dossier validation/ana211 v01 détection, identification ......les psp concernées par ce dossier de...

Vérification : JL Beaudart (RQ) 1 /34 Mise en fonction : 17.06.2013

DDOOSSSSII EERR VVAALL II DDAATTII OONN//AANNAA221111 vv0011

DDéétteecctt iioonn,, iiddeenntt ii ff iiccaatt iioonn eett qquuaanntt ii ff iiccaatt iioonn ddeess ttooxxiinneess PPSSPP ((PPaarr aallyytt iicc SShheell ll ff iisshh PPooiissoonniinngg)) ddaannss lleess ff rr uuii ttss ddee mmeerr ppaarr HHPPLL CC--ff lluuoorr eesscceennccee

Mise en fonction : 08/01/2014 Pages : 6 Annexes : 0 Nom, fonction Date Signature Rédaction : Gillard Nathalie

Responsable méthode

Vérification : Jean-Luc Beaudart Responsable AQ

Approbation : Philippe Delahaut Directeur

Toute reproduction interdite

SOP DHA VALIDATION/ANA211 Validation de la méthode de détection, identification et quantification des PSP dans les fruits de mer


HHiissttoorr iiqquuee ddee llaa mméétthhooddee

N° Version Date Evolution de la méthode

SOP DHA VALIDATION /ANA211

Septembre 2013

Première validation

DDeesstt iinnaattaaii rr eess :: DDééppaarr tteemmeenntt SSaannttéé // llaabboo LL CC--MM SS//MM SS Opérateurs

Mathieu Dubois Laura Pirlot

Responsable

Nathalie Gillard



SSoommmmaaii rr ee 1. Introduction............................................................................................................................................4 2. Scope de la validation............................................................................................................................4 3. Conclusions............................................................................................................................................5 4. Références..............................................................................................................................................5



1. Introduction Les phycotoxines ou biotoxines marines sont des substances toxiques accumulées par les mollusques bivalves, en particulier lorsqu’ils se nourrissent de plancton contenant des toxines. La législation européenne fixe la quantité maximale de biotoxines marines pouvant être présentes dans des mollusques bivalves vivants commercialisés pour la consommation humaine (Règlement 2004/853/CE). La concentration en biotoxines marines de type PSP («Paralytic Shellfish Poison»), mesurées dans le corps entier ou dans toute partie comestible séparément, ne doit pas dépasser 800 microgrammes par kilogramme.

La méthode d’analyse est une double méthode d’analyse, comprenant un premier screening puis une analyse de confirmation quantitative. Cette méthode est nommée « SOP DHA/ANA211 v01, « Détection, identification et quantification des toxines PSP (Paralytic Shellfish Poisoning) dans les fruits de mer par HPLC-fluorescence». Les PSP concernées par ce dossier de validation et la SOP ANA211 sont reprises dans le tableau ci-dessous.

Tableau 1. Liste des PSP recherchées

Code interne nom abréviation Q03 saxitoxine STX Q04 décarbamylsaxitoxine dcSTX Q05 néosaxitoxine NEO Q06 décarbamylnéosaxitoxine dcNEO Q07 gonyautoxine 2&3 (*) GTX2-3

Q06 gonyautoxine 1&4 (*) GTX1-4 Q09 décarbamygonyautoxine 2&3 (*) dcGTX2-3 Q10 N-sulfocarabamoylgonyautoxine 1&2 C1-2

(*) : toxines qui co-eluent et dont les standards sont vendus sous forme de mix

2. Schéma de la validation et performances de la méthode La méthode appliquée étant une méthode officielle AOAC, la validation a été réalisée de manière secondaire. Méthode de screening La méthode a été validée sur un jour d’analyse avec l’analyse de 2 échantillons blancs, 2 QC à 400 ppb et 2 QC à 800 ppb. L’ensemble des composés ont été détectés dans les échantillons fortifiés à la MRL/2. Méthode de confirmation La méthode a été validée sur 3 jours d’analyse, à 3 niveaux de concentration (400, 800 et 1200 µg/kg) et avec 3 répétitions par niveau. D’un point de vue pratique, trois échantillons blancs ont été dopés à trois niveaux différents (400, 800 et 1200 µg/kg). Ces échantillons ont été extraits par chauffage avec de l’acide acétique. Après



centrifugation, 1 mL de surnageant a été purifié sur SPE C18. Cette opération a été répétée 2x. Ces 3 extraits ont ensuite été utilisés pour valider la méthode de confirmation, c'est-à-dire :

- soit après une dérivation de l’extrait au peroxyde (STX, B1, GTX2-3, dcSTX et dcGTX2-3), - soit après une 2nde extraction en phase solide à l’aide d’une cartouche COOH, collecte des

fractions et dérivation au peroxyde ou au périodate. Ce test est été répété sur 2 autres journées (soit trois journées au total). Cette validation permet donc de déterminer la précision et le recovery intra- et inter-jour. L’incertitude élargie de la méthode (U, avec k=2) a également été calculée. Les performances de la méthode sont décrites en Annexes 3 et 4. D’autre part, des blancs ont également été analysés (un blanc par jour d’analyse), permettant de vérifier la spécificité/sélectivité de la méthode. La LOQ a été fixée à 200 ppb. En effet, sur base des chromatogrammes des QC à MRL/2 (voir Annexe 2), il semble que l’ensemble des PSP visés par cette méthode pourront été détectés avec un signal/bruit supérieur à 10 à 200ppb. Cette LOQ devra être réévaluée après 6 mois d’utilisation de la méthode en routine. 3. Conclusions La méthode de confirmation peut être déclarée validée pour l’ensemble des molécules, à savoir :

- saxitoxine - décarbamylsaxitoxine - néosaxitoxine - décarbamylnéosaxitoxine - gonyautoxine 2&3 - gonyautoxine 1&4 - décarbamygonyautoxine 2&3 - N-sulfocarabamoylgonyautoxine 1&2

4. Références � AOAC Official Method 2005.06 Paralytic Shellfish Poisoning Toxins in Shellfish

Prechromatographic Oxidation and Liquid Chromatography with Fluorescence Detection First Action 2005

� Community Reference Laboratory for Marine Biotoxins. 2009. Practical aspects of the implementation of 2005.06 AOAC Official Method for the Official Control of PSP toxins : technical issues and pitfalls.



Annexe 1 - Validation de la méthode de screening Chromatogramme du blanc 1



Chromatogramme du blanc 2



Chromatogramme du QC MRL/2 1

* : pic correspondant au second produit d’oxydation de la molécule.

dcGTX2-3

C1-2 dcNEO

dcSTX NEO

GTX1-4 GTX2-3

STX NEO*

dcGTX2-3* GTX1-4*



Chromatogramme du QC MRL/2 1



Chromatogramme du QC MRL 1

* : pic correspondant au second produit d’oxydation de la molécule.

dcGTX2-3*

dcGTX2-3

C1-2

dcNEO

dcSTX NEO

GTX1-4 GTX2-3

STX NEO*

GTX1-4*



Chromatogramme du QC MRL 2



Annexe 2 - Validation de la méthode de confirmation : estimation de la limite de quantification sur base du chromatogramme d’un QC MRL/2 PSP1-PSP3 : STX, dcSTX, GTX2-3, dcGTX2-3 et C1-2



GTX1-4



NEO, dcNEO



Annexe 3. Validation de la méthode de confirmation - Précision intra-jour (répétabilité et récupération) dcGTX-2-3

Calcul de la précision intra-jour Niveau de validation - jour d'analyse RT aire

ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb

ecartype CVr %

recovery / j et niv

(%)

recovery / jour %

4.68 849893 22.8 182.0 4.77 1204456 32.2 257.9 QC MRL/2 J1 4.76 786756 21.1 168.5

202.8 48.2 23.8 50.7

4.76 1953703 52.3 418.3 4.71 2323726 62.2 497.5 QC MRL J1 4.70 1373960 36.8 294.2

403.3 102.5 25.4 50.4

4.68 2989405 80.0 639.9 4.74 3597601 96.3 770.1 QC 1.5MRL J1 4.76 3390933 90.7 725.8

711.9 66.2 9.3 59.3

53.5

4.77 603609 150.1 4.85 617408 153.7 QC MRL/2 J2 4.88 608856 151.5

151.8 1.8 1.2 37.9

4.80 1225395 312.5 4.85 1209246 308.3 QC MRL J2 4.76 1222203 311.7

310.8 2.2 0.7 38.9

4.75 1596743 409.5 4.78 1343861 343.5 QC 1.5MRL J2 4.85 1814561 466.4

406.5 61.5 15.1 33.9

36.9

4.88 440952 16.8 134.1 4.85 527114 20.9 167.1 QC MRL/2 J3 4.80 563130 22.6 180.9

160.7 24.0 15.0 40.2

4.87 961654 41.7 333.5 4.84 945903 40.9 327.5 QC MRL J3 4.85 848840 36.3 290.3

317.1 23.4 7.4 39.6

4.84 1257704 55.9 446.9 4.84 1167559 51.5 412.4 QC 1.5MRL J3 4.74 756801 31.9 255.1

371.4 102.2 27.5 31.0

36.9



dcSTX

Niveau de validation - jour d'analyse RT aire

ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb

ecartype CVr % recovery /

j et niv (%)

recovery / jour %

9.29 1763420 28.8 230.1 9.39 2656077 43.5 347.7 QC MRL/2 J1 9.35 1650299 26.9 215.2

264.3 72.6 27.5 66.1

9.36 3993722 65.5 523.9 9.33 4931272 80.9 647.4 QC MRL J1 9.30 2988286 48.9 391.4

520.9 128.0 24.6 65.1

9.30 6599881 108.4 867.2 9.35 7766977 127.6 1020.9 QC 1.5MRL J1 9.38 7425667 122.0 976.0

954.7 79.0 8.3 79.6

70.2

9.48 2635691 357.7 9.56 2718548 369.0 QC MRL/2 J2 9.60 2729647 370.5

365.7 7.0 1.9 91.4

9.52 5310212 720.8 9.55 5297746 719.1 QC MRL J2 9.47 5384956 731.0

723.7 6.4 0.9 90.5

9.47 7250711 984.3 9.48 6327972 859.0 QC 1.5MRL J2 9.56 7741278 1050.9

964.7 97.4 10.1 80.4

87.4

9.52 1619798 30.8 246.5 9.49 1955964 37.6 300.6 QC MRL/2 J3 9.47 2234258 43.2 345.4

297.5 49.5 16.6 74.4

9.52 3989403 78.6 628.9 9.50 4135464 81.4 651.4 QC MRL J3 9.49 3904034 76.8 614.2

631.5 18.8 3.0 78.9

9.48 5943249 117.8 942.3 9.50 5617451 111.2 889.9 QC 1.5MRL J3 9.39 4797212 94.7 757.9

863.4 95.0 11.0 71.9

75.1



GTX2-3


ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb


j et niv (%)

recovery / jour %

10.90 874848 32.2 257.6 10.93 1266767 46.8 374.2 QC MRL/2 J1 10.93 813517 29.9 239.3

290.4 73.2 25.2 72.6

10.93 2026191 75.0 600.2 10.93 2460546 91.2 729.4 QC MRL J1 10.92 1497658 55.4 442.9

590.8 143.5 24.3 73.9

10.92 3329305 123.5 987.9 10.92 3945029 146.4 1171.1 QC 1.5MRL J1 10.92 3769253 139.9 1118.8

1092.6 94.4 8.6 91.1

79.2

11.04 1272821 333.7 11.08 1266878 332.2 QC MRL/2 J2 11.10 1290332 338.3

334.7 3.2 1.0 83.7

11.07 2498305 655.8 11.07 2523211 662.4 QC MRL J2 11.04 2562066 672.6

663.6 8.4 1.3 82.9

11.04 3391558 890.6 11.05 2973959 780.8 QC 1.5MRL J2 11.07 3660298 961.2

877.6 90.9 10.4 73.1

79.9

11.00 705575 26.5 212.2 10.99 884226 33.9 271.1 QC MRL/2 J3 11.01 993458 38.4 307.1

263.5 47.9 18.2 65.9

11.01 1726858 68.4 546.9 11.01 1799852 71.6 572.8 QC MRL J3 11.01 1660711 65.9 527.0

548.9 23.0 4.2 68.6

10.99 2513114 101.0 807.8 11.01 2328101 93.4 746.8 QC 1.5MRL J3 10.94 1615954 64.0 512.2

689.0 156.1 22.7 57.4

64.0



STX


ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb


j et niv (%)

recovery / jour %

12.80 707070 33.5 268.0 12.82 1033455 48.9 391.5 QC MRL/2 J1 12.82 674038 31.9 255.4

305.0 75.2 24.7 76.2

12.83 1593694 75.5 603.7 12.83 1979433 93.7 749.7 QC MRL J1 12.82 1209859 57.3 458.3

603.9 145.7 24.1 75.5

12.83 2644929 125.2 1001.7 12.81 3110058 147.2 1177.8 QC 1.5MRL J1 12.80 2987210 141.4 1131.3

1103.6 91.3 8.3 92.0

81.2

12.97 1229940 405.7 13.00 1253386 413.5 QC MRL/2 J2 13.03 1276519 421.1

413.4 7.7 1.9 103.4

12.99 2413950 796.2 12.99 2443171 805.8 QC MRL J2 12.98 2475359 816.4

806.1 10.1 1.3 100.8

12.97 3313669 1092.9 12.98 2914782 961.4 QC 1.5MRL J2 12.99 3572626 1178.3

1077.5 109.3 10.1 89.8

98.0

12.88 763711 34.5 276.2 12.90 933052 42.7 341.3 QC MRL/2 J3 12.92 1077352 49.6 396.8

338.1 60.4 17.9 84.5

12.92 1848454 86.5 692.3 12.92 1966841 92.4 738.8 QC MRL J3 12.92 1866154 87.5 700.1

710.4 24.9 3.5 88.8

12.89 2872819 135.9 1087.2 12.92 2718315 128.5 1027.8 QC 1.5MRL J3 12.83 2392924 112.8 902.6

1005.8 94.2 9.4 83.8

85.7



GTX-1-4


ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb


j et niv (%)

recovery / jour %

11.00 200502 39.9 638.8 11.00 183675 36.6 585.1 QC MRL/2 J1 11.03 177107 35.3 564.2

596.0 38.5 6.5 149.0

10.98 327494 65.2 1043.9 10.94 326207 65.0 1039.8 QC MRL J1 10.91 353017 70.3 1125.3

1069.6 48.2 4.5 133.7

10.92 467735 93.2 1491.2 10.92 493947 98.4 1574.8 QC 1.5MRL J1 10.91 490199 97.7 1562.9

1543.0 45.2 2.9 128.6

137.1

11.02 278085 729.1 11.03 288354 757.9 QC MRL/2 J2 11.00 297478 783.4

756.8 27.2 3.6 189.2

10.26 511559 1352.5 11.07 572781 1554.9 QC MRL J2 11.07 568882 1544.0

1483.8 113.9 7.7 185.5

11.07 803015 2200.1 11.06 839610 2302.7 QC 1.5MRL J2 11.08 829866 2275.4

2259.4 53.1 2.4 188.3

187.7

10.92 146675 32.3 516.4 10.91 145360 32.0 511.7 QC MRL/2 J3 10.90 161599 35.6 569.8

532.6 32.2 6.1 133.2

10.90 295254 65.5 1047.6 10.92 281293 62.4 997.7 QC MRL J3 10.91 290410 64.4 1030.3

1025.2 25.3 2.5 128.2

10.90 411352 91.4 1462.7 10.90 436526 97.0 1552.7 QC 1.5MRL J3 10.91 361366 80.2 1284.0

1433.1 136.8 9.5 119.4

126.9



dcNEO


ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb


j et niv (%)

recovery / jour %

9.33 68240 13.6 218.4 9.32 61636 12.3 196.2 QC MRL/2 J1 9.28 66218 13.2 211.6

208.7 11.4 5.4 52.2

9.20 104928 21.3 341.6 9.34 120667 24.7 394.4 QC MRL J1 9.23 112475 22.9 366.9

367.6 26.4 7.2 46.0

9.32 163045 33.5 536.7 9.30 173325 35.7 571.2 QC 1.5MRL J1 9.23 164792 33.9 542.6

550.2 18.5 3.4 45.8

48.0

9.56 124275 257.0 9.55 134109 284.0 QC MRL/2 J2 9.50 142758 307.8

282.9 25.4 9.0 70.7

9.45 264999 643.3 9.47 265621 645.0 QC MRL J2 9.48 275049 670.9

653.1 15.5 2.4 81.6

9.47 398523 1009.9 9.53 388965 983.7 QC 1.5MRL J2 9.46 403164 1022.6

1005.4 19.9 2.0 83.8

78.7

9.35 97900 24.0 384.0 9.39 93068 22.7 363.6 QC MRL/2 J3 9.36 106032 26.1 418.3

388.6 27.7 7.1 97.2

9.39 175421 44.5 711.2 9.38 189630 48.2 771.2 QC MRL J3 9.39 185797 47.2 755.1

745.8 31.0 4.2 93.2

9.39 263759 67.8 1084.2 9.38 271171 69.7 1115.5 QC 1.5MRL J3 9.37 266109 68.4 1094.1

1097.9 16.0 1.5 91.5

94.0



NEO


ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb


j et niv (%)

recovery / jour %

10.10 135468 30.8 492.5 10.11 123140 28.5 455.6 QC MRL/2 J1 10.08 139855 31.6 505.6

484.6 25.9 5.3 121.1

10.03 226460 47.8 764.6 10.11 260211 54.1 865.5 QC MRL J1 10.05 249309 52.1 832.9

821.0 51.5 6.3 102.6

10.09 347637 70.4 1126.9 10.08 379155 76.3 1221.2 QC 1.5MRL J1 10.05 374370 75.4 1206.8

1185.0 50.8 4.3 98.7

107.5

10.25 230297 608.9 10.24 248756 657.7 QC MRL/2 J2 10.23 264834 700.2

655.6 45.7 7.0 163.9

10.18 520297 1375.6 10.20 529642 1400.3 QC MRL J2 10.21 552844 1461.6

1412.5 44.3 3.1 176.6

10.21 783017 2070.1 10.23 780411 2063.3 QC 1.5MRL J2 10.21 804159 2126.0

2086.5 34.4 1.7 173.9

171.4

10.10 152406 40.7 651.1 10.11 151181 40.4 645.8 QC MRL/2 J3 10.10 174031 46.5 744.1

680.3 55.3 8.1 170.1

10.11 302431 81.0 1296.7 10.11 339335 91.0 1455.5 QC MRL J3 10.12 315160 84.5 1351.5

1367.9 80.7 5.9 171.0

10.12 464997 124.8 1996.3 10.12 488707 131.1 2098.3 QC 1.5MRL J3 10.11 462591 124.1 1985.9

2026.9 62.1 3.1 168.9

170.0



C-1-2


ng/ml (extrait)

ppb (matrice)

moyenne ppb


j et niv (%)

recovery / jour %

9.45 501220 20.1 321.7 9.19 488920 19.6 314.0 QC MRL/2 J1 9.07 436147 17.6 280.9

305.5 21.7 7.1 76.4

8.98 832269 33.1 529.4 8.92 891190 35.4 566.4 QC MRL J1 8.86 845628 33.6 537.8

544.6 19.4 3.6 68.1

8.87 1256148 49.7 795.4 8.87 1293461 51.2 818.8 QC 1.5MRL J1 8.86 1402083 55.4 887.0

833.7 47.6 5.7 69.5

71.3

8.81 779274 307.8 8.94 793570 313.5 QC MRL/2 J2 9.00 785525 310.3

310.5 2.9 0.9 77.6

8.88 1536540 612.3 8.93 1535977 612.1 QC MRL J2 8.81 1549924 617.7

614.0 3.2 0.5 76.8

8.80 2050782 819.1 8.84 1809937 722.3 QC 1.5MRL J2 8.94 2264917 905.2

815.5 91.5 11.2 68.0

74.1

8.96 453324 24.1 192.9 8.89 555690 30.1 241.2 QC MRL/2 J3 8.86 618656 33.9 270.9

235.0 39.4 16.7 58.7

8.94 1134732 64.3 514.2 8.90 1154783 65.5 523.7 QC MRL J3 8.89 1068907 60.4 483.2

507.0 21.2 4.2 63.4

8.89 1623677 93.1 744.8 8.92 1518916 86.9 695.4 QC 1.5MRL J3 8.67 1028916 58.0 464.3

634.8 149.7 23.6 52.9

58.3



Annexe 4. Validation de la méthode de confirmation - Précision inter-jour (répétabilité et récupération) et incertitude de la méthode



dcGTX-2-3 Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)

Conc. corrigée pour le recovery

du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)

CVR - tous niveaux (%)

MS biais (%)

uRw2 (%) u (%)

U (k=2)

364.1 680.7 14.9 515.8 964.5 -20.6 QC MRL/2 J1 337.1 630.2 21.2 418.3 782.0 2.2 497.5 930.1 -16.3 QC MRL J1 294.2 550.1 31.2 426.6 797.6 0.3 513.4 959.9 -20.0 QC 1.5MRL J1 483.9 904.8 -13.1 300.2 813.8 -1.7 307.4 833.4 -4.2 QC MRL/2 J2 303.0 821.3 -2.7 312.5 847.2 -5.9 308.3 835.7 -4.5 QC MRL J2 311.7 844.9 -5.6 273.0 740.1 7.5 229.0 620.7 22.4 QC 1.5MRL J2 310.9 842.9 -5.4 268.3 726.5 9.2 334.2 905.2 -13.2 QC MRL/2 J3 361.8 979.9 -22.5 333.5 903.3 -12.9 327.5 886.9 -10.9 QC MRL J3 290.3 786.3 1.7 297.9 806.8 -0.9 274.9 744.5 6.9 QC 1.5MRL J3 170.0 460.5 42.4

14.9 13.7 19.7 15.8 723.7 250.5 31.2 62.4



dcSTX Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)


du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)


MS biais (%)

uRw2 (%)

u (%) U

(k=2)

460.1 655.0 18.1 695.3 989.8 -23.7 QC MRL/2 J1 430.4 612.6 23.4 523.9 745.7 6.8 647.4 921.6 -15.2 QC MRL J1 391.4 557.2 30.3 578.1 823.0 -2.9 680.6 968.9 -21.1 QC 1.5MRL J1 650.7 926.2 -15.8 715.5 818.4 -2.3 738.0 844.1 -5.5 QC MRL/2 J2 741.0 847.5 -5.9 720.8 824.5 -3.1 719.1 822.5 -2.8 QC MRL J2 731.0 836.1 -4.5 656.2 750.5 6.2 572.7 655.0 18.1 QC 1.5MRL J2 700.6 801.3 -0.2 493.0 656.6 17.9 601.2 800.7 -0.1 QC MRL/2 J3 690.8 920.0 -15.0 628.9 837.6 -4.7 651.4 867.5 -8.4 QC MRL J3 614.2 817.9 -2.2 628.2 836.7 -4.6 593.3 790.1 1.2 QC 1.5MRL J3 505.3 672.9 15.9

16.1 12.9 12.9 13.5 526.2 182.1 26.6 53.2



GTX2-3 Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)


du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)


MS biais (%)

uRw2 (%)

u (%) U

(k=2)

515.1 650.7 18.7 748.4 945.3 -18.2 QC MRL/2 J1 478.6 604.6 24.4 600.2 758.1 5.2 729.4 921.4 -15.2 QC MRL J1 442.9 559.5 30.1 658.6 832.0 -4.0 780.7 986.2 -23.3 QC 1.5MRL J1 745.9 942.2 -17.8 667.5 835.1 -4.4 664.3 831.2 -3.9 QC MRL/2 J2 676.7 846.6 -5.8 655.8 820.6 -2.6 662.4 828.8 -3.6 QC MRL J2 672.6 841.6 -5.2 593.7 742.9 7.1 520.6 651.3 18.6 QC 1.5MRL J2 640.8 801.8 -0.2 424.5 663.6 17.0 542.2 847.7 -6.0 QC MRL/2 J3 614.2 960.2 -20.0 546.9 855.0 -6.9 572.8 895.5 -11.9 QC MRL J3 527.0 823.8 -3.0 538.5 841.9 -5.2 497.9 778.4 2.7 QC 1.5MRL J3 341.5 533.8 33.3

16.1 13.0 17.5 15.0 654.3 226.5 29.7 59.4



STX Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)


du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)


MS biais (%)

uRw2 (%)

u (%) U

(k=2)

535.9 659.7 17.5 783.1 964.0 -20.5 QC MRL/2 J1 510.9 628.9 21.4 603.7 743.1 7.1 749.7 922.9 -15.4 QC MRL J1 458.3 564.2 29.5 667.8 822.1 -2.8 785.2 966.6 -20.8 QC 1.5MRL J1 754.2 928.4 -16.1 811.4 828.2 -3.5 826.9 844.0 -5.5 QC MRL/2 J2 842.2 859.6 -7.4 796.2 812.7 -1.6 805.8 822.5 -2.8 QC MRL J2 816.4 833.3 -4.2 728.6 743.7 7.0 640.9 654.2 18.2 QC 1.5MRL J2 785.5 801.8 -0.2 552.4 644.4 19.4 682.6 796.4 0.5 QC MRL/2 J3 793.6 925.8 -15.7 692.3 807.7 -1.0 738.8 861.9 -7.7 QC MRL J3 700.1 816.8 -2.1 724.8 845.6 -5.7 685.2 799.4 0.1 QC 1.5MRL J3 601.8 702.0 12.2

15.5 12.5 12.4 13.0 491.2 170.0 25.7 51.4



GTX-1-4 Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)


du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)


MS biais (%)

uRw2 (%)

u (%) U

(k=2)

1277.6 931.9 -16.5 1170.2 853.6 -6.7 QC MRL/2 J1 1128.3 823.0 -2.9 1043.9 761.4 4.8 1039.8 758.4 5.2 QC MRL J1 1125.3 820.8 -2.6 994.1 725.1 9.4 1049.9 765.8 4.3 QC 1.5MRL J1 1041.9 760.0 5.0 1458.2 777.1 2.9 1515.7 807.7 -1.0 QC MRL/2 J2 1566.9 835.0 -4.4 1352.5 720.7 9.9 1554.9 828.6 -3.6 QC MRL J2 1544.0 822.8 -2.9 1466.8 781.6 2.3 1535.1 818.1 -2.3 QC 1.5MRL J2 1516.9 808.4 -1.0 1032.9 813.8 -1.7 1023.5 806.4 -0.8 QC MRL/2 J3 1139.6 897.9 -12.2 1047.6 825.5 -3.2 997.7 786.1 1.7 QC MRL J3 1030.3 811.8 -1.5 975.1 768.3 4.0 1035.1 815.6 -2.0 QC 1.5MRL J3 856.0 674.5 15.7

5.8 4.8 6.0 6.5 122.9 42.5 12.9 25.7



dcNEO Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)


du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)


MS biais (%)

uRw2 (%)

u (%) U

(k=2)

436.8 910.0 -13.8 392.4 817.6 -2.2 QC MRL/2 J1 423.2 881.7 -10.2 341.6 711.7 11.0 394.4 821.8 -2.7 QC MRL J1 366.9 764.5 4.4 357.8 745.5 6.8 380.8 793.5 0.8 QC 1.5MRL J1 361.7 753.7 5.8 514.0 653.0 18.4 568.0 721.6 9.8 QC MRL/2 J2 615.5 781.9 2.3 643.3 817.3 -2.2 645.0 819.4 -2.4 QC MRL J2 670.9 852.3 -6.5 673.3 855.3 -6.9 655.8 833.1 -4.1 QC 1.5MRL J2 681.8 866.1 -8.3 767.9 817.3 -2.2 727.1 773.9 3.3 QC MRL/2 J3 836.6 890.4 -11.3 711.2 757.0 5.4 771.2 820.8 -2.6 QC MRL J3 755.1 803.6 -0.4 722.8 769.3 3.8 743.7 791.5 1.1 QC 1.5MRL J3 729.4 776.3 3.0

10.4 5.5 5.5 7.2 150.8 52.2 14.2 28.5



NEO Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)


du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)


MS biais (%)

uRw2 (%)

u (%) U

(k=2)

985.0 916.2 -14.5 911.3 847.7 -6.0 QC MRL/2 J1 1011.2 940.6 -17.6 764.6 711.2 11.1 865.5 805.1 -0.6 QC MRL J1 832.9 774.7 3.2 751.3 698.8 12.6 814.1 757.3 5.3 QC 1.5MRL J1 804.6 748.4 6.5 1217.8 710.3 11.2 1315.4 767.2 4.1 QC MRL/2 J2 1400.4 816.8 -2.1 1375.6 802.3 -0.3 1400.3 816.8 -2.1 QC MRL J2 1461.6 852.5 -6.6 1380.1 805.0 -0.6 1375.5 802.3 -0.3 QC 1.5MRL J2 1417.4 826.7 -3.3 1302.1 766.0 4.2 1291.6 759.8 5.0 QC MRL/2 J3 1488.3 875.5 -9.4 1296.7 762.8 4.6 1455.5 856.2 -7.0 QC MRL J3 1351.5 795.0 0.6 1330.9 782.9 2.1 1398.9 822.9 -2.9 QC 1.5MRL J3 1324.0 778.8 2.6

9.5 5.6 5.2 7.2 149.9 51.9 14.2 28.4



C-1-2 Niveau de validation - jour d'analyse

Conc. Pondérée à

la MRL (ppb)


du jour (ppb)

biais relatif (%)

CVR - 400 ppb (%)

CVR - 800 ppb (%)

CVR - 1200 ppb (%)


MS biais (%)

uRw2 (%)

u (%) U

(k=2)

643.4 902.3 -12.8 628.0 880.7 -10.1 QC MRL/2 J1 561.8 787.8 1.5 529.4 742.4 7.2 566.4 794.3 0.7 QC MRL J1 537.8 754.2 5.7 530.3 743.6 7.0 545.9 765.5 4.3 QC 1.5MRL J1 591.3 829.2 -3.7 615.5 830.5 -3.8 627.0 846.0 -5.8 QC MRL/2 J2 620.5 837.3 -4.7 612.3 826.2 -3.3 612.1 825.9 -3.2 QC MRL J2 617.7 833.4 -4.2 546.1 736.8 7.9 481.5 649.7 18.8 QC 1.5MRL J2 603.5 814.3 -1.8 385.8 661.3 17.3 482.3 826.7 -3.3 QC MRL/2 J3 541.7 928.5 -16.1 514.2 881.4 -10.2 523.7 897.6 -12.2 QC MRL J3 483.2 828.2 -3.5 496.5 851.1 -6.4 463.6 794.6 0.7 QC 1.5MRL J3 309.6 530.6 33.7

9.3 6.3 13.5 10.7 330.1 114.3 21.1 42.2



Annexe 5 - Validation de la méthode de confirmation – chromatogramme d’un échantillon blanc Blanc moule (après C18, dérivatisé au peroxyde)

C1-2



Fraction 2 Blanc moule (après COOH, dérivatisé au periodate)



Fraction 3 Blanc moule (après COOH, dérivatisé au periodate)

dossier validation/ana211 v01 détection, identification ......les psp concernées par ce dossier de...

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