0

EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum)

TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila

SECARA IN-VITRO

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Disusun Oleh:

NURWIRNAWATI

(0801070040)

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2016

1

HALAMAN PERSETUJUAN

EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum)

TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila

SECARA IN-VITRO

Oleh:

NURWIRNAWATI

0801070040

Telah diperiksa dan disetujui oleh Dosen pembimbing untuk dipertahankan di

depan Dewan penguji Skripsi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

Pembimbing I Pembimbing II

Drs. Heri Maryanto, M. Si Dini Siswani Mulia, S.Pi., M.Si

NIP. 196008131991031002 NIK. 2160124

Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

2

Skripsi Berjudul:

EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH

(Piper crocatum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI

Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO

Dipersiapkan dan disusun oleh :

NURWIRNAWATI

0801070040

Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji Pada tanggal 23 Januari 2016

dan dinyatakan telah memenuhi syarat untuk diterima sebagai kelengkapan

persyaratan mendapatkan gelar sarjana pendidikan Program Studi Pendidikan

Biologi

Pembimbing

1. Drs. Heri Maryanto, M. Si. ...................................

NIP. 196008131991031002

2. Dini Siswani Mulia, S. Pi., M. Si. ...................................

NIK. 2160124

Penguji

1. Drs. Arief Husin, M.Si ...................................

NIK. 2160062

2. Drh. Cahyono Purbomartono, M.Sc ...................................

NIP. 196209261994031001

Purwokerto, 10 Februari 2016

Universitas muhammadiyah purwokerto

Fakultas Keguruan Dan Ilmu Pendidikan

Dekan,

Drs. Pudiyono, M. Hum

NIK. 19560508 198603 1 003

Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

3

HALAMAN PERNYATAAN

Saya yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : NURWIRNAWATI

NIM : 0801070040

Program Studi : Pendidikan Biologi

Fakultas : Keguruan dan Ilmu Pendidikan

Menyusun skripsi dengan judul :

EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum)

TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA

IN-VITRO

Menyatakan dengan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil karya

tulis saya sendiri dan bukan dibuatkan orang lain atau jiplakan atau modifikasi

karya orang lain. Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari

terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan

sesuai ketentuan yang berlaku.

Purwokerto, 23 Januari 2016

Yang menyatakan

Nurwirnawati

Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

4

PERSEMBAHAN

Skripsi ini saya persembahkan untuk:

1. Kedua orang tua saya, yang sangat saya sayangi dan hormati, terima kasih

atas doa restu, nasehat dan motivasi yang sangat luar biasa.

2. Suamiku tercinta, Terimakasih untuk cinta, kasih sayang, kesabaran dan

segalanya. Hanya Allah SWT yang mampu membalas semuanya.

3. Kakak dan adikku tersayang yang senantiasa memberi semangat untuk

kelulusanku.

4. Untuk mutiaraku Aqila Rahmadani yang suatu saat nanti akan bersinar

lebih terang.

v Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

5

MOTTO

Sesungguhnya sesudah kesulitan ada kemudahan. Maka apabila engkau telah

selesai (dari suatu urusan), maka kerjakan urusan yang lain dengan sungguh-

sungguh (Q.S. Al-Insyirah: 6-7).

Wahai orang-orang yang beriman ! Mohonlah pertolongan (kepada Alloh) dengan

sabar dan sholat. Sesungguhnya Alloh beserta orang-orang yang sabar (Q.S. Al-

Baqarah: 153).

vi Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

6

UCAPAN TERIMA KASIH

Alhamdulillahirobil ‘alamin, segala puji syukur penulis panjatkan kehadirat

Allah SWT atas segala rahmat, dan karunia-Nya sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi dengan judul Efek Antibakteri Ekstrak Daun Sirih

Merah (Piper crocatum) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas

hydrophila Secara In-Vitro.

Terima kasih dengan setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada Drs. Heri

Maryanto, M.Si. dan Dini Siswani Mulia, S. Pi., M. Si. yang telah membimbing

dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

Penulisan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai

pihak, olek karena itu pada kesempatan kali ini penulis mengucapkan terimakasih

yang tak terhingga kepada:

1. Drs. Pudiyono, M. Hum. selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu

Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

2. Drs. Arief Husin, M.Si. selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi

Fakultas Keguruan dan Ilmu PendidikanUniversitas Muhammadiyah

Purwokerto.

3. Arif Prasetio Kurniawan yang selalu saya cintai yang telah memberikan doa,

motivasi, dan semangat yang luar biasa.

4. Keluarga besar saya yang senantiasa saya banggakan yang tidak pernah lelah

memberikan doa dan motifasi untuk menyelesaikan skripsi ini.

5. Anakku Aqila Rahmadani yang selalu menjadi motivasi untuk meneyelesaikan

skripsi ini.

vii Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

7

Penulis menyadari sepenuhnya akan segala keterbatasan pengetahuan dan

kemampuan yang penulis miliki, sehingga diperlukan kritik dan saran yang

membangun dan bermanfaat.

Akhir kata semoga Alloh SWT selalu melimpahkan rahmat, karunia dan

hidayah-Nya dan semoga skripsi ini bermanfaat bagi para pembaca.

Purwokerto, 23 Januari 2016

Penulis

viii Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

8

EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum)

TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila

SECARA IN-VITRO

NURWIRNAWATI

(0801070040)

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian yang bertujuan untuk mengetahui efektivitas

ekstrak daun sirih merah terhadap bakteri Aeromonas hydrophila. Penelitian

dilaksanakan selama 6 bulan di laboratorium Mikrobiologi Fakultas Keguruan dan

Ilmu Pendidikan dan Laboratorium Biologi-Farmasi Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto. Metode uji dilakukan menggunakan difusi kertas

cakram. Rancangan penelitian menggunakan rancangan acak lengkap dengan

pengulangan masing-masing 3 kali pada konsentrasi ekstrak daun sirih merah 0%,

10%, 15%, 25% dan kontrol positif (Kloramfenikol). Parameter yang diamati

adalah diameter zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak daun sirih merah dan

kloramfenikol. Analisis data dilakukan dengan menggunakan Analysis of

Variance (ANOVA) dengan tingkat kepercayaan 95 %, dilanjutkan dengan uji

Beda Nyata Terkecil (BNT) dengan tingkat kepercayaan 95%. Berdasarkan uji

fitokimia dengan uji reaksi warna Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ekstrak daun

sirih merah mengandung senyawa flafonoid, alkaloid, dan tanin. Hasil penelitian

menunjukkan bahwa semua perlakuan (selain kontrol) dapat menghambat

pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Berdasarkan analisis dengan uji F

menunjukkan terdapat perbedaan bermakna antar perlakuan. Hasil uji BNT

menunjukkan bahwa perlakuan konsentrasi ekstrak paling kecil yang masih

menghambat bakteri adalah 10% dan konsentrasi ekstrak 25% adalah yang paling

tinggi pengaruhnya terhadap pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Namun hasilnya

belum dikatakan efektif, karena belum memenuhi standar zona hambat antibiotik

menurut CLSI. Hasil kesetaraan kekuatan ekstrak daun sirih merah dibanding

dengan kloramfenikol menunjukkan perbandingan 1:1778,35 (dalam satuan ppm).

Kata kunci : Aeromonas hydrophila, antibakteri, sirih merah.

ix Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

9

DAFTAR ISI

Halaman

UCAPAN TERIMAKASIH ............................................................................. vii

ABSTRAK ....................................................................................................... ix

DAFTAR ISI .................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ........................................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xiv

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................... 1

1.1 Latar Belakang.......................................................................... 1

1.2 Perumusan Masalah .................................................................. 4

1.3 Tujuan Penelitian ...................................................................... 4

1.4 Manfaat Penelitian .................................................................... 4

1.5 Hipotesis Penelitian .................................................................. 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................. 5

2.1 Tanaman sirih merah (Piper crocatum) .................................... 5

2.1.1 Klasifikasi Tanaman Sirih Merah (Piper crocatum) ....... 5

2.1.2 Deskripsi Tanaman Sirih Merah (Piper crocatum) ......... 5

2.1.3 Kandungan Kimia Daun Sirih Merah (Piper crocatum) .. 6

2.2 Bakteri Aeromonas hydrophila .................................................. 9

2.2.1 Klasifikasi bakteri Aeromonas hydrophila........... ............ 9

2.2.2 Deskripsi bakteri Aeromonas hydrophila ......................... 10

x Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

10

2.3 Antibiotik Pembanding .............................................................. 11

2.4 Ekstraksi .................................................................................... 11

BAB III METODE PENELITIAN ................................................................ 13

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................. 13

3.2 Alat dan BahanPenelitian ......................................................... 13

3.2.1 Alat .................................................................................. 13

3.2.2 Bahan ............................................................................... 13

3.3 Rancangan Penelitian ............................................................... 14

3.4 Prosedur Penelitian .................................................................... 15

3.4.1 Ekstraksi Daun Sirih Merah ............................................ 15

3.4.2 Pembuatan medium ...................... .................................. 15

3.4.2.1 Medium TSA (Tryptic Soya Agar) ...................... 15

3.4.2.2 Medium TSB (Tryptic Soya Broth ...................... 15

3.4.2.3 Medium GSP (Glutamate Strach Phenil) ............ 16

3.4.3 Analisis Fitokimia Ekstrak Daun Sirih Merah (Piper

crocatum) dengan Metode kromatografi lapis tipis (KLT) 16

3.5 Kultur Biakan Aeromonas hydrophila ....................................... 18

3.6 Penentuan Jumlah Sel Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)

Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ...................... 18

3.7 Uji Sensitivitas Antibiotik Pembanding (kloramfenikol)

Terhadap Bakteri Aeromonas hydrophila................................. 19

3.8 Uji Efektifitas antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

(Piper crocatum) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas

hydrophila ................................................................................ 20

3.9 Penentuan Kesetaraan Efektifitas Ekstrak Daun Sirih Merah

Dengan Antibiotik Pembanding ................................................ 21

3.10 Pengamatan .............................................................................. 21

3.11 Analisis Data ........................................................................... 21

xi Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

11

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 22

4.1 Ekstraksi Daun Sirih Merah ...................................................... 22

4.2 Analisis Fitokimia Ekstrak Daun Sirih Merah Dengan

Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............................................... 23

4.3 Purifikasi Biakan Bakteri Aeromonas hydrophila ..................... 24

4.4 Penentuan Jumlah Sel Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)

Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC ....................... 25

4.5 Uji Sensitifitas Antibiotik Kloramfenikol Sebagai Antibiotik

Pembanding ............................................................................... 26

4.6 Uji Efektifitas Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah ...................... 27

4.7 Kesetaraan Efektifitas Ekstrak Daun Sirih Merah Dengan

Perbandingan Antibiotik Kloramfenikol ................................... 29

BAB V SIMPULAN DAN SARAN............................................................. 32

5.1 Simpulan .................................................................................... 32

5.2 Saran ......................................................................................... 32

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 33

LAMPIRAN ..................................................................................................... 37

xii Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

12

DAFTAR TABEL

Nomor Judul Tabel Halaman

4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Daun Sisih Merah dan Hasilnya ............... 22

4.2 Hasil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Daun Sirih Merah ..... 23

4.3 Hasil Penentuan Jumlah Sel Bakteri Aeromonas hydrophila ............. 25

4.4 Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik Kloramfenikol Sebagai Antibiotik

Pembanding .......................................................................................... 26

4.5 Hasil Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah ...................... 27

xiii Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

13

DAFTAR TABEL

Nomor Judul Tabel Halaman

4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Daun Sisih Merah dan Hasilnya ............... 22

4.2 Hasil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Daun Sirih Merah ..... 23

4.3 Hasil Penentuan Jumlah Sel Bakteri Aeromonas hydrophila ............. 25

4.4 Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik Kloramfenikol Sebagai Antibiotik

pembanding .......................................................................................... 27

4.5 Hasil Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah ...................... 27

xiv Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

14

DAFTAR GAMBAR

Nomor Judul Gambar Halaman

4.1 Hasil penapisan fitokimia senyawa metabolit sekunder ekstrak

daun sirih merah. Hasil positif terdapat A. flavonoid B. Alkaloid

C. tanin ................................................................................................. 23

4.2 Kultur bakteri Aeromonas hydrophila dalam media GSP .................... 24

4.3 Kurva hubungan antara diameter zona hambat kloramfenikol

dengan ekstrak daun sirih merah .......................................................... 30

xv Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016

15

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Judul Lampiran Halaman

1 Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Daun Sirih Merah (Piper

crocatum ............................................................................................... 36

2 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila

Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC ................................. 37

3 Standar Zona Hambat Antibiotik Menurut CLSI............................. .... 38

4 Hasil Analisis Statistik Uji Daya Hambat Ekstrak Sirih Merah ........... 39

5 Perhitungan persamaan regresi linear sederhana ................................. 41

6 Kategori Hubungan Regresi Menurut Gomes dan Gomes (1995 ........ 42

xvi Efek Antibakteri Ekstrak..., Nurwirnawati, FKIP, UMP, 2016