controle de qualidade anvisa 2012

50
Simpósio Gestão da Qualidade em BCTG, ANVISA, São Paulo, Nov-2012 Fertilização in vitro: Aspectos Laboratoriais e Controle de Qualidade Sidney Verza Jr Biólogo, Responsável pelo Laboratório de FIV ANDROFERT- Centro de Referência em Reprodução Masculina Campinas – São Paulo www.androfert.com.br

Upload: marcello-patelli

Post on 10-Aug-2015

93 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Simpósio Gestão da Qualidade em BCTG, ANVISA,

São Paulo, Nov-2012

Fertilização in vitro:

Aspectos Laboratoriais e

Controle de Qualidade Sidney Verza Jr

Biólogo,

Responsável pelo Laboratório de FIV ANDROFERT- Centro de Referência em Reprodução Masculina

Campinas – São Paulo

www.androfert.com.br

Page 2: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Artigos da RDC 23 citados nesta aula:

� Art. 15. A doação de células ... assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido ;

� Art. 27. O BCTG deve ser constituído ... de acordo com a RDC n. 50 ...; � Art. 29. O BCTG deve possuir sistema de energia elétrica de

emergência ...; � Art. 38. O laboratório de fertilização in vitro deve possuir: � I-sistema de climatização que mantenha pressão positiva em

relação aos ambientes adjacentes ...; � Art 39. A manipulação das amostras deve ser efetuada em uma área

limpa classificada, no mínimo, como ISO Classe 5 ...; � Art. 41. São requisitos mínimos adicionais dos ambientes e

equipamentos do BCTG: ... manutenção preventiva e corretiva, ...equipamentos de medição calibrados ...;

Page 3: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Artigos da RDC 23 citados nesta aula:

� Art. 42. Todos os procedimentos críticos realizados no BCTG, desde a coleta até a liberação das células, tecidos germinativos e embriões devem ser validados .

� Art.43. Todos os materiais utilizados e que mantenham contato com as células ou tecidos germinativos, devem ser estéreis ... número de lote .

� Art. 45. Deve ser atribuída, a cada amostra coletada, uma identificação numérica ou alfanumérica.

� Art. 51. Deve ser mantido registro diário das condições dos equipamentos...

� Art. 53. O BCTG deve realizar controle microbiológico ... � Art. 58. O BCTG deve manter disponível ... arquivos de documentos e

registros ...; � Art. 59. Os arquivos de registros podem ser mantidos em meio

eletrônico ...

Page 4: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Laboratório de Fertilização in vitro

� Estrutura:

� Construção, materiais e equipamentos em

conformidade com as RDC’s (RDC 50, RDC 23)

� Controle de qualidade:

� Equipamentos, limpeza, check-list diário

� Identificação do doador:

� Escrita/digital/escrita e digital

� Identificação (alfa-numérica) de placas, tubos e todo

material que terá contato com os gametas e embriões

� Incubadoras com portas individuais para cada

doador

Page 5: Controle de Qualidade Anvisa 2012

LABORATÓRIO DE FIV

Page 6: Controle de Qualidade Anvisa 2012

� Materiais e

Acessórios � Parede (poliuretano/epoxi)

� Piso (poliuretano)

� Tinta (poliuretano)

� Cantos arredondados em

paredes, piso e teto

� Bancada (aço inox)

� Luvas (nitrile)

� Tapete adesivo

� Roupa para sala limpa

� Papéis

� Canetas, etc.

Estrutura para sala limpa

Page 7: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Salas Limpas

ANDROFERT

Page 8: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Estrutura

Classe >15, Grupo 0

Page 9: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Estrutura

Page 10: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Placas aquecedoras

Temperaturas:

Incubadoras Geladeira Equipamentos

aferidos

Laboratório FIV: Controle de Qualidade

Page 11: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Manutenção preventiva

Laboratório FIV: Controle de Qualidade

Page 12: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Termômetro digital (menos preciso).

Termômetro de mercúrio HB. Graduação:

De 0,1 em 0,1 ºC (mais preciso).

Laboratório FIV: Controle de Qualidade

Page 13: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Controles: ºC, CO2, pH; limpezas, ajustes, calibragens, manutenções.

Laboratório FIV: Controle de Qualidade

Page 14: Controle de Qualidade Anvisa 2012

�Meio de cultura com

registro;

� Certificado de análise

do meio de cultura:

� Composição;

� Resultado do pH;

� Testes de

embriotoxicidade

(ratos);

� Valores de

osmolaridade;

� Formação de

blastocisto em ratos.

Laboratório FIV: Controle de Qualidade

Page 15: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Uso de datalogger para

monitoramento dos

equipamentos

Uso de datalogger para

monitoramento da entrega

dos meios de cultura

Laboratório FIV: Controle de Qualidade

Page 16: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Documentação

� Consentimentos informados para todos os

procedimentos;

� Fichas com códigos numéricos e identificação

individual;

� Contratos.

Page 17: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Processo de identificação: � Dados provenientes do prontuário clínico, o qual possui as informações necessárias;

� Ficha de micromanipulação dos gametas com dados do doador, das amostras e alíquotas;

� Dados de controle de qualidade dos meios de cultura, preparo do sêmen;

� Campos para rubrica, identificação de responsáveis;

� Identificação da tampa e base da placa de cultura;

Page 18: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Identificação do doador e amostra

Page 19: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Identificação do doador e amostra

Page 20: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Identificação digital: imagens

Page 21: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Identificação digital: prontuário

eletrônico

� Validação da

informação, que fica

salva e bloqueada

para edição;

� Redução/eliminação

do volume de papel

circulante dentro do

Lab. FIV;

� Facilidade no acesso

das informações

(clínca, casa, celular).

Page 22: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Identificação do doador e amostra

Page 23: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Procedimentos no

Laboratório de FIV:

Passo-a-passo desde o preparo dos

meios de cultura até a transferência

embrionária/congelamento.

Page 24: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Preparo dos meios de cultura (Véspera)

� Identificação do doador;

� Materiais atóxicos e

Estéreis;

� Checagem do pH dos

meios de cultivo.

Page 25: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Preparo de meios de cultura

�Geladeira: 4 a 8°C;

�Materiais estéreis.

Page 26: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Laboratório Centro cirúrgico

Captação oocitária

Page 27: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Centro Cirúrgico:Conforme RDC 50, 2002.

Captação oocitária

Page 28: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Captação oocitária

Page 29: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Verificação do líquido folicular e identificação oocitária

Page 30: Controle de Qualidade Anvisa 2012

DIÂMETRO DO OÓCITO + ZONA PELUCIDA ± 120µM

Ooplasma 100-110µM

Corpúsculo

polar

Zona pelúcida

15-20µM

Espaço perivitelinio

Complexo cumulus

corona radiata

Morfologia do Oócito

Page 31: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Fertilização in vitro

� FIV clássica

� Oócitos são colocados

em contato com

espermatozoides na

mesma gota de meio

de cultura

� Microinjeção do

espermatozoide dentro do

oócito (ICSI – Intracytoplasmic

Sperm Injection)

� Um único espermatozoide é

injetado em cada oócito

Page 32: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Preparo do sêmen

� Orientação prévia para coleta

(tempo de abstinência sexual, etc);

� Identificação da amostra;

� Analise de concentração, motilidade;

� Definição da técnica de preparo a

ser utilizada;

� Lavagem simples;

� Gradiente coloidal;

� Swim-up;

� Envio da amostra identificada pós

processamento para laboratório de

FIV.

Page 33: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Preparo do micromanipulador

Page 34: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Injeção intracitoplasmática do espermatózoide

Page 35: Controle de Qualidade Anvisa 2012

FIV: Cultura celular

48h 72h 16h 5d 96h

Page 36: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Transferência dos pré-embriões

Page 37: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Pós-transferência Embrionária

Page 38: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Criopreservação

Congelamento lento: Vitrificação:

Page 39: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Pós-transferência Embrionária

� Dados da ficha de micromanipulação são

transferidos para:

� Prontuário do paciente (documento escrito e/ou

digital)

� Planilha de dados (documento digital). Esta planilha

gera relatórios semestrais/anuais de dados para:

� Relatórios internos e externos da Clínica (balanços

bimestrais, folders, site)

� Relatório anual de dados para REDLARA

� Relatório anual para SisEmbr (Anvisa)

Page 40: Controle de Qualidade Anvisa 2012

� Ficha de micromanipulação é anexada à pasta de

procedimentos para checagens posteriores e

cruzamento de dados.

Pós-transferência Embrionária

Fichas em papel Fichas digitais

Page 41: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Validação de dados

� Rastreabilidade dos dados:

� Identificação por códigos (únicos):

�Número do prontuário;

� Código da ficha de preparo do sêmen;

� Código da ficha de micromanipulação;

� Código do congelamento de embriões;

Page 42: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Nº do

congelamento

Nº do ciclo de

fertilização

Nº do

prontuário do

paciente

Local de armazenamento

do material biológico

Validação/rastreamento

dos dados

Page 43: Controle de Qualidade Anvisa 2012

� Exigência dos certificados de análise dos meios de

cultura;

� Exigência da curva de temperatura dos meios de

cultura durante o transporte;

� Certificação dos equipamentos interna* e externa;

� Uso de datalogger nos equipamentos do laboratório;

� Definição de valores de referências para

monitoramento dos resultados laboratoriais (Tx.

Fertilização, tx. Qualidade embrionária, tx. Gravidez;

tx. Sobrevivência embrionária pós descongelamento).

Controle de qualidade geral

Page 44: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Certificação interna dos

equipamentos

Temperaturas

observadas nos

líquidos dentro dos

tubos (simulação do

fluido biológico),

acondicionados

dentro dos blocos

aquecidos sobre as

placas aquecedoras.

Checagem do

pH dos meios

de cultura.

Page 45: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Certificação externa dos

equipamentos

Page 46: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Controle microbiológico

Page 47: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Referência externa de resultados

Ano: 2009. Fonte: www.redlara.com

Page 48: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Indicadores de Qualidade 4º Bimestre Valores de

Referência*

Taxa de Fertilização 62,5% ≥65%

Taxa de Degeneração 6,6% ≤10%

Taxa de Clivagem dos Zigotos 2PN 98,3% ≥90%

Taxa de pré-embriões de ótima qualidade no D3 38,5% ≥40%

Taxa de pré-embriões com clivagem lenta no D2 19,0% ≤20%

Taxa de Blastulação ------ ≥45%

Taxa de Gestação Química 49,5% ≥45%

Taxa de Gestação Clínica 44,4% ≥40%

Taxa de Gestação Clínica – Grupo selecionado (<35 anos) 56,6% ≥55%

Taxa de Gestação Clínica – Grupo selecionado (35-39 anos) 57,0% ≥50%

Taxa de abortamento espontâneo 11,3% ≤20%

Taxa de Sobrevida Embrionária pós-Vitrificação 86,5% ≥70%

Taxa de Sobrevida Embrionária pós Descongelamento Lento 46,5% ≥70%

Taxa de Gestação Clínica pós-Vitrificação 35,2% ≥22,0%

Taxa de Gestação Clínica pós-descongelamento lento 25,0% ≥22,0%

Referência interna de resultados

*Os valores de referência são baseados em estudos externos, e sempre que

atingidos, são aumentados, (conceito de melhoria contínua – ISO 9001:2008)

Page 49: Controle de Qualidade Anvisa 2012

ANÁLISE DESCRITIVA

2. ANÁLISE COMPARATIVA 1. Taxa de Fertilização O embriologista 1 injetou 44 casos, com um total de 343 oócitos. Destes, 209 fertilizaram, resultando em uma

taxa de 60,9%.

O embriologista 2 injetou 22 casos, com um total de 193 oócitos. Destes, 119 fertilizaram, resultando em uma taxa de 61,6%.

2. Taxa de Degeneração Dos 343 oócitos injetados pelo embriologista 1, 32 degeneraram, resultando em uma taxa de 9,3%.

Dos 193 oócitos injetados pelo embriologista 2, 13 degeneraram, resultando em uma taxa de 6,7%. 3. Taxa de Gestação Química Dos 44 ciclos realizados pelo embriologista 1, 33 tiveram transferência embrionária, sendo que 16 resultaram

em gestação química - taxa de 48,4%.

Dos 22 ciclos realizados pelo embriologista 2, 16 tiveram transferência embrionária, sendo que 8 resultaram em gestação química - taxa de 50,0%.

O embriologista 1 injetou 44 casos, sendo que destes: 33 (75,0%) com espermatozóides ejaculados 1 (2,3%) com espermatozóides provenientes de PESA 6 (13,6%) com espermatozóides de TESA 4 (9,1%) com espermatozóides de ejaculado + TESA

O embriologista 2 injetou 22 casos, sendo que destes: 18 (81,8%) com espermatozóides ejaculados 1 (4,5%) com espermatozóides de MICRO+crio heteróloga 3 (13,7%) com espermatozóides de ejaculado + TESA

Proficiência interna de resultados

Page 50: Controle de Qualidade Anvisa 2012

Simpósio Gestão da Qualidade em BCTG, ANVISA,

São Paulo, Nov-2012

Fertilização in vitro:

Aspectos Laboratoriais e

Controle de Qualidade Contato: [email protected]

Para rever esta aula: www.androfert.com.br/aulas