EFEK EKSTRAK DAUN INSULIN (SMALLANTHUS

SONCHIFOLIA) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH,

BERAT BADAN, DAN KADAR TRIGLISERIDA PADA TIKUS

DIABETES strain Sprague dawley YANG DIINDUKSI

ALOKSAN

Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

SARJANA KEDOKTERAN

OLEH :

Candra Achmad Hanif Rosyidi

NIM: 1111103000090

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI

SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

1435 H/2014 M

v

KATA PENGANTAR

Assalamualaikum wr.wb.

Puji serta syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas segala

rahmat dan karunia-Nya saya dapat menyelesaikan penelitian ini. Shalawat serta

salam semoga tetap tercurah limpahkan pada Nabi besar Muhammad SAW,

beserta keluarganya, sahabatnya, serta umatnya.

Alhamdulillahi rabbil alamin, penelitian ini akan sulit terselesaikan jika

tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, saya

mengucapkan banyak terima kasih kepada :

1. Prof. DR. (hc) dr. M.K. Tadjudin, Sp. And, dr. M. Djauhari

Widjajakusumah, DR Arif Sumantri, S.K.M, M.Kes, Dr. Dra. Delina

Hasan, Apt, M.Kes, selaku Dekan dan Wakil Dekan FKIK UIN Syarif

Hidayatullah Jakarta yang selalu membimbing dan memberikan

kesempatan kepada saya untuk menempuh pendidikan di Program Studi

Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

2. dr. Witri Ardini, M.Gizi, SpGK selaku Ketua Program Studi Program

Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta, serta

seluruh dosen di prodi ini yang selalu membimbing serta memberikan ilmu

kepada saya selama menjalani masa pendidikan di Program Studi

Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3. dr. Flori Ratna Sari, Ph.D dan dr. Hari Hendarto, Sp.PD, Ph.D, FINASIM

selaku dosen pembimbing penelitian saya, yang selalu membimbing dan

mengarahkan dalam berjalannya penelitian ini.

4. dr. Siti Nur Aisyah Jauharoh, Ph.D dan dr. Nurmila Sari, M.Kes selaku

dewan penguji penelitian saya, untuk ilmu, waktu dan tenaga dalam

memperbaiki laporan penelitian ini.

5. Kedua orang tua tercinta, Chamim Rosyidi Irsyad, MPd dan Sunarsih,

MPd yang selalu memberikan cinta dan kasih sayangnya, memberikan

doa, nasihat, serta semangat sepanjang hidup saya. Juga pada kedua kakak

vi

kandung saya, Aviva Nisahita Ungky Rosyidi dan Badar Joang Harista

Rosyidi serta adik saya, Dinda Adiratna Azizah Rosyidi, dan untuk

seluruh Keluarga besar Rosyidi dan alm. Rasyid yang senantiasa membuat

saya bersemangat dalam menjalani kehidupan di Program Studi

Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

6. dr. Flori Ratna Sari, Ph.D selaku penanggungjawab (PJ) modul riset PSPD

2011, drg. Laifa Annisa Hendarmin, PhD selaku PJ laboratorium Riset,

Ibu Nurlaely Mida R, M.Biomed, DMS selaku PJ laboratotium Animal

house, Ibu Endah Wulandari, M.Biomed selaku PJ laboratorium Biokimia

yang telah memberikan izin atas penggunaan lab pada penelitian ini.

7. Untuk teman seperjuangan penelitian saya, Laras Respati, Anisatul

Muqorobin, Elsa Amelia, Hermansyah dan Norma Maulidatul F.

8. Seluruh mahasiswa PSPD 2011 dan semua teman serta sahabat saya.

9. Laboran yang terlibat Mba Ai, Mba Suryani, Mas Rachmadi, Mba Din.

Juga pada Mas Haris, Mas Panji yang sangat membantu berlangsungnya

penelitian ini.

10. Dan semua pihak yang tidak dapat saya sebutkan satu persatu.

Saya menyadari laporan penelitian ini masih jauh dari kesempurnaan. Kritik

dan saran yang membangun dari semua pihak sangat saya harapkan demi

kesempurnaan laporan penelitian ini.

Demikian laporan penelitian ini saya tulis, semoga dapat memberikan manfaat

bagi penulis khususnya dan para pembaca pada umumnya.

Ciputat, 10 September 2014

Penulis

vii

ABSTRAK

Candra Achmad Hanif Rosyidi. Program Studi Pendidikan Dokter. Efek

Ekstrak Daun Insulin (Smallanthus sonchifolia) Terhadap Kadar Glukosa

Darah, Berat Badan, dan Kadar Trigliserida pada Tikus Diabetes strain

Sprague dawley yang Diinduksi Aloksan. 2014.

Angka kejadian diabetes di Indonesia tertinggi ke 7 di dunia pada tahun

2012, dan diperkirakan akan terus berkembang jumlah penderitanya. Daun Insulin

(Smallanthus sonchifolia) adalah tanaman tradisional Amerika Selatan yang

menarik perhatian karena diketahui memiliki efek hipoglikemik dan

hipolipidemik, dan sebagian penduduk indonesia sudah memakainya sebagai

terapi diabetes serta tanaman ini dapat tumbuh dengan baik di tanah Indonesia.

Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek ekstrak daun insulin dengan dosis

300 mg/kgBB per oral selama 14 hari terhadap glukosa darah, berat badan serta

trigliserida pada tikus Sprague dawley dibetes yang diinduksi aloksan. Hasil

penelitian adalah glukosa darah menurun 29% pada kelompok terapi (p<0,05).

Selain itu terdapat peningkatan BB pada kelompok terapi sebesar 7,69% yang

merupakan peningkatan terbesar diantara semua kelompok (p>0,05), sedangkan

rerata trigliserida pada kelompok terapi sebesar 73,375 mg/dL lebih rendah dari

kelompok diabetes 175,25 mg/dL (p<0,05). Simpulan, daun insulin mempunyai

efek hipoglikemik dan hipolipidemik, akan tetapi tidak mempengaruhi berat

badan pada tikus diabetes Sprague dawley .

Kata kunci : daun insulin, glukosa darah, trigliserida, DM

ABSTRACT

Candra Achmad Hanif Rosyidi. Medical Education Study Program. Effect of

Insulin Leaves Extract (Smallanthus sonchifolia) on Blood Glucose, Body

Weight and Triglycerides of Alloxan-induced Sprague dawley rats. 2014.

The incidence of diabetes in Indonesia, the world's 7th highest in 2012,

and is expected to continue to expand the number of its victims. Insulin leaves

(Smallanthus sonchifolia) is a traditional South American plant that attracts

viii

attention because it is known to have hypoglycemic and hypolipidemic effect, and

partly Indonesians already wore it as a therapy of diabetes and this plant can grow

well in the land of Indonesia. This research was conducted to determine the effect

of insulin leaves extract at a dose of 300 mg/kgBB orally during 14 days of blood

glucose levels, body weight and triglyceride levels on Aloxxan-induced Sprague

dawley rats. Results of the study were blood glucose decreased 29% at therapy

group (p<0.05). Beside, weight gain for about 7.69% which is the largest increase

among all groups (p>0.05), and the average of triglyceride level in therapy group

73,375 mg/dL is the lower than the diabetes group 175,25 mg/dL (p<0,05).

Conclusions, insulin leaves has hypoglycemic effect and possible as a

hypolipidemic agent, but not affecting weight to Sprague dawley diabetic rats.

Key word: Insulin leaves, blood glucose, triglyceride, DM

ix

DAFTAR ISI

LEMBAR JUDUL...................................................................................................i

LEMBAR PERNYATAAN...................................................................................ii

LEMBAR PERSETUJUAN.................................................................................iii

LEMBAR PENGESAHAN..................................................................................iv

KATA PENGANTAR............................................................................................v

ABSTRAK............................................................................................................ vii

DAFTAR ISI......................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL................................................................................................ xii

DAFTAR GRAFIK............................................................................................. xii

DAFTAR GAMBAR........................................................................................... xii

DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................... xiii

BAB I PENDAHULUAN..................................................................................... 1

1.1. Latar Belakang........................................................................................... 1

1.2. Rumusan Masalah...................................................................................... 2

1.3. Tujuan Penelitian....................................................................................... 3

1.3.1. Tujuan Umum.............................................................................. 3

1.3.2. Tujuan Khusus............................................................................. 3

1.4. Manfaat Penelitian..................................................................................... 3

1.4.1. Bagi Peneliti................................................................................. 3

1.4.2. Bagi Institusi................................................................................ 4

1.4.3. Bagi Masyarakat.......................................................................... 4

x

BAB II TINJAUAN PUSTAKA.......................................................................... 5

2.1. Landasan Teori........................................................................................... 5

2.1.1. Definisi dan Klasifikasi Diabetes Melitus................................... 5

2.1.2. Patofisiologi Diabetes Melitus..................................................... 6

2.1.2.1. Fisiologi Pankreas.......................................................... 7

2.1.2.2. Fisiologi Insulin dan Pengaruh Insulin Terhadap

Patofisiologi DM.............../........................................... 7

2.1.3. Manifestasi Klinis........................................................................ 9

2.1.4. Kriteria Diagnosis........................................................................ 9

2.1.5. Komplikasi Diabetes.................................................................... 9

2.1.5.1. Dislipidemia pada Diabetes Melitus............................ 11

2.1.6. Tatalaksana Diabetes Melitus.................................................... 11

2.1.7. Daun Insulin............................................................................ ...13

2.1.7.1. Kandungan Daun Insulin............................................. 15

2.1.8. Aloksan...................................................................................... 15

2.2. Kerangka Konsep..................................................................................... 17

2.3. Definisi Operasional................................................................................ 18

BAB III METODOLOGI PENELITIAN......................................................... 19

3.1. Desain Penelitian...................................................................................... 19

3.2. Waktu dan Tempat Penelitian.................................................................. 19

3.2.1. Waktu Penelitian........................................................................ 19

3.2.2. Tempat Penelitian......................................................................19

3.3. Sampel Penelitian..................................................................................... 19

3.3.1. Kriteria Inklusi........................................................................... 20

3.3.2. Kriteria Eksklusi........................................................................ 20

3.4. Cara Kerja Penelitian............................................................................... 21

3.4.1. Alat Penelitian............................................................................ 21

3.4.2. Bahan Penelitian........................................................................ 21

3.4.3. Proses Ekstraksi......................................................................... 22

3.4.4. Adaptasi Hewan Sampel............................................................ 22

3.4.5. Induksi Aloksan......................................................................... 22

xi

3.4.6. Pemberian Ekstrak Daun Insulin Terhadap Tikus..................... 23

3.4.7. Pengukuran Sampel................................................................... 23

3.4.7.1. Berat Badan................................................................. 23

3.4.7.2. Glukosa Darah Sewaktu.............................................. 23

3.4.7.3. Trigliserida................................................................... 24

3.5. Alur Penelitian......................................................................................... 25

3.6. Managemen Data..................................................................................... 26

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN........................................................... 27

4.1. Glukosa Darah Sewaktu....................................................................... 27

4.2. Berat Badan.......................................................................................... 29

4.3. Trigliserida............................................................................................ 31

4.4. Keterbatasan Penelitian........................................................................ 32

BAB V SIMPULAN DAN SARAN................................................................ 33

5.1. Simpulan............................................................................................... 33

5.2. Saran..................................................................................................... 33

BAB VI KERJASAMA PENELITIAN............................................................ 34

DAFTAR PUSTAKA........................................................................................... 35

LAMPIRAN......................................................................................................... 38

xii

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Klasifikasi Etiologi DM......................................................................... 5

Tabel 2.2 Diagnosis DM........................................................................................ 9

Tabel 2.3 Perbandingan OHO.............................................................................. 13

Tabel 4.1 Rata-Rata dan Standar Deviasi Glukosa Darah Tikus Setiap

Kelompok Penelitian........................................................................... 27

Tabel 4.2 Hasil Analisa Data Glukosa Darah Setiap Kelompok Penelitian........ 28

Tabel 4.3 Rata-Rata dan Standar Deviasi BB Tikus Setiap Kelompok

Penelitian............................................................................................ 29

Tabel 4.4 Hasil Analisa Data BB Setiap Kelompok Penelitian........................... 30

Tabel 4.5 Rata-Rata Kadar dan Standar Deviasi Trigliserida Setiap Kelompok

Penelitian............................................................................................ 31

DAFTAR GRAFIK

Grafik 4.1 Rata-Rata Glukosa Darah Tikus Setiap Kelompok Penelitian........... 27

Grafik 4.2 Rata-Rata Berat Badan Tikus Setiap Kelompok Penelitian............... 29

Grafik 4.3 Rata-Rata Kadar Trigliserida Tikus Setiap Kelompok Penelitian...... 31

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Sekresi Insulin.................................................................................... 8

Gambar 2.2 Tanaman Yacon................................................................................ 14

Gambar 2.3 Struktur Kimia Aloksan................................................................... 15

Gambar 7.1 Surat Keterangan Tikus Sehat......................................................... 38

Gambar 7.2 Surat Hasil Identifikasi Bahan Uji................................................... 39

Gambar 7.3 Blender daun insulin........................................................................ 42

Gambar 7.4 Serbuk hasil blender......................................................................... 42

Gambar 7.5 Hasil setelah serbuk diayak.............................................................. 42

Gambar 7.6 Pengadukan dengan stirer hot plate................................................ 42

Gambar 7.7 Hasil adukan kemudian disaring...................................................... 42

xiii

Gambar 7.8 Evaporator......................................................................................... 42

Gambar 7.9 Maltodextrin 250 mg & 500 ml aquades.......................................... 43

Gambar 7.10 Ekstrak kering daun insulin.......................................................... 43

Gambar 7.11 Sampel penelitian.......................................................................... 43

Gambar 7.12 Alloxan monohydrate..................................................................... 43

Gambar 7.13 Induksi Alloxan monohydrate pada sampel................................... 43

Gambar 7.14 Pengambilan glukosa darah sampel............................................... 43

Gambar 7.15 Pengukuran BB sampel.................................................................. 44

Gambar 7.16 Proses pemberian ekstrak insulin................................................... 44

Gambar 7.17 Proses sacrificed dan pengambilan darah...................................... 44

Gambar 7.18 Pengukuran trigliserida................................................................. 44

Gambar 7.19 Alat centrifuge............................................................................... 44

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Surat Keterangan Tikus Sehat......................................................... 38

Lampiran 2 Hasil Determinasi Bahan Uji............................................................ 39

Lampiran 3 Data Awal Semua Kelompok Penelitian.......................................... 40

Lampiran 4 Hasil Data uji Statistik...................................................................... 41

Lampiran 5 Gambar Proses Penelitian................................................................. 42

Lampiran 6 Cara Perhitungan.............................................................................. 45

Lampiran 7 Riwayat Penulis................................................................................ 48

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1. LATAR BELAKANG

Diabetes menduduki 10 besar dunia penyebab disabilitas dan

penurunan produktifitas & perkembangan manusia. Jika tidak ada aksi yang

dilakukan, angka penderita diabetes di dunia akan meningkat dari lebih dari

366 juta pada tahun 2011 menjadi 552 juta pada tahun 2030, atau 1 dari 10

orang dewasa. Pada tahun 2012, Indonesia menjadi negara tertinggi ke 7

jumlah penduduknya yang menderita diabetes, yaitu 7.551.940 penderita,

dan diperkirakan sejumlah 4.437.520 orang terlewat tidak terdiagnosa.

Angka mortalitas akibat diabetes di Indonesia mencapai 155.465 jiwa.

Diabetes merupakan salah satu tantangan besar dalam dunia kesehatan di

abad 21. (1)

Tantangan bagi para tenaga kesehatan adalah bagaimana menurunkan

angka penderita dan ongkos pengobatan dengan cara diagnosis dini,

tatalaksana yang efektif dan pencegahan kasus baru. Di Indonesia,

Perkumpulan Endokrinologi Indonesia (PERKENI) telah menerbitkan

Konsensus Pengelolaan Diabetes Melitus (DM) Tipe 2 dengan revisi terbaru

tahun 2011 untuk mewujudkan penatalaksanaan diabetes mellitus yang

efektif.(2)

Praktik pelayanan medik herbal telah berkembang dengan pesat ,

bermanfaat dan dapat dipertanggungjawabkan keamanannya. Dalam kasus

DM ini, banyak literatur menunjukkan beberapa spesies tanaman memiliki

efektivitas yang cukup tinggi dalam menurunkan kadar gula darah, dengan

sedikit efek samping, dengan harga obat yang lebih murah daripada obat

konvensional.(3)

Sebagian masyarakat telah menggunakan tanaman tradisional sebagai

terapi diabetes mellitus, salah satunya adalah tanaman yacon. Tanaman

2

yacon telah terbukti memiliki bahan kimia aktif seperti fructooligosacarida,

karbohidrat dan flavonoid yang bisa menyebabkan penurunan glukosa

dalam darah. Daun tanaman yacon, yang lebih dikenal daun insulin atau

Smallanthus sonchifolia (Ss) oleh masyarakat, juga telah diketahui

mengandung komponen phenol. Komponen ini seperti chlorogenic, caffeic,

dan ferulic pada pasien diabetes mellitus dapat memperbaiki sel β pankreas

sehingga dapat meningkatkan sekresi insulin dan meningkatkan sensitifitas

reseptor insulin.(4)

Daun insulin juga mengandung Smallanthaditepenic acids A, B, C dan

D yang memiliki efek anti-diabetik.(5)

Hal ini menunjukkan bahwa tanaman

ini bisa digunakan sebagai agen hipoglikemia yang baru. Tanaman ini sudah

banyak tumbuh di Indonesia, dan mudah dalam pengembangbiakannya.(3)

Penelitian Baroni et al. (2008) menunjukkan pemberian ekstrak daun

insulin dengan dosis 400 mg/kgBB/hari pada tikus diabetes selama 14 hari

memberikan efek hipoglikemik dan hipolipidemik pada tikus.(6)

Dalam penelitian ini, dipilih bagaimana efek ekstraksi alkohol daun

insulin dengan dosis lebih rendah yaitu 300 mg/kgBB/hari yang diberikan

selama 14 hari terhadap kadar glukosa darah, berat badan dan kadar

trigliserida pada tikus diabetes strain sprague dawley yang diinduksi

aloksan.

1.2. RUMUSAN MASALAH

Berdasarkan latar belakang, dapat dirumuskan masalah pada

penelitian ini adalah :

Apakah ekstrak daun insulin (Ss) dengan dosis 300 mg/kgBB/hari yang

diberikan selama 14 hari dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus

diabetes strain sprague dawley yang diinduksi aloksan?

Apakah ekstrak daun insulin (Ss) dengan dosis 300 mg/kbBB/hari yang

diberikan selama 14 hari dapat menaikkan berat badan tikus diabetes

strain sprague dawley yang diinduksi aloksan?

3

Apakah ekstrak daun insulin (Ss) dengan dosis 300 mg/kbBB/hari yang

diberikan selama 14 hari dapat mempengaruhi kadar trigliserida tikus

diabetes strain sprague dawley yang diinduksi aloksan?

1.3. TUJUAN PENELITIAN

1.3.1. Tujuan Umum

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian ekstrak

daun insulin (Ss) dengan dosis 300 mg/kgBB/hari selama 14 hari

terhadap kadar glukosa darah, berat badan, dan kadar trigliserida pada

tikus diabetes strain sprague dawley yang diinduksi aloksan.

1.3.2. Tujuan Khusus

a. Menentukan perbedaan kadar glukosa darah pada tikus diabetes yang

dilakukan pemberian ekstrak daun insulin (Ss) selama 14 hari dan

yang tidak dilakukan pemberian.

b. Menentukan perbedaan berat badan pada tikus diabetes yang

dilakukan pemberian ekstrak daun insulin (Ss) selama 14 hari dan

yang tidak dilakukan pemberian.

c. Mengetahui perbedaan trigliserida pada tikus diabetes yang dilakukan

pemberian ekstrak daun insulin (Ss) selama 14 hari dan yang tidak

dilakukan pemberian.

1.4. MANFAAT PENELITIAN

1.4.1. Bagi Peneliti

a. Mendapatkan pengalaman melakukan penelitian dengan metode

eksperimen.

b. Mendapat pengetahuan mengenai tanaman herbal yang memiliki efek

hipoglikemik.

c. Sebagai salah satu syarat mendapat gelar Sarjana Kedokteran Fakultas

Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif

Hidayatullah.

4

1.4.2. Bagi Institusi

Dapat menambah referensi penelitian di Fakultas Kedokteran dan

Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah.

1.4.3. Bagi Masyarakat

Sebagai informasi bagi masyarakat akan manfaat efek ekstrak daun

insulin terhadap kadar glukosa darah, berat badan dan kadar trigliserida

pada diabetes melitus .

5

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Landasan Teori

2.1.1. Definisi dan Klasifikasi Diabetes Melitus

Diabetes Melitus (DM) merupakan suatu kelompok penyakit

metabolik dengan karakteristik hiperglikemia yang terjadi karena

kelainan sekresi insulin, kerja insulin atau kedua-duanya.(7)

Klasifikasi etiologis DM (4 tipe):

Tabel 2.1 : Konsensus Pengendalian dan Pencegahan DM Tipe 2 di

Indonesia 2011. PERKENI(2)

No. Tipe DM

1. DM Tipe 1 Destruksi sel , umumnya menjurus ke defisiensi insulin

absolut

Autoimun

Idiopatik

2. DM Tipe 2 Dominan resistensi insulin disertai defisiensi

insulin relatif

Dominan defek sekresi insulin disertai resistensi

insulin

3. DM tipe lain Defek genetik fungsi sel

Defek genetik kerja insulin

Penyakit eksokrin pankreas

Endokrinpati

Karena obat atau zat kimia

Infeksi

Sebab imunologi yang jarang

Sindrom genetik lain yang berhubungan dengan

DM

4. DM gestasional

DM tipe 1 mencakup sekitar 10-20% dari semua kasus DM dengan

ditandai tidaknya adanya sekresi insulin. Subtipe ini lebih sering timbul

pada etnik keturunan Afrika-Amerika dan Asia. (8,9)

6

Sedangkan pada DM tipe 2 terjadi resistensi insulin, padahal

sekresi insulin mungkin masih normal atau bahkan meningkat. Subtipe

ini sering dikaitkan dengan kondisi obesitas pada pasien. (8,9)

Insidensi DM gestasional tercatat pada 4% dari semua kehamilan.

Faktor resiko terjadiya subtipe ini adalah usia tua, etnik, obesitas,

multiparitas, riwayat keluarga dan riwayat diabetes pada pasien sebelum

kehamilan.(8,9)

2.1.2. Patofisiologi Diabetes Melitus

Defisiensi sekresi insulin maupun resistensi insulin mengakibatkan

gangguan metabolisme makronutrien seperti karbohidrat, protein dan

lemak. Kegagalan uptake glukosa darah ke sel mengakibatkan sel

kekurangan sumber energi sehingga sel mengalami starving cells.

Keadaan tersebut mengakibatkan sel adiposa dipecah sebagai sumber

energi alternatif, akibatnya leptin sebagai pemberi stimulus sinyal

kenyang yang berada di sel adiposa pun berkurang. Tidak adanya sinyal

untuk memberikan sensasi kenyang mengakibatkan pasien DM

cenderung banyak makan atau polifagia.(10)

Kegagalan uptake glukosa darah ke sel juga menyebabkan

hiperglikemia. Ketika kadar glukosa darah tinggi dan melebihi ambang

filtrasi glukosa ginjal, maka glukosa yang secara fisiologi tidak dapat

lolos dari filtrasi gromerulus, akhirnya bergabung bersama urin. Glukosa

merupakan diuresis osmotik, maka glukosa di urin dapat menarik air dari

tubulus ginjal sehingga volume urin meningkat. Kandung kemih pun

cepat penuh dan merangsang pasien untuk sering buang air kecil atau

poliuria. (10)

Kehilangan cairan yang disebabkan mekanisme diatas

mengaktivasi pusat haus singga pasien DM akan sering minum atau

polidipsi.(10)

Glukoneogenesis berupa glikogenolisis, lipolisis, katabolisme

protein yang berada di otot terus menerus dipecah dan juga kegagalan

7

lipogenesis dan uptake glukosa mengakibatkan pasien DM juga dapat

mengalami penurunan berat badan.(10)

2.1.2.1. Fisiologi Pankreas

Pankreas menyekresikan enzim-enzim pencernaan dan insulin.

Enzim-enzim pencernaan pankreas disekresikan oleh asini pankreas, dan

sejumlah besar larutan natrium bikarbonat disekresi oleh duktus kecil dan

duktus lebih besar yang bersal dari asini. Produk kombinasi ezim dan

natrium bikarbonat mengalir melalui duktus pankreatikus dan masuk ke

duodenum melalui papila Vateri yang diatur oleh sfingter Oddi.(11)

Lain dengan insulin. Insulin disekresi oleh pulau-pulau

Langerhans, juga menyekresikan glukagon. Insulin dan glukagon

langsung ke dalam darah, berbeda dengan getah pankreas yang bekerja di

usus. Pulau Langerhans mengandung 3 jenis sel utama, yakni sel alfa,

beta dan delta. 60 %-nya merupakan sel beta yang merupakan penyekresi

insulin dan amilin. Sel alfa ± 25 %, menyekresikan glukagon. Sel delta ±

10 %, menyekresikan somatostatin.(11)

Insulin menghambat sekresi glukagon, amilin mengahambat

sekresi insulin, dan somatostatin mengahambat sekresi insulin dan

glukagon.(11)

2.1.2.2. Fisiologi Insulin dan Pengaruh Insulin Terhadap Patofisiologi DM

Insulin mempengaruhi metabolisme karbohidrat, lemak dan

protein. Bila terdapat sejumlah besar makanan berenergi-tinggi di dalam

diet, terutama kelebihan jumlah karbohidrat, insulin akan disekresikan

dalam jumlah yang besar. Selanjutnya, bila terdapat kelebihan

karbohidrat, insulin menyimpannya sebagai glikogen terutama di hati dan

otot, yang tidak dapat disimpan sebagai glikogen juga diubah dibawah

rangsangan insulin menjadi lemak dan disimpan di jaringan adiposa.

Dengan adanya kelebihan protein, insulin mempunyai efek langsung

dalam memacu ambilan asam amino oleh sel dan pengubahan asam

8

amino ini menjadi protein. Selain itu, insulin menghambat pemecahan

protein yang sudah terdapat di dalam sel.(11)

Mekanisme produksi insulin dijelaskan melalui gambar berikut :

Gambar 2.1 Sekresi insulin(12)

Mekanisme insulin memasukkan glukosa ke dalam sel-sel,

khususnya yang menggunakan GLUT-4 sebagai transporter glukosa

seperti sel-sel-sel otot, sel adiposa dan sel otot jantung. Insulin Akan

berikatan dengan insulin receptor substrate (IRS) yang terdapat di

membran sel. Kemudian transduksi sinyal mengakibatkan GLUT-4

menuju membran sel untuk proses uptake glukosa ke dalam sel.(12)

Insulin juga mempengaruhi fungsi dari lipoprotein lipase (LPL).

LPL yang berpasangan dengan insulin dapat memecah trigliserida dalam

darah untuk masuk ke dalam sel adiposa. Kekurangan jumlah insulin

menyebabkan disfungsi LPL sehingga terjadi gangguan profil lipid.(12)

9

2.1.3. Manifestasi Klinis

Terdapat 2 macam keluhan DM, yaitu keluhan klasik dan keluhan

lain. Keluhan klasik dari DM yaitu: Poliuria, Polidipsia, polifagia, dan

penurunan berat badan tanpa sebab yang jelas. Sedangkan keluhan

lainnya antara lain: badan lemah, kesemutan, gatal, mata kabur serta

disfungsi ereksi pada pria dan pruritus vulva pada wanita.(13)

2.1.4. Kriteria Diagnosis

Ada 3 cara diagnosis(2)

:

Tabel 2.2 : Konsensus Pengendalian dan Pencegahan DM Tipe 2 di

Indonesia 2011. PERKENI(2)

2.1.5. Komplikasi Diabetes

Komplikasi pada diabetes melitus dapat digolongkan sebagai

berikut: (1)Komplikasi metabolik akut dan (2)Komplikasi vaskular

jangka panjang.(9)

Komplikasi metabolik akut salah satunya diakibatkan perubahan

akut kadar glukosa plasma. Kondisi dapat berupa ketoasidosis

diabetikum (KAD) yaitu komplikasi yang paling parah yang dapat terjadi

pada pasien DM tipe 1. Peningkatan lipolisis dan oksidasi asam lemak

bebas akibat defisiensi insulin yang parah berujung pada pembentukan

benda keton, seperti asetoasetat, hidroksibutirat dan aseton. Peningkatan

10

benda keton ini menimbulkan ketosis, sedangkan peningkatan H+

menimbulkan asidosis.(9)

Glikosuria dan ketonuria mengakibatkan diuresis osmotik,

sehingga pasien mengalami dehidrasi dan juga gangguan elektrolit,

sehingga dapat jatuh pada kondisi hipotensi dan syok. Jika perfusi ke

otak kurang, pasien dapat mengalami koma dan meninggal.(9)

Komplikasi metabolik akut lainnya adalah hiperglikemia,

hiperosmolar, koma nonketotik (HHNK) yang sering pada DM tipe 2

usia tua. Hal ini disebabkan tingginya kadar glukosa darah (>600 mg/dL)

yang menyababkan hiperosmolaritas, diuresis osmotik dan dehidrasi

berat. Pasien akan kehilangan kesadaran dan jika tidak ditangani dengan

benar dan cepat dapat menyebakan kematian.(9)

Komplikasi yang paling sering adalah hipoglikemia akibat

ketidakpatuhan terhadap terapi atau dosis yang berlebih. Gejalan-

gejalanya disebabkan oleh pelepasan epinefrin (berkeringat, palpitasi,

sakit kepala dan tremor), juga bisa diakibatkan kurang asupan glukosa ke

otak (koma, tingkah laku aneh dan sensorium tumpul).(9)

Komplikasi vaskular jangka panjang meliputi makroangiopati dan

mikroangiopati. Komplikasi makroangiopati meliputi kelainan

kardiovaskuler, kelainan serebrovaskuler dan kelainan pembuluh darah.(2)

Pada makroangiopati didapatkan gambaran histologis aterosklerosis,

yang menyebabkan penyumbatan vaskuler. Jika mengenai arteri

koronaria dan aorta dapat menyebakan infark miokardium atau angina.(9)

Mekanismenya insufisiensi insulin dapat menyebabkan

penimbunan sorbitol dalam intima vaskuler, hiperliproteinemia dan

kelainan pembentukan darah.(9)

Komplikasi mikroangiopati berupa klaudikasio intermitten dan

gangren pada ekstremitas, serta stroke. Pada mata dapat terjadi retinopati

diabetik, pada gromerulus ginjal dapat terjadi nefropati diabetik, pada

saraf perifer dapat terjadi neuropati diabetik.(2)

11

2.1.5.1. Dislipidemia pada Diabetes Melitus

Pada keadaan defisiensi insulin terdapat penurunan masuknya asam

lemak dari darah ke dalam sel jaringan adiposa, sehingga keadaan ini

menyebabkan kadar trigliserida di darah meningkat. Pada keadaan

resistensi insulin, hormone sensitive lipase di jaringan adiposa akan

menjadi aktif sehingga lipolisis meningkat sehingga salahn satunya

menyebabkan trigliserida yang beredar di darah meningkat. (7,8)

Free fatty acid (FFA) yang berlebihan di darah sebagian dapat

digunakan sebagai sumber energi, dan sebagian akan dibawa ke hati

untuk dibentuk kembali menjadi trigliserida dan menjadi komponen

VLDL. Akibat kadar trigliserida yang tinggi mengakibatkan kondisi

large VLDL. (7)

Saat Large VLDL beredar di sirkulasi, trigliserida yang banyak di

VLDL tersebut akan bertukar dengan kolesterol ester yang dikandung

LDL, yang mengakibatkan LDL yang kaya dengan trigliserida tetapi

kurang kolesterol ester berupa LDL yang kecil tetapi padat, dikenal

dengan small dense LDL. Sifat small dense LDL adalah mudah

teroksidasi, oleh karena itu sangat aterogenik.(7)

Large VLDL juga dipertukarkan dengan kolesterol ester dari HDL,

mengakibatkan HDL miskin kolesterol ester, yang bentuk tersebut lebih

mudah dikatabolisme oleh ginjal sehingga jumlah HDL menurun. (7)

Oleh karena itu pada resistensi insulin terjadi kelainan profil lipid

yang khas yaitu kadar trigliserida meningkat, HDL menurun dan LDL

meningkat.

2.1.6. Tatalaksana Diabetes Melitus

Terdapat 4 pilar penatalaksanaan diabetes melitus yaitu : 1)

Edukasi, 2) Terapi gizi medis, 3)Latihan jasmani dan 4)Intervensi

Farmakologis.(2)

12

1) Edukasi

Untuk mencapai perubahan perilaku sehat dibutuhkan edukasi yang

komprehensif dan upaya peningkatan motivasi, seperti pengetahuan

tentang pemantauan glukosa darah mandiri, tanda dan gejala

hipoglikemia serta cara mengatasinya.

2) Terapi gizi medis

Pada penyandang diabetes perlu ditekankan pentingnya keteraturan

makan dalam hal jadwal makan, jenis dan jumlah makanan.

3) Latihan jasmani

Latihan jasmani secara teratur 3-4 kali seminggu selama kurang

lebih 30 menit. Latihan jasmani selain untuk menjaga kebugaran juga

dapat menurunkan berat badan dan memperbaiki sensitifitas insulin,

sehingga akan memperbaiki glukosa darah.

4) Intervensi farmakologis

Untuk pasien DM tipe 1 yang mengalami defisiensi insulin,

tatalaksana yang dilakukan adalah terapi insulin. Terdapat 3 jenis insulin

yaitu insulin masa kerja pendek, masa kerja sedang dan masa kerja

panjang. Insulin masa kerja pendek digunakan untuk mengontrol

hiperglikemia postpandrial karena puncak kerjanya pada beberapa menit

hingga 6 jam pasca injeksi, selain itu terapi ini digunakan untuk pasien

dengan ketoasidosis. Insulin masa kerja sedang untuk mengontrol harian

pasien karena dapat bekerja maksimal pada enam hingga delapan jam

pasca injeksi. Sedangkan insulin masa kerja panjang mencapai

puncaknya dalam waktu 14 hingga 20 jam pasca injeksi.(9)

Untuk pasien DM tipe 2, tatalaksana yang dilakukan adalah obat

hipoglikemik oral (OHO) dan atau suntikan insulin. Adapun

perbandingan antar beberapa contoh golongan OHO dijelaskan di tabel

berikut :

13

Tabel 2.3 : Konsensus Pengendalian dan Pencegahan DM Tipe 2 di Indonesia

2011. PERKENI(2)

OHO Cara kerja

utama

Efek

samping

utama

Reduksi

HbA1C

Keuntungan Kerugian

Sulfonilurea

(cth:Glibenklamid)

Meningkatkan

sekresi insulin

BB naik,

hipoglikemia

1-2% Sangat

efektif

BB,

hipoglikemia

Penghambat

glukoneogenesis

(cth: Metformin)

Menekan

produksi

glukosa hati &

menambah

sensitifitas

terhadap

insulin

Dispepsia,

diare,

asidosis,

laktat

1-2% Tidak ada

kaitan

dengan BB

Kontraindikasi

pada

insufisiensi

renal

-glukosidase

inhibitor

(cth: acarbose)

Menghambat

absorpsi

glukosa

Flatulens,

tinja lembek

0,5-

0,8%

Tidak ada

kaitan

dengan BB

Mahal

2.1.7. Daun Insulin

Daun yacon (Smallanthus sonchifolius) lebih dikenal sebagai daun

insulin di masyarakat. Tanaman yacon bersama dengan 21 spesies

Smallanthus lain termasuk dalam kelas Asteraceae. Spesies ini tumbuh

subur di lereng Pegunungan Andean, Amerika Latin. Suhu optimum

untuk pertumbuhan yacon ini adalah 18-25 °C, tetapi juga masih bisa

menolerir sampai suhu 40 °C tanpa mengurangi hasil panen, jika disiram

dengan jumlah air yang adekuat. Umumnya, penanaman optimum untuk

yacon ini sedalam 800 mm. Yacon dapat hidup di berbagai macam tanah,

tetapi lebih bagus tumbuh di tanah yang teraliri air dengan baik, dengan

struktur tanah yang bagus. Pertumbuhan buruk jika ditanam di tanah

yang keras. Yacon juga bisa hidup di pH mulai dari yang asam sampai

basa (lemah).(14)

Di Indonesia sudah banyak didapatkan tanaman ini, khususnya di

daerah pegunungan. Banyak orang Indonesia yang sudah

mengembangbiakannya.

14

Secara morfologi, tanaman yacon dapat mencapai tinggi 1,5-3

meter., akarnya tersusun dari 4-20 berbentuk oval. Bagian atas tanaman

tersusun dari daun yang lebar dan bunga yang berwarna kuning.(6)

Gambar 2.2 Tanaman yacon(15)

Taksonomi daun yacon adalah sebagai berikut :

Kingdom Plantae

Divisi Magnoliophyta

Kelas Magnoliopsida

Ordo Asterales

Famili Asteraceae

Genus Smallanthus

Spesies Smallanthus sonchifolius

Tumbuhan Yacon terdiri dari akar, batang, dan daun. Di daerah

Andean, akar yacon dianggap sebagai buah dan dijual bersama buah

lainnya seperti apel, alpukat, dan nanas. Akarnya lezat dan manis

rasanya, gurih dan penduduk asli daerah tersebut sering menjemurnya di

bawah panas matahari agar rasanya menjadi lebih manis. Mereka

mengonsumsi, mengupasnya, dan menyampurkannya dengan buah lain

sebagai salad serta bentuk lainnya. Akar yacon telah digunakan sebagai

obat tradisional penduduk Peru untuk mengobati hiperglikemia, masalah

ginjal, dan peremajaan kulit. Di Brazil, daun yacon yang digunakan

sebagai obat dalam bentuk teh. Di Jepang, daun dan buahnya dicampur

dengan daun teh.(14,15,16)

15

Macam sediaan yang pernah diteliti adalah roots aqueous extract,

methanol extract, buthanol extract, chloroform extract, yacon flour, 10%

yacon solution dan memakan buah yacon. Semuanya menunjukkan efek

yang baik pada diabetes dengan dosis yang bermacam-macam. Pada

tepung akar yacon kaya akan fructooligosaccharides (FOS) yang

memberikan manfaat pada diabetes dengan hiperlipidemia dengan

menurunkan kadar fasting plasma triacylglycerol dan low-density

lipoprotein (LDL). (14,15,16,17,18)

2.1.7.1. Kandungan Daun Insulin

Daun insulin mengandung protein, lipid, serat, dan sakarida,

catechone, terpenes, dan flavonoid. Daun tersebut memiliki efek seperti

insulin, yaitu menurunkan produksi glukosa di hepatosit.(14,15,16,17,18)

Penelitian Baroni et al. (2008) menunjukkan bahwa daun insulin

yang dikonsumsi dalam sediaan teh dapat menurunkan glukosa darah dan

meningkatkan jumlah insulin pada tikus diabetes.(6)

2.1.8. Aloksan

Gambar 2.3 Struktur Kimia Aloksan(19)

Aloksan merupakan bahan kimia yang hidrofilik dan tidak stabil

yang bentuknya mirip dengan glukosa, sehingga diuptake secara selektif

oleh sel β pankreas. Kemiripannya menyebabkan aloksan bisa masuk ke

sitosol sel β pankreas melalui GLUT-2 di membran plasma sel β

16

pankreas. Efek biologis lainnya adalah aloksan bisa menyebabkan

reaktivitas grup thiol sehingga terjadi inhibisi glukokinase. Hal ini bisa

berefek terhadap penurunan oksidasi glukosa dan penghasilan ATP

sehingga terjadi penekanan pada sekresi insulin yang diinduksi

glukosa.(19,20)

Aloksan bisa menginduksi diabetes melalui 4 tahapan(21,22)

, yaitu:

1. Fase pertama terjadi dalam beberapa menit pertama injeksi aloksan,

maksimal pada 30 menit, terjadi hipoglikemik transien. Hal ini terjadi

karena terjadi peningkatan sekresi insulin secara transien yang

menyebabkan peningkatan uptake glukosa oleh sel β pankreas

sehingga terjadi hipoglikemia

2. Fase kedua terjadi pada jam pertama injeksi, yaitu fase pertama kali

terjadi hiperglikemia. Hal ini terjadi karena aloksan menyebabkan

supresi sekresi insulin

3. Fase ketiga adalah fase hipoglikemik kembali pada 4-8 jam injeksi.

Pada fase ini terjasi sekresi insulin besar-besaran yang diinduksi oleh

aloksan. Selain itu, terjadi ruptur membran sel dan mitokondria sel β

pankreas sehingga menyebabkan nekrosis sel β pankreas.

4. Fase keempat terjadi degranulasi dan hilangnya integritas sel β

pankreas secara komplit sehingga terjadi diabetes. Fase ini terjadi

pada 24-48 jam setelah injeksi.

17

2.2. Kerangka Konsep

Aloksan

(glukomimetik)

Nekrosis sel β

pankreas

Pembentukan

ROS

Masuk ke sel β

pankreas melalui

GLUT 2

Uptake glukosa ke sel otot

rangka

Influx Ca2+

di

cytoplasma

Produksi

insulin

Diabetes

Melitus

Metabolisme

makronutrien

terganggu

karbohidrat

Hiperglikemia

katabolisme

protein

BB Turun

lipolisis

Trigliserida di jar.

adiposa

Disfungsi lipoprotein lipase

Trigliserida

di darah Lipogenesis

Smallanthus sonchifolia

Komponen phenol

memiliki efek antidiabetik

1. Memperbaiki sel β pankreas sehingga

meningkatkan sekresi insulin

2. Meningkatkan sensitifitas reseptor

insulin

18

2.3. Definisi Operasional

No Variabel Definisi

operasional

Alat Ukur Cara Pengukuran Skala

Pengukuran

1 Gula Darah

Sewaktu

(GDS)

Hasil pemeriksaan

gula darah sampel

secara acak tanpa

dipuasakan.

Blood glucose

Test Meter

GlucoDrTM

model AGM-

2100

(diproduksi oleh

allmedicus Co

Ltd., Korea)

Darah yang

diambil dari ekor

sampel diteteskan

pada strip

glukometer,

interpretasi angka

yang muncul pada

alat.

Numerik

2 Berat badan

(BB)

Ukuran yang

digunakan secara

umum untuk

menilai keadaan

gizi

Timbangan

merk kitchen

scale

Sampel diletakkan

pada timbangan

selanjutnya dilihat

angka pada

timbangan. Angka

tersebut

merupakan BB

sampel

Numerik

3 Trigliserida Komponen lipid

utama pada

kilomikron dan

VLDL

Spektrofoto

meter

Plasma sampel

dicampurkan

dengan reagen

trigliserida.

Campuran sampel

dan reagen

selanjutnya dinilai

pada alat

sektrofotometer.

Numerik

19

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1. Desain Penelitian

Desain yang digunakan dalam penelitian ini adalah desain

eksperimental laboratorium.

3.2. Waktu dan Tempat Penelitian

3.2.1. Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada bulan Desember 2013 sampai April

2014

3.2.2. Tempat Penelitian

Penelitian ini dilakukan di laboratorium Animal House,

laboratorium Biologi, laboratorium Riset, laboratorium Pharmacy Drug

Research (PDR), laboratorium Farmakologi, dan laboratorium Biokimia

Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif

Hidayatullah Jakarta Jl. Kertamukti no. 05 Pisangan, Ciputat 15419,

Tangerang Selatan.

3.3. Sampel Penelitian

Obyek percobaan yang digunakan adalah tikus jantan Sprague Dawley

usia 14 minggu, dengan berat badan rata- rata 170-200 gram yang diperoleh

dari Departemen Patologi Institut Pertanian Bogor (IPB). Hewan percobaan

tersebut telah dinyatakan memiliki status kesehatan yang baik dan belum

pernah mendapatkan perlakuan apapun, seperti pada lampiran 2.

Penelitian ini dilakukan dengan membagi hewan coba menjadi 3

kelompok. Kelompok pertama merupakan kelompok N (normal) sebagai

kontrol negatif. Kelompok kedua merupakan kelompok D (diabetes) sebagai

kontrol positif. Sedangkan kelompok ketiga merupakan kelompok D+Ss

(diabetes dengan terapi Smallanthus sonchfolia) yaitu kelompok tikus DM

yang diinduksi aloksan dan diberikan terapi daun insulin (Smallanthus

sonchifolia) dengan dosis 300 mg/kgBB/hari selama 14 hari.

20

Penentuan jumlah sampel pada setiap kelompok penelitian

menggunakan rumus Federer yaitu:

Keterangan:

t = jumlah kelompok, n = jumlah sampel

( )( )

( )( )

( )

Dibulatkan menjadi 9

Menurut hasil perhitungan menggunakan rumus federer didapatkan

jumlah sampel minimum yang harus ada dalam setiap kelompok percobaan

adalah 9 ekor. Pada penelitian ini digunakan 9 sampel untuk kelompok .

Jadi, total seluruh tikus adalah 27 ekor.

3.3.1. Kriteria Inklusi

1. Kelompok N : tikus jantan strain Sprague dawley dengan glukosa

darah sewaktu < 200 mg/dL.

2. Kelompok D dan D+Ss : tikus jantan strain Sprague dawley dengan

glukosa darah sewaktu > 200 mg/dL.

3.3.2. Kriteria Eksklusi

1. Tikus betina atau sakit sebelum perlakuan

RUMUS FEDERER: ( )( )

21

3.4. Cara Kerja Penelitian

3.4.1. Alat Penelitian

Alat- alat yang harus disiapkan untuk penelitian ini antara lain:

1. Kandang tikus

2. Tempat makan dan minum tikus

3. Perlengkapan kebersihan

4. Blood glucose Test Meter

GlucoDrTM

model AGM-2100

(diproduksi oleh allmedius Co

Ltd., Korea)

5. Glucotest strip

6. Neraca hewan

7. Syringe oral

8. Sonde

9. Neraca analitik

10. Timbangan milligram

11. Minor set

12. Tissue

13. Tabung EDTA

14. Valcon tube

15. Effendorf

16. Vortex

17. Sentrifuge

18. Spektrofotometer

19. Kit trigliserida

20. Kulkas -80oC.

3.4.2. Bahan Penelitian

Bahan utama untuk penelitian ini adalah daun insulin (Smallanthus

sonchifolia) yang diperoleh dari Bursa Bibit Yogyakarta sebanyak 2 kg.

Daun insulin kemudian dideterminasi di LIPI Kebun Raya Bogor.

Kemudian dilanjutkan proses ekstraksi yang peneliti lakukan sendiri di

laboratorium Riset dan laboratorium PDR. Selanjutnya hasilnya diolah

labih lanjut menjadi ekstrak kering daun insulin di PAU Institut Pertanian

Bogor. Daun insulin yang semula sebanyak 2 kg, hanya 750 gram saja

yang dilakukan proses ekstraksi kemudian menyusut jumlahnya saat

telah menjadi ekstrak kering, yaitu sekitar 250 gram.

Bahan-bahan kimia yang diperlukan untuk dalam penelitian ini

adalah aloksan monohidrat 5% untuk menginduksi agar tikus dalam

kondisi diabetes, ethanol 70% digunakan sebagai pelarut dalam

pembuatan ekstrak, selain itu juga dipersiapkan larutan natrium

hidroklorida 0,9%, ether, D-glukosa monohidrat 40% dan reagen lipid

(Sclavo).

22

3.4.3. Proses Ekstraksi

Daun insulin awalnya di blender, kemudian diayak sehingga

didapatkan serbuk daun insulinyang halus. Kemudian serbuk daun

insulin dilarutkan dengan ethanol 70% dengan prinsip perbandingannya

10 mg serbuk dilarutkan dengan 100 ml ethanol 70%. Proses ini

dilakukan di lab riset

Hasil larutan tersebut kemudian diaduk dengan hot plate stirer

selama 5 jam. Proses pengadukan dilakukan di lab riset dan lab

biokimia.Hasil adukan tersebut kemudian disaring dengan saringan

mikro.

Ekstrak cair tersebut kemudian dievaporasi di PAU Institut

Pertanian Bogor. Dan didapatkan ekstrak kering daun insulin.

3.4.4. Adaptasi Hewan Sampel

Sampel diadaptasikan di Animal house pada hari pertama sampai

hari kedua puluh satu. Sampel diadaptasikan terhadap tempat tinggal

barunya, pemberian makanan maupun pemberian minuman. Perlakuan

disamakan pada semua tikus.

Menurut referensi adaptasi cukup selama 7 hari(15)

. Adaptasi ini

bertujuansemua obyek penelitian tidak dalam kondisi stress dan dalam

kondisi yang sama saat dimulai penelitian.

3.4.5. Induksi Aloksan

Pada hari ke-22 tikus diinduksi aloksan 150 mg/kgbb secara

intraperitoneal. Setelah hewan diinduksi, diberi makanan yang cukup (ad

libitum) dan dalam waktu 72 jam pertama dalam air minumnya

ditambahkan 40% larutan D-glukosa monohidrat untuk mencegah

terjadinya hipoglikemi yang fatal. Pengukuran kadar glukosa darah

dilakukan 7 hari setelah induksi. Pada penelitian kami, pengukuran

dilakukan di hari ke-29. Tikus dengan glukosa >200 mg/dl dikatakan

sebagai tikus DM.

23

3.4.6. Pemberian Ekstrak Daun Insulin Terhadap Tikus

Setelah tikus dinyatakan DM, dilakukan pemberian ekstrak daun

insulin (Smallanthus sonchifolia) selama 14 hari (hari ke-29 sampai 42)

dengan dosis 300 mg/kgBB/hari pemberian secara oral dengan

menggunakan alat sonde. Alasan peneliti memakai ekstrak daun insulin

dijelaskan dalam bab I.

Dosis dan lama pemberian ini diambil berdasarkan penilitian

sebelumnya yaitu menggunakan dosis 400 mg/kgBB selama 14 hari

secara signifikan dapat menurunkan glukosa darah pada tikus diabetes.(6)

Peneliti mencoba dengan dosis lebih rendah yaitu 300 mg/kgBB/hari

dengan lama pemberian 14 hari.

3.4.7. Pengukuran Sampel

3.4.7.1. Berat Badan

Agar mendapatkan nilai perbandingan berat badan tikus sebelum

dan sesudah pemberian ekstrak, maka sebelum tikus dinyatakan DM,

berat badan harus diukur dan selanjutnya baru boleh diberikan ekstrak.

Selanjutnya berat badan tikus diukur selama 14 hari sejak diberikan

ekstrak tersebut.

3.4.7.2. Glukosa Darah Sewaktu

Kadar glukosa darah diukur dua kali, yaitu sebelum pemberian

ekstrak dan terakhir saat pemberian ekstrak selesai (setelah 14 hari).

Yang diukur adalah glukosa darah sewaktu tikus. Pertama, kita harus

membius tikus terlebih dahulu menggunakan larutan ether sampai tidak

sadarkan diri. Hal ini dilakukan agar mengurangi rasa sakit yang dialami

tikus. Kemudian, dilakukan pemotongan pada ekornya. Setelah dilakukan

pemotongan, darah akan keluar dan diteteskan pada strip pengukur

glukosa darah dan dilihat hasilnya di glukometer

24

3.4.7.3. Trigliserida

Kadar trigliserida dihitung di akhir perlakuan. Tikus yang telah

dibius dengan ether hingga hampir mati, dibedah, kemudian diambil

darahnya dari vena cava inferior jantung sebanyak 3 cc. Darah tersebut

disimpan terlebih dahulu di tabung EDTA agar darah tidak terjadi

koagulasi. Teknik pengambilan darah juga dengan teknik yang benar

sehingga darah yang diambil tidak lisis.

Kemudian dilanjutkan proses sentrifugasi, yaitu dengan

memindahkan terlebih dahulu darah dari tabung EDTA ke tabung

effendorf sebanyak 1,5 ml. Sentrifugasi dilakukan selama 15 menit

dengan kecepatan 3000 rpm. Proses sentrifugasi ini untuk mendapatkan

plasma, plasma ini yang diukur dengan kit pengukur kadar trigliserida.

Kit dalam penelitian ini adalah jenis sclavo, perhitungan setiap

sample dilakukan dua kali (duplo), sehingga didapatkan variasi data

untuk kemudian ditentukan rata-rata.

Setiap tabung terdiri dari 6 μL serum sampel yang selanjutnya

dicampur dengan 600 μL reagen trigliserida. Kemudian dikocok hingga

homogen, dan dibaca di alat spectrofotometer dengan panjang

gelombang 550 nm.

25

3.5. Alur Penelitian

Penilaian kadar trigliserida

menggunakan spektrofotometer

Didapatkan :

1. GDS hari ke-42 (mg/dL)

2. Rasio berat badan hari-42/ hari-29

3. Kadar trigliserida (mg/dL)

*Hari-29 = hari pengukuran ke-1

Hari-42 = hari pengukuran ke-14

Analisa statistik pada data

Tikus tiba di Animal House

(Hari 1)

Adaptasi selama 3 minggu

Makan dan minum ad libitum

(Hari 1-21)

Kelompok N (normal),

Gula darah < 200 mg/dl

(Hari 22)

(Hari 15-21)

Tikus yang diinduksi aloksan

Gula darah <200 mg/dl

Induksi aloksan 150 mg/kgbb

(Hari 22)

Kelompok D (DM

tanpa terapi)

Gula darah >200 mg/dl

Mengukur berat badan

(Hari 29)

Kelompok D+Ss (DM dengan

terapi ekstrak Smallanthus

sonchifolius). Gula darah >200

mg/dl. Mengukur berat badan

(Hari 29)

Sonde oral ekstrak Smallanthus

sonchifolius 300 mg/kgbb/hari,

dilarutkan dengan aquades.

(Hari 29-42)

Sacrifice

Sacrifice, pembiusan dengan

ether dan pengambilan darah

dari vena cava inferior

(Hari 43)

Darah kemudian disentrifugasi,

didapatkan plasma selanjutnya

dicampur dengan kit trigliserida

Mengukur berat badan

(Hari 29)

Mengukur gula darah, dari

darah vena ekor

menggunakan glukometer

(Hari 42)

Mengukur berat badan

(Hari 42)

26

3.6. Managemen Data

Dalam pengambilan data untuk penelitian ini, dilakukan eksperimen

langsung terhadap tikus jenis ”Sprague-Dawley” dengan berat badan 170-

200 gram , yang telah diberi perlakuan sebelumnya berupa pemberian

aloksan dan ekstrak daun insulin (Smallanthus sonchifolia). Ditambah

dengan pencarian literatur dan melakukan peninjauan pustaka untuk

mendapatkan informasi mengenai pengaruh daun insulin (Smallanthus

sonchifolia) terhadap kadar glukosa darah, berat badan dan kadar

trigliserida. Setelah data terkumpul, dilakukan pengolahan data secara

komputerisasi yaitu dengan SPSS versi 16.0.

Uji yang digunakan adalah Uji Oneway Annova karena penelitian ini

termasuk analitik kategorik numerik dan tidak berpasangan. Untuk

melakukan uji Oneway Annova, terlebih dahulu dilakukan uji normalitas

data dan uji homogenitas. Jika salah satu uji tersebut tidak terpenuhi maka

dilakukan transformasi data. Ketika uji transformasi data tidak berhasil

maka dilakukan uji Kruskal Wallis.

27

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Proses pengelompokan hewan coba penelitian tidak secara random

sampling, namun menggunakan teknik consecutive sampling yaitu berdasarkan

tingginya kadar gula darah setelah diinduksi aloksan, sampel dengan kadar gula

tertinggi dimasukkan kelompok terapi dengan tujuan dapat terlihatnya pengaruh

pemberian ekstrak secara nyata.

4.1. Glukosa Darah Sewaktu

Data glukosa darah yang diambil adalah jumlah rata-rata (mean) dari

glukosa darah yang diambil pada hari ke-1, ke-7 dan ke-14 masing-masing

kelompok. Data yang didapatkan selama penelitian adalah sebagai berikut :

Tabel 4.1. Rata-rata dan Standar Deviasi Glukosa Darah Tikus Setiap

Kelompok Penelitian

Kelompok Glukosa Darah

Sewaktu hari ke-1

Glukosa Darah

Sewaktu hari ke-7

Glukosa Darah

Sewaktu hari ke-14

N 132,75±18,02 120,75±29,51 136,75±13,67*

D 540,25±54,63 430±220,76 536,25±84,94*

D+Ss 487,25±119,15 407,25±185,27 345,75±103,25*

Keterangan : N, kelompok normal (N=4), D, kelompok diabetes (N=4), D+Ss, kelompok

diabetes dengan terapi Smallanthus sonchifolia (N=4) *p < 0,05

** p value < 0,01

* p value <0,05

Grafik 4.1 Rata-rata Glukosa Darah Tikus Setiap Kelompok Penelitian

0

100

200

300

400

500

600

700

1 7 14

GD

S (m

g/d

L)

Waktu Pengukuran (Hari)

N

D

D+Ss

** *

**

28

Dari Tabel 4.1 dan Grafik 4.1 didapatkan bahwa kelompok D dan

D+Ss mengalami penurunan kadar glukosa darah pada hari akhir penelitian

dibandingkan pada hari awal penelitian. Persentase penurunan terbesar

terdapat pada kelompok D+Ss yaitu sebesar 29%, meskipun penurunan

glukosa darah kelompok terapi tidak sampai pada kadar glukosa darah

normal. Pada kelompok normal didapatkan peningkatan kadar glukosa darah

sebesar 3%.

Selanjutnya dilakukan perhitungan statistik menggunakan One-Way

Anova untuk mengetahui signifikansi perbedaan antar kelompok. Tetapi

karena distribusi data normal namun varians data tidak homogen (Lampiran

3), maka perhitungan statistik dilanjutkan mentransformasi data, namun

hasil data tetap tidak memenuhi syarat untuk dilakukan One-Way Anova.

Sehingga uji statisk dilanjutkan dengan menggunakan uji Kruskal-Waliis.(18)

Data yang didapat adalah sebagai berikut :

Tabel 4.2. Hasil Analisa Data Glukosa Darah Setiap Kelompok Penelitian

Kategori Kelompok Mean Rank p-value

Glukosa darah N 2.50

D 10.00 0,012

D+Ss 7.00

Dari analisa data statistik Kruskal Wallis pada kadar glukosa darah

sewaktu hari ke-14 didapatkan hasil seperti pada tabel 4.2. Terdapat nilai

(p<0.05) yang menunjukkan perbedaan glukosa darah yang bermakna pada

semua kelompok. Hal ini dapat disebabkan kandungan smallanthaditepenic

acid A,B,C dan D pada daun insulin yang memiliki sifat anti-diabetik.(5)

Studi sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak daun insulin dengan

dosis 400 mg/kgBB/hari selama 14 hari dapat menurunkan kadar glukosa

darah tikus diabetes sebesar 59% dan juga didapatkan perbedaan antar

kelompok penelitian yang bermakna. Dalam studi tersebut dijelaskan efek

hipoglikemik dari daun insulin melalui mekanisme jumlah dan sensisitifitas

reseptor insulin yang meningkat, menurunkan degradasi insulin,

Hari Hari Hari Hari Hari Hari

29

meningkatkan pelepasan insulin oleh sel pankreas sehingga uptake

glukosa ke dalam jaringan otot dapat ditingkatkan.(6)

4.2. Berat Badan

Data berat badan yang diambil berdasarkan rerata tikus masing-

masing kelompok selama penelitian. Data yang diperoleh adalah sebagai

berikut:

Tabel 4.3. Rata-rata dan standar deviasi BB Tikus Setiap Kelompok

Penelitian

BB hari ke-1 BB hari ke-7 BB hari ke-14 Rasio BB (%)

(H14 / H1 x 100 %)

N 310±50 285±35,71 330±15,49 108.735

D 245±21,79 240±51,96 240±28,28 98.3225

D+Ss 260±20 250±33,17 280±28,28 107.74

Keterangan : N, kelompok normal (N=4), D, kelompok diabetes (N=4), D+Ss, kelompok

diabetes dengan terapi Smallanthus sonchifolia (N=4)

** p value < 0,01

*** p value >0,05

Grafik 4.2. Rasio Berat Badan Tikus Setiap Kelompok Penelitian

Dari tabel 4.3 didapatkan adanya kenaikan terdapat peningkatan

6.45% pada kelompok N, penurunan 2,04% pada kelompok D, sedangkan

terjadi peningkatan rerata berat badan sebesar 7,69% pada kelompok D+Ss.

Pada data ini dapat dilihat bahwa kelompok D+Ss terjadi peningkatan berat

badan paling besar dari kelompok lain. Hal ini menunjukkan bahwa adanya

0

20

40

60

80

100

120

140

H14 / H1

Ra

sio

Be

rat

Ba

da

n (%

)

Waktu Pengukuran (Hari)

N D D+Ss

ns ** *** **

30

kemungkinan pemberian terapi ekstrak Smallanthus sonchifolia selama 14

hari dengan dosis 300 mg/kgBB dapat menaikkan berat badan tikus.

Kemudian dilakukan perhitungan statistik dilakukan dengan metode

One-Way Annova. Data yang diinput adalah rasio berat badan hari ke-14

dengan berat badan hari ke-1. Uji normalitas menunjukkan distribusi data

yang normal, dan uji homogenitas varians data menunjukkan homogen

sehingga perhitungan statistik memenuhi syarat menggunakan metode One-

Way Annova.(23)

Tabel 4.4 Hasil Analisa Data BB Setiap Kelompok Penelitian

Rasio berat badan p-value

N 108.74 ± 17.17

0.518 D 98.32 ± 13.58

D+Ss 107.74 ± 8.99

*Data adalah rata-rata ± standar deviasi

Dari Tabel 4.4. diatas diperoleh nilai (p>0,05) menunjukkan

perbedaan BB yang tidak bermakna pada semua kelompok penelitian.

Peningkatan berat badan pada kelompok diabetes yang diberikan

terapi daun insulin lebih tinggi dibandingkan kelompok diabetes tanpa terapi

sesuai dengan penelitian Baroni et al. (2012) dengan dosis 400

mg/kgBB/hari selama 14 hari.

Pada penelitian lainnya oleh Genta et al. (2005) dengan ekstrak akar

yacon yang diberikan per oral menunjukkan hasil peningkatan berat badan

kelompok diabetes yang diberikan terapi dibanding kelompok diabetes

tanpa diberikan terapi pada hewan coba.

31

4.3. Trigliserida

Pada perhitungan statistik kadar trigliserida pada uji normalitas

didapatkan distrubusi data tidak normal dan pada uji homogenitas varians

data homogen (lampiran 3), sehingga tidak memenuhi syarat perhitungan

statistik dengan uji One-Way Anova, maka perhitungan statistik dilanjutkan

dengan menggunakan uji non-parametric test yaitu uji Kruskal-Walis.(23)

Hasil perhitungan statistik data trigliserida sebagai berikut :

Tabel 4.5 Rerata kadar Trigliserida dan Standar Deviasi Setiap Kelompok

Penelitian

Kelompok Kadar Trigliserida (mg/dL)

N 79,5 ± 16,70

D 175,25 ± 62,19

D + Ss 73,375 ± 50,55

* p value < 0,05

*** p value >0,05

Grafik 4.3. Rata-rata Kadar Trigliserida Tikus Setiap Kelompok Penelitian

0

50

100

150

200

250

14

Tri

glis

erid

a(m

g/d

L)

Waktu Pengukuran (Hari)

N

D

D + Ss

*

***

*

32

Tabel 4.6. Hasil Analisa Data Pengaruh Ekstrak Daun Smallanthus

sonchifolia Terhadap Kadar Trigliserida.

Kelompok Mean Rank p-value

N 5.50

D 10.00 0,05

D+Ss 4.00

Dari analisa data statistik Kruskal Wallis didapatkan nilai yang

mendekati (p<0.05) yang menunjukkan perbedaan trigliserida yang

bermakna pada semua kelompok. Hal ini sesuai penelitian sebelumnya oleh

Habib et al. (2011) dan Roselino et al.(2012) bahwa ekstrak daun insulin

efektif menurunkan kadar trigliserida, ditambahkan lagi dalam penelitian

tersebut bahwa pemberian ekstrak daun insulin efektif meningkatkan HDL-

kolesterol.(14,24)

4.4. Keterbatasan Penelitian

Selama penelitian berlangsung, banyak hambatan yang didapat, antara

lain:

a. Mencegah kematian pada tikus pasca induksi aloksan, karena kematian

tikus percobaan dalam penelitian ini tinggi.

b. Referensi penelitian di Indonesia mengenai efek ekstrak daun insulin

pada diabetes mellitus masih kurang.

c. Terbatasnya sample akibat banyaknya kematian tikus percobaan pasca

induksi aloksan menyebabkan, peneliti tidak bisa menambah kelompok

normal yang diberikan ekstrak daun insulin.

33

BAB V

SIMPULAN DAN SARAN

5.1. Simpulan

Berdasarkan pembahasan dan uji statistik pada penelitian ini, maka

peneliti dapat menyimpulkan bahwa pemberian ekstrak daun insulin

(Smallanthus sonchifolia) dengan dosis 300 mg/kgbb selama 14 hari dapat

mempengaruhi kadar glukosa darah, berat badan dan trigliserida tikus

diabetes strain Sprague dawley yang diinduksi aloksan. Pengaruhnya

dijelaskan sebagai berikut :

1) Didapatkan persentase penurunan rata-rata glukosa darah sebesar 29%

(p-value 0,012)

2) Didapatkan persentase kenaikan berat badan 7,69% (p-value 0,518)

3) Didapatkan perbedaan kadar trigliserida antar kelompok yang bermakna

(p-value 0,05)

5.2. Saran

Bagi peneliti selanjutnya :

Diperlukan penelitian lebih lanjut tentang efek ekstrak daun insulin

(Smallanthus sonchifolia) dengan waktu yang lebih lama dan sampel

yang lebih banyak.

Diperlukan penelitian lebih lanjut tentang efek ekstrak daun insulin

(Smallanthus sonchifolia) dengan membandingkan beberapa dosis, agar

dapat ditentukan kadar terbaik untuk digunakan sebagai terapi pasien

diabetes melitus.

34

BAB VI

KERJASAMA PENELITIAN

Penelitian ini merupakan bagian kerjasama penelitian mahasiswa dan

kelompok penelitian diabetes dan regenerasi pankreas PSPD FKIK UIN Syarif

Hidayatullah Jakarta yang dibiayai oleh Kementerian Agama Republik Indonesia

dibawah bimbingan dr. Flori Ratna Sari, Ph.D dan dr. Hari Hendarto, Sp.PD,

Ph.D, FINASIM.

35

DAFTAR PUSTAKA

(1) International Diabetes Federation. (2011). IDF – Global Diabetes Plan 2011

– 2021. Diunduh 25 Des 2013 pukul 11.12 page 4

(2) PERKENI. (2011). Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes

Melitus Tipe 2 di Indonesia. Jakarta : PERKENI

(3) Perhimpunan Dokter Spesialis Penyakit Dalam Indonesia. (2009). Buku

Ajar Ilmu Penyakit Dalam ed. V jilid III. Jakarta : Interna Publishing.

(4) Valentova , K., Ladislav Cvak., Alexandr Muck et al.(2002). Antioxidant

activity of extracts from the leaves of Smallanthus sonchifolius. Institute of

Medical Chemistry and Biochemistry. Olomouc: European Journal of

Nutrition.

(5) Xiang, Z., He, F., Kang, T.G., Dou, D.Q., Gai, K., Shi, Y.Y., Kim,

Y.H., Dong, F. (2010). Anti-diabetes constituents in leaves

of Smallanthus sonchifolius. Natural Product Communication, 5(1), 95-98.

(6) Baroni, Silmara, et. al. (2008). Effect of crude extracts of leaves of

Smallanthus sonchifolius (yacon) on glycemia in diabetic rats. Revista

Brasileira de Ciências Farmacêuticas.

(7) Perhimpunan Dokter Spesialis Penyakit Dalam Indonesia. (2009). Buku

Ajar Ilmu Penyakit Dalam ed. V jilid III. Jakarta : Interna Publishing.

(8) Sherwood, Lauralee. (2010). Fisiologi Manusia: dari sel ke sistem. Edisi 7.

Jakarta: EGC.

(9) Price, Sylvia Anderson., Wilson, Lorraine M. (2005). Patofisiologi: Konsep

Klinis Proses-Proses Penyakit vol.1 ed. 6. Jakarta: EGC.

(10) Gardner, David, G., Shoback, Dolores. (2007). Greenpan’s Basic & Clinical

Endocrinology 8th

ed. McGraw Hill.

(11) Guyton, Hall JE. (2006). Guyton textbook of Medical Physiology 11th

ed.

Pennysylvania : Elsivier.

(12) Longo., Fauci., Kasper., Hauser., Jameson., Loscalzo., (2012). Harrisons’s

Principles of Internal Medicine 8th

ed. USA: McGraw-Hill.

(13) International Diabetes Federation. 2003. IDF – Diabetes Atlas 2nd

ed.

Diunduh 25 Des 2013 11.12

36

(14) Habib NC, Honoré SM, Genta SB, Sánchez SS. 2011. Hypolipidemic effect

of Smallanthus sonchifolius (yacon) roots on diabetic rats: biochemical

approach. Universidad Nacional de Tucumán, San Miguel de Tucumán,

Argentina. Diunduh 18/12/2013 pukul 0:36

(15) Simonovska B, Vovk I, Andrensek S, Valentová K, Ulrichová J. (2003).

Investigation of phenolic acids in yacon (Smallanthus sonchifolius) leaves

and tubers. National Institute of Chemistry, Laboratory for Food Chemistry,

Slovenia. Diunduh 18/12/2013 pukul 0:43

(16) Rao, M.Upendra, et. al. (2010) Herbal Medicines for Diabetes Mellitus: A

Review. USA: International Journal of PharmTech Research.

(17) Genta, S.B., Cabrera, W.M., Mercado, M.I., Grau, A., Catalán,

C.A., Sánchez, S.S. (2010). Hypoglycemic activity of leaf organic extracts

from Smallanthussonchifolius: Constituents of the most active fractions.

Chemico-Biological Interaction, 185(2), 143-152.

(18) Honoré, S.M., Cabrera, W.M., Genta, S.B., Sánchez, S.S. (2012). Protective

effect of yacon leaves decoction against early nephropathy in experimental

diabetic rats. Food and Chemical Toxicology, 50(5), 1704-1715.

(19) Hashemi, M., et. al. (2009). Influence of Aloxanes on the Apoptosis of

Pancreas B-Cells of Rat. World Journal of Medical Sciences 4 (2): 70-73.

IDOSI Publication.

(20) Lenzen, Sigurd. (2008). Alloxan and Streptozotocin Diabetes. Institute of

Clinicl Biochemestry. Hannover : Pubmed. 1-13.

(21) Rohilla, Ankur., Shahjad Ali. (2012). Alloxan Induced Diabetes:

Mechanisms and Effects. India: Shri Gopi Chand Group of Institutions.

(22) Szkuldelski, T. (2001). The Mechanism of Alloxan and Streptozotocin

Action in B Cells of the Rat Pancreas. Poznan: Department of Animal

Physiology and Biochemestry, University of Agriculture, Poland.

(23) Dahlan, Muhammad Sopiyudin.(2009) Statistik untuk Kedokteran dan

Kesehatan: Deskriptif, Bivariat, dan Multivariat, Dilengkapi Aplikasi

dengan Menggunakan SPSS. Jakarta: Salemba Medika.

(24) Roselino, Mariana N., Nadiege DP., Daniela CU., Larissa SC., Roseli AP.,

Regina CV., Elizeu AR. (2012). A Potential Synbiotic Product Improves the

37

Lipid Profile of Diabetic Rats. Department of Food & Nutrition, School of

Pharmaceutical Sciences, Sao Poulo State University. Araraquara: BioMed

Central.

(25) Hendarmin, Laifa Annisa., Tjakradidjaja, Francisca A., Nasution, Silvia

Fitriana. (2011). Pedoman Penulisan Laporan Penelitian Mahasiswa

Program Studi Pendidikan Dokter. Jakarta: FKIK UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta.

38

LAMPIRAN

Lampiran 1

Surat Keterangan Tikus Sehat

Gambar 7.1 : Surat Keterangan Tikus Sehat

39

Lampiran 2

Hasil Determinasi / Identifikasi Bahan Uji

Gambar 7.2 : Surat Hasil Identifikasi Bahan Uji

40

Lampiran 3

Data Awal Semua Kelompok Penelitian

1. Glukosa Darah Sewaktu (mg/dL)

2. Berat Badan (gram)

3. Trigliserida

*Data tidak dilampirkan untuk mencegah praktek plagiarisme

41

Lampiran 4

Hasil Data Uji Statistik

A. Uji Normalitas dan Varians Data

B. Uji One – Way Annova

C. Uji Kruskal Wallis

*Data tidak dilampirkan untuk mencegah praktek plagiarisme

42

Lampiran 5

Gambar Proses Penelitian

1. Pengekstrakan Smallanthus sonchifolius

Gambar 7.3 Blender daun

insulin

Gambar 7.5 Hasil setelah serbuk

diayak

Gambar 7.6 Pengadukan

dengan stirer hot plate

Gambar 7.7 Hasil adukan

kemudian disaring

Gambar 7.8 Evaporator

Gambar 7.4 Serbuk hasil blender

43

(Lanjutan)

2. Hari pertama hingga hari ke empat belas

Gambar 7.10 Ekstrak

kering daun insulin

Gambar 7.9 Maltodextrin 250

mg & 500 ml aquades

Gambar 7.11 Sampel

penelitian

Gambar 7.12 Alloxan

monohydrate

Gambar 7.13 Induksi

Alloxan monohydrate pada

sampel

Gambar 7.14 Pengambilan

glukosa darah sampel

darah sampel

44

(Lanjutan)

Gambar 7.15 Pengukuran BB

sampel

Gambar 7.17 Proses sacrificed

dan pengambilan darah

Gambar 7.18 Pengukuran

trigliserida

Gambar 7.19 alat centrifuge

Gambar 7.16 Proses pemberian

ekstrak insulin

45

Lampiran 6

Cara Perhitungan

1. Induksi aloksan

Dosis aloksan yang digunakan adalah 150 mg/kgBB = 150mg /1000grBB.

Dosis untuk 10 ekor tikus dengan berat 300 gr :

10 x 300 x 150 / 1000 = 1500 mg

Jadi dosis untuk 10 ekor tikus dengan berat badan 300 gr adalah 1500 mg

aloksan.

Konsentrasi obat = 15 mg

0,1 ml

15 mg = 1500

0,1 ml X

X = 0,1 ml x 1500 = 10 ml

15

Jadi untuk dosis 1500 mg aloksan diperlukan 10 ml akuades.

1500 mg = 15 mg

10 ml 0,1ml

Dosis aloksan untuk 10 ekor tikus dengan berat badan 300 gr adalah:

150 mg x 300 gr = 45 mg

10 ml

Konsentrasi obat :

15 mg = 45 mg X = 0,1ml x 45 mg = 0,3 ml

0,1 X 15

Jadi untuk tikus dengan BB 300 gr disuntik aloksan yang telah dilarutkan dengan

akuades sebanyak 0,3 ml.

46

(Lanjutan)

2. Pemberian ekstrak

Dosis ekstrak daun insulin yang diberikan adalah 300 mg/kgBB

300 mg/1000grBB = 30 mg /100 grBB

Untuk konsentrasi obatnya adalah : 30 mg

0,1ml

Dosis ekstrak untuk 10 ekor tikus dengan rata-rata BB 300 gr adalah sebagai

berikut:

10 ekor tikus x 300 grBB x 30/100 grBB = 900 mg

Konsentrasi obat = 30 mg = 900 mg

0,1ml X

X = 0,1ml x 900 mg = 3 ml

30 mg

Jadi untuk setiap 10 ekor tikus dibutuhkan 900 mg ekstrak daun insulin dan 3

ml akuades.

Pemberian ekstrak daun insulin :

900 mg = 300 mg = 30 mg 30 mg x 300 grBB = 90 mg

3ml 1 ml 0,1 ml 100gr

30 mg = 90 mg X = 0,3 ml

0,1 ml X

Jadi untuk tikus dengan BB 300 gr diberikan ekstrak daun insulin sebanyak 0,3

ml.

47

(Lanjutan)

3. Trigliserida

Cara Perhitungan kadar trigliserida adalah sebagai berikut :

Trigliserida = kadar kolesterol sampel x 200 mg/dL

standar

Sampel duplo tabung 1 + tabung 2

2

Nilai rujukan normal trigliserida <150 mg/dL

Standar = 0.800 + 0,951 = 0,875

2

48

Lampiran 7

Riwayat Penulis

IDENTITAS

Nama : Candra Achmad Hanif Rosyidi

Jenis Kelamin : Laki-laki

Tempat, Tanggal Lahir : Surabaya, 14 April 1992

Agama : Islam

Alamat : Perumahan Kota Baru Driyorejo, Gresik

Email : candrarosyidi@gamil.com

Riwayat Pendidikan :

1997 – 1998 : TK Gondang, Mojokerto

1998 – 2004 : SD Muhammadiyah 6 Surabaya

2004 – 2008 : SMP Negeri 1 Surabaya

2008 – 2009 : PP Modern Islam Assalaam, Sukoharjo, Jateng

2009 – 2011 : Madrasah Bertaraf Internasional Amanatul Ummah, Mojokerto

2011 – sekarang : Prodi Pendidikan Dokter, FKIK, UIN Syarif Hidayatullah