Microbiología AmbientalExposición del tema: Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias.Cada equipo (respetando el orden de los equipos formados en el laboratorio) expondrá las siguientes pruebas bioquímicas:

Pruebas que ponen de manifiesto la utilización de carbohidratos:-Prueba con medio Agar Triple Azúcar (TSI) Equipo 1-Prueba con medio Caldo Rojo de Fenol Equipo 2-Prueba con medio Rojo de Metilo- Voges Proskauer Equipo 3

Pruebas bioquímicas que ponen de manifiesto el metabolismo de aminoácidos:-Prueba con medio Agar Hierro Lisina (LIA) Equipo 4-Prueba con medio MIO (Movilidad, Indol, Ornitina) Equipo 5-Prueba con medio SIM ( Sulfuro, Indol, Movilidad) Equipo 6

Pruebas bioquímicas que ponen de manifiesto la utilización de sales orgánicas:-Prueba con medio Agar Citrato de Simmons Equipo 7-Prueba con medio Caldo Malonato Equipo 8-Prueba con medio Caldo Urea Equipo 9

Prueba bioquímica que ponen de manifiesto el metabolismo oxidativo/fermentativo:-Prueba con medio Hugh-Leifson (OF) Equipo 10

Pruebas bioquímicas que ponen de manifiesto la producción de enzimas hidrolíticas:-Prueba de hidrólisis de almidón (Agar Almidón) Equipo 11 -Prueba de hidrólisis de gelatina (Gelatina nutritiva) Equipo 12

Puntos que se deben de cubrir:1. Fundamento de la prueba.2. Medio de cultivo que se emplea.3. Forma de inocular la prueba.4. Condiciones de incubación (tiempo y temperatura).5. Uso de reactivos post-incubación (si los hay).6. Lectura para un resultado positivo y un resultado negativo, con sus respectivos controles (microorganismo que da la

prueba positiva y negativa).7. Cómo se interpretan los resultados.

Ejemplo: Prueba de reducción de nitratosFundamento: Determinar la capacidad de un microorganismo de reducir los nitratos a nitritos e incluso hasta nitrógeno molecular, lo que pone de manifiesto que lleva a cabo respiración anaerobia, utilizando al nitrato como último aceptor de electrones

Prueba Medio de

cultivo

Inoculación Incubación Reactivos

post

incubación

Resultados Interpretación

Reducción de nitratos a nitritos

Caldo nitratocon campana de Durham

1 o 2 gotas de la suspensión bacteriana

35°C /18 a 24 hrs

2 o 3 gotas de alfa-naftilamina + 2 o 3 gotas de ácido sulfanílico

(+) el medio se torna de color rojoControl: Escherichia coli

(-) sin cambio de colorControl: Acinetobacter lwoffii

(+) El microorganismo utiliza el nitrato como último aceptor de electrones.

(-) El microorganismo no utiliza al nitrato como último aceptor de electrones.

Enviar todas las presentaciones en tiempo y forma el día Lunes 13 de Octubre.

Atte. Profra. Elsa Mijangos Espriella