departamento de biotecnologÍa agrÍcola reducciÓn de la

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DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA FERTILIZACIÓN SINTÉTICA CON COMPOSTA Y OPTIMIZACIÓN DEL RIEGO SOBRE LA PUDRICIÓN DEL TALLO (Fusarium spp.) DEL MAÍZ EN SINALOA. Blanca Elvira López Valenzuela T E S I S PARA OBTENER EL GRADO DE: MAESTRO EN CIENCIAS EN RECURSOS NATURALES Y MEDIO AMBIENTE Guasave, Sinaloa, a Diciembre de 2010 INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL CENTRO INTERDISCIPLINARIO DE INVESTIGACIÓN PARA EL DESARROLLO INTEGRAL REGIONAL UNIDAD SINALOA

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Page 1: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGIacuteA AGRIacuteCOLA

REDUCCIOacuteN DE LA FERTILIZACIOacuteN SINTEacuteTICA CON COMPOSTA Y

OPTIMIZACIOacuteN DEL RIEGO SOBRE LA PUDRICIOacuteN DEL TALLO (Fusarium spp) DEL MAIacuteZ EN SINALOA

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

T E S I S

PARA OBTENER EL GRADO DE

MAESTRO EN CIENCIAS EN RECURSOS NATURALES Y MEDIO AMBIENTE

Guasave Sinaloa a Diciembre de 2010

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL CENTRO INTERDISCIPLINARIO DE INVESTIGACIOacuteN

PARA EL DESARROLLO INTEGRAL REGIONAL

UNIDAD SINALOA

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARIacuteA DE INVESTIGACIOacuteN Y POSGRADO

CARTA CESIOacuteN DE DERECHOS

En la Ciudad de Guasave Sinaloa el diacutea Ql del mes de Diciembre del antildeo 2010 el (la) que

suscribe Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela alumno (a) del Programa de Maestriacutea en Recursos

Naturales y Medio Ambiente con nuacutemero de registro B081124 adscrito a CIIDIR-SINALOA

manifiesta que es autor (a) intelectual del presente trabajo de Tesis bajo la direccioacuten de los

Doctores Adolfo Dagoberto Armenta B y Miguel Aacutengel Apodaca Saacutenchez y cede los

derechos del trabajo intitulado Reduccioacuten de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica con Composta y

Optimizacioacuten del Riego sobre la Pudricioacuten del Tallo (Fusarium spp) del Maiacutez en Sinaloa al

Instituto Politeacutecnico Nacional para su difusioacuten con fines acadeacutemicos y de investigacioacuten

Los usuarios de la informacioacuten no deben reproducir el contenido textual graacuteficas o datos del

trabajo sin el permiso expreso del autor yo director del trabajo Este puede ser obtenido

escribiendo a la siguiente direccioacuten blancavzla18hotmailcom Si el permiso se otorga el

usuario deberaacute dar el agradecimiento correspondiente y citar la fuente del mismo

VIra Loacutepez Valenzuela Nombre y firma

SIP-13-BIS

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARIA DE INVESTIGACiOacuteN Y POSGRADO

ACTA DE REGISTRO DE TEMA DE TESIS Y DESiGNACIOacuteN DE DIRECTORES DE TESIS

Guasave Sin a ~ de Octubre del 2010

El Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten de CIIDIR-SINALOA en su sesioacuten Ordinaria No 10 celebrada el diacutea 15 del mes de Octubre conocioacute la solicitud presentada por el(la) alumno(a)

LOacuteEez Valenzuela Blanca Elvira Apellido paterno Apellido materno Nombre ts)

Con registro lB lo la 11 11 12 14 1

Aspirante de

1shy Se designa al aspirante el tema de tesis titulado REDUCCiOacuteN DE LA FERTILIZACiOacuteN SINTEacuteTICA CON COMPOSTA y OPTIMIZACiOacuteN DEL RIEGO SOBRE LA PUDRICiOacuteN DEL TALLO (Fusarium sPE) DEL MAiz EN SINALOA

De manera general el tema abarcaraacute los siguientes aspectos Evaluar el Efecto de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica y Composta en la Pudricioacuten de Tallos y Rendimiento de Grano en el Cultivo de Maiacutez Evaluar la Pudricioacuten de Tallos de Maiacutez respecto al Nuacutemero de Riegos Determinar las Especies de Fusariacuteum asociadas a la Pudricioacuten de Tallos de Maiacutez y Evaluar el Efecto de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica Composta y Nuacutemero de Riegos sobre la Pudricioacuten de Mazorcas en el Cultivo de Maiacutez

2- Se designan como Directores de Tesis a los Profesores Dr Adolfo Dagoberto Armenta Bojoacuterquez Dr Miguel Aacutengel Apodaca Saacutenchez

3- El trabajo de investigacioacuten base para el desarrollo de la tesina seraacute elaborado por el alumno en CIIDIR- SINALOA

que cuenta con los recursos e infraestructura necesarios

4- El interesado deberaacute asistir a los seminarios desarrollados en el aacuterea de adscripcioacuten del trabajo desde la fecha en que se suscribe la presente hasta la aceptacioacuten de la tesis por la Comisioacuten Revisora correspondiente

Directores de Tesis

Dr Miguel

Aspirante Presidente del Colegio

~ Blanca Elvira L1)pez Valenzuela zdOrgeMontiel Montoya 1])1 bull 1 iexclL

l~

DlRECCK)N

SIP14B1$

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARiacuteA DE INVESTIGACiOacuteN Y POSGRADO

ACTA DE REVISIOacuteN DE TESIS

En la Ciudad de Guasave Sinaloa siendo las 11 30 horas del diacutea 29 del mes de

Noviembre del 2010 se reunieron los miembros de la Comisioacuten Revisora de Tesis designada

por el Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten de IDIR-SINALOA

para examinar la tesis titulada

Reduccioacuten de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica con Composta y Optimizacioacuten del Riego sobre la Pudricioacuten

de Tallos (Fusarium spp) del Maiacutez en Sinaloa

Presentada por el alumno

LOacutePEZ VALENZUELA BLANCA ELVIRA Apellido paterno Apellido materno Nombre(s

Con registro I B I O 8 I 1 1 2

aspirante de

y MEDIO AMBIENTE MAESTRiacuteA EN RECURSOS

Despueacutes de intercambiar opiniones los miembros de la Comisioacuten manifestaron APROBAR LA TESIS en virtud de que satisface los requisitos sentildealados por las disposiciones reglamentarias vigentes

LA COMISiOacuteN REVISORA

Dr Adolfo D Arm

Director de Tesis

Camacho Baacuteez

Dr Javi

PRESIDENTE DEL COLEGIO DE PROFESO

~~JA Dr Jorge Montiacuteel Montoya elIDIR -lPN

UNIDAD SINALOl

DlRECCiacuteON

4

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

DEDICATORIA

A mi hija Bianka Yomara Mi nintildea tu eres mi musa mi fuerza mi razoacuten de

ser el motivo por el cual yo me he propuesto salir adelante en la vida

superarme como persona y profesionista luchar por lo que maacutes quiero Tu

me has ensentildeado que para triunfar en lo maacutes simple oacute lo maacutes complicado

hay que poner siempre todo el esfuerzo empentildeo dedicacioacuten y paciencia

maacutes allaacute de lo que uno mismo pueda dar

Eres un aacutengel muy especial que dios ha enviado para transformar mi

mundo eres una ley de vida y un gran ejemplo para mi ldquoTe Amordquo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

AGRADECIMIENTOS A mis Padres Juan Hector y Blanca por inculcarme la importancia del estudio ademaacutes de ensentildearme que para triunfar y prosperar hay que sacrificarse demostrando el interes por alcanzar las metas propuestas y sobre todo mami te agradezco enormemente ser mi brazo derecho en esta etapa de mi vida al estar al pendiente siempre de mi hija cuando yo me dedicaba a sacar adelante este gran proyecto Los Quiero Mucho Agradezco con mucho amor a mi esposo Omar por amarme y aceptarme como soy por comprender mis ganas de superacioacuten en el aspecto laboral y profesional ademaacutes de respetar mi espacio y tiempo dedicado a ello a pesar de sacrificar los momentos que le perteneciacutean ldquoTe Quiero mi Amorrdquo

A mi hermana Georgina mi sobrino Juan Alberto que los adoro a mis tias y tios a mi prima Abigail ya que todos ellos pusieron un granito de arena para sacar adelante este trabajo y por eso les agradezco de corazoacuten todo su apoyo y sientanse parte de este logro porque tambieacuten es suyo

A los Doctores Adolfo D Armenta y Miguel A Apodaca les agradezco infinitamente el haber aceptado ser mis directores Por proponerme este gran proyecto por sus consejos asesoriacutea compartir sus conocimientos conmigo y con ello lograr un apredizaje de trabajo investigacioacuten y sobre todo de vida Los admiro respeto y les agradezco de corazoacuten todo su apoyo

A mis tutores Dr Cipriano Garciacutea y Dr Javier Orduntildea por formar parte de mi comiteacute ya que aportaron su gran experiencia y conocimientos con el fin de culminar con un proyecto de investigacioacuten de calidad A Edalhiacute Breidy Victor Leonardo y especialmente a glenda les digo que para mi fue una experiencia inolvidable y muy grata el que formaran parte de mi vida Todos son personas muy valiosas y con grandes virtudes de los cuales aprendi mucho Me quedo con los mejores momentos y recuerdos de cada uno de cuando estabamos en clases praacutecticas congresos y de cuando saliamos a convivir y demostrarnos que los amigos realmente estan juntos en las buenas y en las malas Realmente hicimos un bonito equipo de trabajo y de amistad Gracias y los quiero mucho

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

A mis compantildeeros de generacioacuten fue muy agradable conocerlos y considero que fue la mejor de todas ya que compartimos lo mejor de cada uno para culminar de la manera maacutes satisfactoria esta etapa de aprendizaje y superacioacuten

A mis compantildeeros de la ESAVF-UAS Ceacutesar Palacios por el apoyo brindado para estudiar el posgrado a Mariacutea Teresa Mondaca por sus consejos y amistad a Janny por su ayuda y Efreacuten Cabanillas por su colaboracioacuten en el proyecto A mis amigochos Lucero y Cipriano por su apoyo y consejos sobre todo a mi amigocha Julia por el gran apoyo incondicional en el proyecto

Al equipo de Laboratorio de Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera Dr Ignacio Maldonado Juan Carlos y Damiaacuten por la colaboracioacuten asesoriacutea tiempo y espacio para la realizacioacuten del anaacutelisis molecular requerido en nuestra investigacioacuten Mil Gracias Y a mi compantildeera y amiga Luky tambieacuten agradezco su apoyo al respecto al igual que a Raquel agradezco su amistad

A todos los administrativos del CIIDIR-Sinaloa ya que brindaron su apoyo en cuanto a mis requerimientos como alumna pero ademaacutes agradezco su carintildeo y amistad en especial a Celestino Doriacuten Elvira Richard Don Rober y a Don Emilio (dagger) Tambieacuten agradezco de corazoacuten a Juliaacuten por su gran apoyo en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal ya que con su asesoriacutea y ayuda logre culminar muchos de los objetivos requeridos en el proyecto de investigacioacuten su colaboracioacuten fue muy valiosa para mi ademaacutes lo considero una persona servicial noble con una simpatiacutea uacutenica y mi amigo Muchas gracias a todos Nunca los olvidareacute

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

La ciencia es respecto del alma lo que es la luz respecto de los ojos

y si las raiacuteces son amargas los frutos son muy dulces

Aristoacuteteles

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

29

645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

30

653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

31

6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

32

6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

33

6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

34

6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

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37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

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666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

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39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

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40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

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41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

57

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Page 2: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARIacuteA DE INVESTIGACIOacuteN Y POSGRADO

CARTA CESIOacuteN DE DERECHOS

En la Ciudad de Guasave Sinaloa el diacutea Ql del mes de Diciembre del antildeo 2010 el (la) que

suscribe Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela alumno (a) del Programa de Maestriacutea en Recursos

Naturales y Medio Ambiente con nuacutemero de registro B081124 adscrito a CIIDIR-SINALOA

manifiesta que es autor (a) intelectual del presente trabajo de Tesis bajo la direccioacuten de los

Doctores Adolfo Dagoberto Armenta B y Miguel Aacutengel Apodaca Saacutenchez y cede los

derechos del trabajo intitulado Reduccioacuten de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica con Composta y

Optimizacioacuten del Riego sobre la Pudricioacuten del Tallo (Fusarium spp) del Maiacutez en Sinaloa al

Instituto Politeacutecnico Nacional para su difusioacuten con fines acadeacutemicos y de investigacioacuten

Los usuarios de la informacioacuten no deben reproducir el contenido textual graacuteficas o datos del

trabajo sin el permiso expreso del autor yo director del trabajo Este puede ser obtenido

escribiendo a la siguiente direccioacuten blancavzla18hotmailcom Si el permiso se otorga el

usuario deberaacute dar el agradecimiento correspondiente y citar la fuente del mismo

VIra Loacutepez Valenzuela Nombre y firma

SIP-13-BIS

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARIA DE INVESTIGACiOacuteN Y POSGRADO

ACTA DE REGISTRO DE TEMA DE TESIS Y DESiGNACIOacuteN DE DIRECTORES DE TESIS

Guasave Sin a ~ de Octubre del 2010

El Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten de CIIDIR-SINALOA en su sesioacuten Ordinaria No 10 celebrada el diacutea 15 del mes de Octubre conocioacute la solicitud presentada por el(la) alumno(a)

LOacuteEez Valenzuela Blanca Elvira Apellido paterno Apellido materno Nombre ts)

Con registro lB lo la 11 11 12 14 1

Aspirante de

1shy Se designa al aspirante el tema de tesis titulado REDUCCiOacuteN DE LA FERTILIZACiOacuteN SINTEacuteTICA CON COMPOSTA y OPTIMIZACiOacuteN DEL RIEGO SOBRE LA PUDRICiOacuteN DEL TALLO (Fusarium sPE) DEL MAiz EN SINALOA

De manera general el tema abarcaraacute los siguientes aspectos Evaluar el Efecto de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica y Composta en la Pudricioacuten de Tallos y Rendimiento de Grano en el Cultivo de Maiacutez Evaluar la Pudricioacuten de Tallos de Maiacutez respecto al Nuacutemero de Riegos Determinar las Especies de Fusariacuteum asociadas a la Pudricioacuten de Tallos de Maiacutez y Evaluar el Efecto de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica Composta y Nuacutemero de Riegos sobre la Pudricioacuten de Mazorcas en el Cultivo de Maiacutez

2- Se designan como Directores de Tesis a los Profesores Dr Adolfo Dagoberto Armenta Bojoacuterquez Dr Miguel Aacutengel Apodaca Saacutenchez

3- El trabajo de investigacioacuten base para el desarrollo de la tesina seraacute elaborado por el alumno en CIIDIR- SINALOA

que cuenta con los recursos e infraestructura necesarios

4- El interesado deberaacute asistir a los seminarios desarrollados en el aacuterea de adscripcioacuten del trabajo desde la fecha en que se suscribe la presente hasta la aceptacioacuten de la tesis por la Comisioacuten Revisora correspondiente

Directores de Tesis

Dr Miguel

Aspirante Presidente del Colegio

~ Blanca Elvira L1)pez Valenzuela zdOrgeMontiel Montoya 1])1 bull 1 iexclL

l~

DlRECCK)N

SIP14B1$

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARiacuteA DE INVESTIGACiOacuteN Y POSGRADO

ACTA DE REVISIOacuteN DE TESIS

En la Ciudad de Guasave Sinaloa siendo las 11 30 horas del diacutea 29 del mes de

Noviembre del 2010 se reunieron los miembros de la Comisioacuten Revisora de Tesis designada

por el Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten de IDIR-SINALOA

para examinar la tesis titulada

Reduccioacuten de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica con Composta y Optimizacioacuten del Riego sobre la Pudricioacuten

de Tallos (Fusarium spp) del Maiacutez en Sinaloa

Presentada por el alumno

LOacutePEZ VALENZUELA BLANCA ELVIRA Apellido paterno Apellido materno Nombre(s

Con registro I B I O 8 I 1 1 2

aspirante de

y MEDIO AMBIENTE MAESTRiacuteA EN RECURSOS

Despueacutes de intercambiar opiniones los miembros de la Comisioacuten manifestaron APROBAR LA TESIS en virtud de que satisface los requisitos sentildealados por las disposiciones reglamentarias vigentes

LA COMISiOacuteN REVISORA

Dr Adolfo D Arm

Director de Tesis

Camacho Baacuteez

Dr Javi

PRESIDENTE DEL COLEGIO DE PROFESO

~~JA Dr Jorge Montiacuteel Montoya elIDIR -lPN

UNIDAD SINALOl

DlRECCiacuteON

4

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

DEDICATORIA

A mi hija Bianka Yomara Mi nintildea tu eres mi musa mi fuerza mi razoacuten de

ser el motivo por el cual yo me he propuesto salir adelante en la vida

superarme como persona y profesionista luchar por lo que maacutes quiero Tu

me has ensentildeado que para triunfar en lo maacutes simple oacute lo maacutes complicado

hay que poner siempre todo el esfuerzo empentildeo dedicacioacuten y paciencia

maacutes allaacute de lo que uno mismo pueda dar

Eres un aacutengel muy especial que dios ha enviado para transformar mi

mundo eres una ley de vida y un gran ejemplo para mi ldquoTe Amordquo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

AGRADECIMIENTOS A mis Padres Juan Hector y Blanca por inculcarme la importancia del estudio ademaacutes de ensentildearme que para triunfar y prosperar hay que sacrificarse demostrando el interes por alcanzar las metas propuestas y sobre todo mami te agradezco enormemente ser mi brazo derecho en esta etapa de mi vida al estar al pendiente siempre de mi hija cuando yo me dedicaba a sacar adelante este gran proyecto Los Quiero Mucho Agradezco con mucho amor a mi esposo Omar por amarme y aceptarme como soy por comprender mis ganas de superacioacuten en el aspecto laboral y profesional ademaacutes de respetar mi espacio y tiempo dedicado a ello a pesar de sacrificar los momentos que le perteneciacutean ldquoTe Quiero mi Amorrdquo

A mi hermana Georgina mi sobrino Juan Alberto que los adoro a mis tias y tios a mi prima Abigail ya que todos ellos pusieron un granito de arena para sacar adelante este trabajo y por eso les agradezco de corazoacuten todo su apoyo y sientanse parte de este logro porque tambieacuten es suyo

A los Doctores Adolfo D Armenta y Miguel A Apodaca les agradezco infinitamente el haber aceptado ser mis directores Por proponerme este gran proyecto por sus consejos asesoriacutea compartir sus conocimientos conmigo y con ello lograr un apredizaje de trabajo investigacioacuten y sobre todo de vida Los admiro respeto y les agradezco de corazoacuten todo su apoyo

A mis tutores Dr Cipriano Garciacutea y Dr Javier Orduntildea por formar parte de mi comiteacute ya que aportaron su gran experiencia y conocimientos con el fin de culminar con un proyecto de investigacioacuten de calidad A Edalhiacute Breidy Victor Leonardo y especialmente a glenda les digo que para mi fue una experiencia inolvidable y muy grata el que formaran parte de mi vida Todos son personas muy valiosas y con grandes virtudes de los cuales aprendi mucho Me quedo con los mejores momentos y recuerdos de cada uno de cuando estabamos en clases praacutecticas congresos y de cuando saliamos a convivir y demostrarnos que los amigos realmente estan juntos en las buenas y en las malas Realmente hicimos un bonito equipo de trabajo y de amistad Gracias y los quiero mucho

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

A mis compantildeeros de generacioacuten fue muy agradable conocerlos y considero que fue la mejor de todas ya que compartimos lo mejor de cada uno para culminar de la manera maacutes satisfactoria esta etapa de aprendizaje y superacioacuten

A mis compantildeeros de la ESAVF-UAS Ceacutesar Palacios por el apoyo brindado para estudiar el posgrado a Mariacutea Teresa Mondaca por sus consejos y amistad a Janny por su ayuda y Efreacuten Cabanillas por su colaboracioacuten en el proyecto A mis amigochos Lucero y Cipriano por su apoyo y consejos sobre todo a mi amigocha Julia por el gran apoyo incondicional en el proyecto

Al equipo de Laboratorio de Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera Dr Ignacio Maldonado Juan Carlos y Damiaacuten por la colaboracioacuten asesoriacutea tiempo y espacio para la realizacioacuten del anaacutelisis molecular requerido en nuestra investigacioacuten Mil Gracias Y a mi compantildeera y amiga Luky tambieacuten agradezco su apoyo al respecto al igual que a Raquel agradezco su amistad

A todos los administrativos del CIIDIR-Sinaloa ya que brindaron su apoyo en cuanto a mis requerimientos como alumna pero ademaacutes agradezco su carintildeo y amistad en especial a Celestino Doriacuten Elvira Richard Don Rober y a Don Emilio (dagger) Tambieacuten agradezco de corazoacuten a Juliaacuten por su gran apoyo en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal ya que con su asesoriacutea y ayuda logre culminar muchos de los objetivos requeridos en el proyecto de investigacioacuten su colaboracioacuten fue muy valiosa para mi ademaacutes lo considero una persona servicial noble con una simpatiacutea uacutenica y mi amigo Muchas gracias a todos Nunca los olvidareacute

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

La ciencia es respecto del alma lo que es la luz respecto de los ojos

y si las raiacuteces son amargas los frutos son muy dulces

Aristoacuteteles

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

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ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

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v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

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base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

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40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

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44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

57

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INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARIA DE INVESTIGACiOacuteN Y POSGRADO

ACTA DE REGISTRO DE TEMA DE TESIS Y DESiGNACIOacuteN DE DIRECTORES DE TESIS

Guasave Sin a ~ de Octubre del 2010

El Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten de CIIDIR-SINALOA en su sesioacuten Ordinaria No 10 celebrada el diacutea 15 del mes de Octubre conocioacute la solicitud presentada por el(la) alumno(a)

LOacuteEez Valenzuela Blanca Elvira Apellido paterno Apellido materno Nombre ts)

Con registro lB lo la 11 11 12 14 1

Aspirante de

1shy Se designa al aspirante el tema de tesis titulado REDUCCiOacuteN DE LA FERTILIZACiOacuteN SINTEacuteTICA CON COMPOSTA y OPTIMIZACiOacuteN DEL RIEGO SOBRE LA PUDRICiOacuteN DEL TALLO (Fusarium sPE) DEL MAiz EN SINALOA

De manera general el tema abarcaraacute los siguientes aspectos Evaluar el Efecto de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica y Composta en la Pudricioacuten de Tallos y Rendimiento de Grano en el Cultivo de Maiacutez Evaluar la Pudricioacuten de Tallos de Maiacutez respecto al Nuacutemero de Riegos Determinar las Especies de Fusariacuteum asociadas a la Pudricioacuten de Tallos de Maiacutez y Evaluar el Efecto de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica Composta y Nuacutemero de Riegos sobre la Pudricioacuten de Mazorcas en el Cultivo de Maiacutez

2- Se designan como Directores de Tesis a los Profesores Dr Adolfo Dagoberto Armenta Bojoacuterquez Dr Miguel Aacutengel Apodaca Saacutenchez

3- El trabajo de investigacioacuten base para el desarrollo de la tesina seraacute elaborado por el alumno en CIIDIR- SINALOA

que cuenta con los recursos e infraestructura necesarios

4- El interesado deberaacute asistir a los seminarios desarrollados en el aacuterea de adscripcioacuten del trabajo desde la fecha en que se suscribe la presente hasta la aceptacioacuten de la tesis por la Comisioacuten Revisora correspondiente

Directores de Tesis

Dr Miguel

Aspirante Presidente del Colegio

~ Blanca Elvira L1)pez Valenzuela zdOrgeMontiel Montoya 1])1 bull 1 iexclL

l~

DlRECCK)N

SIP14B1$

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARiacuteA DE INVESTIGACiOacuteN Y POSGRADO

ACTA DE REVISIOacuteN DE TESIS

En la Ciudad de Guasave Sinaloa siendo las 11 30 horas del diacutea 29 del mes de

Noviembre del 2010 se reunieron los miembros de la Comisioacuten Revisora de Tesis designada

por el Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten de IDIR-SINALOA

para examinar la tesis titulada

Reduccioacuten de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica con Composta y Optimizacioacuten del Riego sobre la Pudricioacuten

de Tallos (Fusarium spp) del Maiacutez en Sinaloa

Presentada por el alumno

LOacutePEZ VALENZUELA BLANCA ELVIRA Apellido paterno Apellido materno Nombre(s

Con registro I B I O 8 I 1 1 2

aspirante de

y MEDIO AMBIENTE MAESTRiacuteA EN RECURSOS

Despueacutes de intercambiar opiniones los miembros de la Comisioacuten manifestaron APROBAR LA TESIS en virtud de que satisface los requisitos sentildealados por las disposiciones reglamentarias vigentes

LA COMISiOacuteN REVISORA

Dr Adolfo D Arm

Director de Tesis

Camacho Baacuteez

Dr Javi

PRESIDENTE DEL COLEGIO DE PROFESO

~~JA Dr Jorge Montiacuteel Montoya elIDIR -lPN

UNIDAD SINALOl

DlRECCiacuteON

4

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

DEDICATORIA

A mi hija Bianka Yomara Mi nintildea tu eres mi musa mi fuerza mi razoacuten de

ser el motivo por el cual yo me he propuesto salir adelante en la vida

superarme como persona y profesionista luchar por lo que maacutes quiero Tu

me has ensentildeado que para triunfar en lo maacutes simple oacute lo maacutes complicado

hay que poner siempre todo el esfuerzo empentildeo dedicacioacuten y paciencia

maacutes allaacute de lo que uno mismo pueda dar

Eres un aacutengel muy especial que dios ha enviado para transformar mi

mundo eres una ley de vida y un gran ejemplo para mi ldquoTe Amordquo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

AGRADECIMIENTOS A mis Padres Juan Hector y Blanca por inculcarme la importancia del estudio ademaacutes de ensentildearme que para triunfar y prosperar hay que sacrificarse demostrando el interes por alcanzar las metas propuestas y sobre todo mami te agradezco enormemente ser mi brazo derecho en esta etapa de mi vida al estar al pendiente siempre de mi hija cuando yo me dedicaba a sacar adelante este gran proyecto Los Quiero Mucho Agradezco con mucho amor a mi esposo Omar por amarme y aceptarme como soy por comprender mis ganas de superacioacuten en el aspecto laboral y profesional ademaacutes de respetar mi espacio y tiempo dedicado a ello a pesar de sacrificar los momentos que le perteneciacutean ldquoTe Quiero mi Amorrdquo

A mi hermana Georgina mi sobrino Juan Alberto que los adoro a mis tias y tios a mi prima Abigail ya que todos ellos pusieron un granito de arena para sacar adelante este trabajo y por eso les agradezco de corazoacuten todo su apoyo y sientanse parte de este logro porque tambieacuten es suyo

A los Doctores Adolfo D Armenta y Miguel A Apodaca les agradezco infinitamente el haber aceptado ser mis directores Por proponerme este gran proyecto por sus consejos asesoriacutea compartir sus conocimientos conmigo y con ello lograr un apredizaje de trabajo investigacioacuten y sobre todo de vida Los admiro respeto y les agradezco de corazoacuten todo su apoyo

A mis tutores Dr Cipriano Garciacutea y Dr Javier Orduntildea por formar parte de mi comiteacute ya que aportaron su gran experiencia y conocimientos con el fin de culminar con un proyecto de investigacioacuten de calidad A Edalhiacute Breidy Victor Leonardo y especialmente a glenda les digo que para mi fue una experiencia inolvidable y muy grata el que formaran parte de mi vida Todos son personas muy valiosas y con grandes virtudes de los cuales aprendi mucho Me quedo con los mejores momentos y recuerdos de cada uno de cuando estabamos en clases praacutecticas congresos y de cuando saliamos a convivir y demostrarnos que los amigos realmente estan juntos en las buenas y en las malas Realmente hicimos un bonito equipo de trabajo y de amistad Gracias y los quiero mucho

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

A mis compantildeeros de generacioacuten fue muy agradable conocerlos y considero que fue la mejor de todas ya que compartimos lo mejor de cada uno para culminar de la manera maacutes satisfactoria esta etapa de aprendizaje y superacioacuten

A mis compantildeeros de la ESAVF-UAS Ceacutesar Palacios por el apoyo brindado para estudiar el posgrado a Mariacutea Teresa Mondaca por sus consejos y amistad a Janny por su ayuda y Efreacuten Cabanillas por su colaboracioacuten en el proyecto A mis amigochos Lucero y Cipriano por su apoyo y consejos sobre todo a mi amigocha Julia por el gran apoyo incondicional en el proyecto

Al equipo de Laboratorio de Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera Dr Ignacio Maldonado Juan Carlos y Damiaacuten por la colaboracioacuten asesoriacutea tiempo y espacio para la realizacioacuten del anaacutelisis molecular requerido en nuestra investigacioacuten Mil Gracias Y a mi compantildeera y amiga Luky tambieacuten agradezco su apoyo al respecto al igual que a Raquel agradezco su amistad

A todos los administrativos del CIIDIR-Sinaloa ya que brindaron su apoyo en cuanto a mis requerimientos como alumna pero ademaacutes agradezco su carintildeo y amistad en especial a Celestino Doriacuten Elvira Richard Don Rober y a Don Emilio (dagger) Tambieacuten agradezco de corazoacuten a Juliaacuten por su gran apoyo en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal ya que con su asesoriacutea y ayuda logre culminar muchos de los objetivos requeridos en el proyecto de investigacioacuten su colaboracioacuten fue muy valiosa para mi ademaacutes lo considero una persona servicial noble con una simpatiacutea uacutenica y mi amigo Muchas gracias a todos Nunca los olvidareacute

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

La ciencia es respecto del alma lo que es la luz respecto de los ojos

y si las raiacuteces son amargas los frutos son muy dulces

Aristoacuteteles

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

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21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

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22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

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23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

30

653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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31

6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

33

6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

34

6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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de la Mazorca del Maiacutez en Meacutexico Colegio de Posgraduados Montecillo Edo

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NOM-021-RECNAT-2000 Aprobada por el Comiteacute Consultivo Nacional de

Normalizacioacuten para la Conservacioacuten Proteccioacuten Restauracioacuten y

Aprovechamiento de los Recursos Forestales de Suelos y Costas Norma

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coffee pulp using the earthworm Eisenia foetida effects on C and N contents

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Maiacutez resultados de investigacioacuten en el Norte de Sinaloa Fundacioacuten Produce

Sinaloa SAGARPA y Gobierno del Estado de Sinaloa Los Mochis Sinaloa

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Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Romero-Lima M Trinidad-Santos R Garciacutea-Espinoza A y Ferrera-

Cerrato R 2000 Produccioacuten de papa y biomasa microbiana en suelo con

abonos orgaacutenicos minerales Agrociencia 34261-269

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y Pesquera Secretariacutea de Agricultura Ganaderiacutea Desarrollo Rural Pesca y

Alimentacioacuten Base de Datos Estadiacutesticos de Produccioacuten Disponible en

httpwwwsiapgobmxindexphpoption=com_wrapperampview=wrapperampItemi

d=351

httpwwwcampomexicanogobmxportal_siapIntegracionEstadisticaDerivad

aComercioExteriorEstudiosPerspectivasmaiz96-10pdf

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Maiacutez resultados de Investigacioacuten en el Norte de Sinaloa Fundacioacuten Produce

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solid waste compost and mineral fertilization on plant growth in two tropical

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on nutrient content and growth of corn (Zea mays) Plant and Soil 51283-287

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determining soil organic matter and a proposed modification of the chromic

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y trigo CIMMYT Meacutexico DF 84 p

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gardener Colorado State University No 7 741

Page 4: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

SIP14B1$

INSTITUTO POLITEacuteCNICO NACIONAL SECRETARiacuteA DE INVESTIGACiOacuteN Y POSGRADO

ACTA DE REVISIOacuteN DE TESIS

En la Ciudad de Guasave Sinaloa siendo las 11 30 horas del diacutea 29 del mes de

Noviembre del 2010 se reunieron los miembros de la Comisioacuten Revisora de Tesis designada

por el Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten de IDIR-SINALOA

para examinar la tesis titulada

Reduccioacuten de la Fertilizacioacuten Sinteacutetica con Composta y Optimizacioacuten del Riego sobre la Pudricioacuten

de Tallos (Fusarium spp) del Maiacutez en Sinaloa

Presentada por el alumno

LOacutePEZ VALENZUELA BLANCA ELVIRA Apellido paterno Apellido materno Nombre(s

Con registro I B I O 8 I 1 1 2

aspirante de

y MEDIO AMBIENTE MAESTRiacuteA EN RECURSOS

Despueacutes de intercambiar opiniones los miembros de la Comisioacuten manifestaron APROBAR LA TESIS en virtud de que satisface los requisitos sentildealados por las disposiciones reglamentarias vigentes

LA COMISiOacuteN REVISORA

Dr Adolfo D Arm

Director de Tesis

Camacho Baacuteez

Dr Javi

PRESIDENTE DEL COLEGIO DE PROFESO

~~JA Dr Jorge Montiacuteel Montoya elIDIR -lPN

UNIDAD SINALOl

DlRECCiacuteON

4

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

DEDICATORIA

A mi hija Bianka Yomara Mi nintildea tu eres mi musa mi fuerza mi razoacuten de

ser el motivo por el cual yo me he propuesto salir adelante en la vida

superarme como persona y profesionista luchar por lo que maacutes quiero Tu

me has ensentildeado que para triunfar en lo maacutes simple oacute lo maacutes complicado

hay que poner siempre todo el esfuerzo empentildeo dedicacioacuten y paciencia

maacutes allaacute de lo que uno mismo pueda dar

Eres un aacutengel muy especial que dios ha enviado para transformar mi

mundo eres una ley de vida y un gran ejemplo para mi ldquoTe Amordquo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

AGRADECIMIENTOS A mis Padres Juan Hector y Blanca por inculcarme la importancia del estudio ademaacutes de ensentildearme que para triunfar y prosperar hay que sacrificarse demostrando el interes por alcanzar las metas propuestas y sobre todo mami te agradezco enormemente ser mi brazo derecho en esta etapa de mi vida al estar al pendiente siempre de mi hija cuando yo me dedicaba a sacar adelante este gran proyecto Los Quiero Mucho Agradezco con mucho amor a mi esposo Omar por amarme y aceptarme como soy por comprender mis ganas de superacioacuten en el aspecto laboral y profesional ademaacutes de respetar mi espacio y tiempo dedicado a ello a pesar de sacrificar los momentos que le perteneciacutean ldquoTe Quiero mi Amorrdquo

A mi hermana Georgina mi sobrino Juan Alberto que los adoro a mis tias y tios a mi prima Abigail ya que todos ellos pusieron un granito de arena para sacar adelante este trabajo y por eso les agradezco de corazoacuten todo su apoyo y sientanse parte de este logro porque tambieacuten es suyo

A los Doctores Adolfo D Armenta y Miguel A Apodaca les agradezco infinitamente el haber aceptado ser mis directores Por proponerme este gran proyecto por sus consejos asesoriacutea compartir sus conocimientos conmigo y con ello lograr un apredizaje de trabajo investigacioacuten y sobre todo de vida Los admiro respeto y les agradezco de corazoacuten todo su apoyo

A mis tutores Dr Cipriano Garciacutea y Dr Javier Orduntildea por formar parte de mi comiteacute ya que aportaron su gran experiencia y conocimientos con el fin de culminar con un proyecto de investigacioacuten de calidad A Edalhiacute Breidy Victor Leonardo y especialmente a glenda les digo que para mi fue una experiencia inolvidable y muy grata el que formaran parte de mi vida Todos son personas muy valiosas y con grandes virtudes de los cuales aprendi mucho Me quedo con los mejores momentos y recuerdos de cada uno de cuando estabamos en clases praacutecticas congresos y de cuando saliamos a convivir y demostrarnos que los amigos realmente estan juntos en las buenas y en las malas Realmente hicimos un bonito equipo de trabajo y de amistad Gracias y los quiero mucho

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

A mis compantildeeros de generacioacuten fue muy agradable conocerlos y considero que fue la mejor de todas ya que compartimos lo mejor de cada uno para culminar de la manera maacutes satisfactoria esta etapa de aprendizaje y superacioacuten

A mis compantildeeros de la ESAVF-UAS Ceacutesar Palacios por el apoyo brindado para estudiar el posgrado a Mariacutea Teresa Mondaca por sus consejos y amistad a Janny por su ayuda y Efreacuten Cabanillas por su colaboracioacuten en el proyecto A mis amigochos Lucero y Cipriano por su apoyo y consejos sobre todo a mi amigocha Julia por el gran apoyo incondicional en el proyecto

Al equipo de Laboratorio de Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera Dr Ignacio Maldonado Juan Carlos y Damiaacuten por la colaboracioacuten asesoriacutea tiempo y espacio para la realizacioacuten del anaacutelisis molecular requerido en nuestra investigacioacuten Mil Gracias Y a mi compantildeera y amiga Luky tambieacuten agradezco su apoyo al respecto al igual que a Raquel agradezco su amistad

A todos los administrativos del CIIDIR-Sinaloa ya que brindaron su apoyo en cuanto a mis requerimientos como alumna pero ademaacutes agradezco su carintildeo y amistad en especial a Celestino Doriacuten Elvira Richard Don Rober y a Don Emilio (dagger) Tambieacuten agradezco de corazoacuten a Juliaacuten por su gran apoyo en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal ya que con su asesoriacutea y ayuda logre culminar muchos de los objetivos requeridos en el proyecto de investigacioacuten su colaboracioacuten fue muy valiosa para mi ademaacutes lo considero una persona servicial noble con una simpatiacutea uacutenica y mi amigo Muchas gracias a todos Nunca los olvidareacute

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

La ciencia es respecto del alma lo que es la luz respecto de los ojos

y si las raiacuteces son amargas los frutos son muy dulces

Aristoacuteteles

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

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72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

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i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

29

645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

30

653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

31

6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

32

6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

33

6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

34

6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

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38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

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39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

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40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

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41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

57

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Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

DEDICATORIA

A mi hija Bianka Yomara Mi nintildea tu eres mi musa mi fuerza mi razoacuten de

ser el motivo por el cual yo me he propuesto salir adelante en la vida

superarme como persona y profesionista luchar por lo que maacutes quiero Tu

me has ensentildeado que para triunfar en lo maacutes simple oacute lo maacutes complicado

hay que poner siempre todo el esfuerzo empentildeo dedicacioacuten y paciencia

maacutes allaacute de lo que uno mismo pueda dar

Eres un aacutengel muy especial que dios ha enviado para transformar mi

mundo eres una ley de vida y un gran ejemplo para mi ldquoTe Amordquo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

AGRADECIMIENTOS A mis Padres Juan Hector y Blanca por inculcarme la importancia del estudio ademaacutes de ensentildearme que para triunfar y prosperar hay que sacrificarse demostrando el interes por alcanzar las metas propuestas y sobre todo mami te agradezco enormemente ser mi brazo derecho en esta etapa de mi vida al estar al pendiente siempre de mi hija cuando yo me dedicaba a sacar adelante este gran proyecto Los Quiero Mucho Agradezco con mucho amor a mi esposo Omar por amarme y aceptarme como soy por comprender mis ganas de superacioacuten en el aspecto laboral y profesional ademaacutes de respetar mi espacio y tiempo dedicado a ello a pesar de sacrificar los momentos que le perteneciacutean ldquoTe Quiero mi Amorrdquo

A mi hermana Georgina mi sobrino Juan Alberto que los adoro a mis tias y tios a mi prima Abigail ya que todos ellos pusieron un granito de arena para sacar adelante este trabajo y por eso les agradezco de corazoacuten todo su apoyo y sientanse parte de este logro porque tambieacuten es suyo

A los Doctores Adolfo D Armenta y Miguel A Apodaca les agradezco infinitamente el haber aceptado ser mis directores Por proponerme este gran proyecto por sus consejos asesoriacutea compartir sus conocimientos conmigo y con ello lograr un apredizaje de trabajo investigacioacuten y sobre todo de vida Los admiro respeto y les agradezco de corazoacuten todo su apoyo

A mis tutores Dr Cipriano Garciacutea y Dr Javier Orduntildea por formar parte de mi comiteacute ya que aportaron su gran experiencia y conocimientos con el fin de culminar con un proyecto de investigacioacuten de calidad A Edalhiacute Breidy Victor Leonardo y especialmente a glenda les digo que para mi fue una experiencia inolvidable y muy grata el que formaran parte de mi vida Todos son personas muy valiosas y con grandes virtudes de los cuales aprendi mucho Me quedo con los mejores momentos y recuerdos de cada uno de cuando estabamos en clases praacutecticas congresos y de cuando saliamos a convivir y demostrarnos que los amigos realmente estan juntos en las buenas y en las malas Realmente hicimos un bonito equipo de trabajo y de amistad Gracias y los quiero mucho

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

A mis compantildeeros de generacioacuten fue muy agradable conocerlos y considero que fue la mejor de todas ya que compartimos lo mejor de cada uno para culminar de la manera maacutes satisfactoria esta etapa de aprendizaje y superacioacuten

A mis compantildeeros de la ESAVF-UAS Ceacutesar Palacios por el apoyo brindado para estudiar el posgrado a Mariacutea Teresa Mondaca por sus consejos y amistad a Janny por su ayuda y Efreacuten Cabanillas por su colaboracioacuten en el proyecto A mis amigochos Lucero y Cipriano por su apoyo y consejos sobre todo a mi amigocha Julia por el gran apoyo incondicional en el proyecto

Al equipo de Laboratorio de Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera Dr Ignacio Maldonado Juan Carlos y Damiaacuten por la colaboracioacuten asesoriacutea tiempo y espacio para la realizacioacuten del anaacutelisis molecular requerido en nuestra investigacioacuten Mil Gracias Y a mi compantildeera y amiga Luky tambieacuten agradezco su apoyo al respecto al igual que a Raquel agradezco su amistad

A todos los administrativos del CIIDIR-Sinaloa ya que brindaron su apoyo en cuanto a mis requerimientos como alumna pero ademaacutes agradezco su carintildeo y amistad en especial a Celestino Doriacuten Elvira Richard Don Rober y a Don Emilio (dagger) Tambieacuten agradezco de corazoacuten a Juliaacuten por su gran apoyo en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal ya que con su asesoriacutea y ayuda logre culminar muchos de los objetivos requeridos en el proyecto de investigacioacuten su colaboracioacuten fue muy valiosa para mi ademaacutes lo considero una persona servicial noble con una simpatiacutea uacutenica y mi amigo Muchas gracias a todos Nunca los olvidareacute

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

La ciencia es respecto del alma lo que es la luz respecto de los ojos

y si las raiacuteces son amargas los frutos son muy dulces

Aristoacuteteles

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

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72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

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i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

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22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

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23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

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6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

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A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

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665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

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El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

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6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

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Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

AGRADECIMIENTOS A mis Padres Juan Hector y Blanca por inculcarme la importancia del estudio ademaacutes de ensentildearme que para triunfar y prosperar hay que sacrificarse demostrando el interes por alcanzar las metas propuestas y sobre todo mami te agradezco enormemente ser mi brazo derecho en esta etapa de mi vida al estar al pendiente siempre de mi hija cuando yo me dedicaba a sacar adelante este gran proyecto Los Quiero Mucho Agradezco con mucho amor a mi esposo Omar por amarme y aceptarme como soy por comprender mis ganas de superacioacuten en el aspecto laboral y profesional ademaacutes de respetar mi espacio y tiempo dedicado a ello a pesar de sacrificar los momentos que le perteneciacutean ldquoTe Quiero mi Amorrdquo

A mi hermana Georgina mi sobrino Juan Alberto que los adoro a mis tias y tios a mi prima Abigail ya que todos ellos pusieron un granito de arena para sacar adelante este trabajo y por eso les agradezco de corazoacuten todo su apoyo y sientanse parte de este logro porque tambieacuten es suyo

A los Doctores Adolfo D Armenta y Miguel A Apodaca les agradezco infinitamente el haber aceptado ser mis directores Por proponerme este gran proyecto por sus consejos asesoriacutea compartir sus conocimientos conmigo y con ello lograr un apredizaje de trabajo investigacioacuten y sobre todo de vida Los admiro respeto y les agradezco de corazoacuten todo su apoyo

A mis tutores Dr Cipriano Garciacutea y Dr Javier Orduntildea por formar parte de mi comiteacute ya que aportaron su gran experiencia y conocimientos con el fin de culminar con un proyecto de investigacioacuten de calidad A Edalhiacute Breidy Victor Leonardo y especialmente a glenda les digo que para mi fue una experiencia inolvidable y muy grata el que formaran parte de mi vida Todos son personas muy valiosas y con grandes virtudes de los cuales aprendi mucho Me quedo con los mejores momentos y recuerdos de cada uno de cuando estabamos en clases praacutecticas congresos y de cuando saliamos a convivir y demostrarnos que los amigos realmente estan juntos en las buenas y en las malas Realmente hicimos un bonito equipo de trabajo y de amistad Gracias y los quiero mucho

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

A mis compantildeeros de generacioacuten fue muy agradable conocerlos y considero que fue la mejor de todas ya que compartimos lo mejor de cada uno para culminar de la manera maacutes satisfactoria esta etapa de aprendizaje y superacioacuten

A mis compantildeeros de la ESAVF-UAS Ceacutesar Palacios por el apoyo brindado para estudiar el posgrado a Mariacutea Teresa Mondaca por sus consejos y amistad a Janny por su ayuda y Efreacuten Cabanillas por su colaboracioacuten en el proyecto A mis amigochos Lucero y Cipriano por su apoyo y consejos sobre todo a mi amigocha Julia por el gran apoyo incondicional en el proyecto

Al equipo de Laboratorio de Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera Dr Ignacio Maldonado Juan Carlos y Damiaacuten por la colaboracioacuten asesoriacutea tiempo y espacio para la realizacioacuten del anaacutelisis molecular requerido en nuestra investigacioacuten Mil Gracias Y a mi compantildeera y amiga Luky tambieacuten agradezco su apoyo al respecto al igual que a Raquel agradezco su amistad

A todos los administrativos del CIIDIR-Sinaloa ya que brindaron su apoyo en cuanto a mis requerimientos como alumna pero ademaacutes agradezco su carintildeo y amistad en especial a Celestino Doriacuten Elvira Richard Don Rober y a Don Emilio (dagger) Tambieacuten agradezco de corazoacuten a Juliaacuten por su gran apoyo en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal ya que con su asesoriacutea y ayuda logre culminar muchos de los objetivos requeridos en el proyecto de investigacioacuten su colaboracioacuten fue muy valiosa para mi ademaacutes lo considero una persona servicial noble con una simpatiacutea uacutenica y mi amigo Muchas gracias a todos Nunca los olvidareacute

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

La ciencia es respecto del alma lo que es la luz respecto de los ojos

y si las raiacuteces son amargas los frutos son muy dulces

Aristoacuteteles

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

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27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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29

645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

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44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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A mis compantildeeros de generacioacuten fue muy agradable conocerlos y considero que fue la mejor de todas ya que compartimos lo mejor de cada uno para culminar de la manera maacutes satisfactoria esta etapa de aprendizaje y superacioacuten

A mis compantildeeros de la ESAVF-UAS Ceacutesar Palacios por el apoyo brindado para estudiar el posgrado a Mariacutea Teresa Mondaca por sus consejos y amistad a Janny por su ayuda y Efreacuten Cabanillas por su colaboracioacuten en el proyecto A mis amigochos Lucero y Cipriano por su apoyo y consejos sobre todo a mi amigocha Julia por el gran apoyo incondicional en el proyecto

Al equipo de Laboratorio de Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera Dr Ignacio Maldonado Juan Carlos y Damiaacuten por la colaboracioacuten asesoriacutea tiempo y espacio para la realizacioacuten del anaacutelisis molecular requerido en nuestra investigacioacuten Mil Gracias Y a mi compantildeera y amiga Luky tambieacuten agradezco su apoyo al respecto al igual que a Raquel agradezco su amistad

A todos los administrativos del CIIDIR-Sinaloa ya que brindaron su apoyo en cuanto a mis requerimientos como alumna pero ademaacutes agradezco su carintildeo y amistad en especial a Celestino Doriacuten Elvira Richard Don Rober y a Don Emilio (dagger) Tambieacuten agradezco de corazoacuten a Juliaacuten por su gran apoyo en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal ya que con su asesoriacutea y ayuda logre culminar muchos de los objetivos requeridos en el proyecto de investigacioacuten su colaboracioacuten fue muy valiosa para mi ademaacutes lo considero una persona servicial noble con una simpatiacutea uacutenica y mi amigo Muchas gracias a todos Nunca los olvidareacute

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela

La ciencia es respecto del alma lo que es la luz respecto de los ojos

y si las raiacuteces son amargas los frutos son muy dulces

Aristoacuteteles

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

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72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

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VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

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6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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AACCL USA 809 pp

Whiting D Wilson C and Card A 2005 Soil amendments Colorado master

gardener Colorado State University No 7 741

Page 8: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

INDICE GENERAL

PAG

GLOSARIOhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip i INDICE DE CUADROShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip iv INDICE DE FIGURAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip v RESUMENhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vi ABSTRATChelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip vii I INTRODUCCIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 1 II ANTECEDENTEShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 21 Cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 211 Importanciahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 3 212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 4 213 Enfermedades del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 5 22 Pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 6 221 Siacutentomas de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 7 222 Agentes causales de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 23 Pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 8 24 Aspectos generales de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 10 241 Fusarium spp en maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 11 242 Fusarium verticillioideshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 12 251 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 13 252 Fertilizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 14 253 Compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 16 2531 Beneficios de la composta 17 25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrienteshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 17 III JUSTIFICACIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 20 IV OBJETIVOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 41 Objetivo generalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 42 Objetivos especiacuteficoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 21 V HIPOacuteTESIShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 22 VI MATERIALES Y MEacuteTODOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 61 Ubicacioacuten de la parcela experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 611 Localizacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 62 Muestreo de suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 23 63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la compostahelliphelliphelliphellip 24 64 Establecimiento del experimentohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 641 Preparacioacuten del terrenohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 642 Fertilizacioacuten y siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26 643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimentalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 26

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644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

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72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

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i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

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COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

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iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

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INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

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INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

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RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

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vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

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23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

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27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

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34

6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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on nutrient content and growth of corn (Zea mays) Plant and Soil 51283-287

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

66

Tisdale SL and Nelson W 1966 Soil fertility and fertilizers Edicioacuten 2th

Togun A O y Akanbi W B 2003 Comparative effectiveness of organic-

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Walkley A and Black LA 1934 An examination of the Dgtjareff method for

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Warham E J Butler L D y Sutton B C sf Ensayos para la semilla de maiacutez

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Gelfand DH Shinsky JJ White TJ (eds) PCR protocols a guide to

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gardener Colorado State University No 7 741

Page 9: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 28 645 Origen de la composta y su incorporacioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 646 Riegoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 651 Altura de plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 652 Grosor de tallohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 29 653 Altura de mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 654 Nuacutemero de hojashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 655 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6551 Muestreo del follajehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 30 6552 Nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno totalhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 31 6553 Foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 65532 Determinacioacuten de foacutesforohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 32 6554 Potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65541 Determinacioacuten de potasiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6555 Calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesiohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 33 6556 Fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobrehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 34 662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 36 665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y

semillahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 37 666 Anaacutelisis molecularhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemicohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 38 6663 Purificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphellip 39 6664 Cuantificacioacuten de ADNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 39 6665 Anaacutelisis de las secuenciashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 67 Rendimiento en grano t ha-1 40 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 671 Peso especiacutefico del granohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 40 VII RESULTADOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembrahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivohelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

72 Propiedades quiacutemicas de la compostahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42 73 Variables de crecimiento de la plantahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 731 Altura de planta y grosor de tallo evaluadas en etapa vegetativahelliphelliphelliphelliphelliphellip 43 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas

evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

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27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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29

645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

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40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

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41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

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Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

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45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

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evaluadas en etapa de maduracioacutenhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentoshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45 74 Variables fitopatoloacutegicashelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 745 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusariumhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del

tallo y pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49 75 Rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip VIII DISCUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 52 IX CONCLUSIOacuteNhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 56 X BIBLIOGRAFIacuteAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 57

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i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

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22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

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23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

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6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

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A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

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665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

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El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

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6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

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Page 11: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

i

GLOSARIO RIEGO Consiste en el aporte de agua al suelo para que los vegetales tengan el

suministro de humedad suficiente para su crecimiento

RIEGO POR GRAVEDAD Es el riego que se aplica de acuerdo a la pendiente del

suelo conocido como riego rodado

FERTILIZACIOacuteN Praacutectica agronoacutemica que consiste en agregar al suelo o la planta

los elementos nutritivos necesarios para producir buenas cosechas partiendo de la

capacidad original de produccioacuten del suelo de las necesidades de la plantacioacuten y de

la calidad de los fertilizantes aplicados suponiendo que las labores de cultivo son

normales y oportunas

FENOLOGIacuteA Establece las distintas fases del desarrollo por las que atraviesa un

cultivo tiene en cuenta los cambios morfoloacuteficos y fisioloacutegicos que se producen a

medida que transcurre el tiempo

FISIOLOGIacuteA Esta muy relacionado al establecimiento de las etapas de crecimiento

del cultivo en el cual se refiere el aumento del nuacutemero y tamantildeo de las ceacutelulas el

desarrollo de la sucesioacuten progresiva de etapas que llevan a establecer la morfologia

del organismo adulto

MACRONUTRIMENTOS Elementos baacutesicos que las plantas requieren en mayor

cantidad o concentracioacuten Se dividen em primarios como el Nitroacutegeno Foacutesforo y

Potasio y secundarios que incluyen al Calcio Magnesio y Azufre

MICRONUTRIMENTOS Son elementos requeridos por las plantas pero en

pequentildeas cantidades sin embargo con la misma importancia que los

macronutrimentos Dentro de estos se encuentra al Manganeso Fierro Cobre

Molibdeno Boro Zinc Cobalto y Cloro

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

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21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

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23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

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27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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29

645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

30

653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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31

6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

32

6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

33

6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

34

6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

57

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Page 12: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

ii

COMPOSTA Materia orgaacutenica descompuesta hasta llegar a huacutemus bajo

condiciones controladas por la accioacuten de microorganismos o por la accioacuten del

hombre

LOMBRICOMPOSTA Se obtiene mediante la accioacuten de degradar mateacuteria orgacircnica

con empleo de lombrices especiacuteficas y microorganismos en un ambiente controlado

para obtener el huacutemus de lombriacutez y la lombriacutez misma

HUacuteMUS El huacutemus es un producto que resulta de la desintegracioacuten de la materia

orgaacutenica (cuerpo de animales y vegetales) relativamente estable logrando de esta

manera la fertilizacioacuten de los suelos Este proceso de humificacioacuten en la naturaleza

es tan lento que se requiere antildeos para su transformacioacuten a inorgaacutenico

AacuteCIDOS HUacuteMICOS Los aacutecidos huacutemicos son unos de los principales componentes

de las sustancias huacutemicas las cuales son los constituyentes principales del huacutemus

materia orgaacutenica del suelo Poseen mayor porcentaje de carbono que los aacutecidos

fuacutelvicos y menor porcentaje de hidroacutegeno que los aacutecidos fuacutelvicos

AacuteCIDOS FUacuteLVICOS Son parte del complejo de compuestos orgaacutenicos del suelo de naturaleza distinta a la de cualquier sustancia vegetal Estos poseen un porcentaje de carbono maacutes bajo y un porcentaje de hidroacutegeno superior respecto al de los aacutecidos huacutemicos Los aacutecidos fuacutelvicos intervienen en los diferentes estados de nutricioacuten de la planta haciendo la funcioacuten de activador del metabolismo de las plantas Se aplican con el riego Actuacutean principalmente sobre las propiedades bioloacutegicas del suelo no precipitan en medio aacutecido tienen baja capacidad de retencioacuten de agua menor capacidad de intercambio catioacutenico (CIC) gran capacidad de concentracioacuten de liacutequidos (60) se obtienen a partir de cualquier tipo de materia orgaacutenica oxidable y poseen un mayor efecto estimulante

FITOPATOacuteGENO Se denomina fitopatoacutegeno a los microorganismo que causan

enfermedades en las plantas por medio de disturbios en el metabolismo celular

causado por la secrecioacuten de enzimas toxinas fitoreguladores y otras sustancias

ademaacutes absorben nutrientes de la ceacutelula vegetal para su propio crecimiento

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

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64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

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base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

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644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

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653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

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6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

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6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

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6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

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Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

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A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

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665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

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44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

57

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Page 13: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA REDUCCIÓN DE LA

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iii

Algunos fitopatoacutegenos pueden causar tambieacuten enfermedades por crecer y

multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y por ende por bloquear el

transporte de agua y nutrientes desde la raiacutez hacia las hojas o el flujo de savia desde

las hojas hacia el resto de la planta Los organismos fitopatoacutegenos incluyen a los

nematodos bacterias virus fitoplasmas protozoarios y a los hongos

INCIDENCIA La Incidencia es la cantidad de individuos o partes contables de un

individuo (plantas frutos hojas etc) afectados por una determinada enfermedad

respecto al total analizado expresada en porcentaje Es un valor objetivo Esta

medida es uacutetil para medir el patroacuten de distribucioacuten en el campo de enfermedades

donde alguna parte o toda la planta estaacute afectada La determinacioacuten de la Incidencia es praacutectica sencilla y precisa

SEVERIDAD La Severidad es una estimacioacuten visual en la cual se establecen grados

de infeccioacuten en una determinada planta sobre la base de la cantidad de tejido

vegetal enfermo Es subjetiva y hace referencia al del aacuterea necrosada o enferma

de una hoja fruto espiga etc Es el paraacutemetro que mejor estaacute relacionado con la

gravedad de la enfermedad y con los dantildeos causados La Severidad es maacutes

apropiada para Royas Oiacutedios y Manchas porque son enfermedades localizadas

cuyo efecto en la disminucioacuten del rendimiento dependeraacute del aacuterea foliar afectada La

estimacioacuten de la severidad es difiacutecil lenta y variacutea de observador a observador

Requiere calibracioacuten visual Su medicioacuten puede ser De manera arbitraria con

escalas numeacutericas oacute con escalas diagramaacuteticas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

iv

INDICE DE CUADROS

PAG

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento primavera-verano 2009 27 Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de

maiacutez primavera-verano Fecha de siembra el 27 de febrero de 2009 27 Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos de

del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 4 Escala utilizada para estimar la severidad de la pudricioacuten de la

mazorca del maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 35 Cuadro 5 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra

del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego

y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la

pudricioacuten del tallo en el valle del fuertehelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 41 Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo despueacutes de

cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego

y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 42

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de

factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphellip 43

Cuadro 8 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y

grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 44 Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de

crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del

cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 45

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de

nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 46

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 49

Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados fuacutengicos asociados a la

pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

v

INDICE DE FIGURAS

PAG

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el campo experimentalhelliphelliphelliphelliphellip 27 Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de talloshelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 47 Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la

pudricioacuten de la mazorcahelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 48 Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados encontrados

en tallo y semilla de maiacutezhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 50

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1 51 helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vi

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fertilizacioacuten sinteacutetica con

composta y riego sobre la pudricioacuten de tallos en maiacutez en el Valle del Fuerte Sinaloa

En el ciclo agriacutecola primavera-verano 2009 se establecioacute un ensayo en el campo

experimental valle el fuerte para lo cual el terreno se preparoacute de acuerdo a la

tecnologiacutea regional Se utilizoacute un disentildeo en parcelas divididas en bloques completos

al azar con tres repeticiones Se establecieron 14 tratamientos producto de la

combinacioacuten de los niveles de dos factores riego (seis y cinco riegos de auxilio) y

fertilizacioacuten (320 Kg de N ha-1 256 Kg de N ha-1 +1 t ha-1 de composta 256 Kg de N

ha-1 +2 t ha-1 de composta 256 Kg de N ha-1 +3 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1

+1 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +2 t ha-1 de composta 208 Kg de N ha-1 +3

t ha-1 de composta) A los 52 y 119 diacuteas despueacutes de la siembra (dds) no se

detectaron diferencias significativas en el factor fertilizacioacuten para las variables de

crecimiento como altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de

hojas pero si se presentaron diferencias en el factor riego solamente en el nuacutemero

de hojas obteniendo un mayor valor (1555) con seis riegos Se evaluoacute a los 152

dds el rendimiento en grano (t ha-1

) en el cual no se presentaron diferencias

significativas ni para el factor riego ni para fertilizacioacuten La incidencia de pudricioacuten de

tallos fue evaluada a los 53 dds y se obtuvo como resultado un 100 La severidad

de pudricioacuten de tallos se estimoacute a los 53 y 145 dds obteniendo diferencias

significativas solamente en el factor riego eacutesta fue mayor con menor humedad en el

suelo (cinco riegos) en comparacioacuten a las parcelas que se aplicaron maacutes riegos de

auxilio (seis riegos) En base a estudios morfoloacutegicos complementados con anaacutelisis

molecular se determinoacute que el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en el

Valle del Fuerte fue Fusarium verticillioides en cuanto a la pudricioacuten de la mazorca

se detectoacute una mayor diversidad de agentes asociados como Aspergillus spp

Penicillium pinophilum y con mayor incidencia Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

vii

ABSTRACT

Field experiments were conducted at the El Fuerte Valley Experimental

Research Station in spring-summer growing season 2009 to study the effects of

irrigation and synthetic fertilization with compost on maize stem rotting The

experimental site was plowed using the regional plowing system The experiments

were arranged under a split plot in a randomized complete block design with 3

replicates The main 14 treatments were established by combining two main factors

irrigation (6 and 5 irrigations) and fertilization 320 Kg of N ha-1 (256 Kg of N ha-1 +1

ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +2 ton ha-1 of compost) (256 Kg of N ha-1 +3

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +1 ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +2

ton ha-1 of compost) (208 Kg of N ha-1 +3 ton ha-1

of compost) There were no

significant differences in growth variables such as height of plant stem thickness

height of ears and number of leaves for irrigation treatment at 52 and 119 days after

planting However for the irrigation treatment there were significant differences in the

number of leaves getting a higher value (1555) with 6 irrigations Grain yield was

realized at 152 days after planting which in there were no significant differences not

for irrigation nor for fertilization treatments Incidence of stem rotting was estimated at

53 days after planting getting a 100 as a result achieved On the other hand

severity of stem rotting was estimated at 53 and 145 days after planting having

significant differences in the irrigation treatment only This one was higher in plots

with lower soil moisture (5 irrigations) compared to those having 6 irrigations

According to morphological studies realized by molecular analysis it was found that

the main agent associated to the stem rotting in the El Fuerte Valley was Fusarium

verticillioides As far as maize cob rotting it was found a higher diversity of agents

involved such as Aspergillus spp Penicillium pinophilum and Fusarium verticillioides

with a higher incidence

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

1

I INTRODUCCIOacuteN

El maiacutez es el cultivo agriacutecola maacutes importante del paiacutes por ser sembrado en

mayor superficie y ser la base de la alimentacioacuten del pueblo mexicano

Sinaloa es el principal productor de maiacutez y es el cultivo que se siembra en

mayor superficie En el ciclo agriacutecola otontildeo-invierno 2009-10 la superficie sembrada

fue de 471000 hectaacutereas cuya produccioacuten alcanzoacute 4 986000 toneladas y su

rendimiento alcanzoacute las 106 t ha-1 Para el ciclo primavera-verano 2010 se

sembraron 26310 hectaacutereas con una produccioacuten de 144 287 toneladas y un

rendimiento de 87 t ha-1

(SIAPSAGARPA 2010)

El incremento de la superficie del maiacutez en Sinaloa obedece principalmente a

la rentabilidad del cultivo lo que ha propiciado su monocultivo Esta praacutectica

inadecuada trajo algunas consecuencias negativas como lo son la degradacioacuten de

los suelos y los problemas fitosanitarios

La siembra repetitiva del cultivo efectuada a traveacutes de los antildeos ha favorecido

la proliferacioacuten de enfermedades que representan un alto riesgo que necesariamente

se debe prevenir de lo contrario en breve este podriacutea ser un factor negativo para el

sostenimiento productivo de la gramiacutenea De las enfermedades potenciales que

afectan al cultivo y han alertado al productor en Sinaloa actualmente sobresalen la

pudricioacuten de tallos y la pudricioacuten de mazorcas atribuiacutedas principalmente a Fusarium

spp (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las enfermedades del maiacutez tienen su origen en el uso de genotipos

susceptibles monocultivo mal uso del agua y fertilizantes y la baja proporcioacuten de

materia orgaacutenica en los suelos de la regioacuten (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

2

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Estudio realizado por Arintildeo et al (2009) indicoacute que la alta Fertilizacioacuten

nitrogenada sinteacutetica incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez

toxinas asociadas a importantes enfermedades de los animales y los humanos

El manejo inadecuado del agua fertilizantes inorgaacutenicos y las bajas

cantidades de materia orgaacutenica en los suelos puede ser una de las causas que han

incrementado la incidencia de la pudricioacuten del tallo y la pudricioacuten de mazorca

logrando una baja en la calidad de las plantas y sobre todo en los rendimientos

En base a esto el manejo del cultivo debe estar orientado hacia la obtencioacuten

de genotipos tolerantes a la pudricioacuten de tallos ademaacutes de un manejo sustentable

del cultivo de maiacutez en lo concerniente a riego y nutricioacuten

Por lo anterior el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la

optimizacioacuten del agua y la reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con composta en la

pudricioacuten de tallos provocada por Fusarium spp en maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

3

II ANTECEDENTES

21 Cultivo de maiacutez

211 Importancia

El maiacutez (Zea mays L) es considerado como uno de los cuatro alimentos

baacutesicos de la poblacioacuten mundial (Anderson et al 2004) y ocupa el primer lugar en

volumen de produccioacuten que se destina principalmente para alimento de animales

humanos y usos industriales (White y Jonson 2003) En Meacutexico es la principal

fuente de alimentacioacuten humana y ocupa la mayor superficie cultivada anualmente 7

a 8500000 hectaacutereas principalmente en temporal (85) y el 15 restante con riego

en el ciclo otontildeo-invierno (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

Sinaloa es el principal estado productor de maiacutez con riego (65 de la

produccioacuten nacional) durante el ciclo otontildeo-invierno A pesar de ser un paiacutes maicero

Meacutexico enfrenta un grave problema de autosuficiencia de maiacutez importando

anualmente 3 a 7000000 de toneladas de las 20 a 26000000 que consumen

(INIFAP2006)

En Meacutexico los rendimientos de maiacutez son bajos con respecto a los potenciales

los mayores rendimientos con riego son 9 t haminus1 en Sinaloa y en temporal 5 t haminus1 en

Jalisco el rendimiento promedio nacional para riego es 52 t haminus1 y 2 t haminus1

para

temporal Esto muestra las diferencias tecnoloacutegicas edaacuteficas y ambientales de las

zonas maiceras del paiacutes (Muntildeoz y Hernaacutendez 2004)

La seleccioacuten adecuada de los hiacutebridos el manejo eficiente de la fertilizacioacuten

riego fitosanidad y el usos de paquetes tecnoloacutegicos aunado a la experiencia

alcanzada por los productores en el manejo del cultivo son los principales factores

que inciden sobre el rendimiento de maiacutez (INIFAP 2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

4

212 Clasificacioacuten taxonoacutemica y descripcioacuten botaacutenica del maiacutez Calderoacuten y Rzedowski (2001) reportaron la siguiente clasificacioacuten taxonoacutemica del

cultivo de maiacutez

Dominio Eukaryota

Reino Plantae

Divisioacuten Antophyta (Angiospermae)

Clase Monocotiledonea

Orden Poales

Familia Poaceae (Gramiacutenea)

Geacutenero Zea

Especie Z mays L

La planta del maiacutez es de porte robusto de faacutecil desarrollo y de produccioacuten

anual Posee un tallo simple erecto de elevada longitud pudiendo alcanzar los 4

metros de altura y sin ramificaciones Es un cultivo de inflorescencia monoica con

inflorescencia masculina y femenina separada dentro de la misma planta La

inflorescencia masculina presenta una paniacutecula de coloracioacuten amarilla que posee

una cantidad muy elevada de polen en el orden de 20 a 25 millones de granos En

cambio la inflorescencia femenina marca un menor contenido de polen alrededor de

los 800 o 1000 granos y se forman en unas estructuras vegetativas denominadas

espaacutedices que se disponen de forma lateral Las hojas son largas de gran tamantildeo

lanceoladas alternas paralelinervias Se encuentran abrazadas al tallo y por el haz

presenta vellosidades Los extremos de las hojas son muy afilados y cortantes Las

raiacuteces son fasciculadas y su misioacuten es la de aportar un perfecto anclaje a la planta y

asiacute como la absorcioacuten de agua y nutrientes (SIAPSAGARPA 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

5

La escala fenoloacutegica maacutes utilizada para describir el desarrollo del cultivo de

maiacutez es la de Ritchie y Hanway (1982) la cual se basa en caracteres morfoloacutegicos

externos (macroscoacutepicos) Y en la que se pueden distinguir dos grandes periacuteodos el

vegetativo y el reproductivo El primero se subdivide en estadios identificados con la

letra V y un subiacutendice que sentildeala el nuacutemero de orden de la uacuteltima hoja

completamente expandida (liacutegula visible) al momento de la observacioacuten El iacutendice VE

se utiliza para identificar la emergencia del cultivo El nuacutemero total de subdivisiones

del periacuteodo vegetativo variacutea con el genotipo y el ambiente considerado por modificar

ambos el nuacutemero final de hojas Una vez producida la aparicioacuten de todas las hojas el

estado es definido por la aparicioacuten de la panoja (VT panojamiento) El periacuteodo

reproductivo subdividido en estadios identificados con la letra R y un subiacutendice

comienza con la emergencia de los estigmas (R1) continuacutea con el cuaje (R2) oacute

estado de ampolla y el llenado de los granos (R3= grano lechoso R4= grano pastoso

y R5= grano duro) finaliza con la madurez fisioloacutegica (R6

213 Enfermedades del maiacutez

)

De Leoacuten (1984) publicoacute que entre las enfermedades del maiacutez mayormente

difundidas a nivel mundial y sus agentes causales destacan los tizones (Pythium)

pudricioacuten de raiacuteces por Fusarium Diplodia y Pythium pudricioacuten de tallos en plantas

joacutevenes causada por Erwinia y Pseudomonas y Despueacutes de la floracioacuten ( Diplodia

Fusarium) asiacute como la marchitez tardiacutea (Cephalosporium) pudricioacuten carbonosa

(Macrophomina) y la pudricioacuten de la mazorca (Diplodia Fusarium Penicillium

Aspergillus Nigrospora y Cladosporium) entre otras

En Sinaloa la pudricioacuten de tallos y de la mazorca son enfermedades que en los

uacuteltimos antildeos se han presentado con intensidad en algunos terrenos con mermas

significativas en los rendimientos esto ha provocado inquietud y alarma en los

productores de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

6

22 Pudricioacuten de tallos

La utilizacioacuten del maiacutez en la alimentacioacuten estaacute estrechamente vinculada a la

calidad sanitaria de los granos cosechados por lo que se debe tratar que el cultivo

llegue a cosecha libre de enfermedades Entre las enfermedades que se presentan

con maacutes regularidad en este cultivo se puede citar en especial la causada por

hongos del geacutenero Fusarium spp como es la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de

mazorcas (Levin et al 2003)

La pudricioacuten de tallos es una de las enfermedades maacutes destructivas del cultivo

de maiacutez y la maacutes importante por su difusioacuten en todas las aacutereas maiceras del mundo

Los dantildeos que ocasiona han preocupado a los productores ya que se presentan

todos los antildeos con peacuterdidas de diferente magnitud por quebrado del tallo

(Fernaacutendez-Valiela 1979)

Esta es una enfermedad fuacutengica de los cereales que infecta frecuentemente

trigo (Triticum vulgare) cebada (Hordeum vulgare) avena (Avena sativa) centeno

(Secale cereale) maiacutez (Zea mays) y pastos forrajeros (Agrios 2001)

Fusarium spp al afectar los tejidos vasculares del tallo impiden que la planta

de maiacutez tome adecuadamente el agua y los fertilizantes del suelo Por lo anterior las

plantas afectadas por esta enfermedad pueden quedar achaparradas y raquiacuteticas

reduciendo su potencial de rendimiento las mazorcas son pequentildeas y no llenan

todos los granos Cuando el dantildeo es fuerte algunas plantas pueden llegar a morir El

hongo Fusarium tambieacuten se ha detectado afectando los granos hasta en un 14 de

la mazorca (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Las especies de Fusarium que producen la pudricioacuten del tallo estaacuten presentes

en todo el mundo en todas las zonas en las que se cultiva maiacutez Estos patoacutegenos

son comunes en cualquier suelo La presioacuten del patoacutegeno es continua durante toda la

estacioacuten de crecimiento Las plantas estresadas (por otros patoacutegenos sequiacutea u otros

factores) son maacutes sensibles (Plantpro 2010)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

7

En Meacutexico se han presentado peacuterdidas por la pudricioacuten de tallo y de los granos

causadas por Fusarium spp (Mendoza et al 2006) En los uacuteltimos antildeos se ha

incrementado la incidencia de plantas de maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente

causada por hongos como Fusarium spp La Junta Local de Sanidad Vegetal del

Valle del Fuerte (JLSVVF 2008) reportoacute que hay una alta incidencia de esta

enfermedad en la regioacuten Valle del Fuerte y Valle del Carrizo encontraacutendose mayor

severidad con 32 en el ciclo agriacutecola primavera-verano a diferencia de otontildeo-

invierno con 13 y el agente asociado fue Fusarium oxysporum

221 Siacutentomas de la pudricioacuten de tallos

Los siacutentomas de pudricioacuten de tallos producidos por Fusarium spp son

semejantes a aquellos causados por Stenocarpella o Cephalosporium y no se les

puede distinguir hasta que son visibles los cuerpos reproductivos Las plantas

marchitas permanecen erectas cuando se secan y aparecen lesiones pequentildeas de

color cafeacute oscuro en los entrenudos inferiores Al partirlos verticalmente se observa

que el floema de los tallos infectados es de color cafeacute oscuro y que hay un

oscurecimiento conspicuo general de los tejidos En las etapas finales de la

infeccioacuten la medula es destruida y los tejidos adyacentes pierden su color (CIMMYT

2007)

El hongo aparece primero como una vellosidad de coloracioacuten salmoacuten paacutelido en

el pedicelo o casquete de la punta de los granos Eventualmente los granos

infectados muestran un crecimiento de moho polvoso de color rosaacuteceo compuesto

por grandes nuacutemero de conidios El hongo penetra cerca de la corona de la planta a

traveacutes de los nudos Las plantas afectadas se vuelven cafeacutes y los tejidos se

reblandecen en la parte inferior del tallo Conforme avanza la enfermedad el

patoacutegeno se distribuye en el tejido medular y solo quedan en el tallo las fibras de los

vasos que conducen el agua (Jugenheimer 1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

8

De Leoacuten (1984) reportoacute que la pudricioacuten causada por los hongos del geacutenero

Fusarium comienza posteriormente a la polinizacioacuten y afecta las raiacuteces la base de la

planta y los entrenudos bajos La enfermedad progresa a medida que la planta

madura se rompen los tallos y ocurre una maduracioacuten prematura como en otras

pudriciones Las plantas pueden permanecer erectas auacuten cuando esteacuten secas pero

caen faacutecilmente al ser golpeadas

Esta enfermedad ocurre con una mayor severidad cuando las plantas estaacuten

estresadas durante el periacuteodo de llenado de granos Algunos de los factores que

favorecen la expresioacuten de esta enfermedad son sequiacutea altas temperaturas y

extensos periacuteodos nublados heridas mecaacutenicas o por insectos un bajo nivel de

potasio en relacioacuten al nitroacutegeno asiacute como el ataque de enfermedades foliares (De

Souza 2007)

222 Agentes causales de la pudricioacuten de tallos

Las pudriciones de tallo en el cultivo de maiacutez son causados principalmente

por hongos del geacutenero Fusarium y dentro de este se tienen especies como F

verticillioides F graminearum y F oxysporum (De Leoacuten 1984) Asiacute mismo

Mendoza et al (2006) mencionan que la pudricioacuten del tallo del maiacutez en Meacutexico estaacute

asociada a dos especies de hongos del geacutenero Fusarium verticillioides y

graminearum

23 Pudricioacuten de la mazorca

Esta es una enfermedad que ocasiona peacuterdidas en el rendimiento en todos los

paiacuteses donde se cultiva maiacutez (Munkvold y Desjardins 1997) y en paiacuteses en

desarrollo afecta maacutes del 40 de la superficie sembrada (Claure 2001) Seguacuten

Domsch et al (1980) los principales agentes causantes de esta enfermedad son un

complejo de hongos como los del geacutenero Fusarium Aspergillus Penicillium

Alternaria y Helminthosporium

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

9

En el altiplano de Meacutexico donde se siembran maacutes de 3500 000 hectaacutereas de

maiacutez puede haber peacuterdidas superiores al 30 En la regioacuten de Chalco Estado de

Meacutexico afecta la produccioacuten en un 30-50 seguacuten estimaciones de los productores

de la zona (Briones-Reyes 2007)

En Sinaloa la pudricioacuten de la mazorca no rebasa el 10 de las mazorcas

dantildeadas Esta afectacioacuten estaacute asociada al ataque de insectos con la posterior

invasioacuten de Fusarium Aspergillus y levaduras entre otros agentes (Apodaca-

Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

Los ataques de Fusarium spp pueden iniciar por el acarreo de las esporas

hacia la mazorca por la accioacuten del viento o lluvia las heridas causadas por insectos

favorecen la penetracioacuten el hongo Las infecciones de la raiacutez a partir del inoacuteculo

presente en residuos de cultivo o bien a partir de semillas infectadas pueden derivar

en una invasioacuten sisteacutemica esta puede avanzar de forma ascendente desde la raiacutez

hacia el tallo por viacutea xilema y llegar hasta la mazorca la cual se puede podrir

(Munkvold y Desjardins 1997)

En las mazorcas invadidas del patoacutegeno los primeros signos de infeccioacuten son

la formacioacuten de micelio blanco que van descendiendo desde la punta de la mazorca

y dan una coloracioacuten rojiza y rosada a los granos infectados (CIMMYT 2009)

La enfermedad puede permanecer asintomaacutetica (sin siacutentomas externos y

signos visibles del hongo) y asiacute ser transmitida por semilla ocasionando que granos

de maiacutez pierdan calidad y valor comercial ademaacutes la peacuterdida del valor alimenticio

por la contaminacioacuten con toxinas que estos patoacutegenos producen (Jugenheimer

1981)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

10

24 Aspectos generales de Fusarium spp

Seguacuten Kirk et al (2001) la taxonomiacutea de Fusarium es

Dominio Eucariota Familia Hipocraceae

Reino Fungi Geacutenero Gibberella (Fusarium)

Phylum Ascomycota Especie F oxysporum F graminearum Clase Ascomycetos F verticillioides F proliferatum etc

Orden Hipocreales

Fusarium es un hongo de amplia distribucioacuten mundial que pertenece a un

extenso geacutenero de hongos filamentosos muy comuacuten en los suelos cultivados Su

presencia se asocia maacutes a suelos neutros y ligeramente aacutecidos La mayoriacutea de las

especies son saproacutefitas y son unos miembros relativamente abundantes de la

microbiota del suelo Algunas especies producen micotoxinas en los cereales que

pueden afectar a la salud de personas y animales si eacutestas entran en la cadena

alimentaria (Blancard et al 2000)

Las especies de Fusarium incluyen paraacutesitos facultativos que forman parte de

la flora de campo Se desarrolla entre los 6 y 40degC con un oacuteptimo de 18 a 30degC es

aeroacutebico y en general necesita de una humedad relativa alta para crecer y proliferar

Algunas especies de este hongo producen sustancias toacutexicas que producen efectos

dantildeinos en los humanos y los animales Fusarium contamina las mazorcas en el

campo y posteriormente cuando este cereal es sometido a secado y otros procesos

el hongo puede llegar a morir no obstante la micotoxina puede permanecer en el

grano (Ayvar-Serna 1997)

En condiciones normales de laboratorio las colonias presentan un crecimiento

raacutepido que en pocos diacuteas llega a cubrir toda la placa del medio de cultivo El color

que desarrollan puede depender de la especie y del medio de cultivo y eacuteste puede

ser blanquecino crema anaranjado rosa rojizo puacuterpura etc La velocidad de

crecimiento la morfologiacutea y la pigmentacioacuten de la colonia son datos importantes para

la identificacioacuten morfoloacutegica (Nelson et al 1983)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

11

241 Fusarium spp en maiacutez

En la regioacuten Norte de Sinaloa el hongo Fusarium spp ataca gran variedad de

cultivos agriacutecolas Estos hongos pueden sobrevivir en estado latente o

alimentaacutendose de los restos vegetales que quedan en el suelo despueacutes de la

cosecha En sitios donde se establecen cultivos sucesivos es comuacuten que en la

siguiente temporada de cultivo en los rastrojos el hongo forma nuevas esporas que

al diseminarse por el viento infectan directamente a los elotes espigas hojas y

tallos El hongo presente en los rastrojos o sobre la superficie de la semilla penetra

a traveacutes de los tejidos tiernos de la radiacutecula Invade las raiacuteces alcanza el cuello y la

pudricioacuten puede ascender varios entrenudos de la base del tallo El hongo alcanza el

sistema vascular y forman pequentildeas esporas que ascienden viacutea agua del xilema

provocan nuevas infecciones en el parte superior de la planta El hongo puede ser

sisteacutemico gracias al sistema vascular y de esta forma llega a alcanzar a las

mazorcas e infectar a la semilla Esporas transportadas por el aire o insectos

tambieacuten pueden infectar directamente a los tallos hojas y particularmente a los

elotes (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-Beniacutetez 2008)

En la regioacuten es comuacuten que los productores apliquen un riego adicional cuando

este ya no es necesario con la intencioacuten de cosechar el grano con un mayor peso

especiacutefico A veces la longitud de los surcos es mayor a los 500 metros de tal

manera que el riego (frecuentemente anticipado) es muy pesado particularmente en

terrenos planos y con suelo arcilloso Es tambieacuten frecuente que los productores de

maiacutez apliquen nitroacutegeno en exceso condicioacuten que puede ser contraproducente

pues se incrementa la pudricioacuten de tallo y mazorca (Apodaca-Saacutenchez y Quintero-

Beniacutetez 2008)

Actualmente en el norte de Sinaloa existe controversia sobre la especie

asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez sin embargo se ha reportado a Fusarium

oxysporum por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del Fuerte (JLSVVF

2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

12

242 Fusarium verticillioides La especie verticillioides (sin F moniliforme telemorfo Gibberella fujikuroi) es

la especie comuacutenmente maacutes importante en climas secos y caacutelidos Es

particularmente dantildeina si la invasioacuten se presenta antes de floracioacuten puede atacar a

la semilla plaacutentulas plantas maduras espigas o la mazorca de maiacutez (Morales-

Rodriacuteguez 2007)

Es un hongo cosmopolita con abundantes microconidias ovoides con base

truncada generalmente unicelulares pero en ocasiones bicelulares Su tamantildeo es

de 5-12 x 1-3 micras en algunos medios forma cadenas que pueden observarse en

la placa de cultivo con objetivos de bajo aumento La presencia de abundantes

microconidias condiciona el aspecto polvoriento de la colonia Los conidioacuteforos nacen

lateralemente de la hifa y son escasamente ramificados (Nelson et al 1983)

Las macroconidias no se forman en todas las cepas y cuando existen son

ligeramente fusiformes casi rectas la superficie dorsal y ventral son casi paralelas

de pared fina y delicada Las ceacutelulas basal y apical son alargadas y ligeramente

curvadas Puede tener 3-7 septos y su tamantildeo es de 31-58 x 27-36 micras No

forma clamidosporas (Nelson et al 1983)

25 Recomendaciones para el manejo de la pudricioacuten de tallos

La pudricioacuten de tallos actualmente afecta a muchos productores de maiacutez y les

preocupa buscar la forma de controlar el problema El manejo de la pudricioacuten de

tallos requiere la rotacioacuten de cultivos en el lote estableciendo plantas no hospederos

de Fusarium y Macrophomina Otras medidas incluyen la incorporacioacuten de materia

orgaacutenica como compostas y antagonistas al suelo como el hongo Trichoderma

Seriacutea conveniente que las compantildeiacuteas productoras de semilla de maiacutez consideraran

en sus programas de mejoramiento geneacutetico la seleccioacuten de un hiacutebrido con tolerancia

a este problema (Quintero-Beniacutetez y Apodaca-Saacutenchez 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

13

Una alternativa de control tambieacuten importante es evitar el estreacutes en las

plantas La infeccioacuten de las plantas sanas comienza despueacutes de periodos de estreacutes

en las plantas Una nutricioacuten equilibrada antildeadir agua si es necesario y un buen

cultivo del suelo puede mantener sano el cultivo (Plantpro 2010)

251 Riegos

La planta de maiacutez requiere diferentes niveles de humedad en el suelo en

funcioacuten del tipo de terreno periacuteodo de siembra ciclo del hiacutebrido y condiciones

climatoloacutegicas Se distinguen cuatro etapas criacuteticas floracioacuten polinizacioacuten formacioacuten

de grano y llenado de grano Existen calendarios de riego de acuerdo al ciclo de

siembra los cuales pueden modificarse en base a las precipitaciones que se

presentan durante el ciclo La laacutemina de riego debe ser de 8 cm y las tiradas de riego

no mayores a 250 metros (INIFAP 2006)

Las etapas maacutes criacuteticas del cultivo de maiacutez desde el punto de vista hiacutedrico

son durante la floracioacuten y el jiloteo El maiacutez es un cultivo maacutes sensible al estreacutes

hiacutedrico que otras gramiacuteneas como trigo o sorgo (Shaw y Newman 1987)

Los requerimientos del riego de los cultivos variacutean temporal y espacialmente

en funcioacuten del clima del manejo de la fase y de la variedad del cultivo por lo que su

caacutelculo debe ser local (Doorenbos y Pruitt 1977)

El manejo adecuado del riego es uno de los factores maacutes importantes que

afectan el rendimiento de los cultivos tanto en calidad como en cantidad ya que

alrededor del 80 de estos es agua El cultivo de maiacutez es de sensibilidad media al

estreacutes por deacuteficit de agua por lo que no debe faltarle agua particularmente en el

periacuteodo que va desde la floracioacuten femenina hasta grano masoso (Sifuentes-Ibarra y

Maciacuteas-Cervantes 2008)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

14

Ireta-Moreno et al (2006) realizaron un muestreo aleatorio en lotes de la

regioacuten del Bajiacuteo (Jalisco Michoacaacuten y Guanajuato) sobre terrenos de temporal y de

riego donde encontraron una epidemia de esta enfermedad en cerca de 30000 ha

Se estimoacute que los periodos prolongados de sequiacutea en la eacutepoca previa y durante la

floracioacuten del maiacutez aumentoacute la incidencia de la pudricioacuten de tallos

Abd El-Rahim et al (1998) evaluaron la planta de maiacutez con diferentes

sistemas y laacuteminas de riego y encontraron que bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad se incrementoacute la severidad de la marchitez tardiacutea por

Cephalosporium maydis a diferencia de las plantas que se encontraron bien regadas

durante todo su ciclo las cuales no fueron muy afectadas por el hongo

252 Fertilizacioacuten

El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio pero se

requiere de un anaacutelisis de suelo para determinar las necesidades precisas de cada

terreno Ademaacutes la fertilizacioacuten reviste especial importancia por el impacto que tiene

en la produccioacuten y por el riesgo que implica en el deterioro del suelo en el mediano y

largo plazo Una produccioacuten de 10 t ha-1 de grano extrae en un ciclo

aproximadamente 250 Kg ha-1 de nitroacutegeno alrededor de 100 Kg ha-1 de foacutesforo y

maacutes de 200 Kg ha-1

Basel et al (2008) realizaron un estudio en Broacutecoli donde se aplicoacute cuatro

dosis de fertilizante orgaacutenico y tres dosis de fertilizante inorgaacutenico Los resultados

demostraron que con la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante orgaacutenico (60 t ha

de potasio ademaacutes de cantidades importantes del resto de

nutrimentos como azufre calcio magnesio y microelementos (INIFAP 2006)

-1)

maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1) se obtuvo la produccioacuten

maacutes alta de Broacutecoli (4005 t ha-1) Al realizar un anaacutelisis foliar se determinoacute que los

niveles de macronutrientes (N P y K) y el contenido de micronutrientes (Fe Mn y Zn)

se incrementaron por la aplicacioacuten del abono orgaacutenico y tambieacuten con el fertilizante

inorgaacutenico en comparacioacuten con el control En el anaacutelisis de suelo se encontroacute que el

pH la conductividad eleacutectrica y el contenido de materia orgaacutenica no se afectaron

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

15

significativamente por la aplicacioacuten de las diferentes dosis de fertilizante inorgaacutenico

Sin embargo la conductividad eleacutectrica y la materia orgaacutenica aumentaron al

incrementar la dosis del fertilizante orgaacutenico pero el pH no se afectoacute por las distintas

dosis del fertilizante Una conclusioacuten de eacuteste estudio fue que el uso de una

combinacioacuten de fertilizantes orgaacutenicos e inorgaacutenicos dieron los mejores valores para

todos los paraacutemetros probados

En el norte de Sinaloa los agricultores utilizan dosis de fertilizantes

nitrogenados de alrededor de 300 Kg ha-1

Las malas praacutecticas de fertilizacioacuten principalmente por nitroacutegeno en el caso de

maiacutez han contribuido en la contaminacioacuten de los cuerpos de agua subordinados a

las aacutereas agriacutecolas en el estado de Sinaloa ademaacutes de provocar problemas de

intoxicacioacuten a la planta de maiacutez por exceso del nitroacutegeno aplicado Esto causa una

disminucioacuten en los rendimientos incremento en los costos de produccioacuten y afecta la

economiacutea de los agricultores Ademaacutes la alta fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica

incrementa los niveles de fumonisinas en granos de maiacutez (Arintildeo et al 2009)

y sin previo anaacutelisis de suelo lo cual

ocasiona actualmente problemas de degradacioacuten del suelo Ademaacutes el mal uso de

los fertilizantes puede predisponer al cultivo al ataque de algunos fitopatoacutegenos

(Apodaca-Saacutenchez y Quintero Beniacutetez 2008)

Por lo anterior se debe evitar los excesos de fertilizantes nitrogenados que se

aplican al maiacutez buscando que el impacto ambiental y econoacutemico sea maacutes favorable

para el productor agriacutecola y la sociedad en conjunto La fertilizacioacuten deberaacute ir

acompantildeada de un adecuado manejo del riego para evitar problemas de

escurrimiento de nitroacutegeno y foacutesforo asiacute como la lixiviacioacuten de nitroacutegeno Ademaacutes de

que todos estos factores provocan una afectacioacuten en la fertilidad del suelo la

productividad del maiacutez y el medio ambiente por las praacutecticas que comuacutenmente se

desarrollan en la tecnologiacutea de produccioacuten del monocultivo en Sinaloa (Diacuteaz-Ruiacutez et

al 1999)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

16

253 Composta

La composta consiste de materia orgaacutenica descompuesta que se degrada y

descompone hasta llegar a huacutemus bajo condiciones controladas por la accioacuten de los

microorganismos y bajo el control del mismo hombre mediante un proceso

denominado compostaje El producto final se utiliza por sus muacuteltiples beneficios para

fertilizar mejorar y enriquecer la tierra de los cultivos (Chen e Inbar 1993)

El compostaje es un proceso de descomposicioacuten aeroacutebica bajo condiciones

controladas particularmente de humedad y aireacioacuten en el cual participan bacterias

y hongos actinomicetos Las poblaciones microbianas y su actividad variacutean en

funcioacuten de los cambios de temperatura que en el proceso pueden oscilar desde 30-

40degC en la etapa mesofiacutelica hasta 70-75degC en la etapa termofiacutelica (Chen e Inbar

1993)

Aunque el proceso de descomposicioacuten aeroacutebica sigue a traveacutes del tiempo una

tendencia anaacuteloga a la de una funcioacuten exponencial negativa la velocidad de

degradacioacuten y la proporcioacuten de subproductos de particioacuten y siacutentesis variacutean en funcioacuten

de las condiciones ambientales como la temperatura humedad y aireacioacuten de la

diversidad de las poblaciones microbianas y de la calidad quiacutemica de los substratos

(Cooperband 2000)

Los restos vegetales tienen los mismos grupos de sustancias ceras grasas

resinas carbohidratos simples y complejos proteiacutenas ligninas entre otros La

proporcioacuten de sustancias en los diferentes materiales es diversa lo que influye en la

velocidad de descomposicioacuten durante la fabricacioacuten de abonos orgaacutenicos mediante

compostaje La variacioacuten en las proporciones de estos compuestos es un factor de

gran peso en la velocidad de descomposicioacuten de los residuos orgaacutenicos Asiacute

sustancias de alto peso molecular y de estructura aromaacutetica como los polifenoles

resinas y las ceras son bastante resistentes al embate de los microorganismos del

suelo a diferencia de otras sustancias de faacutecil descomposicioacuten como los azucares y

compuestos proteicos (Hellmann et al 1997)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

17

2531 Beneficios de la composta

25311 Mejorador de suelos y aporte de nutrientes

La aplicacioacuten de las compostas mejora la estructura del suelo asiacute como la

retencioacuten de humedad ademaacutes facilita la absorcioacuten de nutrientes por parte de la

planta (Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996

Bellapart 1996 Bollo 1999)

Los aacutecidos huacutemicos y los fuacutelvicos contenidos en las compostas mejoran las

propiedades fiacutesicas quiacutemicas y bioloacutegicas en los suelos En consecuencia ocurre

un incremento en la fertilidad y productividad Estas sustancias huacutemicas favorecen la

formacioacuten de agregados estables actuando conjuntamente con arcillas y huacutemus

aumenta la cohesioacuten a suelos arenosos y disminuye eacutesta en suelos arcillosos

((Tisdale y Nelson 1966 Tan y Nopamombodi 1979 Guerrero 1996 Bellapart

1996) ademaacutes dan un color oscuro al suelo lo que provoca un aumento de su

temperatura (Landeros 1993)

El huacutemus es una importante fuente de hidratos de carbono para los

microorganismos del suelo ya que favorece el desarrollo normal de cadenas troacuteficas

en el suelo ademaacutes mejora y regula la velocidad de infiltracioacuten del agua

disminuyendo la erosioacuten producida por el escurrimiento superficial (Tisdale y Nelson

1966 Bellapart 1996 Bollo 1999)

25312 Reduccioacuten del ataque de fitopatoacutegenos

Uno de los beneficios de las compostas es su potencial para controlar

poblaciones de patoacutegenos del suelo (Hadar y Mandelbaum 1992 Hoitink et al

1991) El incremento en la actividad microbiana beneacutefica a menudo estaacute relacionado

con el incremento en el contenido de materia orgaacutenica (Sikora y Stott 1996)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

18

La materia orgaacutenica es vital como fuente de alimento y refugio para los

microorganismos beneacuteficos relacionados con la supresioacuten de enfermedades la

estructura del suelo el mejoramiento de las propiedades del suelo y el buen estado

del cultivo (Hoitink y Boehm 1999 Chen et al 1988 Mandelbaum et al 1988)

Se ha demostrado la supresioacuten de hongos fitopatoacutegenos del suelo en

compostas de desechos orgaacutenicos (Hadar y Mandelbaum 1992) Ademaacutes se ha

comprobado la supresioacuten de Pythium spp y Rhizoctonia solani utilizando composta

preparada con desechos orgaacutenicos como por ejemplo con corteza de madera

madura estieacutercol de res y lodos activados (Chen et al 1987)

De acuerdo a Chaoui et al (2002) la aplicacioacuten de vermicomposta suprime las

enfermedades de plantas las causadas por Phytophthora Fusarium y

Plasmodiophora en tomate y calabaza Pythium y Rhizoctonia en pepino y raacutebano

al igual que de Verticillum en fresa

Craft y Nelson (1996) encontraron que las compostas preparadas de

diferentes materiales pueden ser supresores de Pythium graminiacutecola en pasto

rastrero Los mejores supresores fueron las compostas de lodos de cerveceriacuteas

biosolidos y los estieacutercoles de animales a excepcioacuten de estieacutercol de pavo y

probablemente otras compostas de estieacutercol de aves Las propiedades

microbioloacutegicas de las compostas constituyen el principal factor que influye en la

supresioacuten de Pythium en pasto

El estudio realizado por Osunlaja (2002) demostroacute que el efecto de las

compostas al suprimir la enfermedad de la mancha cafeacute (peca) en maiacutez causada por

Physoderma maydis es debido en gran medida a una mayor actividad microbiana

Una de las virtudes sobre el uso de abonos orgaacutenicos como las compostas es

la incorporacioacuten de la microflora beneacutefica con eficacia comprobada en el control de

la poblacioacuten de ciertos patoacutegenos del suelo ademaacutes de la incorporacioacuten de

nutrientes ya mineralizados asiacute como la subsecuente liberacioacuten de aquellas que se

degradan gradualmente Es importante el promover el manejo orgaacutenico del suelo ya

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

19

que la agricultura convencional se enfoca en lograr rendimientos maacuteximos en un

cultivo especiacutefico Esta actividad se basa en una comprensioacuten simple de que los

requerimientos del cultivo aumentan por el uso de bajas dosis de nutrientes por las

plagas las enfermedades y las malezas En cambio el manejo orgaacutenico mediante la

incorporacioacuten de abonos orgaacutenicos y cuidado del suelo permite obtener una

produccioacuten de alta calidad que ayuda a la conservacioacuten de los recursos naturales

(Feacutelix-Herraacuten 2006)

Feacutelix-Herraacuten (2006) evaluoacute in vitro el efecto antagoacutenico de diez diferentes

compostas sobre los hongos fitopatoacutegenos Fusarium oxysporum (aislado de meloacuten)

Rhizoctonia solani (aislado de papa) asiacute como de Pythium sp Las compostas se

elaboraron a base de pajas de frijol (F) garbanzo (G) garbanzo-frijol (G-F) neem

(N) neem-garbanzo (N-G) una mezcla de pasto de jardiacuten (P) tomate (T) la mezcla

de todas las compostas antes mencionadas (R) lombricomposta de restos vegetales

(LRV) y lombricomposta de cachaza de cantildea (LCC) Todas las compostas tuvieron

efecto antagonista sobre Fusarium oxysporum en cambio contra Rhizoctonia solani

solo los tratamientos F G N GF y NG inhibieron el crecimiento del hongo Por

uacuteltimo contra Pythium sp solo tuvieron efecto los tratamientos P T R LRV y LCC

El tipo de material utilizado para elaborar una composta determinaraacute sus

propiedades incluido su efecto selectivo sobre algunos patoacutegenos (Feacutelix-Herraacuten

2006)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

20

III JUSTIFICACIOacuteN En Sinaloa el maiacutez es el cultivo de grano maacutes rentable lo que ha propiciado

su monocultivo y esto ha provocado la aparicioacuten y el incremento de problemas

causados por enfermedades entre las que sobresalen por su incidencia y severidad

la pudricioacuten de tallos y de la mazorca asiacute como la roya y el carboacuten comuacuten o

ldquohuitlacocherdquo En los uacuteltimos antildeos se ha incrementado la incidencia de plantas de

maiacutez con pudricioacuten de tallos generalmente causada por hongos como Fusarium

La pudricioacuten de tallos en maiacutez se ha venido presentando preferentemente en

el ciclo agriacutecola primavera-verano influenciado tambieacuten por un mal manejo de los

riegos que puede ocasionar un exceso o deficiencia de humedad en el suelo

Por lo anterior es necesario buscar alternativas sostenibles de manejo que

minimicen el impacto negativo de los patoacutegenos y que contribuyan a un desarrollo

armoacutenico del cultivo del maiacutez Una posible estrategia podriacutea ser la reduccioacuten de la

fertilizacioacuten sinteacutetica mediante el uso de composta y la optimizacioacuten de los riegos de

auxilio

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

21

IV OBJETIVOS 41 Objetivo general

Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten riego y la composta sobre la pudricioacuten

de tallo por Fusarium spp en el cultivo de maiacutez

42 Objetivos Especiacuteficos

1 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica y composta en la pudricioacuten de

tallos y rendimiento de grano en el cultivo de maiacutez

2 Evaluar la pudricioacuten de tallos de maiacutez respecto al nuacutemero de riegos

3 Determinar las especies de Fusarium asociadas a la pudricioacuten de tallos de

maiacutez

4 Evaluar el efecto de la fertilizacioacuten sinteacutetica composta y nuacutemero de riegos

sobre la pudricioacuten de mazorcas en el cultivo de maiacutez

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

22

V HIPOacuteTESIS

Un adecuado manejo del agua y una reduccioacuten de la fertilizacioacuten quiacutemica con

composta reduciraacuten la incidencia y la severidad (Fusarium spp) de la pudricioacuten de

tallos en el cultivo de maiacutez

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23

VI MATERIALES Y MEacuteTODOS 61 Ubicacioacuten del sitio

El trabajo se realizoacute durante el ciclo agriacutecola Primavera-Verano 2009-2009 en

el Campo Experimental Valle del Fuerte (CEVAF) del Instituto Nacional de

Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias (INIFAP) situado en Cd Juan

Joseacute Riacuteos Guasave Sinaloa

611 Localizacioacuten

El CEVAF se localiza en el Norte del Estado de Sinaloa en paralelo con la

carretera Internacional Meacutexico-Nogales a la altura del km 1609 Se encuentra en la

parte central del Distrito de Riego 075 del Riacuteo Fuerte colinda con los Distritos 063

Guasave y el 076 El Carrizo Las instalaciones del CEVAF se encuentra en el Moacutedulo

de Riego Batequis limitado al Norte por el dren colector ldquoBatequisrdquo del Km 0+000 al

km 13+800 al sur por el dren Guayparime del Km 0+000 al 13+500 y el Dren Juncos

del km 0+000 al 2+800 al oriente con el canal principal Valle del Fuerte del km

29+900 al km 47+007 y al poniente con las marismas de la Bahiacutea de Ohuira

62 Muestreo del suelo

Se realizaron dos muestreos de suelo el primero previo a la siembra el

segundo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez En cada muestreo se procedioacute a

tomar una cantidad aproximada a 1 Kg de suelo especiacuteficamente al lateral del lomo

del surco Las muestras se embolsaron y etiquetaron para proceder a su

preparacioacuten y anaacutelisis en laboratorio Las muestras se secaron bajo sombra a

temperatura ambiente sobre papel de estraza posteriormente se molieron y se

pasaron por un tamiz con malla de 2 mm para su posterior anaacutelisis en el Laboratorio

de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al CIIDIR-SINALOA Las caracteriacutesticas fiacutesicas y

quiacutemicas de cada muestra se determinaron mediante los criterios establecidos en la

Norma Oficial Mexicana (NOM-021-RECNAT-2000) publicada en el Diario Oficial de

la Federacioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

24

63 Anaacutelisis de las propiedades fiacutesico-quiacutemicas del suelo y de la composta Las determinaciones realizadas a las muestras de suelo posteriormente

descritas se realizaron en igualdad de condiciones a la muestras de composta

excepto textura

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo estaacute determinado por la reaccioacuten

del suelo (pH) la determinacioacuten de esta propiedad quiacutemica se basoacute en la actividad

del ion hidroacutegeno con la utilizacioacuten de un potencioacutemetro Se determinoacute en una

suspensioacuten 12 suelo- agua a traveacutes del meacutetodo AS-02 de la Norma Oficial

Mexicana

La conductividad eleacutectrica se estimoacute a traveacutes del meacutetodo AS-18 con un

conductiacutemetro cuyo material tiene la capacidad de transportar la corriente eleacutectrica

empleando el sobrenadante de la mezcla del suelo y medir la cantidad de sales

solubles presentes en dicha muestra de suelo

Para el anaacutelisis de la textura del suelo se llevo a cabo el procedimiento de

Bouyoucos a traveacutes del meacutetodo AS-09 Este consistioacute en determinar el porcentaje de

arena limo y arcilla presentes en la muestra para posteriormente obtener el resultado

en el Triangulo de Texturas

El anaacutelisis de foacutesforo fue determinado por el Meacutetodo de Olsen correspondiente

al AS-10 de la Norma Oficial Mexicana utilizando una solucioacuten extractora de

bicarbonato de sodio (NaHCO3) con pH=85 ademaacutes de una solucioacuten reductora de

molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 4H2O] maacutes aacutecido ascoacuterbico La lectura de los

datos se tomoacute en un coloriacutemetro de UV visible a 882 nm Previamente fue leiacuteda una

curva de calibracioacuten de fosfato de potasio monobaacutesico (KH2PO4

) con

concentraciones conocidas que van de 01 02 04 06 y 08 partes por milloacuten

(ppm) posteriormente se realizaron los caacutelculos en base a la curva de calibracioacuten

obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

25

P (mg K-1 de suelo) = CC x Vip x Vfa Donde CC=mg L-1 de P en la solucioacuten Se obtiene graficando la curva de calibracioacuten (absorbancia contra mgL-1) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos oacute por medio de una regresioacuten simple Vi = volumen de la solucioacuten extractora adicionada p = peso de la muestra de suelo seca al aire Vf = volumen final de la solucioacuten colorimeacutetrica a leer a = aliacutecuota de la muestra empleada para la cuantificacioacuten

La determinacioacuten de materia orgaacutenica del suelo se evaluoacute a traveacutes del

contenido de carbono orgaacutenico con el meacutetodo de Walkley y Black (1934)

correspondiente al meacutetodo AS-07 de la Norma Oficial Mexicana Este meacutetodo se

basa en la oxidacioacuten del carbono orgaacutenico del suelo por medio de una disolucioacuten de

dicromato de potasio y el calor de reaccioacuten que se genera al mezclarla con aacutecido

sulfuacuterico concentrado Despueacutes de 30 min de reposo la mezcla se diluye se

adiciona aacutecido fosfoacuterico para evitar interferencias de Fe3+

C orgaacutenico =

y el dicromato de potasio

residual es valorado con sulfato ferroso Los caacutelculos se realizan bajo la siguiente

foacutermula

B ndash Tg

(N) (039) m c f

Donde B = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar el testigo (mL) T = volumen de sulfato ferroso gastado para valorar la muestra (mL) N = normalidad exacta del sulfato ferroso (valorar por separado al momento de analizar las muestras) g = peso de la muestra empleada (g) mcf=factor de correccioacuten de humedad Materia orgaacutenica = C Orgaacutenico x 1724

Se utilizoacute el Meacutetodo AS-12 para la determinacioacuten de la capacidad de

intercambio catioacutenico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+ Mg2+ Na+ y K+) de los

suelos empleando acetato de amonio 1N pH 70 como solucioacuten saturante El

meacutetodo para la determinacioacuten consiste en la saturacioacuten de la superficie de

intercambio con un catioacuten iacutendice el ion amonio lavado del exceso de saturante con

alcohol desplazamiento del catioacuten iacutendice con potasio y determinacioacuten del amonio

mediante destilacioacuten

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26

64 Establecimiento del experimento El experimento se establecioacute durante el ciclo agriacutecola primavera-verano el 27

de febrero de 2009

641 Preparacioacuten del terreno La preparacioacuten del terreno se realizoacute de acuerdo a la tecnologiacutea utilizada por

los productores de maiacutez en la regioacuten la cual consistioacute en barbecho rastreo cruzado

marca de surcos riego de asiento (por gravedad) despueacutes de la aplicacioacuten del riego

de asiento se dieron dos pasos de rastra para la eliminacioacuten de maleza y preparacioacuten

de cama de siembra

642 Fertilizacioacuten y siembra El maiacutez tiene una alta demanda de nitroacutegeno foacutesforo y potasio por lo que su

fertilizacioacuten se realizoacute en dos aplicaciones siendo la primera dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea empleando como fuente nitrogenada urea al 46 y 52 Kg

de Foacutesforo ha-1

La segunda aplicacioacuten consistioacute en una dosis de 160 Kg de

Nitroacutegeno por hectaacuterea esto con la finalidad de completar la dosis referente a 320 Kg

de Nitroacutegeno por hectaacuterea en base al anaacutelisis previo del suelo

Para la siembra se utilizoacute semillas del hibrido Bisontereg de ASGROW Se

depositaron siete semillas por metro lineal al lomo del surco huacutemedo en hilera

simple a 80 cm entre surcos Se alcanzoacute una densidad de siembra aproximada a

90000 plantas por hectaacuterea

643 Descripcioacuten de tratamientos y disentildeo experimental

En dicha parcela se establecioacute el cultivo de maiacutez de primavera-verano bajo

condiciones de campo utilizando un disentildeo de experimentos en parcelas divididas

en bloques al azar con tres repeticiones (Figura 1) Se establecieron 14 tratamientos

producto de la combinacioacuten de dos factores riego y fertilizacioacuten Se probaron cinco y

seis riegos de auxilio y estos se calendarizaron en base a la etapa fenoloacutegica del

cultivo en combinacioacuten con fertilizacioacuten quiacutemica convencional (320 Kg ha-1 de N a

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

27

base de urea) la combinacioacuten de una dosis media (256 Kg ha-1 de N) o baja de N

(208 Kg ha-1 de N) con tres dosificaciones de lombricomposta 10 20 y 30 t ha-1

(Cuadro 1)

El aacuterea de cada unidad experimental estaba representada por cuatro surcos

cada uno de 080 m por 10 m Cada parcela experimental consistioacute de 32 m2 de aacuterea

total de los cuales 112 m2

representaban la parcela uacutetil

Cuadro 1 Tratamientos a comparar en el experimento Primavera-Verano 2009 Factor riego Factor fertilizacioacuten

5 riegos de auxilio

6 riegos de auxilio

Nitroacutegeno sinteacutetico (Kg ha-1) + Lombricomposta (t ha-1) 320 00 256 10 256 20 256 30 208 10 208 20 208 30

Figura 1 Distribucioacuten de tratamientos en el sitio experimental

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

28

644 Origen preparacioacuten y aplicacioacuten del inoculo En este trabajo se inoculoacute el suelo con un aislado patogeacutenico de F

verticillioides proporcionado por Joseacute Antonio Garciacutea Espinoza estudiante de la

Escuela Superior de Agricultura del Valle del Fuerte (ESAVF) perteneciente a la

Universidad Autoacutenoma de Sinaloa (UAS) Dicho aislado se obtuvo a partir de semilla

de maiacutez contaminada por este hongo (Garciacutea-Espinoza 2009) El hongo se multiplicoacute

en grano de maiacutez cabrajado seguacuten de describe a continuacioacuten

La preparacioacuten del inoculo se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la

ESAVF-UAS El hongo se sembroacute inicialmente (a partir de inoculo mantenido en

tubos con arena esterilizada) en medio papa-dextrosa-agar+ ampicilina 100 ppm El

hongo se dejoacute crecer por una semana a temperatura ambiente (aproximadamente

20-28 degC)

El sustrato se preparoacute con anticipacioacuten triturando el maiacutez en un molino

domeacutestico comuacuten luego se humedecioacute durante 24 hrs se sometioacute a autoclave a

120degC y se dejoacute enfriar al ambiente antes de inocularlo en condiciones aseacutepticas

En la campana de flujo laminar cada bolsa con 15 kg de grano se inoculoacute

con cinco rodajas de F verticillioides Las bolsas se agitaron para dispersar los

conidios sobre el sustrato y despueacutes de cerrarlas se incubaron durante 20 diacuteas a

temperatura ambiente

Una vez que el grano fue colonizado a los 20 diacuteas de incubacioacuten el inoculo

de las bolsas se vacioacute en charolas de plaacutestico y se secoacute a la sombra a temperaturas

de aproximadamente 28degC

Por uacuteltimo la aplicacioacuten del inoculo en campo consistioacute en esparcirlo de forma

manual especiacuteficamente sobre el lomo del surco en cada una de las unidades

experimentales El inoculo se tapo de inmediato con el mismo suelo utilizando un

azadoacuten

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29

645 Origen de la composta y su incorporacioacuten La lombricomposta fue proporcionada por un productor cooperante y se

obtuvo a partir de estieacutercol de borrego sometido a lombriz californiana (Eisenia

foeacutetida) La composta se aplicoacute de forma localizada a un costado del surco en una

zanja superficial trazada con un azadoacuten posteriormente se cubrioacute con el mismo

suelo

646 Riegos El calendario de riego basado se establecioacute acorde con la etapa fenoloacutegica del

cultivo de maiacutez Los riegos se aplicaron a traveacutes del sistema de gravedad con surcos

(Cuadro 2)

Cuadro 2 Calendario de riego basado en la etapa fenoloacutegica del cultivo de maiacutez Primavera-Verano con fecha de siembra del 27 de Febrero de 2009

Riego Etapa fenoloacutegica Diacuteas entre riegos Ciclo P-V

Fecha de riego

1er Auxilio V5-V6 35 03-abr-09 2do Auxilio V9-10 26 29-abr-09 3er Auxilio Floracioacuten 20 19-may-09 4to Auxilio Grano lechoso 15 03-jun-09 5to Auxilio Grano masoso 13 16-jun-09 6to Auxilio Grano masoso 10 26-jun-09

65 Evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta 651 Altura de planta

En cada una de las 42 unidades experimentales en cinco plantas al azar por

cada repeticioacuten se estimoacute la altura total de la planta con elacioacuten al suelo mediante un

estadal graduado Este paraacutemetro se midioacute en la etapa vegetativa a los 52 diacuteas

despueacutes de la siembra (dds) y en la etapa de maduracioacuten a los 119 dds

652 Grosor de tallo

Se midieron 5 plantas al azar en las 42 unidades experimentales y se calculoacute

el promedio del grosor total de tallo de la planta Este paraacutemetro se evaluoacute mediante

un vernier a los 52 y 119 dds

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

30

653 Altura de mazorca Esta variable se estimoacute a los 119 dds en las 42 unidades experimentales Se

tomaron los datos de tres plantas al azar y se calculoacute el promedio de la altura de la

primera mazorca utilizando para la medicioacuten un estadal graduado

654 Nuacutemero de hojas

Para este paraacutemetro se tomaron datos en tres plantas al azar igualmente en

las 42 unidades experimentales y se calculo el promedio Este paraacutemetro se midioacute a

los 119 dds

655 Anaacutelisis foliar de nutrimentos Este Anaacutelisis se realizoacute en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal perteneciente al

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa El material vegetal (hojas) se colectoacute a los 79 dds

6551 Muestreo del follaje

Se tomaron muestras de hojas en cinco plantas al azar de cada una de las 42

unidades experimentales en cada planta se cortoacute una hoja ubicada en V6 del lado

opuesto de la mazorca para analizarse en el Laboratorio de Nutricioacuten Vegetal del

CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Las muestras foliares fueron lavadas para eliminar las

impurezas y despueacutes se secaron a temperatura ambiente luego se metieron en un

horno de secado marca Felisa con temperatura de 55deg C durante 72 horas Cada

muestra seca se procesoacute por medio de un molino eleacutectrico marca Thomas con una

malla de 40 cavidades

Este material se utilizoacute para el anaacutelisis foliar con el fin de determinar la

concentracioacuten de nitroacutegeno total foacutesforo total potasio y microelementos (Fe Zn Mn

y Cu)

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31

6552 Nitroacutegeno total 65521 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute esta determinacioacuten por el Meacutetodo Kjeldahl La digestioacuten huacutemeda

para este nutrimento consistioacute en pesar 01 g de muestra de hoja seca y molida el

material se colocoacute en un matraz Kjeldahl y luego se adicionaron 15 mL de la mezcla

de aacutecidos sulfuacuterico-saliciacutelico Se mezclaron los reactivos junto con la muestra para

homogenizar el material a digerir y se dejoacute reposar por 24 h Despueacutes se adicionaron

02 g de la mezcla de sulfatos (Na2SO4 selenio metaacutelico y CuSO4

) y se colocaron al

digestor marca Labconcoreg con capacidad para 6 matraces se calentoacute ligeramente a

una temperatura controlada por 5 min posteriormente se aumentoacute la temperatura

hasta observar el vire de color en la muestra de negro a verde oscuro (temperatura

no mayor a 360degC) Una vez que la solucioacuten presentoacute una coloracioacuten verde clara

(aspecto acuoso) se continuoacute calentando por 1 h maacutes hasta obtener un volumen

aproximado de 3 mL Al finalizar la digestioacuten se dejoacute enfriar las muestras digeridas y

se agregoacute 10 mL de agua destilada Por uacuteltimo los digestados fueron transferidos a

tubos Falcon de 25 mL

65522 Determinacioacuten de nitroacutegeno total La solucioacuten digerida se transfirioacute al equipo de destilacioacuten se adicionaron 10

mL de NaOH al 50 y se inicioacute el calentamiento El destilado se recibioacute en 20 mL de

solucioacuten de aacutecido boacuterico al 4 mas 02 mL (3-5 gotas) del indicador verde de

bromocresol-rojo de metilo hasta alcanzar un volumen aproximado de 50 mL a la

salida del refrigerante Posteriormente se llevoacute a cabo la titulacioacuten de cada muestra

con la solucioacuten de H2SO4

N Total mL H

al 005 N hasta el vire de color a levemente rosado Al

mismo tiempo se realizoacute la titulacioacuten a una muestra blanco anotando los mL

gastados en cada muestra para realizar los caacutelculos correspondientes Los datos

fueron calculados bajo la siguiente foacutermula

2SO4 x N del H2SO4

x1401g de muestra

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

32

6553 Foacutesforo 65531 Digestioacuten huacutemeda de la muestra

Se realizoacute bajo el procedimiento del meacutetodo Kjeldahl Se colocaron 05 g de

material vegetal seco y molido en un matraz Kjeldahl de 50 mL a eacuteste se adicionaron

10 mL de aacutecido niacutetrico (HNO3) concentrado y se dejoacute reposar 30 min Posteriormente

se agregaron 15 mL de aacutecido percloacuterico (HClO4) maacutes 20 mL de aacutecido sulfuacuterico

(H2SO4) (ambos concentrados) y se pusieron a la plancha de digestioacuten a una baja

temperatura para lograr una oxidacioacuten completa por la accioacuten del HNO3

La digestioacuten se considero completa cuando la solucioacuten presentoacute un color

totalmente cristalino y el volumen final era de 15-30 mL

Despueacutes se

aumentoacute la temperatura sin exceder los 360degC con el cuidado de que las muestras

no fueran evaporadas totalmente

Los digestados fueron transferidos a matraces volumeacutetricos de 25 mL y

aforados con agua desionizada luego se mezclaron y se filtraron con papel

Whatman No 42 El material filtrado se resguardoacute en frascos de vidrio y se sellaron

con parafilm para evitar la evaporacioacuten de los aacutecidos posteriormente se llevoacute a cabo

la dilucioacuten correspondiente para su lectura 65532 Determinacioacuten de foacutesforo

Se transfirioacute una aliacutecuota de 10 mL del filtrado a un matraz volumeacutetrico de 25

mL mediante el meacutetodo de Vanadato-Molibdato amarillo Posteriormente se

agregaron 05 mL de aacutecido niacutetrico (12 de agua destilada) 05 mL de solucioacuten de

vanadato de amonio y 05 mL de solucioacuten de molibdato de amonio Despueacutes de

agregados los reactivos a la solucioacuten de filtrado se aforoacute con agua destilada a la

marca de 25 mL se agitoacute y dejoacute reposar por 30 min Al transcurrir ese tiempo se

transfirioacute la solucioacuten a tubos de coloriacutemetro y se leyoacute la absorbancia en el

espectrofotoacutemetro de luz UV visible a 470 nm La concentracioacuten de foacutesforo se

determinoacute mediante una curva de calibracioacuten en un intervalo de 0 a 25 ppm

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

33

6554 Potasio 65541 Determinacioacuten de potasio Los materiales filtrados obtenidos mediante la digestioacuten huacutemeda para foacutesforo

tambieacuten se utilizaron para la determinacioacuten de potasio Para ello se transfirioacute 1 mL

de la solucioacuten a matraces volumeacutetricos de 50 mL y fueron aforados con agua

destilada De esta solucioacuten se tomoacute directamente la lectura de las muestras en

porcentaje de transmitancia

Se utilizoacute el meacutetodo de emisioacuten de llama-flamometriacutea Previo a la lectura el

equipo de flamometriacutea fue ajustado con las curvas de calibracioacuten 5 15 20 25 y 30

ppm con longitudes de onda de 7665 nm Los caacutelculos se hicieron en base a la

curva de calibracioacuten obtenida tomando en cuenta la siguiente foacutermula

K =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota Lectura de transmitancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

6555 Calcio y magnesio 65551 Determinacioacuten de calcio y magnesio A partir de la solucioacuten obtenida despueacutes de la digestioacuten para foacutesforo se

colocaron aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 25 mL y para diluirse

fueron aforados con agua destilada De esta misma se realizoacute una segunda dilucioacuten

la cual consistioacute en colocar aliacutecuotas de 1 mL en matraces volumeacutetricos de 10 mL a

los cuales se agregoacute 1 mL del reactivo oxido de lantano y se llevoacute al volumen final

con agua destilada Se mezclaron perfectamente y despueacutes se realizaron los ajustes

correspondientes al espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica (Spectr AA 50B marca

Varian) tomando en cuenta la escala de absorbancia Las muestras tuvieron una

dilucioacuten tal que permitioacute ajustarlas dentro de la curva de calibracioacuten para calcio fue

de 0-10 ppm y para magnesio fue de 0-1 ppm Los caacutelculos se obtuvieron mediante

la siguiente foacutermula

Ca Mg =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x Vol Dilucioacuten x 100

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

34

6556 Fierro manganeso zinc y cobre 65561 Determinacioacuten de fierro manganeso zinc y cobre

De la solucioacuten anterior tambieacuten proveniente de la digestioacuten huacutemeda realizada

para la determinacioacuten del foacutesforo ya filtrada se procedioacute a tomar directamente ( sin

realizar diluciones) las lecturas en el espectrofotoacutemetro de absorcioacuten atoacutemica

previamente se utilizoacute una curva de calibracioacuten con las concentraciones siguientes

para Fierro (Fe) se utilizoacute de 1-10 ppm Manganeso (Mn) 1-10 ppm Cobre (Cu) 1-5

ppm y para Zinc (Zn) se utilizoacute la concentracioacuten de 01-13 ppm Los caacutelculos se

efectuaron mediante las curvas de calibracioacuten utilizando un factor obtenido de la

pendiente considerando siempre las diluciones hechas durante la determinacioacuten de

cada micronutriente y se obtuvieron los resultados en base a la siguiente foacutermula

Fe Mn Cu y Zn =

Pendiente x Peso de la muestra (g) x Aliacutecuota

Absorbancia x Vol Digestioacuten x 100

66 Evaluacioacuten de variables fitopatoloacutegicas 661 Incidencia y severidad de la pudricioacuten del tallo

La incidencia de la pudricioacuten de tallos se evaluoacute a los 53 dds Para evaluar la

severidad de pudricioacuten de tallos se realizaron dos monitoreos el primero a los 53

dds y el segundo a los 145 dds En cada una de las unidades experimentales se

seleccionaron cinco plantas al azar del primer y cuarto surco cada planta se cortoacute

desde raiacutez Las muestras se colocaron en bolsas de plaacutestico y fueron llevadas al

Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS para su anaacutelisis

Los tallos se cortaron longitudinalmente con una navaja para observar si

presentaban dantildeo en el sistema vascular con el fin de calcular la incidencia de

pudricioacuten de tallos y estimar su severidad Para estimar la severidad de la pudricioacuten

de tallos en los dos muestreos se utilizoacute la escala utilizada por la JLSVVF (2008)

(Cuadro 3)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

35

Cuadro 3 Escala utilizada para estimar la severidad en pudricioacuten de tallos del maiacutez Grado Nivel de Dantildeo

0 Sin Dantildeo

1 Corona de Raiacutez

2 1 nudo

3 2 nudo

4 3 Nudo

5 4 Nudo

6 Toda la Planta Dantildeada

JLSVVF (2008)

662 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Al momento de la cosecha (152 dds) se estimoacute la incidencia y severidad de

mazorcas podridas al total de mazorcas cosechadas alrededor de 70-80 mazorcas

por parcela uacutetil en cada unidad experimental Para medir la severidad de mazorcas

podridas se utilizoacute la escala (Cuadro 4) reportada por Briones-Reyes et al (2007)

Cuadro 4 Escala de severidad utilizada para estimar la pudricioacuten de la mazorca

Grado de Dantildeo

1 0-20

2 21-40

3 41-60

4 61-80

5 81-100

663 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

Este estudio se realizoacute en el Laboratorio de Fitopatologiacutea de la ESAVF-UAS

donde se determinoacute la incidencia de hongos asociados a cada muestra de semilla

mediante la teacutecnica de papel secante y congelacioacuten descrita como una de las

adecuadas por el Centro de Mejoramiento del Maiacutez y Trigo (CIMMYT) para este tipo

de estudios (Warham et al sf)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

36

A partir del grano cosechado en cada unidad experimental se analizoacute una

submuestra de 40 semillas eacutestas se sumergieron durante 3 minutos en una solucioacuten

de hipoclorito de sodio (Cloralexreg 525 de cloro activo) al 2 y se dio un triple

lavado con agua destilada esteacuteril

Las semillas se secaron con servilletas de papel esterilizadas y se colocaron

sobre papel secante huacutemedo en charolas de plaacutestico transparente con medidas de 6

x 10 cm Dichas semillas se incubaron por dos diacuteas a temperatura ambiente para

propiciar la germinacioacuten de la semilla posteriormente se colocaron en el congelador

de un refrigerador de uso domeacutestico MABEreg a - 4deg C durante 24 horas para

inactivar el embrioacuten de la semilla Finalmente las charolas se incubaron durante 10

diacuteas a temperatura ambiente (18-22deg C) para que se desarrollaran los hongos

presentes en la semilla mismos que se hallaban en la mazorca A los diez diacuteas de

incubacioacuten se procedioacute a identificar a cada una de las colonias de los diferentes

geacuteneros bajo microscopio compuesto a 10 X y 40 X con la ayuda de las claves

propuestas por CIMMYT (Warham et al sf) Esta identificacioacuten preliminar de las

colonias permitioacute diferenciar a los granos que estaban infectados por Fusarium spp

ya que era el hongo de mayor intereacutes en este trabajo

664 Preservacioacuten de aislados de Fusarium spp A partir de los granos que presentaban desarrollo de colonias fuacutengicas se

tomaron pequentildeos trozos de micelio y esporas que se sembraron en medio de

cultivo agua-agar + ampicilina (100 ppm) Se consideraron cinco aislados de cada

tipo de colonia por muestra Una vez que las colonias crecieron en el agua-agar se

purificaron en medio de cultivo papa-dextrosa-agar Los aislados purificados se

preservaron en tubos con arena de rio esterilizada para la confirmacioacuten definitiva de

la identidad a nivel de geacutenero o de especie mediante meacutetodos morfoloacutegicos y

moleculares

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

37

665 Identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociadas a tallo y semilla

Se realizoacute la identificacioacuten morfoloacutegica de 70 aislados A nivel geacutenero se

utilizoacute el manual de Barnett y Hunter (1998) mientras que la identificacioacuten a nivel

especie se sustentoacute en los criterios de Booth (1971) asiacute como en los de Leslie y

Summerell (2006) A partir de los aislados de Fusarium spp preservados en tubos

con arena se espolvoreoacute inoculo en placas Petri con distintos medios de cultivo para

favorecer el crecimiento de diversas estructuras que ayudariacutean a identificar las

especies asociadas a la pudricioacuten de tallo y semilla Los medios utilizados fueron

papa-dextrosa-agar (PDA) hojas de clavel-agar (Carnation Leaf Agar CLA) y hojas

de clavel-agar + Cloruro de Potasio (CLA+KCl)

El medio PDA se utilizoacute como un medio estaacutendar para determinar el color de la

colonia Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente (18-22 degC)

durante 20 diacuteas y al teacutermino de los cuales se evaluoacute el color de la colonia y la

formacioacuten de clamidosporas

El medio CLA se utilizoacute para observar la formacioacuten de macro y microconidios

Luego se cortaron trozos de hojas plusmn 6 cm2

El medio CLA+KCl se utilizoacute para inducir la formacioacuten de cadenas de micro

conidios La preparacioacuten de eacuteste medio fue similar al CLA con la uacutenica diferencia de

que antes de esterilizarlo se le agregoacute el cloruro de potasio Al transcurrir 15 diacuteas se

evaluoacute la formacioacuten de microconidios en cadena con la ayuda del microscopio

Las hojas de clavel se lavaron con

detergente y agua abundante se deshidrataron en un horno durante 30 min y

enseguida se envolvieron en papel aluminio y se esterilizaron en un autoclave (120degC

por 15 min) Se preparoacute el medio base (Agar-Agua) y se vacioacute sobre las placas Petri

cuando se encontraba a 40degC aproximadamente Los trozos de hoja de clavel

tomados con unas pinzas esterilizadas se depositaron sobre la superficie del medio

al estar semi-gelificado Despueacutes de espolvoreoacute la arena con inoculo para inducir el

crecimiento del hongo y transcurridos 15 diacuteas se revisaron los cultivos con el fin de

observar las caracteriacutesticas de los micro y macroconidios con el auxilio de un

microscopio de luz compuesto

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

38

666 Anaacutelisis molecular Este anaacutelisis de identificacioacuten molecular se realizoacute en el Laboratorio de

Ecologiacutea Molecular de la Rizoacutesfera del CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa Los aislados

preservados en arena fueron sembrados sobre medio de cultivo PDA A los 15 diacuteas

despueacutes de la siembra del hongo en las placas y cuando las colonias estaban bien

desarrolladas se procedioacute a extraer el ADN

6661 Extraccioacuten de ADN genoacutemico

La extraccioacuten se realizoacute utilizando el meacutetodo del DNAzol (Invitrogen Cat No

10503-027) siguiendo las recomendaciones del fabricante con algunas

modificaciones Para cada una de las muestras se colocoacute una asada del hongo en

100 μl de DNAzol se maceroacute suavemente con un pistilo y se incuboacute por 5 min a

temperatura ambiente Posteriormente se centrifugoacute a 10000 rpm por 10 minutos se

transfirioacute el sobrenadante a un tubo nuevo se agregoacute 100 microl de etanol absoluto se

mezcloacute por inversioacuten y se incuboacute por 3 minutos a temperatura ambiente Despueacutes se

centrifugoacute a 12000 rpm por 5 minutos y se retiroacute el sobrenadante Para el lavado de

la pastilla se agregoacute 500 microl de etanol al 75 y se mezcloacute por inversioacuten se dejoacute

reposar 5 minutos a temperatura ambiente y se centrifugoacute a 10000 rpm por 2

minutos Se retiroacute el alcohol y se repitioacute el lavado Por uacuteltimo las muestras fueron

resuspendidas en 50 microl de agua ultrapura (Gibco cat 10977-015)

6662 Reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR)

La PCR se realizoacute en un termociclador BIORAD (My Cycler termal cycler) y las

condiciones fueron las siguientes

La mezcla para la reaccioacuten de PCR se preparoacute a cabo de la siguiente manera

04 μM de primer ITS1 (5` TCCGTAGGTGAACCTGCGG 3`) 04 μM de primer ITS4

(5`TCCTCCGCTTATTGATATG 3`) (White et al1990) 1X PCR buffer 25 mM

MgCl2 05 mM de cada dNTPs 1 U Taq DNA polimerasa (INVITROGEN 11615-

010) en un volumen total de 25 μl

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

39

El programa utilizado en el termociclador fue el siguiente 95deg C por 4 min 95deg

C por 1 min 55deg C por 1 min 72deg C por 2 min (30 ciclos) y un paso final de 72o

Los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 1 y

tentildeidos con bromuro de etidio (05 microgmL)

C por

5 minutos

Las condiciones de electroforesis fueron 90 V por 40 min y el gel fue

visualizado con luz UV en un fotodocumentador CHEMIDOC UNIVERSAL HOOD II

de BIORAD

6663 Purificacioacuten de ADN

La purificacioacuten se realizoacute siguiendo las recomendaciones del fabricante

utilizando el kit QIAquick PCR Purification Kit (QIAgen cat 28106)

1 Se agregaron 5 voluacutemenes del buacutefer PB a 1 volumen de la muestra de PCR

2 Se colocoacute una columna en un tubo colector de 2 mL

4 Se agregoacute la muestra a la columna y se centrifugoacute a 12000 RPM durante 1 min

5 Se desechoacute el liacutequido y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo

6 Para lavar se agregoacute 075 mL del buacutefer PE a la columna y se centrifugoacute a 12000

RPM durante 1 min

7 Se desechoacute el flujo y se colocoacute la columna de nuevo en el mismo tubo Luego se

centrifugoacute a 12000 RPM por un periacuteodo adicional de 1 min

8 La columna se colocoacute en un tubo nuevo de 15 ml Para eluiacuter se agregoacute 50 microL del

buacutefer EB se incuboacute a temperatura ambiente por 1 min

y se centrifugoacute a 12000 RPM

durante 1 min

6664 Cuantificacioacuten de ADN La cuantificacioacuten de ADN se llevoacute a cabo siguiendo las indicaciones del

fabricante utilizando el kit Quant-iT dsDNA HS (Invitrogen EUA cat Q32854) y las

lecturas fueron tomadas en un lector multimodal DTX 880 (BECKMAN COULTER) a

una longitud de onda de 485 nm de excitacioacuten y 535 nm de emisioacuten

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

40

6665 Anaacutelisis de las secuencias Las muestras se enviaron al Laboratorio de Secuenciacioacuten de CINVESTAV-

Irapuato y una vez que estas se determinaron se comparoacute su homologiacutea con las de

la base de datos del GenBank utilizando el programa Blast del NCBI (National Center

for Biotechnology Information) (httpwwwncbinlmnihgov)

67 Rendimiento en grano t ha-1

Se realizoacute la cosecha manual a los 152 dds y el mismo diacutea se estimoacute la

humedad a los granos Con este dato se calculoacute el rendimiento por hectaacuterea

ajustando el resto de humedad a hasta un 14 en todas las unidades

experimentales Las mazorcas se desgranaron en forma mecaacutenica con una

desgranadora marca Aztecareg La humedad del grano fue determinada con el equipo

Moisture Chek Plus

TM marca John Deerereg modelo SW08120 En cada tratamiento

el tamantildeo de la parcela uacutetil fue de 7 metros de largo por 160 m de ancho de la cama

de siembra en cada repeticioacuten se cosecharon los dos surcos centrales el aacuterea

cosechada fue de 112 m2

671 Peso especiacutefico del grano El procedimiento consistioacute en seleccionar 1000 semillas de cada una de las

unidades experimentales y posteriormente se pesaron en una balanza granataria

para reportar cada uno de los datos en unidades por gramo

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41

VII RESULTADOS 71 Propiedades fiacutesicas y quiacutemicas del suelo 711 Anaacutelisis de suelo previo a la siembra

El anaacutelisis realizado a la muestra de suelo como se puede observar en el

cuadro 5 nos indicoacute una textura Arcillosa con valor de pH neutro con contenido de

sales dentro de los paraacutemetros estaacutendar de un suelo de barrial materia orgaacutenica baja

y las demaacutes propiedades se presentaron en rango normal representativo de los

suelos de barrial de la regioacuten

Cuadro 5 Resultados del anaacutelisis fiacutesico-quiacutemico del suelo previo a la siembra del maiacutez hiacutebrido Bisonte en el ensayo para probar el efecto del riego y mezcla de dosis de fertilizante sinteacutetico y composta sobre la pudricioacuten del tallo en el valle del fuerte

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 6 9

C E (ds m-1 0 14 )

MO () 1 34

P (ppm) 16 5

Mg (Cmol Kg-1) 8 64

Ca (Cmol Kg-1 290 )

Na (Cmol Kg-1) 0 04

K (Cmol Kg-1 2 47 )

Arena () 207

Limo () 133

Arcilla () 659

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42

712 Anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo

En relacioacuten con los resultados del anaacutelisis de suelo realizado cuando el cultivo

ya habiacutea sido cosechado (152 dds) se encontroacute que solamente para el factor riego

se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el pH obteniendo el

valor mayor 68 en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor

66 con mayor humedad del suelo (6 riegos) En cuanto a las demaacutes propiedades no

se presentaron diferencias significativas en ninguno de los factores (Cuadro 6)

Cuadro 6 Resultado del anaacutelisis quiacutemico del suelo despueacutes de cosechado el cultivo de maiacutez para ver el efecto de los factores (riego y fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Efecto Principal pH CE ds m-1

MO

Riego 6 66 b 009 a 13 a Riego 5 68 a 008 a 12 a 320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 67 a 009 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 67 a Composta 008 a 13 a 256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 68 a 008 a 12 a 256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 67 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 68 a 007 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 66 a Composta 010 a 13 a 208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 67 a 007 a 12 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 72 Propiedades quiacutemicas de la composta

El anaacutelisis realizado a la muestra de composta indicoacute un pH ligeramente

alcalino una alta conductividad eleacutectrica y salinidad una alta concentracioacuten de

materia orgaacutenica y foacutesforo y una alta capacidad de intercambio catioacutenico (Cuadro 7)

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43

Cuadro 7 Resultado del anaacutelisis quiacutemico de la composta para ver el efecto de los factores (Riego y Fertilizacioacuten) sobre la pudricioacuten de tallos

Propiedades Resultado

pH (12 suelo-agua) 74

C E (ds m-1 74 )

MO () 113

P (ppm) 985

Mg (Cmol Kg-1) 148

Ca (Cmol Kg-1 193 )

Na (Cmol Kg-1) 276

K (Cmol Kg-1 764 )

CIC (Cmol Kg-1 445 )

73 Variables de crecimiento de la planta 731 Altura de planta y grosor de tallo en etapa vegetativa

La evaluacioacuten de variables de crecimiento de la planta realizada a los 52 dds

indicoacute que en el factor riego no se obtuvieron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en cuanto a la altura de planta el valor mayor 153 m se presentoacute con la menor

humedad del suelo (5 riegos) y el valor menor 150 m con mayor humedad del suelo

(6 riegos) Para el factor fertilizacioacuten tampoco hubo diferencias significativas

(ANOVA p le 005) en la altura de planta se obtuvo el valor mayor 154 m con 208 Kg

N ha-1+1 t ha-1 de composta y con 208 Kg N ha-1+2 t ha-1 de composta el valor

menor 147 m se presentoacute con 256 Kg N ha-1+3 t ha-1

de composta

En el grosor de tallo no se presentaron diferencias significativas (ANOVA p le

005) en el factor riego el valor mayor 262 cm se obtuvo con mayor humedad del

suelo (6 riegos) y el valor menor 260 cm se obtuvo con menor humedad del suelo (5

riegos) en el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005)

con 208 Kg N ha-1+1 t ha-1 de composta se presentoacute el valor mayor 269 cm y el valor

menor 255 cm se obtuvo con 208 Kg N ha-1 +2 t ha-1 de composta (Cuadro 8)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

44

Cuadro 8Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) en la altura de planta y grosor de tallo evaluadas a los 52 dds en etapa vegetativa del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura de

planta (m)

Grosor de tallo

(cm) Riego 6 150 262ordf a

Riego 5 153a 260ordf

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 153ordf 261ordf

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 152ordf Composta 264ordf

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 148ordf 260ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 147ordf Composta 256ordf

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 154ordf 269ordf

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 154ordf Composta 255ordf

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 151a 261ordf Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 732 Altura de planta grosor de tallo altura de mazorca y nuacutemero de hojas en etapa de maduracioacuten

En la etapa de maduracioacuten se presentaron diferencias significativas (ANOVA p

le 005) en el factor riego y el factor fertilizacioacuten solamente en el nuacutemero de hojas En

el nivel de 6 riegos se obtuvo significativamente un mayor nuacutemero de hojas (1555)

que con 5 riegos (1531) En el factor fertilizacioacuten las dosis 256 Kg N ha-1+1 t ha-1 de

composta y 256 Kg de N ha-1+2 t ha-1 de composta expresaron diferencias

significativas (ANOVA p le 005) respecto a la dosificacioacuten 208 Kg de N ha-1+2 t ha-1

de composta no se detectaron diferencias con los demaacutes niveles de fertilizacioacuten No

se presentaron interacciones en los factores respecto al nuacutemero de hojas (Cuadro 9)

En relacioacuten con las variables altura de planta grosor de tallo y altura de

mazorca no se presentaron diferencias significativas para los factores estudiados ni

en las interacciones (Cuadro 9)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

45

Cuadro 9 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre variables de crecimiento evaluadas a los 119 dds en etapa de maduracioacuten del cultivo de maiacutez

Efecto Principal Altura

de planta

(m)

Grosor de

tallo (cm)

Altura de

mazorca (m)

Nuacutemero de hojas

Riego 6 262 262ordf a 149ordf 1555ordf

Riego 5 257a 266ordf 149ordf 1531b

320 Kg N ha-1+ 0 t ha-1 Composta 262ordf 262ordf 150ordf 1537ab

256 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 255ordf Composta 259ordf 144ordf 1553a

256 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 Composta 262ordf 265ordf 151ordf 1563ordf

256 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 257ordf Composta 266ordf 146ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 1 t ha-1 Composta 261ordf 277ordf 151ordf 1540ab

208 Kg N ha-1+ 2 t ha-1 259ordf Composta 260ordf 153ordf 1520b

208 Kg N ha-1+ 3 t ha-1 Composta 260a 260ordf 148a 1550ab Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 733 Anaacutelisis foliar de nutrimentos

En cuanto al anaacutelisis de la concentracioacuten de nutrimentos en el factor riego se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en nitroacutegeno el valor maacutes alto

52 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 31

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En foacutesforo el valor mayor 035 ppm se

obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) y el valor maacutes bajo 034 ppm se

obtuvo con la mayor humedad del suelo (6 riegos) En calcio el valor mayor 065

Cmol Kg-1 se obtuvo con la menor humedad del suelo (5 riegos) el valor maacutes bajo

049 Cmol Kg-1

se dio con la mayor humedad (6 riegos) En los demaacutes nutrimentos

no hubo diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego En el factor

fertilizacioacuten no se presentoacute diferencias significativas en ninguno de los nutrimentos

analizados (Cuadro 10)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

46

Cuadro 10 Efectos principales (riego y fertilizacioacuten) sobre la concentracioacuten de nutrimentos en el follaje del cultivo de maiacutez

Efecto Principal

N

P ppm

K Cmol Kg-1

Ca Cmol Kg-1

Mg ppm

Fe ppm

Mn ppm

Zn ppm

Cu ppm

Riego (6) 31 b 034 b 229 a 049 b 050 a 330 a 88 a 33 a 23 a Riego (5) 52 a 035 a 227 a 065 a 052 a 342 a 82 a 25 a 22 a

320 N 45 a 033 a 220 a 043 a 048 a 321 a 96 a 11 a 30 a 256 N + 1 C 33 a 033 a 235 a 066 a 052 a 319 a 86 a 14 a 21 a 256 N + 2 C 62 a 036 a 238 a 053 a 051 a 319 a 93 a 52 a 28 a 256 N + 3 C 27 a 035 a 240 a 062 a 054 a 334 a 82 a 33 a 22 a 208 N + 1 C 27 a 034 a 218 a 056 a 049 a 332 a 74 a 39 a 27 a 208 N + 2 C 50 a 036 a 223 a 068 a 053 a 379 a 82 a 11 a 17 a 208 N + 3 C 43 a 034 a 220 a 049 a 047 a 348 a 81 a 42 a 13 a

Medias con letras iguales dentro de cada columna y de cada factor son iguales seguacuten Tukey (p le 005) 74 Variables fitopatoloacutegicas 741 Incidencia y severidad de la pudricioacuten de tallos

A los 53 dds la incidencia de la pudricioacuten de tallos fue de 100 En la primera

evaluacioacuten de la severidad de pudricioacuten de tallos a los 53 dds en base a la escala de

severidad (0-6) todas las plantas muestreadas presentaron el grado 1 (dantildeo a la

corona de raiacutez) Los resultados de la segunda evaluacioacuten de la severidad de

pudricioacuten de tallos a los 145 dds muestran que para el factor riego se presentaron

diferencias significativas (ANOVA p le 005) entre los tratamientos en el nivel con

menor humedad del suelo (5 riegos) se encontroacute mayor severidad con un grado de

53 (escala 0-6) y la menor severidad se presentoacute en el nivel con mayor humedad (6

riegos) con un grado de 43 en la misma escala Para el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en ninguno de los niveles los

valores oscilaron entre 427 y 533 con 320 Kg de N ha-1 y 208 Kg de N ha-1+3 t ha-1

de composta respectivamente (Figura 2)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

47

Figura 2 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de tallos Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005) 742 Incidencia de la pudricioacuten de la mazorca

La incidencia de mazorcas podridas fue significativamente mayor con 5

riegos y para el factor fertilizacioacuten no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en los niveles estudiados (Figura 3)

Figura 3 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la incidencia de la pudricioacuten de la mazorca Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

48

743 Severidad de la pudricioacuten de la mazorca

Los resultados de la severidad de mazorcas podridas indican que hubo

diferencias significativas (ANOVA p le 005) en el factor riego con una mayor severidad

en las parcelas que recibieron 5 riegos En contraste en el factor fertilizacioacuten no se

presentaron diferencias significativas (ANOVA p le 005) en los niveles estudiados

(Figura 4)

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Figura 4 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre la severidad de la pudricioacuten de la mazorca 744 Incidencia de hongos asociados a la semilla de maiacutez

En la evaluacioacuten de incidencia de hongos asociados a los granos obtenidos de

las mazorcas cosechadas se identificaron morfoloacutegicamente diversos hongos con los

siguientes porcentajes Fusarium spp con un 85 de incidencia Penicillium spp con

un 12 y Aspergillus spp con un 3 de incidencia en el total de las semillas

analizadas por muestra

745 Identificacioacuten morfoloacutegica de las especies de Fusarium

Los resultados de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos indicaron que la principal especie asociada fue

Fusarium verticillioides En seguida se muestran los resultados de los aislados maacutes

representativos por tratamiento (Cuadro 11)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

49

Cuadro 11 Resultado de la identificacioacuten morfoloacutegica de especies de Fusarium asociada a la pudricioacuten de tallos de maiacutez Aislado Microconidios Macroconidios Clamidosporas Especie

B1 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B2 Cabezuelas Gruesos -

Curvos Presencia Fusarium spp

B3 Pocas Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B4 Cadenas Largas - Falsas Cabezas Presencia Ausencia F verticillioides

B5 Cadenas Largas- Falsas Cabezas Ausencia Ausencia F verticillioides

B6 Abundantes Cadenas Largas Ausencia Ausencia F verticillioides

B7 Pocas Cadenas Largas Presencia Ausencia F verticillioides

746 Identificacioacuten molecular de los aislados fuacutengicos asociados a la pudricioacuten del tallo y pudricioacuten de la mazorca

Al analizar mediante PCR a los aislados de tallo BF1T BF2T asiacute como a los

aislados de semilla BF1S BF2S BA1 BA3 BP1 y BP2 se determinoacute que se

amplificoacute un producto de aproximadamente 600 pb (Figura 5) La comparacioacuten de las

secuencias de BF1T utilizando el programa Blast-N del Gene Bank indicoacute que esta

presentaba una homologiacutea del 96 con Giberella moniliformis asiacute mismo los

aislados BF2T en un 98 BF1S una homologiacutea del 95 con Fusarium proliferatum

BF2S en un 99 de homologiacutea con Giberella moniliformis Por otra parte los

aislados BA1 y BA3 presentaron homologiacutea en un 99 a Aspergillus sp mientras

que BP1 y BP2 tuvieron 99 y 98 de homologiacutea con Penicillium pinophilum

(Cuadro 12)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

50

Figura 5 Electroforesis en gel de agarosa (1) de los productos de PCR

amplificados a partir de ADN genoacutemico de los aislados de tallo BF1T carril 1 BF2T

carril 2 y de los aislados de semilla BF1S carril 3 BF2S carril 4 BA1 carril 5 BA3

carril 6 BP1 carril 7 y BP2 carril 8 marcador de peso molecular 1 kb_ladder plus

carril 9 control negativo Cuadro 12 Identificacioacuten molecular de aislados de hongos asociados a la pudricioacuten del tallo y de la mazorca en el cultivo de maiacutez

Aislado Acceso Homologiacutea Descripcioacuten BF1T GU9361131 96 Fusarium verticillioides BF2T GU9823111 98 Fusarium verticillioides BF1S FJ7985941 95 Fusarium proliferatum BF2S GU9823111 99 Fusarium verticillioides BA1 FJ8276221 99 Aspergillus sp BA3 FJ8276221 99 Aspergillus sp BP1 GQ4224451 99 Penicillium pinophilum BP2 GQ4224451 98 Penicillium pinophilum

650 pb

1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 ctl -

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

51

75 Rendimiento en grano t ha-1

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas (ANOVA p le

005) en ninguno de los factores y sus respectivos niveles Sin embargo

numeacutericamente el valor maacutes alto 1007 t ha-1 se obtuvo con 256 Kg de N +2 t ha-1 de

composta y el valor maacutes bajo 897 t ha-1 con 208 Kg de N +3 t ha-1

de composta

(Figura 6)

Figura 6 Efecto principal del riego y fertilizacioacuten sobre el rendimiento en grano t ha-1

Medias con letras iguales no presentan diferencias significativas seguacuten Tukey (p le 005)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

52

VIII DISCUSIOacuteN

En los anaacutelisis de suelo realizados al inicio y final del experimento no se

presentaron variaciones en sus propiedades fiacutesico-quiacutemicas excepto en pH esto

debido a que las bajas cantidades de composta (1-3 t ha-1

) incorporadas al suelo no

impactaron de manera significativa en las demaacutes propiedades En el pH se presentoacute

diferencia significativa en el factor riego el mayor valor se obtuvo con menos riegos

(5 riegos) y el menor con 6 riegos esto posiblemente es debido a que el agua movioacute

a mayor profundidad de muestreo cationes alcalinos como K Ca Mg y Na

Los valores de pH y conductividad eleacutectrica determinados en la composta 74

y 74 ds m-1 respectivamente se ubicaron dentro de los liacutemites reportados en la

literatura pH de 53-757 para CE de 244-1176 ds m-1

(Madrid y Castellanos 1998

Togun y Akanbi 2003 Montes-Rivera et al 2003)

El valor del P obtenido (985 ppm) estaacute comprendido entre los reportados que

van de 270 a 1840 ppm (Forster et al 1993 Atiyeh et al 2002 Manios et al 2003)

El K con un valor de 764 Cmol Kg-1 tambieacuten correspondioacute con lo reportado

que va de 173 a 2561 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000

Atiyeh et al 2002 Soumareacute et al 2002)

El valor obtenido de Na (276 Cmol Kg-1) queda dentro de los liacutemites

reportados que van de 016 a 10 Cmol Kg-1

(Peregrim y Hinesley 1999 Whiting et

al 2005)

Para Ca se obtuvieron 193 Cmol Kg-1 valores normales de acuerdo a lo

reportado que van de 02 a 303 Cmol Kg-1

(Orozco et al 1996 Peregrim y

Hinesley 1999 Atiyeh et al 2002 Togun y Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

53

El valor obtenido para Mg obtenido fue de 148 Cmol Kg-1 nivel superior a los

valores reportados que van de 014 a 105 Cmol Kg-1

(Forster et al 1993 Orozco et

al 1996 Peregrim y Hinesley 1999 Atiyeh et al 2001 Atiyeh et al 2002 Togun y

Akanbi 2003 Manios et al 2003)

Por uacuteltimo en la materia orgaacutenica estimada en la composta (113 ) el valor

obtenido quedoacute en un nivel aproximado a lo reportado que va de 1172 a 565

(Aacutelvarez-Soliacutes et al 2000 Romero-Lima et al 2000 Montes-Rivera et al 2003)

En las variables de crecimiento como altura de planta grosor de tallo y altura

de mazorca no se presentaron diferencias significativas en la etapa vegetativa ni en

la etapa de maduracioacuten sin embargo el nuacutemero de hojas fue ligeramente mayor con

6 riegos (1555) en comparacioacuten con 5 riegos de auxilio (1531) Esto sugiere que la

composta aplicada compensoacute la fertilizacioacuten nitrogenada sinteacutetica aun en los

tratamientos con menor aplicacioacuten de nitroacutegeno

No se presentaron variaciones en el contenido de nutrimentos en el follaje

excepto N P y Ca eacutestas presentaron diferencias significativas en el factor riego y los

valores maacutes altos se obtuvieron en el nivel con menos humedad del suelo (5 riegos)

En cuanto a la evaluacioacuten de incidencia de pudricioacuten de tallos realizada a los

53 dias despueacutes de la siembra el 100 de las plantas presentoacute dantildeo por hongos en

la base del tallo aunque fue con el miacutenimo grado de severidad lo cual permitioacute

evaluar los tratamientos en las mismas condiciones de incidencia y severidad en la

pudricioacuten de tallos

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

54

Al momento de la cosecha se estimoacute la mayor severidad de pudricioacuten de

tallos con el nivel de menor humedad del suelo (5 riegos) lo cual sugiere que el

estreacutes hiacutedrico favorecioacute la pudricioacuten de tallos esto coincide con lo encontrado por

Ireta-Moreno et al (2006) quienes reportaron que en El Bajiacuteo Jalisco Meacutexico

incrementoacute la severidad de pudricioacuten de tallos en el cultivo de maiacutez en condiciones

de deficiencia de humedad Asiacute tambieacuten Abd El Rahim et al (1998) encontraron un

incremento en la severidad de la marchitez tardiacutea (Cephalosporium maydis) en el

cultivo de maiacutez en plantas que se encontraban bajo condiciones de estreacutes hiacutedrico

por deficiencia de humedad a diferencia de las plantas que se encontraban bien

regadas y con una suficiente hidratacioacuten

En cuanto a la incidencia y la severidad de mazorcas podridas hubo un efecto

significativo solamente en el factor riego la mayor incidencia y severidad de la

pudricioacuten de mazorcas se presentoacute en condiciones de menor humedad en el suelo (5

riegos) Los resultados anteriores tambieacuten se pudieran deber probablemente a que

el estreacutes hiacutedrico favorece el ataque de Fusarium a la mazorca de maiacutez De igual

manera Abd El Rahim et al (1998) reportaron mayor severidad en pudricioacuten de

mazorca con presencia de estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad en el suelo

En la identificacioacuten morfoloacutegica y molecular de especies de Fusarium

asociadas a la pudricioacuten de tallos de maiacutez se encontroacute a la especie F verticillioides

como el principal agente asociado a la pudricioacuten de tallos en Sinaloa El resultado

anterior difiere de lo encontrado por la Junta Local de Sanidad Vegetal del Valle del

Fuerte (JLSVVF 2008) Este es el primer reporte en el que se confirma que

Fusarium verticillioides es el principal agente asociado a esta enfermedad en el Valle

del Fuerte

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

55

En el rendimiento de grano no hubo diferencias significativas en ninguno de

los factores estudiados (riego y fertilizacioacuten) Sin embargo se observoacute una tendencia

a mayor rendimiento con el mayor nuacutemero de riegos (6 riegos) diferencia que no fue

significativa posiblemente debido a que el estreacutes hiacutedrico por deficiencia de humedad

(5 riegos) se aplicoacute en una etapa muy cercana a madurez fisioloacutegica

El rendimiento fue similar en todos los niveles estudiados en la fertilizacioacuten

por lo tanto las compostas ejercieron un buen papel al compensar en gran parte el

deacuteficit de la fertilizacioacuten sinteacutetica nitrogenada basaacutendose en lo reportado por

SIAPSAGARPA (2010) donde en el estado de Sinaloa el promedio en rendimiento

para el ciclo primavera-verano fue de 84 t ha-1 logrado solamente con el fertilizante

sinteacutetico nitrogenado En el presente estudio en promedio se superoacute este

rendimiento pues se alcanzaron las 9 t ha-1 con la adicioacuten de la mezcla de fertilizante

nitrogenado sinteacutetico y el abono orgaacutenico Asiacute por ejemplo con la foacutermula de

fertilizacioacuten de 208 Kg de N ha-1 + 1 tonelada de composta ha-1 se obtuvo un

rendimiento equivalente al logrado con 320 Kg de N ha-1 esto trae como beneficio

un ahorro de $130000 ha-1 en cuanto a la fertilizacioacuten del cultivo ademaacutes que se

estariacutea introduciendo al productor a una agricultura maacutes sustentable Los presentes

resultados no coinciden plenamente con los obtenidos por Basel et al (2008) quienes

en Broacutecoli demostraron que al aplicar la mezcla de la dosis maacutes alta de fertilizante

orgaacutenico (60 t ha-1) maacutes la dosis mayor de fertilizante inorgaacutenico (60 Kg ha-1)

obtienen la produccioacuten maacutes alta del cultivo (4005 t ha-1

) Estas diferencias podriacutean

deberse a que el cultivo de maiacutez es una gramiacutenea que demanda maacutes nitroacutegeno otra

posible razoacuten seriacutea que el maiacutez estuvo expuesto a la presencia del patoacutegeno en el

sistema radical y en las mazorcas

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

56

IX CONCLUSIONES

La mayor severidad de la pudricioacuten de tallos y de la mazorca se obtuvo con la

menor humedad en el suelo (cinco riegos de auxilio)

La lombricomposta presentoacute un efecto significativo en la nutricioacuten de la planta

pero no en el control de la pudricioacuten de tallos y mazorcas

Fusarium verticillioides fue el organismo maacutes frecuentemente asociado a la

pudricioacuten de tallos en maiacutez

En la pudricioacuten de la mazorca se presentoacute una mayor diversidad de agentes

asociados como Aspergillus spp Penicillium pinophilum y con mayor incidencia

Fusarium verticillioides

Blanca Elvira Loacutepez Valenzuela 2010

57

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