7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

1/15

ANALIZEFIZICO - CHIMICEELECTROFOREZA

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

2/15

2

Electroforeza= metoda ce se bazeaza pe

migrarea componentilor dintr-o proba, supusaunei diferente de potential, intr-o solutie sau

printr-un suport solid poros (hartiecromatografica, gel), separarea explicandu-se

prin vitezele de migrare diferite alecomponentilor incarcati electric pozitiv saunegativ, care sunt atrasi de polii opusi aicampului electric, proportional cu natura,

marimea si sarcina lor.

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

3/15

3

Mobilitatea electroforetica

= viteza cu care se deplaseaza particulelepurtatoare de sarcini electrice, in camp electric inconditiile experimentale date

In care:

d = distanta de migrare parcursa in timpul t (m);

E = gradientul de potential (V/m);0 = mobilitatea electroforetica (m

2/V/s).

Et

d

0

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

4/15

4

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :

Factori ce depind de particula: marimea

natura

forma

sarcina

gradul de hidratare si disociere

coeficientul de frecare

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

5/15

5

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :

Factori ce depind de solutia de electrolit:

natura

concentratia forta ionica

pH-ul

vascozitatea

temperatura

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

6/15

6

Factori care influenteaza electroforeza

Natura moleculelor separate Marimea moleculelor

Mobilitatea

Natura Sarcina

Aparatura

suportul

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

7/15

7

Factori care influenteaza electroforezaCurentul electric

Deplasarea electroforetica este proportionala cu

Mobilitatea

Campul electric

Timpul de trecere a campului electric

d = distanta parcursa de particulaU0 = mobilitatea particulei (V/cm)

E = tensiunea (V)

t = timpul de trecere al curentului

tEUd 0

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

8/15

8

Factori care influenteaza electroforeza

pH - ul In cazul acizilor si bazelor tari (electroliti tari)

pH-ul nu influenteaza migrarea

Natura solutiei

natura sarurilor

natura acizilor

natura bazelor influenteaza

natura altor substante mobilitateaexistente in solutie

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

9/15

9

Electroforeza capilara Cea mai noua si mai utilizata tehnica electroforetica

utilizata pentru separarea speciilor incarcate cu sarcinielectrice

Pentru efectuarea separarilor se efectueaza unmontaj automatizat ale carui elemente principale sunt:

tub capilar sistem de introducere a probei

sistem de detectie

electrozi de platina sursa de alimentare cu curent

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

10/15

10

Electroforeza capilara

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

11/15

11

Avantajele electroforezei capilare:

timpi de analiza relativ scurti;

volume mici de proba;

cantitati mici de solventi (tampon);

posibilitatea automatizarii intregului ciclu deanaliza;

poate opera atat in medii apoase cat si in mediineapoase;

detectia se face in capilar (UV); sensibilitate inalta.

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

12/15

12

Miscarea unui analit incarcat pozitiv

+ -+

+ -

Miscarea unui analit neutru

Miscarea unui analit incarcat negativ

+ --

Uep= mobilitatea electroforetica

Ueo = mobilitatea electroosmotica

UR = mobilitatea rezultanta

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

13/15

13

Separarea unui amestec de cationi

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

14/15

14

Separarea unui amestec de compusiaromatici

7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

15/15

15

Separarea unui amestec de medicamente