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各装置毎の検出例 NEXT 試薬を通して最新研究をサポート 試薬を通して最新研究をサポート ʹۃΑΔධՁ ʹۃΑΔධՁ 検索 JC-1 同仁 HeLa ๔ΛࡎۃͰΔ carbonylcyanide-p-trifluoromethoxyphenylhydrazone ʢFCCPʣʹॲཧɺຊΩοτͰບҐͷมԽΛධՁ ·ɻ Ռɺະॲཧͷ๔ͰɺϛτίϯυϦΞશମછ·Γɺ FCCP Ͱॲཧ๔৭ܬͷݮগΕ·ɻ ຊΩοτɺདྷΑΓϛτίϯυϦΞບҐݕग़ʹ༻ΕΔ JC-1 ৭ૉͱղੳ༻ͷόοϑΝʔ·Ε·ɻॳΊͷ қΑɺ৭ૉͷղϓϩτίϧΛΊɺʑͳΞϓϦέʔγϣϯΛ༻ҙ·ɻ ͳϛτίϯυϦΞບҐݟΒΕΔ ͳϛτίϯυϦΞບҐݟΒΕΔ དྷͷ՝Λղ དྷͷ՝Λղ × ॳΊͰ ॳΊͰ ϛτίϯυϦΞɺATP ͷΤωϧΪʔੜͷͰΓɺͷ ׆ͷมԽػোΜԽɺਆܦױͳͲͱʹ ࿈·ɻͷΊϛτίϯυϦΞͷঢ়ଶΛཧղΔͱ ཁͰΓɺͷඪͱΤωϧΪʔੜʹੜΔບҐ ධՁΕ·ɻ ϛτίϯυϦΞਖ਼ৗͰບҐอΕঢ়ଶͰɺ JC-1 ڽ৭ͷܬΛɺບҐԼΔͱɺ JC-1 ୯ମͱ ৭ͷܬΛ·ɻͷ৭ͱ৭ͷܬڧͷม ԽΛϛτίϯυϦΞͷঢ়ଶͱධՁΔͱͰ·ɻ ミトコンドリ 膜電位 ミトコンドリア 膜電位ミトコンドリ 膜電位検出 キット ミトコンドリア膜電位検出キット JC-1 MitoMP Detection Kit JC-1 MitoMP Detection Kit ຊΩοτͰ ղ ͷ JC-1 ৭ૉΛ༰қʹղΔ ͱͰ·ɻ ʑͳஔʹରԠ ʑͳஔʹରԠ ݕग़ஔຖʹݧΛ४උ·ɻ ղੳͷόοϑΝʔΛಉ ղੳͷόοϑΝʔΛಉ ๔ͷঢ়ଶΛΑΓҡΔΊɺ HEPES ༗ͷόοϑΝʔΛಉ ·ɻ Control FCCP 100μmol/l ບҐ ߴບҐ JC-1 monomer JC-1 polymer ۃա ۃJC-1 ͷݕݪݧ JC-1 ɿ2 μmol/l in MEM, છ৭ɿ30 min FCCP ɿ100 μmol/l, FCCP ॲཧɿ1 h ݕGreenɿEx 488 nm / Em 500-550 nm Red ɿEx 561 nm / Em 560-610 nm εέʔϧόʔɿ20 μm

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Page 1: 試薬を通して最新研究をサポート ミトコンドリア … › technical › pdf › mt09.pdfTitle ミトコンドリア膜電位を蛍光で見る JC-1 MitoMP Detection

各装置毎の検出例NEXT

試薬を通して最新研究をサポート試薬を通して最新研究をサポート

脱分極による評価例脱分極による評価例

検索JC-1 同仁

HeLa細胞を脱分極剤である carbonylcyanide-p-trifluoromethoxyphenylhydrazone(FCCP)にて処理し、本キットで膜電位の変化を評価しました。 結果、未処理の細胞では、ミトコンドリア全体が赤く染まり、FCCPで処理した細胞は赤色蛍光の減少が確認されました。

本キットは、従来よりミトコンドリア膜電位検出に使用されている JC-1 色素と解析用のバッファーが含まれています。初めての方も使い易いよう、難溶性色素の溶解プロトコルをはじめ、様々なアプリケーションをご用意しています。

なぜミトコンドリア膜電位が見られているかなぜミトコンドリア膜電位が見られているか

従来の課題を解決従来の課題を解決

×× 〇〇

初めてでも使いやすい初めてでも使いやすい

ミトコンドリアは、ATP等のエネルギー産生の場であり、その活性の変化や機能障害ががんや老化、神経変性疾患などと密接に関連しています。そのためミトコンドリアの状態を理解することが重要であり、その指標としてエネルギー産生に伴い生じる膜電位差が評価されています。

ミトコンドリアが正常で膜電位差が保たれた状態では、JC-1が凝集し赤色の蛍光を発し、膜電位が低下すると、JC-1が単量体として存在し緑色の蛍光を発します。この赤色と緑色の蛍光強度の変化をミトコンドリアの状態として評価することができます。

ミトコンドリア膜電位をミトコンドリア膜電位を

光光で見るで見るミトコンドリア膜電位検出キットミトコンドリア膜電位検出キットJC-1 MitoMP Detection KitJC-1 MitoMP Detection Kit

本キットで解決

難溶性の JC-1 色素を容易に溶解することができます。

様々な装置に対応様々な装置に対応

検出装置毎に実験例を準備しています。

解析時のバッファーを同梱解析時のバッファーを同梱

細胞の状態をより長く維持するため、HEPES 含有のバッファーを同梱しています。

Control FCCP 100μmol/l

低膜電位高膜電位

JC-1 monomerJC-1 polymer

脱分極

過分極

JC-1の検出原理

蛍蛍

実験条件JC-1 濃度 : 2 μmol/l in MEM, 染色時間 :30 minFCCP濃度 :100 μmol/l, FCCP 処理時間 :1 h

検出条件Green:Ex 488 nm / Em 500-550 nm Red :Ex 561 nm / Em 560-610 nmスケールバー:20 µm

Page 2: 試薬を通して最新研究をサポート ミトコンドリア … › technical › pdf › mt09.pdfTitle ミトコンドリア膜電位を蛍光で見る JC-1 MitoMP Detection

http://www.dojindo.co.jpURL E-mail [email protected]

JC-1 MitoMP Detection KitJC-1 MitoMP Detection Kitミトコンドリア膜電位検出キット

メーカーコードコード希望納入価格容 量品 名

JC-1 MitoMP Detection Kit 1 set ¥ 23,000 MT09349-09401

JC-1 同仁 検 索キーワードで検索

操作の流れ操作の流れ

アポトーシス誘導時の評価例アポトーシス誘導時の評価例Jurkat 細胞にアポトーシス誘導剤である Staurosporineを添加し、本キットにて評価しました。操作方法については、小社 HPに掲載している取扱説明書よりご覧いただけます。

アポトーシス誘導により変化した膜電位を色の変化で明瞭にイメージング

個々の細胞の膜電位変化を定量解析(汎用のフィルターに対応)個々の細胞の膜電位変化を定量解析(汎用のフィルターに対応)

ウェル中のすべての細胞を対象に膜電位の変化を確認(多検体処理に対応)ウェル中のすべての細胞を対象に膜電位の変化を確認(多検体処理に対応)

薬剤などで刺激 JC-1 Working Solution添加 バッファー交換(製品に同梱)

インキュベーション30分インキュベーション

プレートリーダープレートリーダーフローサイトメーターフローサイトメーター

蛍光顕微鏡蛍光顕微鏡

使用回数の目安使用回数の目安

Control Apoptosis

蛍光顕微鏡 フローサイトメーター プレートリーダー25枚

(35mm dish 使用時) 100回

※ 2 µmol/l JC-1 working solutionを調製した場合

5枚(96-well 使用時)

解析解析・蛍光顕微鏡・フローサイトメトリー・プレートリーダー

染色試薬を培養細胞へ添加するだけの簡単な操作で染色できます。また細胞の状態をより長く維持しながら解析できる HEPES 含有バッファーを本製品に同梱しています。

Red

fluo

resc

ence

1010 Green fluorescence

Control

Apoptosis

102 103 104 105

101

010

210

310

410

5

検出条件Green: Ex 488 nm / Em 515-545 nmRed :Ex 488 nm / Em 564-604 nm

検出条件Green: Ex 485 nm / Em 525-545 nm Red :Ex 535 nm / Em 585-605 nm

検出条件Green:Ex 488 nm / Em 500-550 nmRed :Ex 561 nm / Em 560-610 nmスケールバー:80 µm

Control cells

1.2

1

0.8

0.6

0.4

0.2

0

Fluo

resc

ense

inte

nsity

ratio

(Red

/Gre

en)

Apoptosis cells

Page 3: 試薬を通して最新研究をサポート ミトコンドリア … › technical › pdf › mt09.pdfTitle ミトコンドリア膜電位を蛍光で見る JC-1 MitoMP Detection

マイトファジーを蛍光検出NEXT

ミトコンドリア解析用試薬ラインナップ

メーカーコードコード希望納入価格容 量品 名

Mito-Ferro Green

MitoPeDPP

Si-DMA for Mitochondrial Singlet Oxygen Imaging

MitoBright Green

MitoBright Red

MitoBright Deep Red

Lactate Assay Kit-WST

50 μg ×2

5 μg ×3

2 μg

50 μg ×3

50 μg ×3

50 μg ×3

50 tests200 tests

¥ 25,000

¥ 18,600

¥ 20,000

¥ 9,800

¥ 9,800

¥ 9,800

¥ 29,000¥ 68,000

344-09211

346-91721

341-91911

341-92011

346-91961

343-91971

343-09281349-09283

M489

M466

MT05

MT06

MT07

MT08

L256

ミトコンドリア 比較 同仁 検 索キーワードで検索小社では、ミトコンドリア解析用試薬を各種取り揃えています。

各製品の測定例やプロトコルについては、小社 HPにてご覧いただけます。

O

OH

O

LOOHLOOH

1O21O2

Fe2+Fe2+

OH・OH・

LOOH・LOOH・

L・L・

LHLH

H2O2H2O2

O2O2

UV irradiationUV irradiation

H

HO

H

HOH

OH

OH

CH2OHO

解糖系解糖系

ピルビン酸ピルビン酸

アセチルCoAアセチルCoA

TCA回路TCA回路

グルコースグルコースMitophagy Detection KitMitophagy Detection Kit

低分子蛍光プローブにより生細胞中のマイトファジーを簡便に検出できる。低分子蛍光プローブにより生細胞中のマイトファジーを簡便に検出できる。

マイトファジーの検出 (次項に掲載)マイトファジーの検出 (次項に掲載)ミトコンドリア内の鉄 (II) の検出 ミトコンドリア内の鉄 (II) の検出

一重項酸素の検出一重項酸素の検出

MitoBright Series (Green, Red, DeepRed)MitoBright Series (Green, Red, DeepRed)

ミトコンドリア染色試薬ミトコンドリア染色試薬

MitoBright GreenMitoBright Green MitoBright Deep RedMitoBright Deep Red MitoBright Red MitoBright Red

脂溶性過酸化物の検出脂溶性過酸化物の検出

Mito-FerroGreenMito-FerroGreen

ミトコンドリア内の 2価鉄を選択的に検出できる。ミトコンドリア内の 2価鉄を選択的に検出できる。

MitoPeDPPMitoPeDPP

ROS により酸化障害を受けたミトコンドリア中の脂溶性過酸化物を検出できる。

ROS により酸化障害を受けたミトコンドリア中の脂溶性過酸化物を検出できる。

Si-DMA for Mitochondrial Singlet Oxygen ImagingSi-DMA for Mitochondrial Singlet Oxygen Imaging

UV 照射等で発生した一重項酸素をリアルタイムにイメージングできる。UV 照射等で発生した一重項酸素をリアルタイムにイメージングできる。

細胞内のミトコンドリアを特異的に染色できる。実験に応じた蛍光波長の選択が可能。

ミトコンドリア膜電位の検出ミトコンドリア膜電位の検出

JC-1 MitoMP Detection KitJC-1 MitoMP Detection Kit

ミトコンドリア膜電位変化を、顕微鏡、フローサイトメーター、マイクロプレートリーダーを用い解析ができる。ミトコンドリア膜電位変化を、顕微鏡、フローサイトメーター、マイクロプレートリーダーを用い解析ができる。

乳酸乳酸

乳酸検出キット乳酸検出キット

解糖系の代謝産物である乳酸を96 ウェルマイクロプレートを使った吸光度測定にて定量することができる。

Lactate Assay Kit-WSTLactate Assay Kit-WST

Page 4: 試薬を通して最新研究をサポート ミトコンドリア … › technical › pdf › mt09.pdfTitle ミトコンドリア膜電位を蛍光で見る JC-1 MitoMP Detection

Mitophagy Detection KitMitophagy Detection Kitマイトファジー検出キット

関連製品

メーカーコードコード希望納入価格容 量品 名

Mitophagy Detection Kit 1 set ¥36,000 MD01

1)記載価格は本体価格のみで、消費税等は含まれておりません。2)記載価格はこのパンフレット編集時 (2018年9月)における希望納入価格です。予告なしに変更する場合がございますのでご注意ください。3)試験・研究用のみに使用するものです。医療用その他の目的には使用できません。

344-91901

Mitophagy 同仁 検 索キーワードで検索

オートファジー検出キット

老化細胞検出キット

DALGreen/DAPGreen - Autophagy Detection Kit

Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER-βGal

:ffwk.fujifilm.co.jp:0120 - 052-099

URLFree Dial :0120 - 052-806Free Fax

:0120 - 489-548:www.dojindo.co.jp

Free DialURL

:096-286-1515(代表)

[email protected]

:03-3578-9651(代表)Tel

製造元・国内問合せ先

国内販売元 取扱店

180925-1(S)Ⓒ Dojindo Laboratories. All Right Reserved.

Mtphagy Dyeのミトコンドリアへの集積、固定化Mtphagy Dyeのミトコンドリアへの集積、固定化

: Mtphagy Dye(弱い蛍光): Mtphagy Dye(弱い蛍光)

ミトコンドリアミトコンドリア Lysosome との融合Lysosome との融合Autophagosome形成

Autophagosome形成

: Mtphagy Dye(強い蛍光): Mtphagy Dye(強い蛍光)

ミトコンドリアがリソソームと融合し、酸性条件下におかれた Mtphagy Dyeの蛍光強度が増大

ミトコンドリアがリソソームと融合し、酸性条件下におかれた Mtphagy Dyeの蛍光強度が増大

マイトファジーにより蛍光が増大マイトファジーにより蛍光が増大

飢餓培養細胞での検出例飢餓培養細胞での検出例

培養細胞に試薬(Mtphagy Dye)を添加すると、ミトコンドリアに Mtphagy Dye が集積しますが、この状態では蛍光強度は弱い状態です。その後、マイトファジーが誘導されミトコンドリアがオートファゴソームに内包され、リソソームと融合すると酸性条件下となりMtphagy Dye の蛍光が増大します。さらに、本キットに付属するリソソーム染色試薬(Lyso Dye)と共染色することができます。

※ 本製品の測定原理・使用例が記載された論文は、小社 HP にてご覧いただけます。

HeLa 細胞へ Mtphagy Dye を添加後、飢餓培養条件下にて 6 時間インキュベート。その後 Lyso Dye 添加によりリソソームの共染色を行いました。結果、飢餓培養した HeLa 細胞において、Mtphagy Dye の蛍光の増大がみられ、その局在はリソソームの局在とも合致しました。

飢餓誘導

cont

rol

重ね合せLyso Dye(リソソーム染色)

Mtphagy Dye(マイトファジー染色)

実験条件誘導条件︓DMEM培地(アミノ酸不含、Pepstatin A及び E-64d含有)

検出条件Mtphagy Dye:Ex 561 nm / Em 650 LP nmLyso Dye :Ex 488 nm / Em 502-554 nm

pHによる Mtphagy Dyeの蛍光強度変化pHによる Mtphagy Dyeの蛍光強度変化