definisi mikropipet

7/24/2019 DEFINISI MIKROPIPET

1/12

DEFINISI MIKROPIPETSekilas Tentang Mikropipet

1. Multichannel Pipet (Image from sciencephoto.com)

Di berbagai bidang ilmu, termasuk biologi sel, mikrobiologi, biotechnologi, biokimia

dan kimia kuantitatif, pipetting merupakan keterampilan penting yang harus dikuasai. Pipet

adalah alat penting di berbagai bidang ilmu pengetahuan. Bekerja di laboratorium tentu tidak

akan terlepas dari urusan ukur-mengukur. Untuk sampel padatan, kita akan berurusan dengan

neraca analitik, sementara untuk sampel cairan, pipet volumetrik-lah andalannya. Akurasi dan

presisi pemipetan merupakan faktor utama keberhasilan analisa atau percobaan yang

melibatkan cairan. Pipet sudah digunakan sejak abad ke-! oleh "ouis Pasteur #$%%-$!&'

dan kini jenis pipet sudah berkembang luas dengan tingkat akurasi dan presisi yang

bermacam-macam pula.

2. Mengenal Jenis-Jenis Pipet Volumetrik

Pipet Serologis. Pipet ini terbuat dari pipa kaca silinder yang lurus dan memiliki

skala volume. (etelitian pipet serologis sesuai dengan skala terkecilnya.

Pipet Volumetrik Volume Tetap. Pipet jenis ini hanya memiliki garis tera dengan

volume tertentu, berbentuk silinder tetapi bagian tengahnya lebih gendut. (etelitiannya lebih

tinggi dibanding pipet pasteur karena garis tera berada pada bagian atas pipet yang memiliki

diameter kecil.

Pipet Volumetrik engan Piston. Pipet jenis ini mulai berkembang pada tahun !)*-

an. A+alnya pipet ini memiliki volume yang tetap, namun kemudian berkembang hinggamemiliki volume yang dapat diatur pada range tertentu. Pipet jenis ini lebih disukai karena

selain volumenya yang dapat diatur, akurasi dan presisi yang tinggi, pemakaiannya pun

simpel dan mudah.

!. "unakan Jenis Pipet #ang Sesuai

Pipet yang digunakan harus disesuaikan dengan jenis sampelnya


2/12

ampel airan Biasa. /unakan pipet jenis air-displacement

ampel airan (husus. Untuk cairan kental #gliserol, madu', mudah menguap

#chloroform, methanol', korosif dan mengandung radioaktif, gunakan pipet jenis positive-

displacement.

Untuk sampel biologi molekular yang harus terbebas dari kontaminasi D0A, 10A,nuclease dan bahan lain yang dapat menimbulkan degradasi pada sampel, maka bisa

digunakan pipet jenis air-displacement dengan menggunakan tips steril berfilter maupun

menggunakan pipet jenis positive-displacement juga dengan tips dan piston steril.

(a) $ir %ispacement & 'Positie %isplacemen Pipette

Pipet air-displacement selalu memiliki ruang udara #dead volume' antara piston pipet

dan sampel cairan, sedangkan pipet positive-displacement tidak, cairan kontak langsung

dengan piston.

Piston merupakan bagian permanen pada pipet air-displacement, tetapi pada pipet

positive-displacement bersifat disposable, menyatu dengan tips pipet.

*. Mikro Pipet

2ikropipet ini ditemukan dan dipatenkan pada tahun !)* oleh Dr. 3anns chmit4

#2arburg, 5erman'. etelah itu, mitra penemu dari perusahaan bioteknologi 6ppendorf, Dr.

3einrich 0etheler, me+arisi hak-hak yang melekat pada paten itu dan memulai penggunaan

mikropipet secara umum dan luas di laboratorium-laboratorium di dunia. Pada tahun !7%,

mikropipet yang dapat ditala ditemukan di Universitas 8isconsin92adison oleh beberapa

orang, terkhusus 8arren /ilson dan 3enry "ardy.

+. Perhatikan Volume ,airan #ang $kan %ipipet


3/12

Perhatikan range volume pipet yang akan digunakan. Setiap pipet memiliki range volume tertentu. Maka

angan !ampai !alah memilih pipet" karena produ!en tidak menamin akura!i pemipetan ika dilakukan

di luar angkauan yang !udah mereka tentukan.

elain itu jika volume yang kita kehendaki cocok dengan dua range volume pipet,

maka pilihlah yang mendekati volume maksimalnya. ontoh, jika kita ingin memipet

sebanyak .! u", bisa menggunakan pipet dengan range volume -* u" atau *.%-% u".

0amun sebaiknya gunakan pipet dengan range *.%-% u"

.

. "unakan Tip Pipet #ang aik

ekilas nampak semua tip pipet sama saja, namun tidak semua tip cocok untuk semua

pipet. :leh karena itu pemilihan tip sangat menentukan akurasi pemipetan. Ada baiknya

menggunakan tip dengan brand yang sama dengan pipet. 0amun jika ingin menggunakan

brand lain, maka harus memperhatikan hal-hal berikut ini

/unakan ;ips dengan (ualitas Baik

;ip harus bersih dan bebas dari partikel debu

Bentuk bagian kerah #yang menempel ke pipet' dan ujung tip harus benar-benar halusdan rapi

;ransparan


4/12

benar adalah dengan memasukkan ujung pipet ke dalam tip #tidak terlalu kencang', kemudian

pipet diputar untuk memperkuat posisi tip pada pipet. (husus untuk pipet multichannel,

cukup dengan digoyang sambil ditekan ke kiri dan kanan.

0. Moe Pemipetan orar atau 3eerse4

aat Ada menekan plunger pipet, maka Anda akan menemukan posisiplungerberhenti.

5ika plungerterus ditekan, maka ia akan berhenti lagi pada posisi kedua. 0ah, bagaimana cara

pemipetan yang benar= Apakahplungerpipet ditekan hingga posisi berhenti pertama atau

kedua=

Ada dua cara pemipetan, yaitu orar Moedan 3eerse Moe. Berikut ini ilustrasi

kedua proses tersebut

,ara Pemipetan Moe orar (image from "ilson "uie to Pipetting)

,ara Pemipetan Moe 3eerse (image from "ilson "uie to Pipetting)

Umumnya pipet jenis air-displacement menggunakan >or+ard 2ode ketika

melakukan kalibrasi, sehingga metode inilah yang harus kita gunakan. 2ode 1everse dapat

digunakan ketika menggunakan pipet jenis air-displacement untuk memipet cairan yang

kental atau mudah menguap. ementara itu pipet positive-displacement hanya menggunakan

mode >or+ard saja.

#. 5ati-hati engan 6ontaminasi

(ontaminasi pada Pemipetan #image from /ilson /uide to Pipetting'


5/12

Ada beberapa jenis kontaminasi, kenapa bisa sampai terjadi dan bagaimana cara

mencegahnya=

6ontaminasi Pipet-ke-Sampel. Penyebab 2enggunakan tip atau pipet yang sudah

terkontaminasi.Pencegahan Bersihkan dan sterilkan bagian pipet yang kontak dengan

sampel. /unakan tips steril, dan ganti tip setiap berganti sampel.

6ontaminasi Sampel-ke-Pipet.Penyebab ampel atau aerosol dari sampel kontak

dan memasuki bagian pipet. Pencegahan 5angan terlalu memiringkan pipet, simpan selalu

pipet secara vertikal, sedot cairan dengan perlahan dan gunakan filter tip atau gunakan pipet

positive-displacement.

6ontaminasi Sampel-ke-Sampel (sample carr#oer).Penyebab 2enggunakan tip

bekas untuk sampel yang berbeda.Pencegahan /anti tip setiap berganti sampel

$%. 6ali'rasi an Peraatan 3utin

(alibrasi akan menjamin akurasi. "akukanlah secara rutin minimal satu satun sekali.

(alibrasi bisa dilakukan sendiri atau dengan memanfaatkan jasa laboratorium kalibrasi yangsudah terakreditasi. 5angan lupa untuk melakukan hal-hal berikut ini

2engecek secara rutin kondisi pipet, periksa apakah ada bagian yang rusak, retak atau

ada komponen yang hilang.

2embersihkan pipet setiap sebelum dan sesudah pemakaian dengan alkohol atau

cairan khusus pembersih pipet.

2ensterilkan komponen-komponen pipet yang dapat disterilkan #dengan autoclave

atau penyinaran U?'

5ika terdapat kerusakan atau kelainan dan kejanggalan, segera periksakan kondisi

pipet Anda ke Distributor atau agen penjualnya.

emoga bermanfaat

MIKROPIPRT 100ML

TISSUE

GELAS ARLOJI

,ara Menggunakan Micropipet

%*.@) "A0DA ! comments

Mikropipet (micropipet) adalah suatu alat yang digunakan untuk memindahkancairan dalam jumlah kecil secara akurat. Penggunaan pipet gelas seperti pipet ukur
http://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.htmlhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.html#comment-formhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.html#comment-formhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.htmlhttp://lansida.blogspot.com/2010/10/cara-menggunakan-micropipet.html#comment-form


6/12

dan pipet gondok tidak mempunyai akurasi yang tinggi untuk volume kurang dari 1ml. Sehingga pada pemindahan cairan dengan volume kecil kurang dari 1000microliter, orang cenderung menggunakan mikropipet, biasa juga disebut denganpipet otomatis. Pipet otomatis ini mempunyai akuraritas dan presisi yang lebih baikdari pada pipet gelas. isamping itu setiap pipet dapat diset berapapun volumenya

selama dalam range volume pipet. !da beberapa macam merek mikropipet yangberedar dipasaran seperti "ilson, Pipetman, dll.Meskipun produk mikropipet telah dirancang akurat dan presisi oleh pabriknya, alattersebut tetap harus dikalibrasi jika digunakan untuk laboratorium yangterakreditasi.!da beberapa macam mikropipet yang biasa dipakai di laboratorium, sepertimisalnya merk "ilson ada tertulis P#0, P#00 dan P1000 pada kepala pipet.

Macam$macam ukuran mikropipet

P#0 dimaksudkan untuk memipet larutan pada volume antara # $ #0 ulP#00 untuk memipet larutan pada volume antara #0 % #00 ulP1000 untuk memipet larutan pada volume antara 100 % 1000 ul

&agian$bagian mikropipet

&agian$bagian dari mikropipet terdiri dari !utomatic Pipettor dan Pipette tips.!utomatic Pipettor ber'ungsi untuk memompa cairan yang akan dipindahkandengan volume yang telah diset, sedang Pipette tips merupakan pasanganmikropipet yang ber'ungsi untuk menampung cairan yang dipompa.


7/12

Pengoperasian Mikropipet

!da beberapa tahapan untuk mengoperasikan mikropipet secara benar yang antaralain

1. Set volume

#. Pasang tip disposable

. *ekan penyedot sampai pembatas pertama

+. Masukkan tip ke sampel

. !mbil sampel

-. *ahan

. *arik tip

/. eluarkan sampel

. *arik pipet

10.2epaskan tekanan penyedot

11.2epaskan tip

3ah, berikut ini saya uraian lengkapnya *ahap 1 !tur volume dengan cara memutar knop pengatur volume, sayacontohkan begini...


8/12

*ahap # Pasanglah tip disposable yang telah tertata pada 4adah dengan caramenancapkan ujung mikropipet seperti gambar di samping kanan.

*ahap *ekan penyedot pipet sampai pada batas pertama.


9/12

*ahap + &enamkan tip kedalam cairan yang akandipindahkan.

*ahap Pengambilan sampel5ntuk mengambil sampel ke dalam tip, jagalah tekanan balik berjalan secara

perlahan dan halus sampai penuh ke posisi sebelum penyedotan. 6angan birakanpenyedot bergerak cepat dan tiba$tiba. &iarkan tip tetap diba4ah permukaansampel selama pengambilan.

*ahap - &erhenti sesaat7 *unggu sesaat untuk memastikan seluruh sampel yang disedot sudah mengisi tip.7 *unggu lebih lama lagi untuk pengambilan volume yang lebih besar.7 *unggu lebih lama untuk sampel yang mempunyai viskositas yang lebih besar.

ara menghilangkan

cairan menempel

yang benar

ara menghilangkan

cairan menempel

yang salah

*ahap Penarikan tip dari sampelPindahkan tip dari cairan sampel. Perlu diperhatikan tidak boleh ada cairantertinggal di bagian luar tip dan lap8usap butiran cairan di luar dengan tissue,tetapi hanya dari bagian samping saja. 6angan sentuhkan tissue pada bagianba4ah8ujung tip.

*ahap / Pengeluaran Sampel5ntuk mengeluarkan sampel dari pipet caranya sebagai berikut

1. Sentuhkan tip pada dinding 4adah penampung sampel.


10/12

#. *ekan penyedot sampai pembatas pertama.

. *ahan paling tidak 1 detik, 1$# detik untuk P$1000, #$ detik untuk P$000atau lebih lama untuk sampel yang mempunyai viskositas yang lebih tinggi.

+. *ekan penyedot ke pembatas kedua untuk mengeluarkan sisa$sisa cairan.

2ulai mengeluarkan Pembatas Pembatas %

*ahap Penarikan pipet

engan penyedot masih dalam posisi tertekan tarik pipet dari 4adah penampungsampel dengan terus menempelkan tip didinding 4adah khususnya ketikapemipetan dalam jumlah kecil.

*ahap 10 Melepaskan tekanan penyedot

Secara pelan$pelan biarkan penyedot kembalia pada posisi 5P. 6angan biarkantertekan kembali.

*ahap 11 Melepas tip2epaskan tip dengan cara menekan ejector seperti gambar.

Akurasi dan Presisi!kurasi maksudnya kedekatan volume yang di keluarkan terhadap volume yangdiset di pipet. !kurasi ini ditunjukkandari angka rata$rata eror, penyimpangan pengukuran berulang terhadap volumeyang diset.Sedang presisi adalah reprodusibiliti pengukuran individual untuk volume yangsama. Presisi ditunjukkan oleh standar deviasi (S).

!kurasi relati' secara umum adalah 19 atau kurang, sedang presisi kurang dari 0,9 kecuali digunakan volume terkecil yang dianjurkan dari model.


11/12

"unakan mikropipet yang sesuai dengan volume yang akan diukur8dipipet.Menggunakan pipet diba4ah volume yang dianjurkan akan menghasilkan kesalahanyang lebih besar.

5ntuk mendapatkan reprodusibilitas optimal ikuti saran sebagai berikut

1. onsisten dalam :;:P!*!3 dan :

#. *ekanan yang konsisten dalam penekanan penyedot pada pembataspertama.

. edalaman penyedotan yang cukup dan konsisten.

+. Posisi pemipetan hampir vertikal.

. 6angan sampai ada gelembung udara.

-. 6angan pernah meninggalkan pipet pada posisi mendatar apalagi terbaliksaat tip terisi sampel.

engan demikian, jika !nda bekerja dengan mikropipet akan memperoleh hasilyang akurat, presisi dan alat tidak mudah rusak.Selamat bekerja.....

MIKRO PIPET

I. LATAR BELAKANG

Mikropipet ini ditemukn dn diptenkn pd t!un 1"#0 o$e! %r. &nn'

S(!mit) *Mr+ur,- Jermn. Sete$! itu- mitr penemu dri peru'!n

+iotekno$o,i Eppendor/- %r. &einri(! Net!e$er- meri'i !k!k 2n, me$ekt

pd pten itu dn memu$i pen,,unn mikropipet 'e(r umum dn $u' di

$+ortorium$+ortorium di duni. Pd t!un 1"34- mikropipet 2n, dptdit$ ditemukn di Uni5er'it' 6i'(on'in7Mdi'on o$e! +e+erp orn,-

terk!u'u' 6rren Gi$'on dn &enr2 Lrd2.

Mikropipet d$! $t untuk memind!kn (irn 2n, +er5o$ume (ukup ke(i$-

+i'n2 kurn, dri 1000 8$. Bn2k pi$i!n kp'it' d$m mikropipet-

mi'$n2 mikropipet 2n, dpt ditur 5o$ume pen,m+i$nn2 *d9u't+$e

5o$ume pipette ntr 18$ 'mpi 40 8$- tu mikropipet 2n, tidk +i' ditur

5o$umen2- !n2 ter'edi 'tu pi$i!n 5o$ume *:;ed 5o$ume pipette mi'$n2

mikropipet < 8$. d$m pen,,unnn2- mukropipet memer$ukn tip.

1. Prin'ipMemind!kn 'utu $rutn dri d! ke d! $in den,n men,,unkn


12/12

ukurn tertentu pd umum n2 prin'ip ker9 mikropipet 'm den,n pipet

+i'n2 nmun !n2 di+edkn den,n dn2 pen,ukurn 2n, kurt

4. Tu9un

. Untuk men,et!ui (r men,,unk mikropipet 2n, +ik dn +enr

+. Men,et!ui k$i+r'i pertn dn ke,unn dri mikropipet

=. Bentuk dn >un,'i

untuk men,m+i$ $rutn den,n 5o$ume 'edikit- den,n men,,unkn du

teknik 2itu (r /orrd dn re5er'e.

Ke,unn d$m +idn, ke'e!tn

untuk men,m+i$ $rutn tu 'mpe$ den,n 5o$ume 2n, ke(i$.

B,in +,in dri mikropipet

Terdir dri

1. Pippetor 2n, +er/un,'i untukmemomp (irn 2n, kn di pind!kn

4. Pippet tip p'n,n mikropipet 2n, +er/un,'i untuk menmpun, (irn

2n, di pompkn.

II. PROSE%UR

Pro'edur Pen,,unn

?r pen,,unn mi(ro' pipet di +,i men9di du (r 2itu@

1. >orrd den,n (r 1't 'top- 4nd 'top. Artin2- tekn 1;- m+i$ $rutn-

m'ukn ked$m t+un,- ke$urkn tekn 4;.

4. Re5er'e- den,n (r 4nd 'top 1't 'top- rtin2 m+i$ $rutn 4 k$i $$u

t!n m'ukn $rutn ked$m t+un, dn ke$urkn tekn 1 k$i.

Pro'edur Pertn

=. M'ukkn tip ked$m d! 2n, +eri'i ir

. Lp u9un, mikropipet den,n ti''ue kerin,

definisi mikropipet

Documents