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C´odigo Transcripci´ on Traducci´on 7. Expresi´on g´ enica y regulaci´on Fundamentos de Gen´ etica Grado en Bioqu´ ımica Universidad de Granada Prof. ´ Angel Mart´ ın Alganza ([email protected]) Departamento de Gen´ etica Gen´ etica, Universidad de Granada 7. Expresi´ on g´ enica y regulaci´ on bgbgyellow 6pt0.2cm1cm

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Codigo Transcripcion Traduccion

7. Expresion genica y regulacion

Fundamentos de GeneticaGrado en Bioquımica

Universidad de Granada

Prof. Angel Martın Alganza ([email protected])Departamento de Genetica

Genetica, Universidad de Granada 7. Expresion genica y regulacion bgbgyellow 6pt0.2cm1cm

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Codigo Transcripcion Traduccion

7. Expresion genica y regulacion

1 El codigo geneticoEl flujo de la informacion geneticaCaracterısticas del codigo geneticoEl codigo genetico es casi universal

2 La transcripcionLa transcripcion sintetiza RNA sobre un molde de DNAEn eucariotas hay varias diferencias importantesLas regiones codificantes de eucariotas estan interrumpidas

3 La traduccion y las proteınasLa traduccion del mRNA depende de ribosomas y tRNALa traduccion del mRNA puede dividirse en tres pasosLa traduccion es mas compleja en eucariotasLas proteınas, su estructura y su funcion

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Codigo Transcripcion Traduccion Flujo Caracterısticas Universalidad

7. Expresion genica y regulacion

1 El codigo geneticoEl flujo de la informacion geneticaCaracterısticas del codigo geneticoEl codigo genetico es casi universal

2 La transcripcionLa transcripcion sintetiza RNA sobre un molde de DNAEn eucariotas hay varias diferencias importantesLas regiones codificantes de eucariotas estan interrumpidas

3 La traduccion y las proteınasLa traduccion del mRNA depende de ribosomas y tRNALa traduccion del mRNA puede dividirse en tres pasosLa traduccion es mas compleja en eucariotasLas proteınas, su estructura y su funcion

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Codigo Transcripcion Traduccion Flujo Caracterısticas Universalidad

Flujo de la informacion geneticacodificada en el ADN a ARN mensajero y a proteına

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Codigo Transcripcion Traduccion Flujo Caracterısticas Universalidad

El codigo genetico presenta una serie de caracterısticas

Esta escrito de maneral lineal

Cada ((palabra)) de tres letras (codones) → un aminoacido

No contiene ambiguedades, cada triplete → un aminoacido

Es degenerado, aminoacidos codificados por mas de un codon

Contiene senales para iniciar y terminar la transcripcion

No tiene comas, se lee en orden y sin interrupcion

No solapado, un ribonucleotido forma parte de un solo codon

Es casi universal, salvo pequenas excepciones

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Codigo Transcripcion Traduccion Flujo Caracterısticas Universalidad

El codigo genetico es degenerado

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Codigo Transcripcion Traduccion Flujo Caracterısticas Universalidad

Efectos de las mutaciones de cambio de faseLa insercion de un nucleotido cambia la fase de lectura, la de tres no

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Diccionario del codigo genetico

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Codigo Transcripcion Traduccion Flujo Caracterısticas Universalidad

Naturaleza ordenada, iniciacion, terminacion y supresion

Aminoacidos quımicamente similares comparten, a menudo,una o dos bases

AUG, codon de iniciacion, codifica metionina

UAG, UAA y UGA, codones de terminacion

Mutaciones sin sentido, cuando aparecen en medio de unasecuencia codificanteMutaciones supresoras, suprimen la terminacion

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Codigo Transcripcion Traduccion Flujo Caracterısticas Universalidad

Excepciones al codigo genetico universal

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Diferentes puntos de iniciacion generan genes solapadosEn el fago ΦX174 se codifican siete polipeptidos a partir de secuencias solapadas

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

7. Expresion genica y regulacion

1 El codigo geneticoEl flujo de la informacion geneticaCaracterısticas del codigo geneticoEl codigo genetico es casi universal

2 La transcripcionLa transcripcion sintetiza RNA sobre un molde de DNAEn eucariotas hay varias diferencias importantesLas regiones codificantes de eucariotas estan interrumpidas

3 La traduccion y las proteınasLa traduccion del mRNA depende de ribosomas y tRNALa traduccion del mRNA puede dividirse en tres pasosLa traduccion es mas compleja en eucariotasLas proteınas, su estructura y su funcion

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

La expresion genicaera investigada simultaneamente a la investigaciones sobre el codigo genetico

El RNA participa como molecula intermediaria en el proceso

La mayorıa del DNA esta asociado a cromosomas, en el nucleo

El RNA se sintetiza en el nucleo y es parecido al DNA

La mayorıa del RNA migra al citoplasma, donde se traduce

La cantidad de RNA suele ser proporcional a la de proteına

Demostracion por Volkin y col. (1956, 1958) con fagos T2 y T4

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

La RNA polimerasa dirige la sıntesis de RNA

RNA polimerasa comparte sus requisitos con DNA polimerasa

Pero no precisa un cebador para iniciar la sıntesis de RNA

La reaccion general se puede expresar como:

n(NTP) −→ (NMP)n + n(PPi )

Cada paso implica la adicion de un ribonucleotido (NMP)

(NMP)i + NTP −→ (NMP)i+1 + PPi

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

La sıntesis de RNAUnion al molde, iniciacion, elongacion y terminacion de la sıntesis

Union a la cadena molde a nivel del promotor

Comienza en el sitio de inicio de la transcripcion

La conservacion de secuencias consenso revela importancia

Elementos de actuacion en cis

Region -10, caja de Pribnow o caja TATA (TATTAAT)

Region -35 (TTGACA)

Factores de actuacion en trans, que se unen al DNA

La iniciacion consiste en la insercion del primer ribonucleotido

La elongacion continua a unos 50 residuos/segundo

Una senal de terminacion detiene el proceso

La secuencia de terminacion se transcribe y forma horquilla

Es frecuente la existencia de mRNA policistronicos

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

Primeros estadios de la transcripcion en procariotasUnion al molde de DNA, iniciacion, elongacion. . .

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

Procesamiento postranscripcional en eucariotasRNA nuclear heterogeneo (hnRNA) → mRNA con caperuza 5’ y cola 3’ de poli-A

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

Heteroduplex de DNA molde y mRNA maduroLos siete intrones del gen de la ovoalbumina de gallina forman lazos no emparejados

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

Secuencias intercaladas en genes eucarioticos

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

Mecanismo de corte y empalme en intrones del grupo I

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

Mecanismo de corte y empalme de intrones del pre-mRNADepende de snRNA (U1, U2,. . . , U6) que se combinan con proteınas para formar snRNP(snRNA: RNA nucleares pequenos; snRNP: ribonucleoproteınas nucleares pequenas)

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Codigo Transcripcion Traduccion Procariotas Eucariotas Intrones

Transcripcion simultanea de genes

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

7. Expresion genica y regulacion

1 El codigo geneticoEl flujo de la informacion geneticaCaracterısticas del codigo geneticoEl codigo genetico es casi universal

2 La transcripcionLa transcripcion sintetiza RNA sobre un molde de DNAEn eucariotas hay varias diferencias importantesLas regiones codificantes de eucariotas estan interrumpidas

3 La traduccion y las proteınasLa traduccion del mRNA depende de ribosomas y tRNALa traduccion del mRNA puede dividirse en tres pasosLa traduccion es mas compleja en eucariotasLas proteınas, su estructura y su funcion

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Componentes de ribosomas procarioticos y eucarioticos

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Bases nitrogenadas especıficas de los tRNASon bases no usuales que se generan postranscripcionalmente

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Modelo en hoja de trebol de Holley de los tRNAque predijo exclusivamente sobre la base de la secuencia nucleotıdica

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Modelo tridimensional del RNA transferentea partir de datos de cristalografıa con rayos X

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Previo a la traduccion ocurre la carga del tRNAdirigida por las enzimas aminoacil tRNA sintetasas

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Iniciacion de la traduccion

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Elongacion de la cadena del polipeptido en crecimiento

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Terminacion del proceso de traduccion

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

La traduccion en eucariotas

Ribosomas mas grandes y complejos

Transcripcion y traduccion separadas en espacio y tiempo

Multiples oportunidades para regular la expresion genica

mRNA eucariotico tiene una vida mas larga que el procariotico

Caperuza de 7-metilguanosina en 5’

Secuencia de reconocimiento (de Kozak) para la iniciacion

En eucariotas hay ribosomas libres y unidos a membrana (RE)

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Las proteınas

Las proteınas son importantes para la herencia

Primeras ideas a partir de errores congenitos del metabolismo

Hipotesis de un gen—una enzima

Analisis de mutantes en Neurospora

Un gen codifica una cadena polipeptıdica

Estudios hemoglobina humana

Secuencia nucleotıdica y secuencia amonoacıdica colineares

Analisis de la triptofano sintetasa de E. coli

La estructura proteica es la base de la diversidad biologica

Estructura primaria, secundaria, terciaria y nivel cuaternario

Funcion directamente relacionada con estructura molecular

Constituidas por uno o mas dominios funcionales

Barajado de exones y origen de los dominios proteicos

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Codigo Transcripcion Traduccion General Pasos Eucariotas Proteınas

Flujo de la informacion genetica y codigo genetico

1 El codigo geneticoEl flujo de la informacion geneticaCaracterısticas del codigo geneticoEl codigo genetico es casi universal

2 La transcripcionLa transcripcion sintetiza RNA sobre un molde de DNAEn eucariotas hay varias diferencias importantesLas regiones codificantes de eucariotas estan interrumpidas

3 La traduccion y las proteınasLa traduccion del mRNA depende de ribosomas y tRNALa traduccion del mRNA puede dividirse en tres pasosLa traduccion es mas compleja en eucariotasLas proteınas, su estructura y su funcion

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