium ESPUTO

LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO

ORINA BIOPSIAS

MUESTRAS DE PIEL

ASPIRADOS BROCOALVEOLARES

OTROS LIDQUIDOS ORGANICOS

PIEL


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MEDIOS DE CULTIVO

INVESTIGACION DE MICOBATERIAS

LOWENSTEIN JENSEN

OGAWA KUDOH STONENENBRING

MIDDLEBROOK

AGAR y CALDOS 7H9 -7H10 Y 7H11.


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Factor CordnM.tuberculosis

Agar CDFactor CordnM.tuberculosis

Colonia MTB en LJ


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Colonia MTB en LJ

Niacina

+ -

Reduccin de Nitratos

+ -+

Cat 68CPirazinamidasa

Pruebas bioqumicas


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Mtodos para Deteccin Rpida de

M. tuberculosisa partir de la Muestra

Amplificacin de cidosnuclecos Sistemas capaces de detectar

pequeas cantidades de materiagentico (secuencias de DNA

PCR (IS6110) Secuenciacin (gen 16S rRNA) Sondas. Genes de resistencia (rpoB, Kat G)

Roche: AmplicorMycobacteriumtuberculosis test

The Gen-Probe AmplifiedMycobacterium tuberculosis Direct Test(MTD)

The BD ProbeTec (multiplex strand

displacement system) INNO-LIPA PCR casera Otros genes de resistencia:MBP64, rpob,

hsp65

PCR sensibilidad en muestras Bk +: 90100% y en muestras Bk-: 6070%


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TRATAMIENTOFARMACOS

ISONIAZIDARIMFAMPICINA

PIRAZINAMIDA

ESTREPTOMICINA

ETHAMBUTOL


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Pruebas de Sensibilidad

Mtodo de las

proporciones

Directa

Indirecta

MGIT 960

Bactec 460*

Alamar Azul

Nitrato Reductasa

Dx Molecular

Genes de resitencia:

Rpob: Rifampicina

KG: Isoniazida


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Mtodo Proporciones directasM. tuberculosis , INH (R), RIF (R), 8 Das

ACD+PNB

ACD+INH ACD+RIF

ACD


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Proporciones Indirecto


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Proporciones Indirecto


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Micobacterifagos Micobacterifagos (D29) s una

metodologa rpida que puedeser aplicada directamente a la

muestra, no requiere deinfraestructura especial y su

costo es bajo. Adems ha sidoaplicado con xito en ladeteccin de resistencia,

especialmente la resistencia arifampicina


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Nuevas Pruebas para el Diagnstico de

Tuberculosis Activa

Las limitaciones de la microscopa y el lentocrecimiento en los medios tradicionales para hacer

diagnstico de infeccin por M. tuberculosis, hahecho que todas las herramientas nuevas estnenfocadas en buscar un a metodologa ideal:

La prueba ideal sera aquella que permitiera una

identificacin temprana del bacilo y el diagnsticorpido de su sensibilidad especialmente laidentificacin de los aislamientos MDR


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PRESENCIA DE BAAR Y PMN


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Mtodos para Aislamiento de

Micobacterias Coloracin para BAAR:

Auramina Rodamina (AR) Kinyoun

Cultivo: Lowenstein-Jensen (LJ) Middlebrook 7H11

(capa delgada: CD) Sistema MGIT:

Positivos: Subcultivos a CD Coloracin para BAAR

32C - 37C


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MICOBACTERIAS ATIPICAS

MYCOBACTERIAS

ATIPICAS

CARACTERISTICAsMORFOLOGIA COLONIASPRODUCCION DE PIGMENTO

VELOCIDAD DE CRECIMIENTO

CUADRO CLINICOINFECCION PULMONARADENITIS CERVICALES

INFECCIONES EN PIEL

INFECCIONES TEJIDOS

BLANDOS

DIAGNOSTICOCLINICO

RADIOLOGICO

MICROBIOLOGICO

MOLECULAR


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PARAMETROS PARA CLASIFICACION

1. MORFOLOGIA DE COLONIAS

2. PRODUCCION PIGMENTO FOTO Y ESCOTO

3. VELOCIDAD DE CRECIMIENTO


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Grupos Establecidos

GRUPO I Fotocromogenas GRUPO II Escotocromogenas

GRUPO III No fotocromogenas

GRUPO IV Crecedores rapidos

Crecedores lentos.


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Clasificacin de Micobacterias segn el riesgo de

infeccin en humanos*

Grupo Riesgo IM. gordonae M. tokaiense M. flavescens

M. smegmatis M. gastri, M. terrae

M. mucogenicum M. chitae M. parafortuitum

M. hassiacum M. triplex M. phlei

M. hiberniae M.triviale M. obuense

M. hodleri M. vaccae. M. confluentis.

M. nonchromogenicum, M. porcinum ,M. cookii

M. Interjectum M. branderi M. gilvum

M. aurum M. madagascariense M. sphagniM. Moriokaense M. neoaurum . M.gadium

Grupo Riesgo II M. celatum ,M. chelonae ,M. fortuitum ,M. avium,M. abscessus, M. xenopi, M. malmoense,

M. intracellulare, M. haemophilum, M. kansasii

M. paratuberculosis, M. genavense

M. marinum, M. ulcerans, M. peregrinum,M. scrofulaceum, M. szulgai

Grupo Riesgo IIIM. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti,

M leprae

*Pract ical handbook fo r the phenotypic and genotyp ic ident i f icat ion of mycob acter ia


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Toma de Muestra Muestras recomendadas:

Biopsias En tubo tapa rosca y estril (seco)

Material obtenido por puncin Tubo tapa rosca y estril

Muestras No recomendadas

Aplicadores de algodn


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Recomendaciones Confirmar diagnstico de infeccin por MNT

siempre con cultivos, con la identificacin de laespecie

Correlacionar los resultados del laboratorio conotros hallazgos (epidemiologa, clnica,histopatologa)

Realizar pruebas de sensibilidad

Terapia con antibiticos especfica + drenaje y/oreseccin


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Clasificacin Fenotpica:

Tiempo de crecimiento Caractersticas morfolgicas

Produccin de pigmento

Morfologa de colonia Reacciones bioqumicas HPLC (perfil de cidos miclicos)

Genotpica: Deteccin de regiones altamente conservadas dentro del genoma

Deleciones, inserciones que son especie especficas Clasificacin por secuenciacin del gen 16S rRNA PCR del gen hsp 65con Enzimas de restriccin (PRA)


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Lesiones


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Toma de Muestras


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Microcolonias NT


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Identificacin Fenotpica

Mic

rocolonias

M.fortui tum M.chelonae

M.tuberculosis

M.avium

M.tuberculosis


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Cromatografa Lquida de Alta Presin

HPLC HPLC analiza la

composicin de los cidosmiclicos de la pared de la

micobacteria, cada especietiene un perfil especficode cidos miclicos. Es un

mtodo con altasensibilidad y

especificidad. Sulimitacin los altos costosdel equipo y personal

altamente especializado.


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Identificacin inicial

Tiempo decrecimiento

No cromgeno:No produce pigmento

Fotocromgeno:Produce pigmento en presencia de luz

>7 das: LENTO< 7 das: RPIDO

Escotocromgeno:Produce pigmento en luz y oscuridad


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Identificacin FenotpicaArylsulfatasa

Positiva Negativa

R. Nitratos

Positivos Negativos

NaCl

Positivo Negativo

Manitol

Positivo negativo

M. peregrinum M. fortut i tum

Positivo

M. chelonae

M. abscessu s

Cto. 45C

Positivo Negativo

M. smegmatis M. chitae

Cto. 32C

Crecedores Rpidos-No pigmentados


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Identificacin FenotpicaNitratr Reduction

Positive Negative

UreaseGrow NaCl

Negative

M. gordonae

Positive

M. scrofulaceum

Grow 45Cpositive

M. xenopi

Negative

Positive

M. flavesc ens*

M. szulg ai

Crecedor Lento - Escotocromgeno


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Nitrate Reduction

Positive Negative

Urease

Positive Negative

M. asiat icumTween H

Positive Negative

M. marinum M. simiae

Tellurite R

Positive Negative

M. Szulgai* M. kansasii

Crecedor Lento - Fotocromgeno


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Cultivos Rpidos en Medio Lquido Estos sistemas miden cambios en la presin de gases como la

produccin de dioxido de carbono, el consumo de oxigeno. Hacen un monitoreo continuo del cultivo

Multiples estudios han mostrado las ventajas de estos sistemas en elaumento en el porcentaje de recuperacin La disminucin en el tiempo de crecimiento Disminucin de el % de contaminacin.

Septi-Chek

MGIT 960 (Tubo Indicador de Crecimiento de Micobacterias) MGIT manual Bactec 460 * BACTEC 9000MB. MB/BacT


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Mtodos para Realizar Diagnstico de Infeccin

por Micobacterias Coloracin para BAAR: (Se:45-70%)

ZN Kinyoun Auramina-Rodamina

Cultivos: Medios a base de huevo (LJ- OK) Medios con frmula definida:

(Middlebrook: 7H9-7H10-7H11-7H12*)

Sistemas automatizados Bactec 460*- MGIT (Becton Dikison)

Hemocultivos HPLC

Moleculares Sondas PCR
http://127.0.0.1:1818/chaps/17FF5


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GRACIAS POR SU

ATENCION.

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