ds kythuatsxdp t2 w50

1
50 B»ng ph¬ng ph¸p ho¸ häc, ph©n tö enzym ®îc nèi l¹i víi nhau t¹o thμnh c¸c sîi ngang däc b»ng ph¶n øng gi÷a c¸c nhãm amin cña enzym víi t¸c nh©n polymer ho¸ cña mét ho¸ chÊt nhglutaraldehyd. Cã nhiÒu ph¶n øng ho¸ häc cã thÓ sö dông ®Ó bÊt ®éng enzym b»ng c¸ch nμy c¸c nhãm chøc n¨ng kh«ng chÝnh yÕu cña chóng ®îc g¾n víi c¸c chÊt mang v« c¬ nhgèm, thuû tinh, s¾t, titan ... hoÆc víi c¸c polymer thiªn nhiªn nhsepharose vμ cellulose, víi c¸c polymer tæng hîp nhnilon, polyacriamid, c¸c polymer vinyl kh¸c vμ chÝnh c¸c polymer nμy gi÷ ®îc c¸c nhãm ho¸ chøc ho¹t ®éng trë l¹i. Trong nhiÒu thñ thuËt thùc hiÖn ®Ó gãi enzym víi chÊt mang b»ng ph¬ng ph¸p nμy nhËn thÊy c¸c nhãm ho¹t ®éng ho¸ häc bÞ ph©n t¸n lén xén. V× thÕ c¸c nghiªn cøu gÇn ®©y ®· chó ý ®Õn kü thuËt bÊt ®éng enzym sao cho c¸c enzym khi g¾n víi chÊt mang kh«ng bÞ mÊt hoÆc gi¶m ®i ho¹t tÝnh cña m×nh. Giíi h¹n cña kü thuËt bÊt ®éng enzym ®îc tr×nh bμy ë b¶ng 4.5. B¶ng 4.5. Nh÷ng h¹n chÕ cña kü thuËt bÊt ®éng enzym Ph¬ng ph¸p ¦u ®iÓm Nhîc ®iÓm g¾n kÕt ®¬ng lîng Kh«ng bÞ ¶nh hëng cña pH, ion cña m«i trêng hoÆc nång ®é c¬ chÊt Líi ho¹t ®éng cã thÓ biÕn ®æi gi¸ thμnh ®¾t Polymer ho¸ ®¬ng lîng Enzym ho¹t ®éng m¹nh, chËm mÊt ho¹t tÝnh Ho¹t tÝnh bÞ mÊt trong khi kh«ng hiÖu qu¶ ®èi víi c¸c c¬ chÊt cã ph©n tö lîng lín; kh«ng cã kh¶ n¨ng t¸i sinh HÊp phô §¬n gi¶n, enzym kh«ng bÞ biÕn ®æi, cã thÓ thu håi chÊt mang, gi¸ thμnh thÊp BÞ thay ®æi trong m«i trêng ion ho¸ m¹nh, enzym bÞ ®Èy ra dïng cho protease BÉy b»ng ho¸ häc Enzym kh«ng bÞ biÕn ®æi vÒ ho¸ häc C¬ chÊt khuÕch t¸n vμo trong s¶n phÈm ®i ra ngoμi, chuÈn bÞ khã kh¨n, enzym bÞ mÊt ho¹t tÝnh, kh«ng hiÖu qu¶ ®èi víi c¬ chÊt cã ph©n tö lín Kü thuËt “bÉy” enzym vμo trong c¸c gel lμ mét thμnh c«ng khi tiÕn hμnh polymer ho¸ hoÆc t¹o h¹t b»ng c¸c ph¶n øng ®«ng tô. Polyacriamid, collagen, silicagel ... lμ nh÷ng chÊt tá ra thÝch hîp cho kü thuËt nμy. Tuy nhiªn qu¸ tr×nh t¹o gel khã kh¨n vμ hiÖu qu¶ ho¹t tÝnh cña enzym thÊp. Trªn thùc tÕ thêng cã khuynh híng bÊt ®éng tÕ bμo h¬n lμ bÊt ®éng enzym v× bá qua ®îc c«ng ®o¹n chiÕt xuÊt vμ tinh chÕ enzym mÊt thêi gian, tèn kÐm. BÊt ®éng tÕ bμo ®ang lμ vÊn ®Ò cã tiÒm n¨ng to lín, bëi v× nã cho phÐp thùc hiÖn kh«ng chØ ®èi víi viÖc t¹o ra c¸c s¶n phÈm chuyÓn ho¸ s¬ cÊp, mμ cßn øng dông ®Ó biÕn ®æi ®Ó t¹o ra c¸c s¶n phÈm chuyÓn ho¸ thø cÊp rÊt cã gi¸ trÞ, nhc¸c kh¸ng sinh b¸n tæng hîp, c¸c steroid, ®iÒu khiÓn liªn tôc c¸c qu¸ tr×nh ho¸ häc th«ng qua c¸c ®iÖn cùc enzym, xö lý níc th¶i, cè ®Þnh nit¬... (b¶ng 4.6).

Upload: phiphi

Post on 15-Dec-2015

215 views

Category:

Documents


0 download

DESCRIPTION

7896876ty

TRANSCRIPT

Page 1: DS KythuatSXDP t2 w50

50

B»ng ph−¬ng ph¸p ho¸ häc, ph©n tö enzym ®−îc nèi l¹i víi nhau t¹o thμnh c¸c sîi ngang däc b»ng ph¶n øng gi÷a c¸c nhãm amin cña enzym víi t¸c nh©n polymer ho¸ cña mét ho¸ chÊt nh− glutaraldehyd. Cã nhiÒu ph¶n øng ho¸ häc cã thÓ sö dông ®Ó bÊt ®éng enzym b»ng c¸ch nμy c¸c nhãm chøc n¨ng kh«ng chÝnh yÕu cña chóng ®−îc g¾n víi c¸c chÊt mang v« c¬ nh− gèm, thuû tinh, s¾t, titan ... hoÆc víi c¸c polymer thiªn nhiªn nh− sepharose vμ cellulose, víi c¸c polymer tæng hîp nh− nilon, polyacriamid, c¸c polymer vinyl kh¸c vμ chÝnh c¸c polymer nμy gi÷ ®−îc c¸c nhãm ho¸ chøc ho¹t ®éng trë l¹i. Trong nhiÒu thñ thuËt thùc hiÖn ®Ó gãi enzym víi chÊt mang b»ng ph−¬ng ph¸p nμy nhËn thÊy c¸c nhãm ho¹t ®éng ho¸ häc bÞ ph©n t¸n lén xén. V× thÕ c¸c nghiªn cøu gÇn ®©y ®· chó ý ®Õn kü thuËt bÊt ®éng enzym sao cho c¸c enzym khi g¾n víi chÊt mang kh«ng bÞ mÊt hoÆc gi¶m ®i ho¹t tÝnh cña m×nh. Giíi h¹n cña kü thuËt bÊt ®éng enzym ®−îc tr×nh bμy ë b¶ng 4.5.

B¶ng 4.5. Nh÷ng h¹n chÕ cña kü thuËt bÊt ®éng enzym

Ph−¬ng ph¸p ¦u ®iÓm Nh−îc ®iÓm

Sù g¾n kÕt ®−¬ng l−îng

Kh«ng bÞ ¶nh h−ëng cña pH, ion cña m«i tr−êng hoÆc nång ®é c¬ chÊt

L−íi ho¹t ®éng cã thÓ biÕn ®æi gi¸ thµnh ®¾t

Polymer ho¸ ®−¬ng l−îng

Enzym ho¹t ®éng m¹nh, chËm mÊt ho¹t tÝnh

Ho¹t tÝnh bÞ mÊt trong khi kh«ng hiÖu qu¶ ®èi víi c¸c c¬ chÊt cã ph©n tö l−îng lín; kh«ng cã kh¶ n¨ng t¸i sinh

HÊp phô §¬n gi¶n, enzym kh«ng bÞ biÕn ®æi, cã thÓ thu håi chÊt mang, gi¸ thµnh thÊp

BÞ thay ®æi trong m«i tr−êng ion ho¸ m¹nh, enzym bÞ ®Èy ra dïng cho protease

BÉy b»ng ho¸ häc

Enzym kh«ng bÞ biÕn ®æi vÒ ho¸ häc

C¬ chÊt khuÕch t¸n vµo trong s¶n phÈm ®i ra ngoµi, chuÈn bÞ khã kh¨n, enzym bÞ mÊt ho¹t tÝnh, kh«ng hiÖu qu¶ ®èi víi c¬ chÊt cã ph©n tö lín

Kü thuËt “bÉy” enzym vμo trong c¸c gel lμ mét thμnh c«ng khi tiÕn hμnh polymer ho¸ hoÆc t¹o h¹t b»ng c¸c ph¶n øng ®«ng tô. Polyacriamid, collagen, silicagel ... lμ nh÷ng chÊt tá ra thÝch hîp cho kü thuËt nμy. Tuy nhiªn qu¸ tr×nh t¹o gel khã kh¨n vμ hiÖu qu¶ ho¹t tÝnh cña enzym thÊp.

Trªn thùc tÕ th−êng cã khuynh h−íng bÊt ®éng tÕ bμo h¬n lμ bÊt ®éng enzym v× bá qua ®−îc c«ng ®o¹n chiÕt xuÊt vμ tinh chÕ enzym mÊt thêi gian, tèn kÐm.

BÊt ®éng tÕ bμo ®ang lμ vÊn ®Ò cã tiÒm n¨ng to lín, bëi v× nã cho phÐp thùc hiÖn kh«ng chØ ®èi víi viÖc t¹o ra c¸c s¶n phÈm chuyÓn ho¸ s¬ cÊp, mμ cßn øng dông ®Ó biÕn ®æi ®Ó t¹o ra c¸c s¶n phÈm chuyÓn ho¸ thø cÊp rÊt cã gi¸ trÞ, nh− c¸c kh¸ng sinh b¸n tæng hîp, c¸c steroid, ®iÒu khiÓn liªn tôc c¸c qu¸ tr×nh ho¸ häc th«ng qua c¸c ®iÖn cùc enzym, xö lý n−íc th¶i, cè ®Þnh nit¬... (b¶ng 4.6).