disciplina: microbiologia i aula: crescimento bacteriano
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Disciplina: MICROBIOLOGIA IDisciplina: MICROBIOLOGIA IAula: Crescimento BacterianoAula: Crescimento Bacteriano
Profa Dra Cristina L S Petrarolha Silva
FEA Fundação Educacional de AndradinaFISMA-FCCA
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11--Considerações GeraisConsiderações Gerais
� Crescimento em bactérias:◦ Individual◦ populacional
� Crescimento é um somatório dos processos metabólicos progressivos, que normalmente conduz à divisão com concomitante produção de duas células-filhas a partir de uma.
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http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/divisao/divisao.html#fissaohttp://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/divisao/divisao.html#fissao
http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/divisao/Mitose.jpg
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www.youtube.com
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� Tamanho bacteriano adulto◦ O que é?◦ Quem o influencia?◦ Quem o influencia?
� Idade bacteriana◦ O que é?
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Termos para crescimento Termos para crescimento microbianomicrobiano
� Taxa de crescimento (velocidade específicade crescimento): é a variação no número oumassa de microrganismos por unidade detempo.
� Tempo de geração: é o intervalo de temponecessário para que uma célula se duplique.necessário para que uma célula se duplique.◦ O tempo de geração é variável para os diferentesorganismos, podendo ser de 10 a 20 minutos até dias,sendo que em muitos dos organismos conhecidos, estevaria de 1 a 3 horas.◦ O tempo de geração não corresponde a umparâmetro absoluto, uma vez que é dependente defatores genéticos e nutricionais.
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IMPORTANTEIMPORTANTE
� Toda bactéria tem seu ambiente ideal onde encontra condições ótimas de crescimento.crescimento.
� Uma pop bacteriana é um SISTEMA DINÂMICO, com células se dividindo e células morrendo o tempo todo.
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Tubo à direita, meio BHI sem semeadura; tubo àesquerda, meio BHI após crescimento bacteriano.Observar turvação indicativa de multiplicação microbiana
http://www.microbiologia.vet.br/ImagensBacteriologia.htm
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Meio com crescimento bacteriano apresentando sedimento(deposição de bactérias).
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22-- Métodos de medidaMétodos de medida
� Desenvolvimento da cultura bacteriana:
◦ Aumento da quantidade de protoplasma◦ Aumento do número de microorganismos
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2.12.1-- Métodos para estimar Métodos para estimar massa ou aumento de massa ou aumento de protoplasmaprotoplasma◦ DIRETOS� Centrifugação� Peso Seco
◦ INDIRETOS◦ INDIRETOS� Nitrogênio� Colorimetria ou espectrofotometria� Consumo de Metabólito ou Acúmulo de
produto do metabolismo� Turbidimetria
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� Turbidímetro� Leitura em 660nm
� Curva padrão
� Não destrutiva
Não diferencia céls viáveis� Não diferencia céls viáveis
das céls mortas
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ColorímetroColorímetro
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2.22.2-- Métodos para estimar o Métodos para estimar o número de microorganismosnúmero de microorganismos� DIRETOS◦ Contadores de partículas◦ Câmaras de contagem◦ Esfregaços corados◦ Esfregaços corados
� INDIRETOS (células viáveis)◦ Diluição Seriada ou do número mais
provável (NMP)◦ Plaqueamento em Meio Sólido (UFC)
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Contagem direta Contagem direta
� Câmara de Neubauer
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Contagem indiretaContagem indireta
http://mednt.jp/dilution%2Btechnique
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Contagem IndiretaContagem Indireta
� Técnica da Diluição Seriada
http://bervieira.sites.uol.com.br/dilui.htm
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Contagem em placas:Contagem em placas:
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Contagem em placas:Contagem em placas:Técnica Técnica PourPour PlatePlate
http://www.practicalbiology.org/areas/advanced/health-and-disease/hygiene/making-a-pour-plate,98,EXP.html
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http://biology.clc.uc.edu/fankhauser/Labs/Microbiology/Meat_Milk/Pour_Plate.htm
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Técnica da membrana filtranteTécnica da membrana filtrante
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Técnica número mais provávelTécnica número mais provável
� http://laboratoriodemicrobiologiadealimentos.blogspot.com/
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33-- Curva de CrescimentoCurva de Crescimento� Utilizar apenas CULTURA PURA
� Representação gráfica do aumento do número de indivíduos em um determinado período de tempo
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33-- Curva de CrescimentoCurva de Crescimento
� fases de desenvolvimento de uma cultura bacteriana
� adaptação, desenvolvimento (crescimento),
� extinção de nutrientes e morte
� Fases: lag, exponencial, estacionária e morte
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Curva de Crescimento Sistema Curva de Crescimento Sistema FechadoFechado
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Fase Fase LagLag ou Latenteou Latente
� Período de adaptação, intensa atividade metabólica
� Ausência de divisão
� Longa: inóculo pequeno, cultura velho, meio e T desfavoráveis
� Pode inexistir
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Fase Fase logarítimicalogarítimica ou exponencialou exponencial
� Divisão máxima
� Progressão geométrica de razão 2� Progressão geométrica de razão 2
� Fatores determinantes do crescimento
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Fase estacionáriaFase estacionária
� Escassez de nutrientes ou acúmulo de metabólitos
� Bactérias crescem muito lentamente ou número de mortes é igual ao de novas
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Fase de declínio ou morteFase de declínio ou morte
� Morte das bactérias
� Lento ou exponencial
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Curva de Crescimento Sistema Curva de Crescimento Sistema FechadoFechado
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� Curva Diáuxia◦ duas fontes de carbono◦ após término da primeira, inicia-se uma
nova curva
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Crescimento em culturas Crescimento em culturas contínuascontínuas
� Estes são respectivamente controlados pela concentração do nutriente limitante (fonte de C ou N) e pela taxa de fluxo (taxa de diluição).pela taxa de fluxo (taxa de diluição).
� Em baixas concentrações do nutriente limitante, a taxa de crescimento é proporcional à concentração do nutriente
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� Se houvesse:◦ Suprimento ilimitado de nutrientes +◦ Ambiente inalterável +◦ Espaço ilimitado
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QuimiostatoQuimiostato
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/12crecimiento.htm
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Equações para determinação dosEquações para determinação dosparâmetros de crescimentoparâmetros de crescimento
� O tempo de geração pode ser calculado quando uma cultura encontra-se em fase exponencial, pela fórmula abaixo:
N=No.2nN=No.2n
� onde� N= número final de células� No= número inicial de células� n= número de gerações
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n= log(N) - log(No)/0,301
G = t/n
� ondeG= tempo de geraçãot= tempo de crescimenton= determinado acima.
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44-- Efeito dos fatores ambientais Efeito dos fatores ambientais no Crescimento Bacterianono Crescimento Bacteriano� 4.1-Temperatura
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� Tipos de Bactérias em Relação a Temperatura
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� 4.2- pH
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� 4.3- Tensão de Oxigênio� 4.4- Água� 4.5- Pressão Osmótica
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Fontes de ConsultaFontes de Consulta
� TRABULSI, L. R.; ALTERTHUM, F.; Microbiologia. 4. ed. rev. e atual. São Paulo: Atheneu, 2005. 718 p.
� Imagens: � Imagens: ◦ www.google.com.br