SEMINARIO DE CASOS PRACTICOS

CURSO DE PRIMAVERA SEAP/AIP

PATOLOGIA MOLECULAR DEL CANCER

Samuel Navarro Departamento de Patologia, Universidad de Valencia.

Servicio de Anatomía Patológica Hospital Clínico Universitario de Valencia

CASO CLINICO

El paciente es una niña de 5 años con una historia reciente de dolor

en fosa iliaca derecha, febrícula y vómitos. La palpación describe

una masa abdominal indolora que ocupa el flanco derecho.

El estudio de RNM muestra una masa en glándula suprarrenal

derecha que aparentemente se extiende al hilio renal y borde

hepático. Las catecolaminas son normales, la LDH presenta niveles

de 1660 UI/L. Existe captación tumoral de MIBG-I123.

El estudio de extensión de medula ósea es normal.

Rx de tórax normal. Con el diagnostico de Neuroblastoma localizado

estadio IIB se realiza resección quirúrgica de la masa.

Se remiten a nuestro laboratorio dos secciones tumorales para estudio

molecular.

Las secciones histológicas corresponden a estos fragmentos.

Anticuerpo Ø + ++ +++

NSE +++

HNK-1 +

S-100 Ø

CD-99 Ø

NB-84 +++

P-53 +

BCL-2 +++

Myc-n ++

KI-67 +++

TOP II-a +++

WT-1 Ø

CK(AE1-AE3) Ø

MYOD-1 Ø

MYOGENINA Ø

DESMINA Ø

CD-45 Ø

CD-20 Ø

CD-3 Ø

INMUNOFENOTIPO TUMORAL

NB-84

NB-84 Myc-N

Myc-N

HNK-1 Bcl-2

KI-67

Topo II-

P-53

LH

M IMR32 NB

PCR

NEUROBLASTOMA CON AMPLIFICACIÓN DE MYCN

FISH

D1Z:1p36 3:3 90%, 2:2 10%

Sonda: 1p36 Midisatélite Banda crom. asignada: 1pter Locus detectado: D1Z2

• Deleción de 1p36

D1S80

PCR

36.3

36.2

36.1

35 34.3

34.1 33

31.3

21

12 11

34.2

32.3

32.1 32.2

31.2

31.1

22.3

22.1

22.2

13.3

13.1 13.2

11

12

21.1

22

23

24

25

31

32.1

41

42.1

43 44

21.2 21.3

32.2 32.3

42.2 42.3

35 34.3

34.1 33

31.3

21

12 11

34.2

32.3

32.1 32.2

31.2

31.1

22.3

22.1

22.2

13.3

13.1 13.2

11

12

21.1

22

23

24

25

31

32.1

41

42.1

43 44

21.2 21.3

32.2 32.3

42.2 42.3

1 del 1 p36.3

Anaplásico

a1s2: MNA. (1p-,+17q). FSCA-10q

Sistema analizador de imágenes

(Olympus - CUE-2)

PLOIDÍA

CITOMETRIA ESTÁTICA Células tumorales teñidas con Feulgen

IOD células tumorales

IOD control linfocitos

histograma IOD

0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

200

0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 45 48 51 54 57 60

Valor (IOD)

Fre

cu

en

cia

(N

¼ C

�ls.)

C�lulas Tumorales

Linfocitos

Tetraploide (D)

DIAGNOSTICO

Neuroblastoma pleomórfico anaplásico

Neuroblastoma indiferenciado de la clasificación INPC

histopronóstico desfavorable

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL

WILMS WT-1(+), NB-84 (ø)

T. Germinales FP, PLAP, HCG, OCT-4

Rabdomiosarcomas MyoD-1, Miogenina, Desmina

Linfoma CD-45, ALK-1, CD-20, CD-3, etc

Feocromocitoma Cromogranina (+), Myc-n (ø)

BIBLIOGRAFIA

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9- Caron H (1995) Allelic loss of chromosome 1 and additional chromosome 17 material are both unfavorable

prognostic markers in neuroblastoma. Med. Pediatr. Oncol. 24: 215-221.

10- O Burgues, S Navarro, R Noguera, et al (2006). Prognostic value of the International Neuroblastoma

Pathology Classification in Neuroblastoma and comparison with other prognostic factors: a study of

182 cases from theSpanish Neuroblastoma Registry, Virchows Arch 449:410-420.

11- S Navarro, G Amann, K Beiske, et al (2006). Prognostic value of the International Neuroblastoma

Classification in localised resectable peripheral neuroblastic tumors. A histopathologic study

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12- S Navarro, R Noguera, A Pellín, et al. (2000). Brief Report: Pleomorphic anaplastic neuroblastoma.

Medical and Pediatric Oncology 35:498-502.

TUMORES NEUROBLÁSTICOS

FACTORES PRONÓSTICOS

Edad: < 1 año (F)

Estadio: INSS

Factores biológicos:

• Expresión TrKA (F)

• Expresión TrKB (D)

• Amplificación de N-MYC (D)

• Diploidia/Tetraploidia (D)

• Triploidia (F)

• Ganancias/pérdidas cromosómicas: 1p- /11q- /14q-/17q+ (D)

Factores histopatológicos: Clasificación INPC (Sistema Shimada)

(F) Favorable; (D) Desfavorable G.M. Brodeur. Nature Rev 2003;3:203-216

IMK: Índice Mitosis Cariorrexis ; D: Desfavorable; F: Favorable

NB edad < 1,5 años

IMK Indiferenciado Pobremente diferenciado En diferenciación

Bajo D F F Medio D F F Alto D D D

NB edad 1,5 – 5 años

IMK Indiferenciado Pobremente diferenciado En diferenciación

Bajo D D F Medio D D D Alto D D D

NB edad > 5 años

IMK Indiferenciado Pobremente diferenciado En diferenciación

Bajo D D D Medio D D D Alto D D D

GNB EM (entremezclados) y GN (ganglioneuromas) cualquier edad F

INPC Categorización, MKI, Edad

CONCLUSIONES

1- El fenotipo anaplasico-pleomorfico aparece tambien en casos de

tumores neuroblasticos localizados y confiere mal pronostico.

2- El estudio de amplificacion de MYC-N y de sobreexpresion de

Myc-n posee valor no solo pronostico sino que tambien ayuda en

el diagnostico diferencial con otros tumores pleomorficos de la

infancia

Niña de 3 años con masa retroperitoneal

de rápido crecimiento

No captación de MIBG

SOSPECHA CLINICA

Sarcoma retroperitoneal

PROCEDIMIENTO DIAGNOSTICO

Biopsia exéresis

TUMORES DE CELULAS REDONDAS

CASO CLINICO (2)

Rabdomiosarcoma

TUMORES DE CELULAS REDONDAS

N-myc

Rabdomiosarcoma alveolar: Amplificación MYCN

RABDOMIOSARCOMA ALVEOLAR

Actin

PAX7/FKHR

PAX3/FKHR

M 1 2 3 4 5 6 C

PAX 3 FKHR

PAX 7 FKHR

B

t(2;13)(q35-37;q14)PAX 3-FOXO1

TUMORES DE CELULAS REDONDAS

DIAGNOSTICO (2)

TUMORES DE CELULAS REDONDAS

DIAGNOSTICO ANATOMO-PATOLOGICO

Tumor de células redondas con diagnostico

diferencial de

Rabdomiosarcoma alveolar

Neuroblastoma indiferenciado

ESTUDIO MOLECULAR

Amplificación MYCN

TUMORES DE CELULAS REDONDAS

Varón de 24 años con masa abdominal de crecimiento

rápido con metástasis pulmonares y mediastinicas.

Se practica biopsia a cielo abierto.

Tras 12 meses y 2 ciclos de QT el paciente fallece

CASO CLINICO (3)

TUMORES DE CELULAS REDONDAS

Ewing’s/PNET: Fusiones génicas atipicas EWS-FEV

Tumor de Ewing/PNET

Atípico Pleomorfico

Con Feno-Genotipo inusual

DIAGNOSTICO (3)

TUMORES DE CELULAS REDONDAS